intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Giáo trình hình thành hệ thống điều tiết cảm thụ truyền nhận kích thích phản xạ của đồng tử p2

Chia sẻ: Tewt Dgdfg | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:10

55
lượt xem
3
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Tham khảo tài liệu 'giáo trình hình thành hệ thống điều tiết cảm thụ truyền nhận kích thích phản xạ của đồng tử p2', khoa học tự nhiên, nông - lâm phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Giáo trình hình thành hệ thống điều tiết cảm thụ truyền nhận kích thích phản xạ của đồng tử p2

  1. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k ch c năng gan tăng cư ng, fibrinogen trong máu tăng t c ñ huy t tr m nhanh; ngư c l i, ch c năng gan b r i lo n, t c ñ huy t tr m l i gi m. + T l globulin và albumin trong huy t tương cũng có nh hư ng. Globulin mang ñi n dương, albumin mang ñi n âm. Các b nh làm globulin tăng, tăng ñi n dương trong máu, h ng c u k t chu i d t c ñ huy t tr m nhanh. Albumin trong máu tăng - t c ñ huy t tr m ch m. + Hàm lư ng cholesterol, hàm lư ng các mu i khoáng trong máu cũng nh hư ng ñ n t c ñ huy t tr m. + Nhi t ñ trong phòng thí nghi m nh hư ng r t l n ñ n t c ñ huy t tr m. Nhìn chung, mùa ñông t c ñ huy t tr m ch m hơn mùa hè. III. Hoá tính c a máu 1. Huy t s c t (Hemoglobin) S lư ng h ng c u trong máu gi m ñi thì hàm lư ng huy t s c t gi m. Nhưng nhi u ca b nh, lư ng huy t s c t trong máu gi m do hàm lư ng huy t s c t trong m i h ng c u gi m, s lư ng h ng c u l i không gi m. Vì v y trong công tác ch n ñoán c n thi t ñ m s lư ng h ng c u và ño lư ng huy t s c t . * Phương pháp ño Thông d ng trong ch n ñoán thú y là dùng phương pháp Shali. Hi n nay m t s phòng thí nghi m l n còn dùng máy ño huy t h c ñ xác ñ nh. - Nguyên t c: axit HCl vào máu s k t h p v i huy t s c t thành axit hematin màu nâu, sau ñó so màu v i ng chu n. - Thu c th : HCL 0,1N ho c 1% - B Shali: G m: + H p so màu Shali ( ng m u màu vàng nâu tương ñương v i dung d ch 1% huy t s c t ) + ng ño Shali ( ng ño hình tròn, trên có hai c t kh c ñ : C t ch s gram huy t s c t ; và c t ch s %, có v ch tròn g n ñ y ng). + ng hút Shali (dùng ñ hút máu ñ xét nghi m, có v ch 20) B HSK Shali - Thao tác Cho dung d ch HCL 0,1N (ho c 1%) vào ng ño Shali ñ n v ch tròn. Dùng ng hút Shali hút máu ñ n v ch 20. Dùng bông lau s ch v t máu ngoài ng. Cho ng hút xu ng t n ñáy ng ño th i nh máu xu ng ng ño và hút lên th i xu ng nhi u l n ñ r a s ch máu trong ng hút r i tr n ñ u. ð 10 phút sau, r i pha loãng t t v i nư c c t ñ n khi màu c a ng ño và màu c a ng m u b ng nhau thì thôi . ð c k t qu trên c t s . ðó là s gram huy t s c t trong 100 ml máu. Máy ño huy t h c Chú ý: - Khi pha loãng máu b ng nư c c t ph i h t s c t t . . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….116
