Giáo trình hình thành ứng dụng khả năng cảm thụ truyền nhận kích thích thần kinh thực vật p2
lượt xem 3
download
Tham khảo tài liệu 'giáo trình hình thành ứng dụng khả năng cảm thụ truyền nhận kích thích thần kinh thực vật p2', khoa học tự nhiên, nông - lâm phục vụ nhu cầu học tập, nghiên cứu và làm việc hiệu quả
Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!
Nội dung Text: Giáo trình hình thành ứng dụng khả năng cảm thụ truyền nhận kích thích thần kinh thực vật p2
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k ch c năng gan tăng cư ng, fibrinogen trong máu tăng t c ñ huy t tr m nhanh; ngư c l i, ch c năng gan b r i lo n, t c ñ huy t tr m l i gi m. + T l globulin và albumin trong huy t tương cũng có nh hư ng. Globulin mang ñi n dương, albumin mang ñi n âm. Các b nh làm globulin tăng, tăng ñi n dương trong máu, h ng c u k t chu i d t c ñ huy t tr m nhanh. Albumin trong máu tăng - t c ñ huy t tr m ch m. + Hàm lư ng cholesterol, hàm lư ng các mu i khoáng trong máu cũng nh hư ng ñ n t c ñ huy t tr m. + Nhi t ñ trong phòng thí nghi m nh hư ng r t l n ñ n t c ñ huy t tr m. Nhìn chung, mùa ñông t c ñ huy t tr m ch m hơn mùa hè. III. Hoá tính c a máu 1. Huy t s c t (Hemoglobin) S lư ng h ng c u trong máu gi m ñi thì hàm lư ng huy t s c t gi m. Nhưng nhi u ca b nh, lư ng huy t s c t trong máu gi m do hàm lư ng huy t s c t trong m i h ng c u gi m, s lư ng h ng c u l i không gi m. Vì v y trong công tác ch n ñoán c n thi t ñ m s lư ng h ng c u và ño lư ng huy t s c t . * Phương pháp ño Thông d ng trong ch n ñoán thú y là dùng phương pháp Shali. Hi n nay m t s phòng thí nghi m l n còn dùng máy ño huy t h c ñ xác ñ nh. - Nguyên t c: axit HCl vào máu s k t h p v i huy t s c t thành axit hematin màu nâu, sau ñó so màu v i ng chu n. - Thu c th : HCL 0,1N ho c 1% - B Shali: G m: + H p so màu Shali ( ng m u màu vàng nâu tương ñương v i dung d ch 1% huy t s c t ) + ng ño Shali ( ng ño hình tròn, trên có hai c t kh c ñ : C t ch s gram huy t s c t ; và c t ch s %, có v ch tròn g n ñ y ng). + ng hút Shali (dùng ñ hút máu ñ xét nghi m, có v ch 20) B HSK Shali - Thao tác Cho dung d ch HCL 0,1N (ho c 1%) vào ng ño Shali ñ n v ch tròn. Dùng ng hút Shali hút máu ñ n v ch 20. Dùng bông lau s ch v t máu ngoài ng. Cho ng hút xu ng t n ñáy ng ño th i nh máu xu ng ng ño và hút lên th i xu ng nhi u l n ñ r a s ch máu trong ng hút r i tr n ñ u. ð 10 phút sau, r i pha loãng t t v i nư c c t ñ n khi màu c a ng ño và màu c a ng m u b ng nhau thì thôi . ð c k t qu trên c t s . ðó là s gram huy t s c t trong 100 ml máu. Máy ño huy t h c Chú ý: - Khi pha loãng máu b ng nư c c t ph i h t s c t t . . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….116
