Bước đầu khảo sát tác dụng sinh học của dược liệu tứ bạch long (blepharis maderspatensis (L.) roth)

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> BƯỚC ĐẦU KHẢO SÁT TÁC DỤNG SINH HỌC<br /> CỦA DƯỢC LIỆU TỨ BẠCH LONG (BLEPHARIS MADERSPATENSIS (L.) ROTH)<br /> Văn Đức Thịnh*, Lê Thị Hồng Quý**, Trần Công Luận*<br /> <br /> TÓM TẮT<br /> Đặt vấn đề - Mục tiêu nghiên cứu: Thực hiện các khảo sát ban đầu về những hoạt tính sinh học liên quan<br /> đến khả năng điều trị vết thương áp‐ xe của các cao chiết từ dược liệu Tứ Bạch Long (Blepharis maderaspatensis<br /> (L.) Roth).<br /> Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Chiết dược liệu bằng 2 loại dung môi là cồn 96% và nước. Cao<br /> cồn tổng được lắc phân đoạn bằng 4 dung môi có độ phân cực tăng dần: ether dầu hỏa, chloroform, ethyl acetat,<br /> và n‐buthanol bão hòa nước. Khảo sát tính kháng khuẩn trên ba chủng vi khuẩn gram âm (Escherichia coli, E. coli<br /> kháng ampiciclin, Pseudomonas aeruginosa), ba vi khuẩn gram dương (Staphylococcus aureus, MRSA,<br /> Streptococcus pyogenes), nấm men Candida albicans và nấm da Trychophyton mentagrophytes bằng phương<br /> pháp đặt đĩa giấy tẩm và xác định MIC bằng phương pháp pha vi pha loãng trên phiến 96 giếng.Khảo sát hoạt<br /> tính chống oxy hóa bằng đánh giá năng lực khử, khả năng quét gốc tự do DPPH và khả năng quét gốc hydroxyl<br /> tự do.Thăm dò hoạt tính kháng viêm, giảm đau bằng khả năng ức chế biến tính albumin do nhiệt.<br /> Kết quả: MIC của cao phân đoạn chloroform và ethyl acetat trên S. aureus, MRSA, St. pyogenes, P.<br /> aeruginosa, E. coli và C. albicans lần lượt từ 12,5 – 50 mg/ml và 32,5 – 250 mg/ml.Cao cồn tổng thể hiện khả<br /> năng chống oxy hóa tốt hơn cao nước tổng. Cao ethyl acetat quét gốc DPPH tự do tốt nhất (IC50=8,3µg/ml), cao<br /> ether quét gốc hydroxyl tự do tốt nhất.Cao cồn tổng và cao nước tổng đều có tiềm năng kháng viêm và cao cồn<br /> tổng nổi trội hơn. Phân đoạn ethyl acetat thể hiện tiềm năng kháng viêm mạnh nhất.<br /> Kết luận: Tứ Bạch Long có hoạt tính kháng khuẩn rất yếu. Trong khi đó, hoạt tính chống oxy hóa thể hiện<br /> rất tốt. Ngoài ra còn ghi nhận được tiềm năng về hoạt tính kháng viêm, giảm đau, có thể tiến hành khảo sát in<br /> vivo để có kết luận chính xác hơn.<br /> Từ khóa: Blepharis maderaspatensis, kháng khuẩn, kháng oxy hóa, kháng viêm.<br /> <br /> SUMMARY<br /> PRELIMINARY STUDY ON BIOACTIVITIES OF BLEPHARIS MADERSPATENSIS (L.) ROTH.<br /> Van Đuc Thinh, Le Thi Hong Quy, Tran Cong Luan<br /> * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 16 - Supplement of No 1 – 2012 : 199 – 206<br /> Background: Preliminarily evaluate the bioactivities relating the healing abces ability of the herbal extracts<br /> from Blepharis maderaspatensis (L.) Roth.<br /> Materials and Methods: Extracting with two solvents: 96% alcohol and water. The alcohol crude extract<br /> was separated using four solvents: Petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, and saturated n‐buthanol. Testing<br /> antibiotic resistance on (1) ‐ three Gram‐negative bacteria: Wild‐typed Escherichia coli, Ampicillin‐resistant E.