Phân tích các týp gen cagA và vacA của helicobacter pylori trong ung thư dạ dày

Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Số 1 * 2011<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> PHÂN TÍCH CÁC TÝP GEN CAGA VÀ VACA CỦA HELICOBACTER<br /> PYLORI TRONG UNG THƯ DẠ DÀY<br /> Trần Thiện Trung*, Cao Minh Nga*, Nguyễn Thúy Oanh*, Hứa Thị Ngọc Hà*,<br /> Hồ Huỳnh Thùy Dương**<br /> <br /> .TÓM TẮT<br /> Mục tiêu: Nghiên cứu định týp gen cagA và các týp gen vacA của vi khuẩn Helicobacter pylori (H. pylori),<br /> và mối liên quan đến ung thư dạ dày ở bệnh nhân khu vực Miền Nam Việt Nam và thành phố Hồ Chí Minh.<br /> Bệnh nhân và phương pháp: Từ tháng 12/2008 đến tháng 5/2010, tại Bệnh viện Đại học Y Dược TP. Hồ<br /> Chí Minh và Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TP. Hồ Chí Minh, chúng tôi tiến hành nghiên cứu các týp gen<br /> của vi khuẩn H. pylori bằng phương pháp multiplex PCR. Nghiên cứu bệnh chứng gồm 126 bệnh nhân ung thư<br /> được mổ cắt 2/3 dạ dày, nạo hạch R2, trong số này có 96 bệnh nhân ung thư dạ dày; và 93 bệnh nhân viêm dạ<br /> dày có H. pylori-dương tính được chẩn đoán bằng PCR, CLO test và Giải phẫu bệnh.<br /> Kết quả: Trong 162 bệnh nhân (71 ung thư và 91 viêm dạ dày), gen cagA (+) là 95,7% (150/157), ở bệnh<br /> nhân ung thư dạ dày là 100% so với 92,3% (84/91) viêm dạ dày, p = 0,018, tỷ số chênh = 1,845 (KTC 95%,<br /> 1,597 – 2,133). Gen vacA s1 là 98,1% (156/159), ở ung thư dạ dày là 100% (68/68) so với 96,7% (88/91) viêm<br /> dạ dày; gen vacA s2 là 3,3% (3/91) và chỉ gặp ở viêm dạ dày, với p= 0,261. Gen vacA m1 là 50,6% (81/160), ở<br /> ung thư dạ dày là 63,8% (44/69) so với 40,7% (37/91) viêm dạ dày; Gen vacA m2 là 49,4% (79/160), ung thư<br /> dạ dày là 36,2% (25/69) so với 59,3% (54/91) viêm dạ dày, p= 0,004, tỷ số chênh = 2,569 (KTC 95%, 1,348 –<br /> 4,895). Liên quan giữa gen cagA và vacA trên 157 bệnh nhân (66 ung thư dạ dày, 2 cagA (+) không xác định m,<br /> và 3 cagA (+) không xác định s; và 91 viêm dạ dày) đã được xác định. Ở 66 bệnh nhân ung thư dạ dày, cagA (+)<br /> là 100%, các týp gen vacA s1/m1 ở 63,6%, và vacA s1/m2 là 36,4%. Ở 91 viêm dạ dày, cagA (+) là 92,3% và<br /> cagA (-) là 7,7%. Các týp gen vacA trong nhóm này lần lượt là s1/m1 (42%), s1/m2 (55%) và s2/m2 (3%).<br /> Trong các trường hợp cagA (+), có sự khác biệt của các týp gen vacA s1/m1 và vacA s1/m2 giữa ung thư và<br /> viêm dạ dày, p=0,025, tỷ số chênh = 2,118 (KTC 95%, 1,094 – 4,1).<br /> Kết luận: Gen cagA (+) có ở tất cả các trường hợp ung thư dạ dày, và cagA (-) chỉ gặp ở viêm dạ dày. Gen<br /> cagA (+) kết hợp với kiểu gen vacA m1 của các chủng H. pylori. Đặc biệt, ở chủng H. pylori có gen cagA (+) và<br /> gen vacA s1/m1 cho thấy nguy cơ cao liên quan đến bệnh ung thư dạ dày.<br /> Từ khóa: Helicobacter pylori, gen cagA và gen vacA, ung thư dạ dày.