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k - Cho HCL vào tr n v i máu ph i ñ 10 phút m i pha loãng và ti p t c ño. N u pha loãng dung d ch ño quá s m, k t qu ñ nh lư ng s sai. N u cho máu ch 1 phút sau ñã pha loãng, k t qu ch b ng 75 % s th c t , vì ch có 75% huy t s c t chuy n thành axit Hematic; n u 5 phút – 88% và 2 gi – 100%. Sau 10 phút pha loãng, ch 90% lư ng huy t s c t chuy n thành màu nâu. Nh ng ng m u c a b huy t s c k Shali ñã ñư c pha trong nh ng ñi u ki n ñó. - Sau m i l n ño, nên dùng nư c c t ñ r a s ch ng. ð nh lư ng huy t s c t qua lư ng Fe trong máu toàn ph n: lư ng Fe (tính b ng mg%) chia cho 3,35g s có s gram huy t s c t trong 100 ml máu. Vì hàm lư ng Fe trong huy t s c t là 0,335%. - ý nghĩa ch n ñoán Lư ng huy t s c t thay ñ i theo tu i gia súc, theo tính bi t, th c ăn và ñi u ki n môi trư ng. + Lư ng huy t s c t cao: Thư ng g p nh ng b nh làm cơ th m t nư c, xo n ru t, trúng ñ c c p tính. + Lư ng huy t s c t gi m: Thư ng g p các b nh thi u máu, suy dinh dư ng,… Chú ý: ð ch n ñoán thi u máu thư ng tính thêm các ch tiêu sau: + ch s huy t s c t Lư ng Hb c a gia súc khám Lư ng Hb tiêu chu n Ch s : = huy t s c t S lư ng h ng c u con khám S lư ng h ng c u tiêu chu n Ch s huy t s c t = 1, là thi u máu ñ ng s c; Ch s huy t s c t > 1, là thi u máu ưu s c; Ch s huy t s c t < 1, là thi u máu như c s c. + Lư ng huy t s c t bình quân trong m i h ng c u (Pg) S gam % huy t s c t x 10 Lư ng HSTBQ (pg) = S hàng tri u h ng c u/mm3 S gram % huy t s c t là s gram huy t s c t trong 100 ml máu, ño b ng huy t s c k Shali. 2. ð ki m d tr trong m u - Kh i ni m: ð d tr ki m là lư ng ki m d tr trong cơ th ñ trung hoà nh ng axit trong m u, nh ñú gi cho m u cú ñ ki m toan nh t ñ nh và ph n ng c a m u n ñ nh. Trong thỳ y d ng r ng rói phương ph p N v ñ v, v phương ph p ñơn gi n, ho ch t t. HCl 0,01N - Ho ch t: NaOH 0,1N Phenolphtalein 1% (pha trong c n) - L y m u x t nghi m: . rư T ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….117
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k D ng 2 l s ch ñó s y kh cú nỳt cao su ñ y k n mi ng, m t l làm th nghi m và m t l làm ñ i ch ng. Cho vào m i l 10 ml HCl 0,01N. Ti p theo ñú cho vào l ñ i ch ng m t vài gi t Phenolphtalein 1%, và 0,2 ml m u c n x t nghi m vào l th nghi m r i ñ y k n nỳt l i và l c ñ u. Trong phũng th nghi m n u ñ y k n ng nghi m như tr n, ñ 2-3 ngày k t qu x t nghi m kh ng thay ñ i. - Thao t c: Khi chu n ñ th ñ ra b nh tam gi c thu tinh 50 ml. D ng ng hỳt lo i 1 ml và chu n ñ b ng NaOH 0,1N. ng x t nghi m v a nh NaOH 0,1N v a l c ng nghi m cho ñ n khi dung d ch b t ñ u k t t a ñ c, l c kh ng tan th th i; v d h t b ml NaOH 0,1N. ng ñ i ch ng chu n ñ như tr n b ng NaOH 0,1N cho ñ n lỳc xu t hi n màu h ng nh t; v d h t a ml NaOH 0,1N. TÍnh k t qu : BÌnh tam giÁc chu n ñ x = (a-b) . 20 . 10 = (a-b) . 2000 X: lư ng ki m d tr trong 100 ml m u, t nh b ng mg% V d : chu n ñ ng ñ i ch ng (a) h t 1 ml NaOH 0,1N; ng x t nghi m (b) h t 0,69 ml NaOH 0,1N, th k t qu ñư c t nh: X = (1- 0,69) . 2000 = 620 mg% Trong ng x t nghi m, c ng lư ng HCl tr n nhưng ñó b s ki m trong 0,2 ml m u trung hoà ñi m t s , s cũn l i ñư c chu n ñ h t b ml NaOH 0,1N. V y hi u s a-b ch nh là s ml NaOH 0,1N tương ñương v i s ki m cú trong 0,2 ml m u ñưa x t nghi m. 1 ml NaOH 0,1N cú 4 mg NaOH Do ñú, s cú trong 0,2 ml m u là: (a-b) . 4 (mg) S ki m trong 100 ml m u s là: 100 x = (a - b).4. = (a - b).20.100 0,2 x = (a-b) . 2000 - ý nghĩa ch n ño n Trong cơ th ñ ng v t n ng ñ H+ thư ng n ñ nh nh ñi u ti t c a h th ng dung d ch ñ m. Vì v y, vi c xác ñ nh ñ ki m trong máu có ý nghĩa v m t ch n ñoán, nh t là các trư ng h p b nh c n xác ñ nh ñ nhi m ñ c axit (acidosis). + ð d tr ki m gi m: Thư ng g p b nh li t sau khi ñ bò, ch ng xêtôn huy t bò, trúng ñ c ure, viêm th n,… + ð d tr ki m tăng: Viêm ph i thuỳ, trúng ñ c cacbamid,… .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….118