<br /> coli, and Pseudomonas aeruginosa, (2) – three Gram‐positive bacteria: Staphylococcus aureus, MRSA,<br /> Streptococcus pyogenes, (3) – two types of fungi: Candida albicans, and Trychophyton mentagrophytes by using<br /> diffusion method (5µl of 500 mg/ml extracts in DMSO). The MIC of the extracts were test using the micro‐<br /> dilution method.Antioxidant activity of the extracts was carried out with reduction power, DPPH radical<br /> * Trung tâm Sâm và Dược liệu Tp. HCM  Khoa Sinh học - Trường ĐH Khoa học tự nhiên TPHCM<br /> Tác giả liên lạc: CN. Văn Đức Thịnh<br /> ĐT: 0908992221 ,<br /> Email: princetoad1985@yahoo.com<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> 199<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012<br /> <br /> scavenging and hydroxyl radical scavenging tests.Evaluating the potentiality of the anti‐ inflammatory activity of<br /> extracts by the inhibition of the heat denaturation of serum albumin.<br /> Results: The MIC of chloroform and ethyl acetate extracts on S. aureus, MRSA, St. pyogenes, P.<br /> aeruginosa, E. coli, and C. albicans were 12.5 – 50 mg/ml, and 32.5 – 250 mg/ml, respectively.Both alcohol crude<br /> extract and water crude extract had antioxidant activity, but the alcohol crude extract was better. The ethyl acetate<br /> extract was the best in DPPH radical scavenging activity (IC50=8.3 µg/ml) and the petroleum ether extract was<br /> the best in hydroxyl radical scavenging activity.Both alcohol crude extract and water crude extract had anti‐<br /> inflammatory potentiality, but the alcohol crude extract was better. The ethyl acetate extract was the best in all of<br /> extract separated from the alcohol crude extract.<br /> Conclusion: Blepharis maderaspatensis show weak antimicrobial activity. However, B. maderaspatensis<br /> displayed a strong antioxidant activity. Besides, B. maderaspatensis also had anti‐ inflammatory potentiality, that<br /> must be studied further on experiments in vivo.<br /> Key words: Blepharis maderaspatensis, antibacteria, antioxidant, antiinflammatory.<br /> <br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> Trong suốt thời gian kháng chiến và đến<br /> nhiều năm sau giải phóng, nhân dân tỉnh Bình<br /> Thuận sử dụng Tứ Bạch Long (TBL), một loài<br /> cây thân thảo mọc bò ven rạch nước, như một<br /> dược liệu điều trị vết thương áp- xe phần mềm<br /> sau khi đã được nạo hút hết mủ. Sau khi định<br /> danh, TBL được xác định tên khoa học là<br /> Blepharis maderaspatensis (L.) Roth, một loài thuộc<br /> họ Acanthaceae (họ Ô rô)(4).Theo những khảo sát<br /> về cây thuốc dân gian nhiều vùng trên thế giới,<br /> TBL cũng được sử dụng nhiều trong các bài<br /> thuốc chữa vết thương phần mềm, viêm họng,<br /> phỏng, gout…(2).<br /> Nhằm góp phần phát huy tiềm lực cây<br /> thuốc của Việt Nam và củng cố cho phương<br /> pháp điều trị dân gian, chúng tôi đã bước đầu<br /> khảo sát về những hoạt tính liên quan đến khả<br /> năng làm lành vết thương áp- xe của TBL. Các<br /> khả năng kháng khuẩn, khả năng chống oxy hóa<br /> và tiềm năng kháng viêm của TBL sẽ được làm<br /> rõ trong báo cáo này.