  2. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k - Cho HCL vào tr n v i máu ph i ñ 10 phút m i pha loãng và ti p t c ño. N u pha loãng dung d ch ño quá s m, k t qu ñ nh lư ng s sai. N u cho máu ch 1 phút sau ñã pha loãng, k t qu ch b ng 75 % s th c t , vì ch có 75% huy t s c t chuy n thành axit Hematic; n u 5 phút – 88% và 2 gi – 100%. Sau 10 phút pha loãng, ch 90% lư ng huy t s c t chuy n thành màu nâu. Nh ng ng m u c a b huy t s c k Shali ñã ñư c pha trong nh ng ñi u ki n ñó. - Sau m i l n ño, nên dùng nư c c t ñ r a s ch ng. ð nh lư ng huy t s c t qua lư ng Fe trong máu toàn ph n: lư ng Fe (tính b ng mg%) chia cho 3,35g s có s gram huy t s c t trong 100 ml máu. Vì hàm lư ng Fe trong huy t s c t là 0,335%. - ý nghĩa ch n ñoán Lư ng huy t s c t thay ñ i theo tu i gia súc, theo tính bi t, th c ăn và ñi u ki n môi trư ng. + Lư ng huy t s c t cao: Thư ng g p nh ng b nh làm cơ th m t nư c, xo n ru t, trúng ñ c c p tính. + Lư ng huy t s c t gi m: Thư ng g p các b nh thi u máu, suy dinh dư ng,… Chú ý: ð ch n ñoán thi u máu thư ng tính thêm các ch tiêu sau: + ch s huy t s c t Lư ng Hb c a gia súc khám Lư ng Hb tiêu chu n Ch s : = huy t s c t S lư ng h ng c u con khám S lư ng h ng c u tiêu chu n Ch s huy t s c t = 1, là thi u máu ñ ng s c; Ch s huy t s c t > 1, là thi u máu ưu s c; Ch s huy t s c t < 1, là thi u máu như c s c. + Lư ng huy t s c t bình quân trong m i h ng c u (Pg) S gam % huy t s c t x 10 Lư ng HSTBQ (pg) = S hàng tri u h ng c u/mm3 S gram % huy t s c t là s gram huy t s c t trong 100 ml máu, ño b ng huy t s c k Shali. 2. ð ki m d tr trong m u - Kh i ni m: ð d tr ki m là lư ng ki m d tr trong cơ th ñ trung hoà nh ng axit trong m u, nh ñú gi cho m u cú ñ ki m toan nh t ñ nh và ph n ng c a m u n ñ nh. Trong thỳ y d ng r ng rói phương ph p N v ñ v, v phương ph p ñơn gi n, ho ch t t. HCl 0,01N - Ho ch t: NaOH 0,1N Phenolphtalein 1% (pha trong c n) - L y m u x t nghi m: . rư T ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….117
  3. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k D ng 2 l s ch ñó s y kh cú nỳt cao su ñ y k n mi ng, m t l làm th nghi m và m t l làm ñ i ch ng. Cho vào m i l 10 ml HCl 0,01N. Ti p theo ñú cho vào l ñ i ch ng m t vài gi t Phenolphtalein 1%, và 0,2 ml m u c n x t nghi m vào l th nghi m r i ñ y k n nỳt l i và l c ñ u. Trong phũng th nghi m n u ñ y k n ng nghi m như tr n, ñ 2-3 ngày k t qu x t nghi m kh ng thay ñ i. - Thao t c: Khi chu n ñ th ñ ra b nh tam gi c thu tinh 50 ml. D ng ng hỳt lo i 1 ml và chu n ñ b ng NaOH 0,1N. ng x t nghi m v a nh NaOH 0,1N v a l c ng nghi m cho ñ n khi dung d ch b t ñ u k t t a ñ c, l c kh ng tan th th i; v d h t b ml NaOH 0,1N. ng ñ i ch ng chu n ñ như tr n b ng NaOH 0,1N cho ñ n lỳc xu t hi n màu h ng nh t; v d h t a ml NaOH 0,1N. TÍnh k t qu : BÌnh tam giÁc chu n ñ x = (a-b) . 20 . 10 = (a-b) . 