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k 3. ðư ng huy t Trong máu gia súc có nhi u lo i ñư ng: Glucoza, Fructoza, Galactoza, trong ñó ch y u là glucoza trong máu toàn ph n. Th t ra ñư ng huy t ch y u là glucoza t do; ngoài ra còn ch a m t lư ng nh các h p ch t gluxit dư i d ng photphat, d ng ph c h p gluxit-protit, glycogen,… ñ ng v t cao c p có nhi u cơ quan ñi u ti t s trao ñ i gluxit, như tuy n thư ng th n, tuy n tu nhưng gan có vai trò quan tr ng và n i b t. Gan là kho d tr gluxit dư i d ng glycogen và cung c p ñư ng thư ng xuyên cho máu. Th t v y, khi hàm lư ng ñư ng trong máu tăng cao (sau khi ăn no), glucoza s chuy n thành glycogen và khi n ng ñ glucoza trong máu th p thì gan s di n ra quá trình phân gi i glycogen ñ gi hàm lư ng ñư ng luôn n ñ nh trong máu. Nh n ñ nh tăng, h ñư ng huy t c n chú ý phương pháp, lo i gia súc, tu i, th i gian l y máu xét nghi m, m c ñ tiêu th (lao tác). Glucoza khu ch tán nhanh, phân b r ng kh p trong cơ th : trong máu kho ng 10% (2/3 trong huy t tương, 1/3 trong các h ng c u); 30% trong d ch khe và 70% khu v c n i bào. Trong máu lư ng ñư ng huy t tĩnh m ch (lúc ñói) th p hơn trong ñ ng m ch kho ng 2-3 mg%. N ng ñ ñư ng huy t tương ñ i n ñ nh nh s cân b ng gi a ngu n cung c p và tiêu th . ðư ng huy t có hai ngu n g c: + Ngu n ngo i sinh: Gluxit trong th c ăn ch y u có glucoza, fructoza, galactoza, mannoza và pentoza. Các lo i ñư ng này h p th qua niêm m c ru t (Trong niêm m c ru t m t s fructoza ñ ng phân hoá thành glucoza; còn galactoza không bi n ñ i); ñ n tĩnh m ch c a vào gan. gan nh m t chu i men xúc tác (ch gan có) galactoza và fructoza còn l i bi n thành glucoza hay d tr trong gan dư i d ng glycogen. Ch có m t lư ng r t nh galactoza và fructoza ñi vào tu n hoàn. Glucoza, sau khi ăn, n ng ñ trong máu cao, ñư c ñưa ñ n b sung cho t t c t bào, t ch c, ph n còn l i sinh t ng h p thành glycogen d tr gan. + Ngu n n i sinh: Lúc ñói, ph n l n glucoza cung c p cho máu là t gan. Glucoza gan cung c p vào máu ch y u là glycogen thu phân. Nó còn do s tân t o glucoza t các ch t không ph i gluxit. Sinh t ng h p glycogen trong gan t các ñư ng ñơn (glucoza, fructoza, galactoza,…) h p th t ru t và t axit lactic, axit piruvic máu các t ch c ñưa ñ n gan. Tân t o glucoza gan t các ch t không ph i gluxit, nh t là khi ñói, t các axit amin b kh amin ho c chuy n amin sinh ñư ng khi các axit này không ñư c s d ng ñ sinh t ng h p các protein m i. Sinh t ng h p glycogen t các lipit, nh t là t các axit béo r t phong phú. Chuy n hoá glucoza trong máu ch y u theo 3 ñư ng chính: - Oxy hoá trong các t bào; - D tr nhi u nh t ñ cung c p năng lư ng; - L c và tái h p thu th n. .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….119
