BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
***000***
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG NHIỄM TOMATO SPOTTED
WILT VIRUS TRÊN CÀ CHUA TẠI TỈNH TIỀN GIANG
BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ XÂY DỰNG QUY
TRÌNH CHẨN ĐOÁN TOMATO SPOTTED
WILT VIRUS BẰNG KỸ THUẬT RT – PCR
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên khóa: 2003 – 2007
Sinh viên thực hiện: NGUYỄN HỒNG PHƢỚC
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2007
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC
***000***
ĐÁNH GIÁ TÌNH TRẠNG NHIỄM TOMATO SPOTTED
WILT VIRUS TRÊN CÀ CHUA TẠI TỈNH TIỀN GIANG
BẰNG KỸ THUẬT ELISA VÀ XÂY DỰNG QUY
TRÌNH CHẨN ĐOÁN TOMATO SPOTTED
WILT VIRUS BẰNG KỸ THUẬT RT – PCR
Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện:
PGS.TS. BÙI CÁCH TUYẾN NGUYỄN HỒNG PHƢỚC
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2007
MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING
NONG LAM UNIVERSITY, HCMC
DEPARTMENT OF BIOTECHNOLOGY
EVALUATION ON THE STATUS QUO OF TOMATO SPOTTED
WILT VIRUS AFFECTING TOMATO PLANT IN TIEN GIANG
PROVINCE BY ELISA AND FORMULATING
THE RT – PCR PROCESS TO DIAGNOSE
TOMATO SPOTTED WILT VIRUS
Graduation thesis
Major: Biotechnology
Professor: Student:
BUI CACH TUYEN NGUYEN HONG PHUOC
Term: 2003 – 2007
HCMC, 9/2007
iv
LỜI CẢM TẠ
Em xin chân thành cảm tạ:
PGS.TS. Bùi Cách Tuyến đã hết lòng hƣớng dẫn, giúp đỡ và truyền đạt
những kinh nghiệm quý báu giúp em hoàn thành khóa luận.
Ban Giám hiệu Trƣờng Đại Học Nông Lâm TP.Hồ Chí Minh, Ban Chủ
nhiệm bộ môn Công Nghệ Sinh Học đã tạo điều kiện thuận lợi cho em trong
quá trình học tập và thực hiện khóa luận này.
Ban Giám đốc Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Hóa Sinh và toàn thể
Anh Chị đã tạo điều kiện thuận lợi và giúp em hoàn thành tốt khóa luận.
TS. Lê Đình Đôn cùng quý Thầy – Cô trong và ngoài trƣờng đã truyền đạt
cho em nhiều kiến thức quý báu trong suốt thời gian học tập và làm khóa
luận.
Em xin cám ơn chị Dƣơng, chị Hƣng, chị Hạnh, anh Lẫm, anh Trƣờng, anh
Vũ đã tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ em trong suốt thời gian thực hiện khóa luận.
Cảm ơn tập thể lớp Công Nghệ Sinh Học K29 niên khóa 2003 – 2007, đã
luôn gắn bó, chia sẻ, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt thời gian học tập và
thực hiện khóa luận.
Con vô cùng biết ơn cha mẹ đã dạy bảo, nuôi dƣỡng con đƣợc nhƣ ngày hôm
nay, cùng những ngƣời thân trong gia đình luôn tạo điều kiện và động viên con
trong suốt thời gian học tập tại trƣờng.
Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 9 năm 2007.
Sinh viên
Nguyễn Hồng Phƣớc
v
TÓM TẮT KHÓA LUẬN
Nguyễn Hồng Phƣớc, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Tháng 9 năm
2007, “Đánh giá tình trạng nhiễm Tomato Spotted Wilt Virus trên cà chua
bằng kỹ thuật ELISA và xây dựng quy trình chẩn đoán Tomato Spotted
Wilt Virus bằng kỹ thuật RT – PCR” đƣợc thực hiện từ tháng 3 đến tháng 8
năm 2007 tại Trung Tâm Phân Tích Thí Nghiệm Hóa Sinh thuộc Viện Nghiên
Cứu Công Nghệ Sinh Học và Công Nghệ Môi Trƣờng (RIBET), Trƣờng Đại Học
Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh.
Nội dung thực hiện:
Thu mẫu có triệu chứng nhiễm TSWV tại xã Bình Ninh và xã Hòa Định
huyện Chợ Gạo, xã Bình Nhì và xã Thạnh Nhật thuộc thị xã Gò Công.
Xác định tỉ lệ nhiễm TSWV trên cà chua tại các xã Bình Ninh, Hòa Định,
Bình Nhì, Thạnh Nhật thuộc tỉnh Tiền Giang bằng kỹ thuật DAS – ELISA.
Mẫu biểu hiện dƣơng tính mạnh đƣợc chọn để thực hiện phản ứng RT –
PCR. Từ đó tìm ra quy trình RT – PCR chẩn đoán bệnh TSWV.
Kết quả đạt đƣợc:
1. Xác định tỷ lệ nhiễm TSWV tại các địa bàn nhƣ sau:
Huyện Chợ Gạo
Xã Hòa Định 12,0 %
Xã Bình Ninh 13,16 %
Thị xã Gò Công
Xã Bình Nhì 14,29 %
Xã Thạnh Nhật 10,0 %
2. Bƣớc đầu tìm đƣợc quy trình RT – PCR một bƣớc để chẩn đoán bệnh TSWV.