<br /> <br /> VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP<br /> TBL được cung cấp bởi Hội Đông y huyện<br /> Bắc Bình, tỉnh Bình Thuận, dưới dạng phơi khô<br /> cả rễ, thân và lá, trong đó, thân và lá chiếm sinh<br /> khối chủ yếu.<br /> <br /> 200<br /> <br /> Chiết xuất dược liệu<br /> 2 kg bột dược liệu khô chiết với cồn 96%<br /> bằng phương pháp ngấm kiệt (tỷ lệ 1:10), và 50 g<br /> bột dược liệu khô chiết với nước bằng phương<br /> pháp siêu âm gia nhiệt 60 oC (tỷ lệ 1:25). Cao cồn<br /> tổng được tiến hành lắc phân đoạn với các dung<br /> môi có độ phân cực tăng dần là ether dầu hỏa,<br /> chloroform, ethyl acetat và n-buthanol bão hòa<br /> nước. Gộp dịch chiết của từng dung môi, cô<br /> giảm áp đến cắn, thu được 5 phân đoạn cao(8).<br /> <br /> Xác định tính kháng khuẩn<br /> Thăm dò tính kháng khuẩn bằng phương<br /> pháp đặt đĩa giấy tẩm 5 µl cao hoà trong DMSO<br /> ở nồng độ 500 mg/ml, trên môi trường TSA. Xác<br /> định MIC dựa vào phương pháp vi pha loãng<br /> trên phiến 96 giếng. Các chủng khuẩn thử<br /> nghiệm gồm Staphylococcus aureus (MSSA), S.<br /> aureus<br /> đề<br /> kháng<br /> methicillin<br /> (MRSA),<br /> Streptococcus pyogenes (StrP), Escherichia coli<br /> (ASEC), E. coli đề kháng ampiciclin (AREC),<br /> Pseudomonas aeruginosa (PA), nấm men Candida<br /> albicans (CA) và nấm da Trychophyton<br /> mentagrophytes (TM)(6).<br /> <br /> Xác định hoạt tính chống oxy hóa.<br /> Xác định năng lực khử<br /> Theo phương pháp của Yen và Duh<br /> (1993)(11). Thí nghiệm được thực hiện 3 lần lặp<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012<br /> lại. Năng lực khử của mẫu được xác định dựa<br /> trên công thức: ∆OD = ODthử - ODchứng.<br /> ODthử là mật độ quang của hỗn hợp sau<br /> phản ứng của mẫu thử.<br /> ODchứng là mật độ quang của hỗn hợp sau<br /> phản ứng có mẫu thử được thay thế bằng<br /> nước cất.<br /> <br /> Xác định khả năng quét gốc tự do DPPH<br /> Theo phương pháp của Brand-Williams1995(9). Thí nghiệm được thực hiện 3 lần lặp lại.<br /> Hoạt tính chống oxi hóa (HTCO) được tính theo<br /> công thức:<br /> ODc là mật độ quang của dung dịch DPPH<br /> và MeOH.<br /> ODt là mật độ quang của dung dịch DPPH<br /> và mẫu thử.<br /> <br /> Xác định khả năng quét gốc hydroxyl tự do<br /> Theo phương pháp của Li và cộng sự (2007)<br /> (7). Thí nghiệm được thực hiện 3 lần lặp lại.<br /> Hoạt tính chống oxi hóa (KGOH) được tính theo<br /> công thức: KGOH (%)  ODm  ODtk x100<br /> ODdc  ODtk<br /> <br /> ODm: độ hấp thu của mẫu thử ở bước sóng<br /> 520 nm.<br /> ODtk: độ hấp thu của mẫu thử không ở bước<br /> sóng 520 nm.<br /> ODdc: độ hấp thu của mẫu đối chứng ở bước<br /> sóng 520 nm.<br /> <br /> Xác định khả năng kháng viêm<br /> Theo phương pháp khảo sát tác dụng ức chế<br /> biến tính albumin do nhiệt của Mizushima<br /> (1964)(5). Thí nghiệm được thực hiện 3 lần lặp lại.