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k ði u ch nh n ng ñ ñư ng huy t thông qua m t cơ ch ph c t p: - Gan gi vai trò quan tr ng ñi u ch nh n ng ñ ñư ng huy t, vì gan th c hi n quá trình sinh t ng h p glycogen, d tr và tân t o glucoza và th c hi n glycogen thu phân ñ gi n ng ñ ñư ng huy t luôn n ñ nh - Vai trò c a các tuy n n i ti t trong vi c ñi u ch nh n ng ñ ñư ng là r t l n. Trư c h t là Insulin c a tuy n tu tác d ng làm h ñư ng huy t b ng cách làm tăng s xuyên th m glucoza máu vào các n i bào, kích thích quá trình oxy hoá glucoza n i bào và sinh t ng h p glycogen. - H th ng làm tăng ñư ng huy t là h kích thích luôn b sung glucoza vào máu, ch y u là t glycogen thu phân. ði u ti t quá trình này là các hormon: (1) Adrenalin kích t c a tuy n thư ng th n, tác d ng ngư c v i Insulin; (2) Glucagon, tác d ng tăng ñư ng huy t gi ng Adrenalin, nhưng ch kích thích khâu glycogen thu phân gan. Glucagon còn tác d ng kích thích tân t o glucoza hay glycogen t protit; (3) nhóm kích t c a v thư ng th n: coctizol, coctizone và cocticosteron làm gi m quá trình s d ng glucoza, ñ y m nh tân t o glucoza và glycogen. Ngoài ra còn hormon tuy n yên, hormon tuy n giáp tr ng. * Phương pháp ñ nh lư ng Các phương pháp ñ nh lư ng ñư ng huy t có th s p x p làm 3 nhóm: - Nhóm các phương pháp d a trên tính kh c a glucoza. - Nhóm các phương pháp t o thành d n xu t furfural. - Phương pháp ñ c hi u dùng men glucoza - oxydaza m t s cơ s sinh hoá hi n nay dùng các phương pháp Folin Wu, Nelson Somogyi, Máy ñ nh lư ng ñư ng huy t (Blood Glucose Meter). - Phương pháp Folin - Wu có thu n l i là d th c hi n nhưng có như c ñi m là m c nào ñó không theo lu t Bia- Lambe và theo th i gian s n ph m b oxy hoá tr l i nên ngư i ta khuyên không nên dùng phương pháp này. Tuy nhiên trong th c t ngư i ta v n s d ng. - Phương pháp Nelson Somogyi cho k t qu tương ng v i lư ng glucoza, khá b n v ng, có ch t ch ng oxy hoá tr l i (Natribicacbonat, ho c Natrrisunfat), dùng ñ nh lư ng t t. - Dùng máy ñ nh lư ng ñư ng huy t cho k t qu nhanh và chính xác a. Phương pháp Folin – Wu + Nguyên t c: Nư c máu ñã lo i protein có gluco trong ñó. Gluco trong dung d ch ki m ñ ng, s kh oxy c a Cu++ thành C+ (Cu2O) có màu vàng ñ . Oxit ñ ng l i kh oxy c a Phosphomolybdic thành d n xu t màu xanh ñ m nh t t l thu n v i lư ng glucoz có trong máu. Cũng x lý như v y v i dung d ch glucoz chu n ñã bi t n ng ñ r i suy ra n ng ñ glucoz có trong máu. Hoá ch t: 1. Natri tungstat 10%: 2. H2SO4 2/3 N (2 ph n H2SO4; 1 ph n nư c c t) 3. Dung d ch ki m ñ ng: . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….120
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k 4. Dung d ch Phosphomolybdic 5. Dung d ch axit Benzoic bão hoà: 2,5 gr axit benzoic hoà trong 1000 ml nư c c t. 6. Dung d ch Glucoz chu n g c (1 ml có 10 mg glucoz): ðư ng glucoz dùng pha ph i th t khô: l y glucoz ñ sùng v i H2SO4 m t ñêm trong l kín ho c s y 80oC trong 2 gi . Cân th t chính xác 1,000gr glucoz cho vào bình ñ nh m c100 ml, r i cho axit benzoic bão hoà cho ñ n m c 100. 