2000 X: lư ng ki m d tr trong 100 ml m u, t nh b ng mg% V d : chu n ñ ng ñ i ch ng (a) h t 1 ml NaOH 0,1N; ng x t nghi m (b) h t 0,69 ml NaOH 0,1N, th k t qu ñư c t nh: X = (1- 0,69) . 2000 = 620 mg% Trong ng x t nghi m, c ng lư ng HCl tr n nhưng ñó b s ki m trong 0,2 ml m u trung hoà ñi m t s , s cũn l i ñư c chu n ñ h t b ml NaOH 0,1N. V y hi u s a-b ch nh là s ml NaOH 0,1N tương ñương v i s ki m cú trong 0,2 ml m u ñưa x t nghi m. 1 ml NaOH 0,1N cú 4 mg NaOH Do ñú, s cú trong 0,2 ml m u là: (a-b) . 4 (mg) S ki m trong 100 ml m u s là: 100 x = (a - b).4. = (a - b).20.100 0,2 x = (a-b) . 2000 - ý nghĩa ch n ño n Trong cơ th ñ ng v t n ng ñ H+ thư ng n ñ nh nh ñi u ti t c a h th ng dung d ch ñ m. Vì v y, vi c xác ñ nh ñ ki m trong máu có ý nghĩa v m t ch n ñoán, nh t là các trư ng h p b nh c n xác ñ nh ñ nhi m ñ c axit (acidosis). + ð d tr ki m gi m: Thư ng g p b nh li t sau khi ñ bò, ch ng xêtôn huy t bò, trúng ñ c ure, viêm th n,… + ð d tr ki m tăng: Viêm ph i thuỳ, trúng ñ c cacbamid,… .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….118
  4. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k 3. ðư ng huy t Trong máu gia súc có nhi u lo i ñư ng: Glucoza, Fructoza, Galactoza, trong ñó ch y u là glucoza trong máu toàn ph n. Th t ra ñư ng huy t ch y u là glucoza t do; ngoài ra còn ch a m t lư ng nh các h p ch t gluxit dư i d ng photphat, d ng ph c h p gluxit-protit, glycogen,… ñ ng v t cao c p có nhi u cơ quan ñi u ti t s trao ñ i gluxit, như tuy n thư ng th n, tuy n tu nhưng gan có vai trò quan tr ng và n i b t. Gan là kho d tr gluxit dư i d ng glycogen và cung c p ñư ng thư ng xuyên cho máu. Th t v y, khi hàm lư ng ñư ng trong máu tăng cao (sau khi ăn no), glucoza s chuy n thành glycogen và khi n ng ñ glucoza trong máu th p thì gan s di n ra quá trình phân gi i glycogen ñ gi hàm lư ng ñư ng luôn n ñ nh trong máu. Nh n ñ nh tăng, h ñư ng huy t c n chú ý phương pháp, lo i gia súc, tu i, th i gian l y máu xét nghi m, m c ñ tiêu th (lao tác). Glucoza khu ch tán nhanh, phân b r ng kh p trong cơ th : trong máu kho ng 10% (2/3 trong huy t tương, 1/3 trong các h ng c u); 30% trong d ch khe và 70% khu v c n i bào. Trong máu lư ng ñư ng huy t tĩnh m ch (lúc ñói) th p hơn trong ñ ng m ch kho ng 2-3 mg%. N ng ñ ñư ng huy t tương ñ i n ñ nh nh s cân b ng gi a ngu n cung c p và tiêu th . ðư ng huy t có hai ngu n g c: + Ngu n ngo i sinh: Gluxit trong th c ăn ch y u có glucoza, fructoza, galactoza, mannoza và pentoza. Các lo i ñư ng này h p th qua niêm m c ru t (Trong niêm m c ru t m t s fructoza ñ ng phân hoá thành glucoza; còn galactoza không bi n ñ i); ñ n tĩnh m ch c a vào gan. gan nh m t chu i men xúc tác (ch gan có) galactoza và fructoza còn l i bi n thành glucoza hay d tr trong gan dư i d ng glycogen. Ch có m t lư ng r t nh galactoza và fructoza ñi vào tu n hoàn. Glucoza, sau khi ăn, n ng ñ trong máu cao, ñư c ñưa ñ n b sung