<br /> Hoạt tính chống oxi hóa (UCBT) được tính theo<br /> công thức: UCBT (%)  ODc  ODm x100<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN<br /> Hoạt tính kháng khuẩn<br /> Ở nồng độ mẫu thử là 500 mg/ml, chỉ có cao<br /> cồn tổng và 2 cao phân đoạn là chloroform,<br /> ethyl acetat thể hiện khả năng kháng khuẩn. Khả<br /> năng kháng khuẩn chủ yếu là đối với Gram<br /> dương là Staphylococcus aureus, Streptococcus<br /> pyogenes; ngoài ra còn có khả năng kháng đối<br /> với Gram âm là Pseudomonas aeruginosa và nấm<br /> men Candida albicans. Trong đó, S. aureus đặc biệt<br /> nhạy cảm và P. aeruginosa cũng bị đáp ứng khá<br /> cao.<br /> Bảng 1. Kết quả khảo sát hoạt tính kháng khuẩn<br /> Đường kính kháng khuẩn (mm)<br /> <br /> Mẫu thử<br /> <br /> MSS MRS<br /> StrP ASEC<br /> A<br /> A<br /> H2O<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> DMSO<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> Cao cồn tổng 7,7 7,3<br /> 1<br /> 0<br /> Cao nước<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> tổng<br /> Cao ether<br /> 6<br /> 3,7 0,7<br /> 0<br /> Cao<br /> 16,3 15 2,7 1,7<br /> chloroform<br /> Cao ethyl<br /> 13,7 5,3 2,3<br /> 2<br /> acetat<br /> Cao n –<br /> 5<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> butanol<br /> Cao nước<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> còn lại<br /> Tetracylin<br /> 38 28,3 26,3 19,7<br /> Clotrimazol<br /> <br /> ODc: mật độ quang của mẫu mà chất thử<br /> nghiệm được thay bằng đệm.<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> PA TM CA<br /> 0 0<br /> 0 0<br /> 3,3 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0,3 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 4,7 14,3 0<br /> <br /> 4<br /> <br /> 1,7 4,3 0<br /> <br /> 3<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> 0<br /> 2,3<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 0<br /> <br /> 23,3 31,3<br /> 26,7 7,3<br /> <br /> Phân đoạn chloroform và ethyl acetat thể hiện<br /> tính kháng khuẩn nhưng đều cho kết quả MIC<br /> rất cao, 12,5 – > 50 mg/ml đối với phân đoạn<br /> chloroform và 62,5 – 250 mg/ml đối với phân<br /> đoạn ethyl acetat.<br /> Bảng 2. Kết quả MIC cao chloroform và ethyl acetat<br /> <br /> ODc<br /> <br /> ODm: mật độ quang của mẫu thử có mang<br /> chất thử nghiệm.<br /> <br /> ARE<br /> C<br /> 0<br /> 0<br /> 0<br /> <br /> Chủng khuẩn (mg/ml)<br /> Mẫu<br /> MSSA MRSA StrP ASEC AREC<br /> MIC cao<br /> chloroform 25<br /> (mg/ml)<br /> MIC cao<br /> ethyl<br /> 125<br /> acetat<br /> (mg/ml)<br /> <br /> PA<br /> <br /> CA<br /> <br /> 25<br /> <br /> 12,5<br /> <br /> 50<br /> <br /> 50<br /> <br /> 50<br /> <br /> > 50<br /> <br /> 125<br /> <br /> 250<br /> <br /> 250<br /> <br /> 250<br /> <br /> 250<br /> <br /> 62,5<br /> <br /> 201<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> Hoạt tính chống oxi hóa<br /> <br /> Năng lực khử<br /> Năng lực khử của các loại cao tăng theo<br /> nồng độ khảo sát và so với chất đối chiếu<br /> vitamin C thì năng lực khử của các loại cao thấp<br /> hơn nhiều.