7. Dung d ch glucoz dùng ( 1 ml có 0,1 mg glucoz): L y 1 ml dung d ch trên pha thành 100 ml v i axit benzoic bão hoà. + Thao tác: L y c c 50 ml cho vào: 7 ph n nư c t 1 ph n máu (có ch t kháng ñông) 1 ph n Natri tungsta 10% 1 ph n axit sunfuric 2/3N Cho t t , v a cho v a l c. Sau 5 phút dung d ch chuy n sang màu nâu b m, k t t a, l c không n i b t. L c qua gi y l c ho c ly tâm ñ lo i protit l ng xu ng dư i. Nư c máu trong này có th dùng ñ ñ nh lư ng creatinin, ñ m c n, … Các bư c ti p theo: Các ng (ml) Các bư c ng ng xét ng chu n tr ng nghi m Dung d ch glucoz ch a 0,1mg/ml 0 1,0 0 Nư c máu 0 0 1,0 Nư c c t 3,0 2,0 2,0 Dung d ch ki m ñ ng 1,0 1,0 1,0 Tr n ñ u và ñun cách thu sôi 8 phút( tính t lúc sôi), l y ra ñ l nh 3 phút. ð ng l c và cho ti p: Dung d ch Photphomolybdic 1,0 1,0 1,0 Tr n ñ u và ñ sau 2 phút cho khí CO2 b c h t Nư c c t v a ñ 12,5 12,5 12,5 .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….121
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Tr n ñ u và ñưa so màu trong vòng 5 phút. Quang k ñi n, kính l c màu xanh (λ = 440µm) ho c dùng t s c k Dubog. Cách tính: T s c k : mg% glucoz =[h ( ng chu n)/ h( ng xét nghi m)] x0,1x100/0,1 = h( ng chu n)/ h( ng xét nghi m) x100. nghi m / Echu n x100. Quang k ñi n: mg% glucoz = Exét Có th so màu b ng m t thư ng v i 3 trư ng h p: - N u màu c a ng xét nghi m và ng chu n b ng nhau: Lư ng ñư ng huy t= 100 mg%. - N u ng xét nghi m s m hơn thì rút ng xét nghi m và ng chu n, m i ng 10 ml cho vào hai ng nghi m cùng c . Pha loãng dung d ch ng xét nghi m b ng nư c c t cho ñ n lúc màu 2 ng nghi m b ng nhau; ví d c n x ml nư c c t. Lư ng ñư ng huuy t s là: mg% glucoza = 100x( 10 + X)/10. - N u ng xét nghi m màu nh t hơn thì pha loãng ng chu n, lư ng nư c cho thêm là X ml và lư ng ñư ng huy t là: glucoza % = 100x 10/ (10 + X). ð xét nghi m ñư c nhanh có th làm s n b ng m u. Chú ý: - N u ch t kháng ñông trong máu quá nhi u có th làm cho protit k t t a không h t. Trư ng h p y cho thêm vài gi t H2SO4 10% r i l c m nh sau ñó l c. V i huy t thanh và huy t tương lúc lo i protit lư ng axit sunfuric và axit tungstic có th gi m m t n a và thay b ng nư c c t. Nư c máu ñã lo i protit n u không xét nghi m ngay, có th cho thêm m t gi t toluen vào b o qu n trong t l nh. Dung d ch phosphomolybdic n u có màu xanh thì không dùng ñư c. + ý nghĩa ch n ñoán - ðư ng huy t cao: Trúng ñ c toan, b nh chó d i, li t sau khi ñ , viêm th n, cư ng giáp tr ng, cư ng thư ng th n, thi u insulin. - ðư ng huy t th p: Do ñói, ti t s a nhi u, làm vi c n ng; Trúng ñ c, viêm gan, thi u máu, viêm th n mãn, như c năng giáp tr ng, xêtôn huy t bò,…. b. Phương pháp Nelson Somogyi - Nguyên t c: Oxy hoá ñư ng b ng thu c th ki m ñ ng có dư natrisunfat ñ tránh s oxy hoá tr l i c a oxy ñ ng ñư c t o thành. Sau ñó ñ nh lư ng so màu ph c ch t màu xanh t o thành do thu c th asen- molypdic tác d ng v i oxy ñ ng. c. Dùng máy ñ nh lư ng ñư ng huy t (Blood Glucose Meter) Các bư c ti n hành Bư c 1: Ch nh code c a máy ñúng code c a gi y th - B t nút on/off ñ m máy: khi máy m thì màn hình c a máy s nh p nháy, sau m t kho ng th i gian màn hình s xu t hi n code c a máy. - Ch nh s code c a máy: N u s code c a máy không ñúng v i s code c a gi y th thì ph i ti n hành ñi u ch nh máy: . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….122
