Đánh giá vai trò của HLA‐DR trong chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp dòng tủy phân nhóm M3

Chia sẻ: Trần Thị Hạnh | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:6

Thêm vào BST

Báo xấu

65
lượt xem 2
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Mục tiêu nghiên cứu nhằm khảo sát vai trò của HLA‐DR trong chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp dòng tủy phân nhóm M3 (BCCDT‐M3). Nghiên cứu tiến hành trong 156 ca chẩn đoán bạch cầu cấp dòng tủy có 18 ca thuộc phân nhóm M3 và 138 ca khác phân nhóm M3.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Đánh giá vai trò của HLA‐DR trong chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp dòng tủy phân nhóm M3

Nghiên cứu Y học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 ĐÁNH GIÁ VAI TRÒ CỦA HLA‐DR TRONG CHẨN ĐOÁN BỆNH BẠCH CẦU CẤP DÒNG TỦY PHÂN NHÓM M3 Nguyễn Hồng Điệp*, Nguyễn Phương Liên* TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Khảo sát vai trò của HLA‐DR trong chẩn đoán bệnh bạch cầu cấp dòng tủy phân nhóm M3 (BCCDT‐M3). Phương pháp nghiên cứu: Mô tả hàng loạt ca. Sử dụng các kháng thể đơn dòng có gắn huỳnh quang và phân tích bằng hệ thống máy FACSCanto II trên phần mềm Diva để xác định kiểu hình dấu ấn miễn dịch (DAMD). Tiến hành nghiên cứu trên 156 bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu cấp dòng tủy có làm xét nghiệm tủy đồ, DAMD và sinh học phân tử (SHPT) tại Bệnh viện Truyền máu Huyết học TP.HCM từ tháng 04/2010 đến 09/2012. Kết quả: Trong 156 ca chẩn đoán BCCDT có 18 ca thuộc phân nhóm M3 và 138 ca khác phân nhóm M3. Ghi nhận 36/156 ca có HLA‐DR âm tính, gặp ở tất cả các phân nhóm BCCDT: 94% trong các ca M3; 33% trong M0; 15% trong M2; 4% trong Mono; 25% trong M6 và 50% trong M7. Trong 18 ca được chẩn đoán xác định M3 với t(15;17) và PML‐RARA dương tính: 17 ca có HLA‐DR âm tính và 1 ca có HLA‐DR dương tính yếu. Kết luận: HLA‐DR âm tính gặp ở tất cả các phân nhóm BCCDT. Do đó, HLA‐DR âm tính trong BCCDT không còn được xem là tiêu chuẩn vàng để thiết lập chẩn đoán phân nhóm M3 về mặt DAMD. Khi kết quả tủy đồ hướng BCCDT‐M3 bước tiếp theo phải bổ sung xét nghiệm SHPT để chẩn đoán xác định. Từ khóa: Bạch cầu cấp dòng tủy với HLA‐DR, bạch cầu cấp dòng tủy phân nhóm M3, bạch cầu cấp, kiểu hình dấu ấn miễn dịch. ABSTRACT EVALUATING THE ROLE OF HLA‐DR IN THE DIAGNOSIS OF ACUTE PROMYELOCYTIC LEUKEMIA Nguyen Hong Diep, Nguyen Phuong Lien * Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ No 5 ‐ 2013: 126 ‐ 131 Objective: to determine the values of HLA‐DR in diagnosis of acute promyelocytic leukemia. Methods: Case series. Using flourescent monoclonal antibodies and analysing results on FACSCanto II system with Diva software to perform immunophenotyping on the specimens of bone marrow aspirated from AML patients, at Blood Transfusion Hematology Hospital, from 04/2010 to 09/2012. Results: In 156 AML cases, there were 18 acute promyelocytic leukemia (APL/AML‐M3) cases and 138 other subtypes of AML cases. HLA‐DR antigens were not detected on AML cells from 36 patients, including 17/18 with APL (in 94% APL); and 19/138 with other subtypes of AML (in 33% M0; 15% M2; 4% Mono; 25% M6 and 50% M7). All 18 APL cases had t(15;17) and/or PML‐RARA, including 17 cases with HLA‐DR‐ negative and 1 case with HLA‐DR dim. Conclusion: HLA‐DR antigens were not detected on 36/156 AML cases, including APL and other subtypes of AML. The diagnosis of APL cannot be based on lack of HLA‐DR antigen expression; rather, it requires further cytogenetic or molecular studies. * Bệnh viện Truyền máu Huyết học TP.HCM. Tác giả liên lạc: TS. BS. Nguyễn Phương Liên. ĐT: 0903 333 994. Email: lien_nguyen1974@yahoo.com. 126 Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Nghiên cứu Y học Keywords: HLA‐DR‐negative AML, AML‐M3, leukemia, immunophenotyping. ĐẶT VẤN ĐỀ Trước đây, việc chẩn đoán bệnh BCCDT‐ M3 về mặt DAMD thường dựa vào đặc điểm HLA‐DR âm tính, vì đối với dòng tủy, HLA‐ DR dương tính trên những tế bào (TB) non nhất (myeloblast), từ giai đoạn promyelocyte trở đi sẽ không còn hiện diện(8). Ngày nay, mặc dù BCCDT‐M3 