<br /> Bảng 3. Năng lực khử của TBL<br /> Mẫu<br /> Cao cồn tổng<br /> Cao nước tổng<br /> Cao ether dầu<br /> Cao chloroform<br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> Vitamin C<br /> <br /> 200<br /> µg/ml<br /> 0,173<br /> 0,013<br /> 0,233<br /> 0,303<br /> 0,324<br /> 0,093<br /> 0,066<br /> 0,463<br /> <br /> Năng lực khử<br /> 400<br /> 600<br /> 800<br /> µg/ml µg/ml µg/ml<br /> 0,231 0,294 0,369<br /> 0,03 0,062 0,108<br /> 0,324 0,395 0,451<br /> 0,381 0,448 0,555<br /> 0,433 0,705 0,824<br /> 0,135 0,182 0,229<br /> 0,124 0,167 0,201<br /> 0,952 1,399 1,986<br /> <br /> 1000<br /> µg/ml<br /> 0,43<br /> 0,138<br /> 0,526<br /> 0,607<br /> 0,978<br /> 0,289<br /> 0,27<br /> 2,308<br /> <br /> hỏa<br /> Cao chloroform<br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> Vitamin C<br /> <br /> y=0,8254x+22,486<br /> y=4,8492x+9,651<br /> y=0,3959x+11,319<br /> y=0,2539x-7,506<br /> y=15,427x-0,972<br /> <br /> 0,9819<br /> 0,9849<br /> 0,9913<br /> 0,9922<br /> 0,9853<br /> <br /> 33,3<br /> 8,3<br /> 97,7<br /> 226,5<br /> 3,4<br /> <br /> Hai dạng cao chiết đều có hoạt tính chống<br /> oxy hóa bằng cơ chế quét gốc tự do DPPH,<br /> nhưng cao chiết bằng cồn có hoạt tính cao hơn<br /> cao chiết bằng nước. Trong các phân đoạn dịch<br /> chiết từ cao chiết cồn thì phân đoạn ethyl acetat<br /> cho hoạt tính quét gốc tự do DPPH mạnh nhất,<br /> mạnh hơn gấp nhiều lần các phân đoạn ether<br /> dầu và gần bằng với hoạt tính của vitamin C<br /> tinh khiết.<br /> <br /> Khả năng quét gốc hydroxyl tự do<br /> Bảng 5. Khả năng quét gốc hydroxyl tự do của TBL<br /> Khả năng kháng hydroxyl tự do (%)<br /> 200<br /> 400<br /> 600<br /> 800 1000<br /> µg/ml µg/ml µg/ml µg/ml µg/ml<br /> Cao cồn tổng<br /> 11,88 19,57 27,95 35,86 45,7<br /> Cao nước tổng<br /> 3,11<br /> 5,69<br /> 9,72 13,85 21,47<br /> Cao ether dầu<br /> 13,5 30,64 39,18 56,9 64,18<br /> Cao chloroform 10,53 17,67 23,13 32,05 44,66<br /> Cao ethyl acetat 4,67<br /> 8,01<br /> 14,25 16,48 25,79<br /> Cao n-buthanol<br /> 1,94<br /> 3,11<br /> 6,02<br /> 5,64 4,29<br /> Cao nước còn lại 3,54<br /> 1,93<br /> 5,41<br /> 6,85 6,14<br /> Vitamin C<br /> 2,53<br /> 4,02<br /> 11,16 18,69 21,38<br /> Mẫu<br /> <br /> Năng lực khử<br /> 2.5<br /> <br /> 2<br /> Cao tổng cồn<br /> Cao tổng nước<br /> Cao ether dầu<br /> <br /> 1.5<br /> ∆OD<br /> <br /> Cao chloroform<br /> Cao ethyl acetat<br /> 1<br /> <br /> Cao n-Buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> Vitamin C<br /> <br /> 0.5<br /> <br /> 0<br /> 200<br /> <br /> 400<br /> <br /> 600<br /> <br /> 800<br /> <br /> 1000<br /> <br /> Khả năng kháng gốc hydroxyl tự do<br /> <br /> Nồng độ mẫu (µg/ml)<br /> <br /> 70<br /> 60<br /> <br /> Trong 2 dạng cao tổng thì cao cồn tổng có<br /> năng lực khử mạnh hơn cao nước tổng. Năng<br /> lực khử của 5 phân đoạn cao chiết từ cao cồn<br /> tổng giảm dần theo thứ tự sau: ethyl acetat ><br /> chloroform > ether > n-buthanol > nước. Phân<br /> đoạn ethyl acetat cho năng lực khử mạnh nhất<br /> và nổi trội hơn hẳn so với các phân đoạn khác.