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k n nút C ho c M ñ tăng hay gi m s code c a máy cho b ng s code c a gi y th . Bư c 2: Cho gi y th vào máy (chi u mũi tên c a gi y th hư ng v phía trên c a máy - ñưa gi y th vào rãnh gi a c a máy) Bư c 3: Cho máy c n xét nghi m vào gi y th Máy ñ nh lư ng ñư ng huy t + Sau khi cho gi y th vào máy, ñ i cho t i khi trên màn hình c a máy xu t hi n gi t máu thì cho máu vào gi y th (vào l tròn c a gi y th ) + Sau khi cho máu vào gi y th , ñ i m t kho ng th i gian trên màn hình c a máy s xu t hi n hàm lư ng ñư ng huy t (mmol/l) Chú ý: Ch cho máu v a ñ l tròn c a gi y th (không ít quá và không nhi u quá) 4. Bilirubin (s c t m t ) trong máu Lư ng bilirubin trong máu r t ít, nh t là bilirubin k t h p ( cholebilirubin ) Ba trư ng h p sau ñây bilirubin tích l i nhi u trong máu gây h i ch ng hoàng ñ n: - Nh ng b nh làm t c ng d n m t (s i m t, giun sán chui ng m t, viêm ng d n m t.), bilirubin k t h p không ra ñư c tá tràng, tích l i trong máu. - Nhu mô gan t n thương (do viêm, xơ,…), bilirubin t do tăng ( Hemobilirubin ) và bilirubin k t h p tăng trong máu - Nh ng b nh gây toan huy t (do kí sinh trùng ñư ng máu, do trúng ñ c), h ng huy t c u v nhi u, bilirubin t do tăng nhi u trong máu. * Các ph n ng tìm bilirubin trong máu (huy t thanh huy t tương) T t c các ph n ng tìm bilirubin trong huy t thanh ( huy t tương) ñ u d a trên nguyên t c: Bilirubin + dung d ch diazo = azobilirubin có màu h ng. N u bilirubin t do thì ph i ñư c hoà tan trong dung môi h u cơ ( thư ng dùng c n 90 o, dung d ch cafein, ure benzoat Natri.) a. Phương pháp ñ nh tính: * Ph n ng Vandenben (Van den Bergh) M c ñích: - Nh m xác ñ nh trong huy t thanh có bilirubin k t h p tăng hay bilirubin t do tăng. - Trong ch n ñoán còn dùng phân bi t các trư ng h p hoàng ñ n. Ngày nay, xét nghi m bilirubin trong huy t thanh thư ng ñư c ñ nh lư ng, ph n ng Vandenbergh ít ñư c s d ng. Hoá ch t: 1. Dung d ch Ehrlich: Axit sulfanilic: 1,0 g Ehrlich I HCl ( d = 1,19): 15,0 ml Nư c c t v a ñ : 1000 ml Natri Nitris ( NaNO2): 0,5 g Ehrlich II Nư c c t ñ n: 100 ml Dung d ch Ehrlich I dùng ñư c lâu dài, dung d ch Ehrlich II ch có tác d ng trong vòng 6 tu n. Khi dùng, l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II s ñư c dung d ch diazon dùng trong ph n ng. 2. C n 95 o Thao tác . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….123
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Cho 1ml huy t thanh tươi (huy t tương) vào m t ng nghi m nh , r i theo thành ng gi t t 0,5 ml dung d ch diazo lên trên huy t thanh. - N u ch ti p xúc xu t h ên ngay màu h ng tím là ph n ng tr c ti p dương tính. - N u sau 15 phút ph n ng m i xu t hi n: ph n ng tr c ti p ch m – còn g i là ph n ng lư ng tính. - Sau 15 phút không xu t h ên màu h ng tím: ph n ng tr c ti p âm tính (-). Cho thêm 5 ml c n, ngoáy ñ u. N u màu h ng tím xu t hi n: Ph n ng gián ti p dương tính. ý nghĩa ch n ñoán * V i gia súc kho + Ph n ng tr c ti p âm tính (-). + Ph n ng gián ti p tuỳ lo i gia súc: v i huy t thanh bò kho , ph n