cho t t c t bào, t ch c, ph n còn l i sinh t ng h p thành glycogen d tr gan. + Ngu n n i sinh: Lúc ñói, ph n l n glucoza cung c p cho máu là t gan. Glucoza gan cung c p vào máu ch y u là glycogen thu phân. Nó còn do s tân t o glucoza t các ch t không ph i gluxit. Sinh t ng h p glycogen trong gan t các ñư ng ñơn (glucoza, fructoza, galactoza,…) h p th t ru t và t axit lactic, axit piruvic máu các t ch c ñưa ñ n gan. Tân t o glucoza gan t các ch t không ph i gluxit, nh t là khi ñói, t các axit amin b kh amin ho c chuy n amin sinh ñư ng khi các axit này không ñư c s d ng ñ sinh t ng h p các protein m i. Sinh t ng h p glycogen t các lipit, nh t là t các axit béo r t phong phú. Chuy n hoá glucoza trong máu ch y u theo 3 ñư ng chính: - Oxy hoá trong các t bào; - D tr nhi u nh t ñ cung c p năng lư ng; - L c và tái h p thu th n. .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….119
  5. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k ði u ch nh n ng ñ ñư ng huy t thông qua m t cơ ch ph c t p: - Gan gi vai trò quan tr ng ñi u ch nh n ng ñ ñư ng huy t, vì gan th c hi n quá trình sinh t ng h p glycogen, d tr và tân t o glucoza và th c hi n glycogen thu phân ñ gi n ng ñ ñư ng huy t luôn n ñ nh - Vai trò c a các tuy n n i ti t trong vi c ñi u ch nh n ng ñ ñư ng là r t l n. Trư c h t là Insulin c a tuy n tu tác d ng làm h ñư ng huy t b ng cách làm tăng s xuyên th m glucoza máu vào các n i bào, kích thích quá trình oxy hoá glucoza n i bào và sinh t ng h p glycogen. - H th ng làm tăng ñư ng huy t là h kích thích luôn b sung glucoza vào máu, ch y u là t glycogen thu phân. ði u ti t quá trình này là các hormon: (1) Adrenalin kích t c a tuy n thư ng th n, tác d ng ngư c v i Insulin; (2) Glucagon, tác d ng tăng ñư ng huy t gi ng Adrenalin, nhưng ch kích thích khâu glycogen thu phân gan. Glucagon còn tác d ng kích thích tân t o glucoza hay glycogen t protit; (3) nhóm kích t c a v thư ng th n: coctizol, coctizone và cocticosteron làm gi m quá trình s d ng glucoza, ñ y m nh tân t o glucoza và glycogen. Ngoài ra còn hormon tuy n yên, hormon tuy n giáp tr ng. * Phương pháp ñ nh lư ng Các phương pháp ñ nh lư ng ñư ng huy t có th s p x p làm 3 nhóm: - Nhóm các phương pháp d a trên tính kh c a glucoza. - Nhóm các phương pháp t o thành d n xu t furfural. - Phương pháp ñ c hi u dùng men glucoza - oxydaza m t s cơ s sinh hoá hi n nay dùng các phương pháp Folin Wu, Nelson Somogyi, Máy ñ nh lư ng ñư ng huy t (Blood Glucose Meter). - Phương pháp Folin - Wu có thu n l i là d th c hi n nhưng có như c ñi m là m c nào ñó không theo lu t Bia- Lambe và theo th i gian s n ph m b oxy hoá tr l i nên ngư i ta khuyên không nên dùng phương pháp này. Tuy nhiên trong th c t ngư i ta v n s d ng. - Phương pháp Nelson Somogyi cho k t qu tương ng v i lư ng glucoza, khá b n v ng, có ch t ch ng oxy hoá tr l i (Natribicacbonat, ho