có những đặc trưng riêng về hình thái và DAMD nhưng quyết định chẩn đoán BCCDT‐M3 phải dựa vào kết quả phân tích di truyền học TB và SHPT nhờ sự hiện diện của chuyển đoạn t(15;17) và/hoặc phức hợp PML‐RARA. Theo một số báo cáo gần đây cho thấy ở các phân nhóm khác BCCDT (về mặt DAMD) vẫn có trường hợp HLA‐DR âm tính(15). Vì vậy chúng tôi thực hiện nghiên cứu này nhằm khảo sát vai trò của HLA‐DR trong các ca BCCDT để tìm hiểu xem HLA‐DR âm tính có phải là tiêu chuẩn phù hợp để chẩn đoán BCCDT‐M3 hay không. Mục tiêu tổng quát Khảo sát vai trò của HLA‐DR trong chẩn đoán bệnh BCCDT‐M3 tại bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP.HCM từ tháng 04/2010 đến tháng 09/2012. Mục tiêu chuyên biệt Xác định tỉ lệ HLA‐DR âm tính trong các phân nhóm của BCCDT; Xác định tỉ lệ HLA‐DR âm tính có t(15;17) và/hoặc PML‐RARA; Xác định kiểu hình DAMD thường gặp của BCCDT‐ M3. ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế nghiên cứu Mô tả hàng loạt ca. Đối tượng nghiên cứu Những bệnh nhân mắc bệnh BCCDT tại bệnh viện Truyền Máu Huyết Học TP.HCM có làm xét nghiệm tủy đồ, DAMD và SHPT (cụ thể là FISH/PCR) từ tháng 04/2010 đến tháng 09/2012. Tiêu chuẩn chọn bệnh Bệnh nhân được chẩn đoán lần đầu (de novo), có kết quả tủy đồ/ DAMD xác nhận là BCCDT. Tiêu chuẩn loại trừ Không đưa vào nghiên cứu các ca BCCDT tái phát hoặc thứ phát. Cỡ mẫu Từ tháng 04/2010 đến tháng 09/2012, có 156 ca BCCDT được chọn vào nghiên cứu. Phương pháp tiến hành Ban đầu, các mẫu tủy đều được nhuộm với cùng một bộ thuốc thử (kháng thể đơn dòng có gắn huỳnh quang của hãng Becton Dickinson ‐ Mỹ) để xác định BCCDT: CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD10, CD13, CD15, CD19, CD20, CD22, CD33, CD34, CD36, CD45, CD56, MPO, HLA‐DR. Sau đó, tùy từng trường hợp mà các mẫu tủy được nhuộm với các thuốc thử sau để phân nhóm BCCDT: CD14, CD64, CD11b, CD16, CD117, CD41a, CD61, CD71, CD235a. Sau cùng được thu thập trên máy FACS Canto II và được phân tích trên phần mềm FACS Diva version 2.1 của hãng Becton Dickinson ‐ Mỹ. Phân tích số liệu Sử dụng phần mềm Stata để phân tích thống kê. Đánh giá phần trăm đồng thuận giữa các nhóm nghiên cứu bằng Kappa test. KẾT QUẢ Đặc điểm chung về tuổi và giới tính của quần thể nghiên cứu ‐ Bệnh gặp ở nam tương đương ở nữ (79 nam và 77 nữ). Tỉ lệ nam/nữ: 1/1. ‐ Tuổi trung bình: 36 tuổi; ≤15 tuổi: 20%; >15 tuổi: 80%. Tỉ lệ HLA‐DR âm tính trong các phân nhóm của BCCDT Ghi nhận 36/156 (23%) ca BCCDT có HLA‐ DR âm tính. Bảng 1: Sự hiện diện của HLA‐DR trong các phân nhóm BCCDT theo tiêu chuẩn phân lọai FAB. Chuyên Đề Truyền Máu – Huyết Học 127 Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Số 5 * 2013 Nghiên cứu Y học FAB Sự biểu hiện của HLA-DR M0 M1 M2 M3 Mono M6 M7 n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) HLA-DR (─) (n=36) 2 (33) 0 (0) 13 (15) 17 (94) 1 (4) 1 (25) 2 (50) HLA-DR (+) (n=120) 4 (67) 10 (100) 72 (85) 1 (6) 28 (96) 3 (75) 2 (50) Tổng số 6 (100) 10 (100) 85 (100) 18 (100) 29 (100) 4 (100) 4 (100) Nhận xét: Đặc điểm HLA‐DR âm tính trong BCCDT gặp nhiều nhất ở phân nhóm M3 (94% M3). Tỉ lệ HLA‐DR âm tính có t(15;17) và/hoặc PML‐RARA. Trong 36 ca BCCDT với HLA‐DR âm tính, ghi nhận 17 ca (47%) có t(15;17) và/hoặc PML‐ RARA. Bên cạnh đó, ghi nhận được 1 ca BCCDT với HLA‐DR dương tính có biểu hiện t(15;17) và PML‐RARA. Chúng tôi tiến hành so sánh kết quả DAMD và tủy đồ với kết quả SHPT (FISH/PCR) của 156 ca trong nghiên cứu (Bảng2 và bảng3). Bảng 2: So sánh sự đồng thuận giữa kết quả DAMD với kết quả SHPT KQDAMD KQ SHPT BCCDT-M3 t(15;17)/ PML-RARA BCCDT- Tổng khác M3 cộng Phân tích kiểu hình của 18 ca BCCDT‐M3 có t(15;17) và/hoặc PML‐RARA, ghi nhận: * Tỉ lệ quần thể bất thường trong mẫu khảo sát: trung bình 85 ± 11% (56 ‐ 95%). Đặc điểm CD45 và SSC ‐ 100% BCCDT‐M3 có nồng độ biểu hiện CD45 trung bình. ‐ Đặc điểm SSC: 78% có SSC trải dài từ thấp tới cao, tương ứng BCCDT‐M3 dạng nhiều hạt (APL); 22% có SSC thấp, tương ứng BCCDT‐M3 dạng ít hạt (APLv). Sự hiện diện của các kháng nguyên (KN) non Bảng 4: Sự phân bố mật độ dương tính với các KN non Mật độ dương tính với 1 KN HLA-DR CD34 CD117 n (%) n (%) n (%)