ng gián ti p không rõ; v i ng a, ph n ng di n ra r t rõ, vòng h ng tím khá ñ m. * Trư ng h p b nh lý + Ph n ng tr c ti p dương tính: Nh ng b nh gây t c ng m t. + Ph n ng tr c ti p âm tính, ph n ng gián ti p rõ: Nh ng b nh làm h ng huy t c u v nhi u + Ph n ng tr c ti p ch m: Nh ng b nh gây t n thương nhu mô gan. b. Phương pháp ñ nh lư ng bilirubin trong huy t thanh (huy t tương) Có nhi u phương pháp. Nhưng phương pháp thư ng dùng trong thú y là Bôcantruc và Rappaport * ð nh lư ng bilirubin theo Bôcantruc Hoá ch t Axit sulfanilic: 1,0g Ehrlich I HCl ( d = 1,19): 10,0 ml Nư c c t: 200 ml Nitris Natri (NaN02): 0,5 % Ehrlich II Nư c c t ñ n: 100 ml Khi dùng l y 10 ml dung d ch Ehrlich I tr n v i 0,3 ml dung d ch Ehrlich II. Thao tác L y 6 ng nghi m nh ñ u nhau, ñánh s t 1 ñ n 6. T ng s 2, cho vào m i ng 0,5 ml nư c mu i sinh lý. Sau ñó, cho vào ng 1 và 2, m i ng 0,5 ml huy t thanh (ho c huy t tương). Tr n ñ u huy t thanh v i nư c mu i trong ng th 2. Hút 0,5 ml trong ng th 2 cho qua ng th 3. Tr n ñ u ng th 3, hút 0,3 ml cho qua ng th 4. C như v y cho ñ n ng cu i cùng hút b ñi 0,5 ml. Như v y các ng ñã ñư c pha loãng theo th t : 1 2 3 4 5 6 ng 1 2 4 8 16 32 ð pha loãng Cho vào m i ng 0,5 ml dung d ch diazo, tr n ñ u, N u có ng xu t hi n màu h ng là ph n ng tr c ti p. Sau 15 phút, cho vào m i ng nghi m 0,5 ml c n, ng xu t hi n màu h ng có ñ pha loãng l n hơn. ðó là do có ph n ng gián ti p, .Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….124
- h a n g e Vi h a n g e Vi XC XC e e F- F- w w PD PD er er ! ! W W O O N N y y bu bu to to k k lic lic C C w w m m w w w w o o .c .c .d o .d o c u -tr a c k c u -tr a c k Cách tính: L y ñ pha loãng c a ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên nhân v i 0,0016 ( t c là s bilirubin trong 1 ml dung d ch ñ ñ có ph n ng v i diazo) nhân v i 100 = s mg % bilirubin. Ví d : ng th 2 xu t hi n màu h ng ñ u tiên thì: 0,0016 x 2 x 100 = 3,2 mg % bilirubin . Chú ý: + ðánh d u ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên khi chưa cho c n ñ tính lư ng bilirubin tr c ti p (cholebilirubin) và ng xu t hi n màu h ng ñ u tiên sau khi ñã cho thêm c n ñ tính lư ng bilirubin t ng s . Lư ng bilirubin gián ti p (Hemobilirubin) là hi u s c a lư ng bilirubin t ng s và lư ng bilirubin tr c ti p. + ð nh lư ng theo phương pháp Bôcantruc, hàm lư ng bilirubin trong huy t thanh có th tăng ñ n 3,2 mg%; ng a: 6,4 mg %. ý nghĩa ch n ñoán: Trong các b nh: thuỳ ph viêm, lư ng bilirubin trong huy t thanh tăng lên 4 mg%. Các b nh huy t bào t trùng, trúng ñ c SO2, viêm não tu truy n nhi m – bilirubin tăng. * ð nh lư ng bilirubin trong huy t thanh theo Rappaport B nh ph m: huy t thanh, huy t tương Hoá ch t: 1. dung d ch Natri benzoat – urê: Natri benzoat: 10g Natri urê: 10g Nư c c t v a ñ : 100 ml Ngoáy cho tan, l c l y nư c trong. 2. Dung d ch diazo ( như trong ph n ng Vandenbe) 3. Dung d ch HCl 1,5% 4.Dung d ch bilirubin chu n: L y 4,32 g coban sunfat khan ho c 7,8 g Coban sunfat k t tinh ( CoSO4. 