<br /> <br /> 50<br /> KGOH (%)<br /> <br /> Hình 1. Năng lực khử của các loại cao chiết TBL<br /> <br /> Cao tổng cồn<br /> Cao tổng nước<br /> Cao ether dầu<br /> <br /> 40<br /> <br /> Cao chloroform<br /> <br /> 30<br /> <br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-Buthanol<br /> <br /> 20<br /> <br /> Cao nước còn lại<br /> Vitamin C<br /> <br /> 10<br /> 0<br /> 200<br /> <br /> 400<br /> <br /> 600<br /> <br /> 800<br /> <br /> 1000<br /> <br /> nồng độ mẫu (µg/ml)<br /> <br /> Khả năng quét gốc tự do DPPH<br /> Bảng 4. Kết quả quét gốc tự do DPPH của TBL<br /> Phương trình tuyến<br /> IC50<br /> 2<br /> Mẫu<br /> R<br /> tính<br /> (µg/ml)<br /> Cao cồn tổng<br /> y=1,9354x-4,4006 0,9901<br /> 28,1<br /> Cao nước tổng y=0,3428x+16,941 0,9621<br /> 96,4<br /> y=0,3491x+5,35<br /> 0,9895 127,9<br /> Cao ether dầu<br /> <br /> 202<br /> <br /> Hình 2. Khả năng kháng gốc tự do của các loại cao<br /> chiết TBL<br /> Cao cồn tổng có khả năng kháng gốc<br /> hydroxyl tự do và khả năng có liên quan đến<br /> nồng độ của cao chiết. Trong khi đó, cao nước<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 16 * Phụ bản của Số 1 * 2012<br /> tổng thể hiện khả năng kháng gốc hydroxyl tự<br /> do rất thấp và không ổn định khi thay đổi nồng<br /> độ của cao chiết. Như vậy có thể xem như cao<br /> cồn tổng của TBL có khả năng kháng hydroxyl<br /> tự do và cao nước tổng lại không có khả năng<br /> này. Tương tự trên, trong các phân đoạn cao<br /> chiết từ cao cồn tổng của TBL, 3 phân đoạn thể<br /> hiện khả năng kháng gốc hydroxyl tự do theo<br /> trật tự giảm dần là ether > chloroform > ethyl<br /> acetat; và 2 phân đoạn n-buthanol, phân đoạn<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> nước còn lại không có khả năng kháng gốc<br /> hydroxyl tự do.<br /> Hoạt tính kháng viêm<br /> Thuốc kháng viêm không có steroid<br /> (NSAIDs – Non- steroidal anti- inflammatory<br /> drugs) ở nồng độ thấp, dưới 1mM đối với chất<br /> tinh khiết, sẽ làm giảm độ nhớt và làm giảm sự<br /> biến tính dưới tác nhân nhiệt. Những hợp chất<br /> hay dịch chiết từ cây thuốc có khả năng kháng<br /> viêm cũng có hoạt tính này (1, 5, 7, 10)<br /> <br /> Bảng 6. Kết quả khảo sát khả năng ức chế biến tính albumin của TBL<br /> Mẫu<br /> (µg/ml)<br /> Cao cồn tổng<br /> Cao nước tổng<br /> Cao ether dầu<br /> Cao chloroform<br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> Indomethacin<br /> <br /> 0,977<br /> -9,13<br /> -23,65<br /> -1,92<br /> 1,91<br /> -6,49<br /> -20,39<br /> -42,11<br /> 7,72<br /> <br /> 1,953<br /> 0,83<br /> -10,37<br /> -0,76<br /> 3,44<br /> 24,03<br /> -19,08<br /> -27,63<br /> 25,72<br /> <br /> Khả năng ức chế biến tính (%)<br /> 7,813<br /> 15,625<br /> 31,25<br /> 62,5<br /> 20,33<br /> -7,88<br /> -14,52<br /> -30,71<br /> -4,98<br /> 0,41<br /> 2,9<br /> 7,05<br /> 6,87<br /> -17,56<br /> -19,47<br /> -32,82<br /> 0<br /> -0,76<br /> -10,31<br /> -28,63<br /> -25,32<br /> -6,49<br /> -31,82<br /> -17,53<br /> -9,87<br /> -6,58<br /> 8,55<br /> -18,42<br /> -17,76<br /> -11,18<br /> -7,24<br /> 1,97<br /> 13,18<br /> 3,86<br /> -7,69<br /> -33,33<br /> <br /> 3,906<br /> 7,47<br /> -5,39<br /> 4,58<br /> 11,45<br /> -21,43<br /> -15,13<br /> -33,55<br /> 14,79<br /> <br /> 