c Natrrisunfat), dùng ñ nh lư ng t t. - Dùng máy ñ nh lư ng ñư ng huy t cho k t qu nhanh và chính xác a. Phương pháp Folin – Wu + Nguyên t c: Nư c máu ñã lo i protein có gluco trong ñó. Gluco trong dung d ch ki m ñ ng, s kh oxy c a Cu++ thành C+ (Cu2O) có màu vàng ñ . Oxit ñ ng l i kh oxy c a Phosphomolybdic thành d n xu t màu xanh ñ m nh t t l thu n v i lư ng glucoz có trong máu. Cũng x lý như v y v i dung d ch glucoz chu n ñã bi t n ng ñ r i suy ra n ng ñ glucoz có trong máu. Hoá ch t: 1. Natri tungstat 10%: 2. H2SO4 2/3 N (2 ph n H2SO4; 1 ph n nư c c t) 3. Dung d ch ki m ñ ng: . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….120
  6. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k 4. Dung d ch Phosphomolybdic 5. Dung d ch axit Benzoic bão hoà: 2,5 gr axit benzoic hoà trong 1000 ml nư c c t. 6. Dung d ch Glucoz chu n g c (1 ml có 10 mg glucoz): ðư ng glucoz dùng pha ph i th t khô: l y glucoz ñ sùng v i H2SO4 m t ñêm trong l kín ho c s y 80oC trong 2 gi . Cân th t chính xác 1,000gr glucoz cho vào bình ñ nh m c100 ml, r i cho axit benzoic bão hoà cho ñ n m c 100. 7. Dung d ch glucoz dùng ( 1 ml có 0,1 mg glucoz): L y 1 ml dung d ch trên pha thành 100 ml v i axit benzoic bão hoà. + Thao tác: L y c c 50 ml cho vào: 7 ph n nư c t 1 ph n máu (có ch t kháng ñông) 1 ph n Natri tungsta 10% 1 ph n axit sunfuric 2/3N Cho t t , v a cho v a l c. Sau 5 phút dung d ch chuy n sang màu nâu b m, k t t a, l c không n i b t. L c qua gi y l c ho c ly tâm ñ lo i protit l ng xu ng dư i. Nư c máu trong này có th dùng ñ ñ nh lư ng creatinin, ñ m c n, … Các bư c ti p theo: Các ng (ml) Các bư c ng ng xét ng chu n tr ng nghi m Dung d ch glucoz ch a 0,1mg/ml 0 1,0 0 Nư c máu 0 0 1,0 Nư c c t 3,0 2,0 2,0 Dung d ch ki m ñ ng 1,0 1,0 1,0 Tr n ñ u và ñun cách thu sôi 8 phút( tính t lúc sôi), l y ra ñ l nh 3 phút. ð ng l c và cho ti p: Dung d ch Photphomolybdic 1,0 1,0 1,0 Tr n ñ u và ñ sau 2 phút cho khí CO2 b c h t Nư c c t v a ñ 12,5 12,5 12,5 .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….121
  7. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Tr n ñ u và ñưa so màu trong vòng 5 phút. Quang k ñi n, kính l c màu xanh (λ = 440µm) ho c dùng t s c k Dubog. Cách tính: T s c k : mg% glucoz =[h ( ng chu n)/ h( ng xét nghi m)] x0,1x100/0,1 = h( ng chu n)/ h( ng xét nghi m) x100. nghi m / Echu n x100. Quang k ñi n: mg% glucoz = Exét Có th so màu b ng m t thư ng v i 3 trư ng h p: - N u màu c a ng xét nghi m và ng chu n b ng nhau: Lư ng ñư ng huy t= 100 mg%. - N u ng xét nghi m s m hơn thì rút ng xét nghi m và ng chu n, m i ng 10 ml cho vào hai ng nghi m cùng c . Pha loãng dung d ch ng xét nghi m b ng nư c c t cho ñ n lúc màu 2 ng nghi m b ng nhau; ví d c n x ml nư c c t. Lư ng ñư ng huuy t s là: mg% glucoza = 100x( 10 + X)/10. - N u ng xét nghi m màu nh t hơn thì pha loãng ng chu n, lư ng nư c cho