<br /> <br /> ABSTRACT<br /> ANALYSIS OF VACA GENOTYPES AND CAGA GENE OF HELICOBACTER PYLORI IN GASTRIC<br /> CANCERS<br /> Tran Thien Trung, Cao Minh Nga, Nguyen Thuy Oanh, Hua Thi Ngoc Ha, Ho Huynh Thuy Duong<br /> * Y hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 15 – No. 1 – 2011: 43 - 51<br /> Aim: The main objective of this study was to determine cagA and vacA genotypes of Helicobacter pylori and<br /> evaluating the relation of these genotypes to gastric cancer in patients in Ho Chi Minh city and the southern area<br /> of Vietnam.<br /> Patients and methods: From December 2008 to May 2010, at University Medical Center and University<br /> * Đại học Y Dược TP. Hồ Chí Minh. ** Trường Đại học Khoa học Tự nhiên- ĐH Quốc gia TP. Hồ Chí Minh<br /> Tác giả liên lạc: PGS.TS. Trần Thiện Trung<br /> <br /> ĐT: 0903645659<br /> <br /> Email: drtranthientrung@yahoo.com<br /> <br /> 43<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Số 1 * 2011<br /> <br /> of Natural Science in Ho Chi Minh city. We underwent a study to investigate cagA gene and vacA genotypes of<br /> Helicobacter pylori in infected patients with gastric cancer by multiplex polymerase chain reaction assay. The<br /> case-control study includes 126 patients with gastric cancer, operated by subtotal gastrestomy, R2 ganglion<br /> curage and 93 patients with gastritis. All patients were diganosed H. pylori infection by PCR, urease test (CLO<br /> test), or pathology.<br /> Results: Of the 162 patients, including 71 gastric cancers and 91 gastritis, the ratio of cagA-positive was<br /> 95.7% (150/157). All patients with gastric cancer and 92.3% patients with gastritis were cagA-positive<br /> (p=0.018, OR=1.845, CI=1.597-2.133). The vacA s1 was 98.1%. In gastric cancer group, allele s1 was 100%,<br /> compared to 96.7% in gastritis group; Allele s2 was 3.3% and just identified in gastritis group (p=0.261). The<br /> vacA m1 and m2 were 50.6 (81/160) and 49.4% (79/160). In gastric cancer group, allele m1 was 63.8% and<br /> allele m2 was 36.2%, while in gastritis group allele m1 was 40.7% and m2 was 59.3% (p=0.004, OR=2.569,<br /> CI=1.348-4.895). The relation between cagA gene and vacA genotypes with gastric cancer was identified. 157<br /> patients were studied. Of 66 patients with gastric cancer, cagA-positive was 100% within this group, vacA s1m1<br /> and s1m2 genotypes were 63.6% and 36.4%. Of 91 patients with gastritis, cagA-positive was 92.3% and cagAnegative was 7.7%. In this group, there were three genotypes for vacA gene: s1m1 (42%), s1m2 (50.5%), s2m2<br /> (3%). In patients with cagA-positive, there was a significant difference between vacA genotype s1/m1 and s1/m2<br /> in two groups (p=0.025, OR=2.118, CI=1.094 - 4.100).<br /> Conclusion: The cagA-positive genotype existed in all gastric cancer patients and cagA-negative just<br /> appeared in gastritis. The cagA-positive genotype always coexisted with vacA m1 genotype. Specially, H. pylori<br /> with cagA-positive and vacA s1m1 genotype showed a significant association with gastric cancer.