7 H2O), cho thêm m t ít nư c c t trong bình ñ nh m c 100ml. Thêm vào 1ml H2SO4 ñ c ( C.P) r i cho nư c c t ñ n 100 ml. dung d ch có màu tương ñương 0,01 mg bilirubin trong 1 ml. Thao tác + ð nh lư ng bilirubin tr c ti p (cholebilirubin) L y 2 ng nghi m A, B – ng A làm ng tr ng, ng B làm ng th . ng A cho vào 0,5 ml huy t thanh, 0,25 ml HCl 1,5% r i thêm nư c c t v a ñ 5 ml. ng B – 0,5 ml huy t thanh ; 0,25 ml dung d ch diazo r i thêm nư c c t v a ñư 5 ml. + ð nh lư ng bilirubin t ng s : ng C ( ng tr ng): 0,5 ml huy t thanh; 0,25 ml dung d ch diazo r i cho thêm dung d ch Natri benzoat – urê v a ñ 5 ml. So màu trên quang k , kính l c màu l c ( bư c sóng landa = 500 – 540 micro met) Tính: E ng th mg % bilirubin = E ng chu n E: m t ñ quang h c 5. Protein huy t thanh Vi c xác ñ nh Protein t ng s và các ti u ph n c a nó trong huy t thanh có nhi u ý nghĩa trong ch n ñoán b nh, ñ c b êt là ch n ñoán r i lo n ch c năng gan. . Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Giáo trình Giáo trình Ch n ñoán b nh thú …………………….125
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Giáo trình hình thành ứng dụng cấu tạo mainserver dùng tham biến dòng lệnh p1
10 p | 76 | 8
-
Giáo trình hình thành ứng dụng nguyên lý của hàm phức giải tích dạng vi phân p2
10 p | 73 | 7
-
Giáo trình hình thành ứng dụng nguyên lý của hàm phức giải tích dạng vi phân p3
10 p | 77 | 6
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điện thế âm vào Jfet với tín hiệu xoay chiều p4
10 p | 70 | 6
-
Giáo trình hình thành ứng dụng nguyên lý của hàm phức giải tích dạng vi phân p5
10 p | 55 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng cấu tạo đường đi của vận tốc ánh sáng trong môi trường đứng yên p1
10 p | 85 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điều phối cơ bản về đo lường cấp nhiệt thu hồi trong định lượng p3
10 p | 65 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điện thế âm vào Jfet với tín hiệu xoay chiều p1
10 p | 67 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điện thế âm vào Jfet với tín hiệu xoay chiều p5
10 p | 68 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điện thế âm vào Jfet với tín hiệu xoay chiều p3
10 p | 70 | 5
-
Giáo trình hình thành ứng dụng phân tích xử lý các toán tử trong một biểu thức logic p4
10 p | 82 | 4
-
Giáo trình hình thành ứng dụng phân tích xử lý các toán tử trong một biểu thức logic p3
10 p | 64 | 4
-
Giáo trình hình thành ứng dụng phân tích xử lý các toán tử trong một biểu thức logic p2
10 p | 77 | 4
-
Giáo trình hình thành ứng dụng phân tích xử lý các toán tử trong một biểu thức logic p5
10 p | 52 | 4
-
Giáo trình hình thành ứng dụng phân tích xử lý các toán tử trong một biểu thức logic p1
10 p | 83 | 3
-
Giáo trình hình thành ứng dụng nguyên lý của hàm phức giải tích dạng vi phân p4
10 p | 69 | 3
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điều phối cơ bản về đo lường cấp nhiệt thu hồi trong định lượng p4
10 p | 65 | 3
-
Giáo trình hình thành ứng dụng điều phối cơ bản về đo lường cấp nhiệt thu hồi trong định lượng p2
10 p | 71 | 3
Chịu trách nhiệm nội dung:
Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA
LIÊN HỆ
Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM
Hotline: 093 303 0098
Email: support@tailieu.vn