thêm là X ml và lư ng ñư ng huy t là: glucoza % = 100x 10/ (10 + X). ð xét nghi m ñư c nhanh có th làm s n b ng m u. Chú ý: - N u ch t kháng ñông trong máu quá nhi u có th làm cho protit k t t a không h t. Trư ng h p y cho thêm vài gi t H2SO4 10% r i l c m nh sau ñó l c. V i huy t thanh và huy t tương lúc lo i protit lư ng axit sunfuric và axit tungstic có th gi m m t n a và thay b ng nư c c t. Nư c máu ñã lo i protit n u không xét nghi m ngay, có th cho thêm m t gi t toluen vào b o qu n trong t l nh. Dung d ch phosphomolybdic n u có màu xanh thì không dùng ñư c. + ý nghĩa ch n ñoán - ðư ng huy t cao: Trúng ñ c toan, b nh chó d i, li t sau khi ñ , viêm th n, cư ng giáp tr ng, cư ng thư ng th n, thi u insulin. - ðư ng huy t th p: Do ñói, ti t s a nhi u, làm vi c n ng; Trúng ñ c, viêm gan, thi u máu, viêm th n mãn, như c năng giáp tr ng, xêtôn huy t bò,…. b. Phương pháp Nelson Somogyi - Nguyên t c: Oxy hoá ñư ng b ng thu c th ki m ñ ng có dư natrisunfat ñ tránh s oxy hoá tr l i c a oxy ñ ng ñư c t o thành. Sau ñó ñ nh lư ng so màu ph c ch t màu xanh t o thành do thu c th asen- molypdic tác d ng v i oxy ñ ng. c. Dùng máy ñ nh lư ng ñư ng huy t (Blood Glucose Meter) Các bư c ti n hành Bư c 1: Ch nh code c a máy ñúng code c a gi y th - B t nút on/off ñ m máy: khi máy m thì màn hình c a máy s nh p nháy, sau m t kho ng th i gian màn hình s xu t hi n code c a máy. - Ch nh s code c a máy: N u s code c a máy không ñúng v i s code c a gi y th thì ph i ti n hành ñi u ch nh máy: . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….122
  8. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k n nút C ho c M ñ tăng hay gi m s code c a máy cho b ng s code c a gi y th . Bư c 2: Cho gi y th vào máy (chi u mũi tên c a gi y th hư ng v phía trên c a máy - ñưa gi y th vào rãnh gi a c a máy) Bư c 3: Cho máy c n xét nghi m vào gi y th Máy ñ nh lư ng ñư ng huy t + Sau khi cho gi y th vào máy, ñ i cho t i khi trên màn hình c a máy xu t hi n gi t máu thì cho máu vào gi y th (vào l tròn c a gi y th ) + Sau khi cho máu vào gi y th , ñ i m t kho ng th i gian trên màn hình c a máy s xu t hi n hàm lư ng ñư ng huy t (mmol/l) Chú ý: Ch cho máu v a ñ l tròn c a gi y th (không ít quá và không nhi u quá) 4. Bilirubin (s c t m t ) trong máu Lư ng bilirubin trong máu r t ít, nh t là bilirubin k t h p ( cholebilirubin ) Ba trư ng h p sau ñây bilirubin tích l i nhi u trong máu gây h i ch ng hoàng ñ n: - Nh ng b nh làm t c ng d n m t (s i m t, giun sán chui ng m t, viêm ng d n m t.), bilirubin k t h p không ra ñư c tá tràng, tích l i trong máu. - Nhu mô gan t n thương (do viêm, xơ,…), bilirubin t do tăng ( Hemobilirubin ) và bilirubin k t h p tăng trong máu - Nh ng b nh gây toan huy t (do kí sinh trùng ñư ng máu, do trúng ñ c), h ng huy t c u v nhi u, bilirubin t do tăng nhi u trong máu. * Các ph n ng tìm bilirubin trong máu (huy t thanh huy t tương) T t c các ph n ng tìm bilirubin trong huy t thanh ( huy t tương) ñ u d a trên nguyên t c: Bilirubin + dung d ch diazo = azobilirubin có màu h ng. N u bilirubin t do thì ph i ñư c hoà tan trong dung môi h u cơ ( thư ng dùng c n 90 o, dung d ch cafein, ure benzoat Natri.) a. Phương pháp ñ nh tính: * Ph n ng Vandenben (Van den Bergh) M c ñích: - Nh m xác ñ nh trong huy t thanh có bilirubin k t h p tăng hay bilirubin t do tăng. - Trong ch n ñoán còn dùng phân bi t các trư ng h p hoàng ñ n. Ngày nay, xét nghi m bilirubin trong huy t thanh thư ng ñư c ñ nh lư ng, ph n ng Vandenbergh ít ñư c s d ng. Hoá ch t: 1. Dung d ch Ehrlich: Axit sulfanilic: 1,0 g Ehrlich I HCl ( d = 1,19): 15,0 ml Nư c c t v a ñ : 1000 ml Natri Nitris ( NaNO2): 0,5 g Ehrlich II Nư c c t ñ n: 100 ml Dung d ch Ehrlich I dùng ñư c lâu dài, dung d ch Ehrlich II ch có tác d ng trong vòng 6 tu n. Khi dùng, l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II s ñư c dung d ch diazon dùng trong ph n ng. 2. C n 95 o Thao tác . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….123
  9. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Cho 1ml huy t thanh tươi (huy t tương) vào m t ng nghi m nh , r i theo thành ng gi t t 0,5 ml dung d ch diazo lên trên huy t thanh. - N u ch ti p xúc xu t h ên ngay màu h ng tím là ph n ng tr c ti p dương tính. - N u sau 15 phút ph n ng m i xu t hi n: ph n ng tr c ti p ch m – còn g i là ph n ng lư ng tính. - Sau 15 phút không xu t h ên màu h ng tím: ph n ng tr c ti p âm tính (-). Cho thêm 5 ml c n, ngoáy ñ u. N u màu h ng tím xu t hi n: Ph n ng gián ti p dương tính. ý nghĩa ch n ñoán * V i gia súc kho + Ph n ng tr c ti p âm tính (-). + Ph n ng gián ti p tuỳ lo i gia súc: v i huy t thanh bò kho , ph n ng gián ti p không rõ; v i ng a, ph n ng di n ra r t rõ, vòng h ng tím khá ñ m. * Trư ng h p b nh lý + Ph n ng tr c ti p dương tính: Nh ng b nh gây t c ng m t. + Ph n ng tr c ti p âm tính, ph n ng gián ti p rõ: Nh ng b nh làm h ng huy t c u v nhi u + Ph n ng tr c ti p ch m: Nh ng b nh gây t n thương nhu mô gan. b. Phương pháp ñ nh lư ng bilirubin trong huy t thanh (huy t tương) Có nhi u phương pháp. Nhưng phương pháp thư ng dùng trong thú y là Bôcantruc và Rappaport * ð nh lư ng bilirubin theo Bôcantruc Hoá ch t Axit sulfanilic: 1,0g Ehrlich I HCl ( d = 1,19): 10,0 ml Nư c c t: 200 ml Nitris Natri (NaN02): 0,5 % Ehrlich II Nư c c t ñ n: 100 ml Khi dùng l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II. Thao tác L y 6 ng nghi m nh ñ u nhau, ñánh s t 1 ñ n 6. T ng s 2, cho vào m i ng 0,5 ml nư c mu i sinh lý. Sau ñó, cho vào ng 1 và 2, m i ng 0,5 ml huy t thanh (ho c huy t tương). Tr n ñ u huy t thanh v i nư c mu i trong ng th 2. Hút 0,5 ml trong ng th 2 cho qua ng th 3. Tr n ñ u ng th 3, hút 0,3 ml cho qua ng th 4. C như v y cho ñ n ng cu i cùng hút b ñi 0,5 ml. Như v y các ng ñã ñư c pha loãng theo th t : 1 2 3 4 5 6 ng 1 2 4 8 16 32 ð pha loãng Cho vào m i ng 0,5 ml dung d ch diazo, tr n ñ u, N u có ng xu t hi n màu h ng là ph n ng tr c ti p. Sau 15 phút, cho vào m i ng nghi m 0,5 ml c n, ng xu t hi n màu h ng có ñ pha loãng l n hơn. ðó là do có ph n ng gián ti p, .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….124