50<br /> 0<br /> -50 0<br /> <br /> 100<br /> <br /> 200<br /> <br /> 300<br /> <br /> 400<br /> <br /> 500<br /> <br /> 600<br /> <br /> -100<br /> <br /> UCBT (%)<br /> <br /> -150<br /> -200<br /> -250<br /> <br /> Cao ether dầu<br /> Cao chloroform<br /> Cao ethyl acetat<br /> <br /> -300<br /> <br /> Cao n-Buthanol<br /> <br /> -350<br /> <br /> Cao nước còn lại<br /> Cao tổng cồn<br /> <br /> -400<br /> nồng độ (µg/ml)<br /> <br /> Cao tổng nước<br /> <br /> -450<br /> <br /> Indom ethacin<br /> <br /> Hình 3. Kết quả khảo sát khả năng ức chế biến tính<br /> albumin của TBL nồng độ cao<br /> Tác động ức chế biến tính albumin do nhiệt<br /> 30<br /> 20<br /> Cao ether dầu<br /> <br /> 10<br /> <br /> UCBT (%)<br /> <br /> Cao chloroform<br /> 0<br /> 0<br /> <br /> 10<br /> <br /> 20<br /> <br /> 30<br /> <br /> 40<br /> <br /> 50<br /> <br /> 60<br /> <br /> -10<br /> <br /> 70<br /> <br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-Buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> <br /> -20<br /> <br /> Cao tổng cồn<br /> Cao tổng nước<br /> <br /> -30<br /> <br /> Indomethacin<br /> <br /> -40<br /> -50<br /> nồng độ (µg/m l)<br /> <br /> Hình 4. Kết quả khảo sát khả năng ức chế biến tính<br /> albumin của TBL nồng độ thấp<br /> Williams và cộng sự chọn mức hoạt tính ức<br /> chế biến tính albumin do nhiệt là trên 20% làm<br /> <br /> Chuyên Đề Y Học Cổ Truyền<br /> <br /> 125<br /> -18,67<br /> 13,69<br /> -93,13<br /> -45,04<br /> -14,29<br /> -42,1<br /> 5,92<br /> -29,06<br /> <br /> 250<br /> -65,15<br /> 23,24<br /> -189,31<br /> -137,79<br /> -23,38<br /> -49,34<br /> 7,89<br /> -55,13<br /> <br /> 500<br /> -156,02<br /> 5,81<br /> -396,57<br /> -338,93<br /> -75,3247<br /> -50<br /> -8,55<br /> -94,02<br /> <br /> ngưỡng đánh giá tiềm năng kháng viêm của<br /> chất khảo sát (10). Như vậy, dựa vào nồng độ ức<br /> chế biến tính được trên 20% albumin (IC20) ta có<br /> thể dự đoán được khả năng kháng viêm của<br /> dịch chiết từ TBL. Dựa vào các giá trị khảo sát<br /> được từ bảng 6, ta có thể xác định một cách<br /> tương đối giá trị IC20 của các loại cao chiết từ<br /> TBL và được thể hiện như bảng 7.<br /> Bảng 7. Khả năng ức chế biến tính albumin của TBL<br /> Mẫu<br /> Cao cồn tổng<br /> Cao nước tổng<br /> Cao ether dầu<br /> Cao chloroform<br /> <br /> IC20<br /> (µg/ml)<br /> 7,5<br /> 207<br /> 6,5<br /> <br /> Mẫu<br /> Cao ethyl acetat<br /> Cao n-buthanol<br /> Cao nước còn lại<br /> Indomethacin<br /> <br /> IC20<br /> (µg/ml)<br /> 1,8<br /> 43<br /> 1,6<br /> <br /> Kết quả đánh giá IC20 cho thấy cao cồn tổng<br /> có khả năng ức chế biến tính albumin cao hơn<br /> cao cao nước tổng. Trong 5 phân đoạn cao chiết,<br /> 2 phân đoạn không có khả năng ức chế biến tính<br /> albumin là ether dầu và phần dịch nước còn lại,<br /> do trong khoảng tuyến tính giữa nồng độ mẫu<br /> thử với khả năng ức chế, 2 phân đoạn này<br /> không thể đạt được giá trị IC20; 3 phân đoạn có<br /> khả năng ức chế biến tính albumin do nhiệt<br /> được xếp theo thứ tự khả năng giảm dần là ethyl<br /> <br /> 203<br /> <br />