Bài giảng nuôi cấy mô - tế bào thực vật bằng tế bào trần và kĩ thuật chuyển gen

Chia sẻ: saobachkim_90_hn

Tham khảo tài liệu 'bài giảng nuôi cấy mô - tế bào thực vật bằng tế bào trần và kĩ thuật chuyển gen', tài liệu phổ thông, sinh học phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả

Bạn đang xem 20 trang mẫu tài liệu này, vui lòng download file gốc để xem toàn bộ.

Nội dung Text: Bài giảng nuôi cấy mô - tế bào thực vật bằng tế bào trần và kĩ thuật chuyển gen

 

  1. Chủ đề: NUÔI CẤY MÔ – TẾ BÀO THỰC VẬT BẰNG TẾ BÀO TRẦN VÀ KĨ THUẬT CHUYỂN GEN
  2. KHÁI NIỆM Nuôi cấy mô­ tế bào thực vật là kĩ thuật cho phép  nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật hay mô  phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo  thích hợp để tạo ra những khối tế bào hay những  cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm.    
  3. CƠ SỞ SINH LÍ CỦA CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ- TẾ BÀO TÍNH TOÀN NĂNG:    Là khả năng của 1 tế bào  hình thành 1 cây hòa  chỉnh trong điều kiện nuôi  cấy thích hợp, do trong tế  bào có chứa bộ  AND(NST) hoàn chỉnh,  chứa toàn bộ thông tin di  truyền cho 1 chu kì sống  hoàn chỉnh.         AND       mARN       Protêin       tính trạng    
  4.  Tùy từng tế bào, từng loại mô, từng thời kì sinh trưởng, phát triển mà các gen phù hợp hoạt động; các gen không cùng hoạt động như nhau trong các giai đoạn phát triển của cơ thể (do cơ chế điều hòa hoạt động của gen).
  5.  SỰ PHÂN CHIA, PHÂN HÓA, PHẢN PHÂN HÓA CỦA TẾ BÀO: Phân hóa: 1 tế bào 1khối tế bào(phân hóa) mô cơ quan  hệ cơ quan. Phản phân hóa: khi các tế bào đã phân hóa thành các  mô chức năng riêng biệt nhưng vẫn có thể quay về trạng thái chức năng phôi sinh ban đầu ki gặp điều kiện thuận lợi.
  6. • Các đặc tính trên được xác định dựa trên cơ sở là đặc điểm di truyền nhưng sự thay đổi môi trường cũng có ảnh hưởng trực tiếp đến các đặc tính đó.
  7. CÁC NHÂN TỐ ĐẢM BỎ THÀNH  CÔNG TRONG CÔNG NGHỆ NUÔI  CẤY MÔ­ TẾ BÀO THỰC VẬT:  Đảm  bảo điều kiện  vô trùng, phòng thí  nghiệm phải chuyên  hóa cao.  Chọn đúng môi  trường và chuẩn bị  môi trường đúng  cách.  Chọn mô cấy, xử lí  mô cấy thích hợp  trước và sau khi cấy.    
  8. CÁC BƯỚC TRONG KĨ THẬY NUÔI CÁC CẤY MÔ- TẾ BÀO THỰC VẬT  Tạo vật liệu khởi đầu: thường chọn chồi là bộ phận nuôi cấy thích hợp nhất khử cấy trong môi trường khởi động để trùng tái sinh  Giai đoạn nhân nhanh: vật liệu khởi đầu được chuyển sang môi trường nhân nhanh có bổ sung Xitokinin để tái sinh 1 thành nhiều chồi.  Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh: tách riêng các tách chồi cho vào môi trường tạo rể (bố sung ch mỗi chồi ra rể thành 1 cây hoàn chỉnh. Auxin)  Giai đoạn ra cây: cây trong ống nghiệm đủ tiêu chuẩn (chiều cao, số lá, số rể) sẽ được chuyển sang môi trường tự nhiên.
  9. CÁC HÌNH THỨC NUÔI  CẤY MÔ • Nuôi cấy mô thực vật • Nuôi cấy mô bằng tế bào  trần    
  10. NUÔI CẤY MÔ THỰC VẬT NUÔI  Nuôi cấy mô của cơ quan tách rời: VD: củ cà rốt cắt lát VD: tách mảnh mạch rây xử tách lí+ nuôi cấy mô phôi phôi nảy mầm cây non trong ống nghiệm cây trưởng thành
  11. Nuôi cấy từ mô hay cơ   quan:   VD: từ 1 mô lá   tách tế  bào   nuôi cấy trên  đĩa Pêtri    điều kiện  thuận lợi sẽ hình  thành những cây non    trồng chậu    phát  triển cây trưởng  thành.    
  12.  Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng: tr Từ 1 mô phân sinh của mô đỉnh sinh trưởng của rễ hoặc thân nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng sẽ tạo nên cây con
  13. Nuôi cấy mô sẹo từ hạt Nuôi phấn( Auxin rất quan trọng): Nuôi cấy bao phấn có hạt Nuôi phấn chín môi trường thuận lợi bao phấn chín sẽ phân hóa bằng cách: nhân sinh sản sẽ tiêu biến nhân sinh dưỡng sẽ nguyên phân tạo mô sẹo nuôi dưỡng cây đơn bội(n) xử lí cônxixin cây trưởng thành(đơn bội kép).
  14. NUÔI CẤY MÔ BẰNG TẾ BÀO NUÔI TRẦN  Khái niệm tế bào trần: Là tế bào thực vật bị Là loại bỏ vách bởi 1 xử lí enzim. Đó là tế bào tự do, cô lập, không định hướng( vì không còn chịu sự tương quan trong hệ thống thực vật).
  15. SỰ CÔ LẬP VÀ NUÔI CẤY TẾ BÀO TRẦN Sự cô lập:  Trước hết phải xử lí vật liệu khởi đầu( lá, mô sẹo, dịch treo tế bào…) với enzim phân hủy vách( Xenlulaza, HemiXenlulaza, Pectolyaza…).
  16. Ví dụ: phương pháp tạo  tế bào trần từ lá: Lá  làm sạch lá bằng  Clorox 10%      rửa lại  lá 3 lần bằng nước cất  tiệt trùng     tách lớp  biểu bì dưới của lá+  gây co nguyên sinh  1h bằng Mannitol  10%   enzim  thu được  tế bào trần.    
  17.  Sức trương tế bào bình thường thì được cân bằng với sức ép cơ học của vách vách mất, để tế bào không bị vỡ thì cho vào những chất gây co nguyên sinh sinh (CaCl2,KCl,Mannitol…) (CaCl ,KCl,Mannitol…) hòa tan trong Enzim khi xử lí lí
  18. SỰ NUÔI CẤY NUÔI Thành phần của môi trường nuôi cấy lỏng hay đặc tùy thuộc vào vaät liệu thực vật.Môi trường này có thêm Auxin và thêm Xitokinin để giúp sự Xitokinin tái tạo vách và các lần phân cia đầu tiên
  19.  Đảm bảo đủ các yếu tố dinh dưỡng: axit amin, polyamin, amin, Hydrolysat Cazein, nước dừa, mạch nha…  Đảm bảo điều kiện nhiệt độ, PH, ánh sáng,áp suát thẩm thấu….
Theo dõi chúng tôi
Đồng bộ tài khoản