  10. h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Cách tính: L y ñ pha loãng c a ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên nhân v i 0,0016 ( t c là s bilirubin trong 1 ml dung d ch ñ ñ có ph n ng v i diazo) nhân v i 100 = s mg % bilirubin. Ví d : ng th 2 xu t hi n màu h ng ñ u tiên thì: 0,0016 x 2 x 100 = 3,2 mg % bilirubin . Chú ý: + ðánh d u ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên khi chưa cho c n ñ tính lư ng bilirubin tr c ti p (cholebilirubin) và ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên sau khi ñã cho thêm c n ñ tính lư ng bilirubin t ng s . Lư ng bilirubin gián ti p (Hemobilirubin) là hi u s c a lư ng bilirubin t ng s và lư ng bilirubin tr c ti p. + ð nh lư ng theo phương pháp Bôcantruc, hàm lư ng bilirubin trong huy t thanh có th tăng ñ n 3,2 mg%; ng a: 6,4 mg %. ý nghĩa ch n ñoán: Trong các b nh: thuỳ ph viêm, lư ng bilirubin trong huy t thanh tăng lên 4 mg%. Các b nh huy t bào t trùng, trúng ñ c SO2, viêm não tu truy n nhi m – bilirubin tăng. * ð nh lư ng bilirubin trong huy t thanh theo Rappaport B nh ph m: huy t thanh, huy t tương Hoá ch t: 1. dung d ch Natri benzoat – urê: Natri benzoat: 10g Natri urê: 10g Nư c c t v a ñ : 100 ml Ngoáy cho tan, l c l y nư c trong. 2. Dung d ch diazo ( như trong ph n ng Vandenbe) 3. Dung d ch HCl 1,5% 4.Dung d ch bilirubin chu n: L y 4,32 g coban sunfat khan ho c 7,8 g Coban sunfat k t tinh ( CoSO4. 7 H2O), cho thêm m t ít nư c c t trong bình ñ nh m c 100ml. Thêm vào 1ml H2SO4 ñ c ( C.P) r i cho nư c c t ñ n 100 ml. dung d ch có màu tương ñương 0,01 mg bilirubin trong 1 ml. Thao tác + ð nh lư ng bilirubin tr c ti p (cholebilirubin) L y 2 ng nghi m A, B – ng A làm ng tr ng, ng B làm ng th . ng A cho vào 0,5 ml huy t thanh, 0,25 ml HCl 1,5% r i thêm nư c c t v a ñ 5 ml. ng B – 0,5 ml huy t thanh ; 0,25 ml dung d ch diazo r i thêm nư c c t v a ñư 5 ml. + ð nh lư ng bilirubin t ng s : ng C ( ng tr ng): 0,5 ml huy t thanh; 0,25 ml dung d ch diazo r i cho thêm dung d ch Natri benzoat – urê v a ñ 5 ml. So màu trên quang k , kính l c màu l c ( bư c sóng landa = 500 – 540 micro met) Tính: E ng th mg % bilirubin = E ng chu n E: m t ñ quang h c 5. Protein huy t thanh Vi c xác ñ nh Protein t ng s và các ti u ph n c a nó trong huy t thanh có nhi u ý nghĩa trong ch n ñoán b nh, ñ c b êt là ch n ñoán r i lo n ch c năng gan. . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….125
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
2=>2