<br /> Keywords: Helicobacter pylori, cagA and vacA genotypes, gastric cancer.<br /> nhiều hay ít hoặc là cao hay thấp tùy thuộc vào<br /> ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> các chủng H. pylori liên quan đến các gen cagA<br /> Vi khuẩn H. pylori được tìm ra vào tháng 4<br /> và gen vacA. Gen cagA (cytotoxin-associated<br /> năm 1982, kể từ đó đã có rất nhiều công trình<br /> gene) và gen vacA (vacuolating toxin gene) là các<br /> nghiên cứu về vi khuẩn này gây ra các bệnh ở<br /> gen được coi là yếu tố độc lực chủ yếu có khả<br /> dạ dày-tá tràng như viêm, loét và ung thư dạ<br /> năng gây bệnh và đặc trưng của vi khuẩn H.<br /> dày(15). Năm 1983, Marshall là một trong hai<br /> pylori(1, 6). Sự kết hợp giữa các gen cagA và các týp<br /> người tìm ra H. pylori lần đầu tiên đưa ra giả<br /> gen vacA có thể liên quan đến nguy cơ với các<br /> thuyết về sự kết hợp giữa nhiễm H. pylori và ung<br /> mức độ biểu hiện lâm sàng khác nhau của<br /> thư dạ dày(7). Năm 1994, Cơ quan Quốc tế<br /> bệnh(5). Gen cagA có thể không có ở tất cả các<br /> Nghiên cứu về Ung thư (International Agency<br /> chủng H. pyori(3). Protein cagA, có kích thước từ<br /> for Research on Cancer-IARC) dựa trên các bằng<br /> 128 đến 140 kDa, có khả năng kích thích phản<br /> chứng dịch tễ học đã nêu lên sự liên quan giữa<br /> ứng phosphoryl hóa tyrosine trong tế bào ký<br /> nhiễm H. pylori với carcinom hay là ung thư dạ<br /> chủ, dẫn đến sự tăng sinh bất thường của các tế<br /> dày, và Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) đã công<br /> bào biểu mô dạ dày(11). Gen vacA có chứa ít nhất<br /> nhận và xếp H. pylori là tác nhân quan trọng<br /> hai vùng biến đổi gồm vùng tín hiệu và vùng<br /> hàng đầu hay nhóm 1 các tác nhân gây carcinom<br /> giữa. Vùng giữa (middle) của gen vacA có các<br /> dạ dày(8).<br /> týp gen là m1/m2 và vùng tín hiệu (signal) có<br /> Liên quan đến bệnh sinh, ngoài các yếu tố<br /> thể có các týp gen là s1/s2. Mức độ độc tố cao<br /> môi trường, yếu tố ký chủ có các thay đổi về di<br /> hay thấp của gen vacA phụ thuộc vào các týp<br /> truyền như thay đổi về gen... là những tác nhân<br /> gen của hai vùng này. Chủng H. pylori với týp<br /> có khả năng gây bệnh. Một yếu tố quan trọng<br /> gen vacA s1/m1 có độc tố trên tế bào mạnh hơn<br /> khác đó là độc lực của vi khuẩn H. pylori có thể<br /> <br /> 44<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Số 1 * 2011<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> <br /> týp gen vacA s1/m2, trong khi đó chủng H. pylori<br /> với týp gen vacA s2/m2 không gây độc tố(1).<br /> <br /> nhóm chứng 93 viêm dạ dày có H. pylori-dương<br /> tính được đưa vào nghiên cứu.<br /> <br /> Để hiểu rõ hơn về tính đa dạng và vai trò<br /> của các týp gen vacA của H. pylori liên quan đến<br /> các bệnh dạ dày, Rhead và cs(12) đã nêu lên ngoài<br /> 2 vùng giữa của gen vacA có các týp gen là m1<br /> hoặc m2 và vùng tín hiệu có các týp gen là s1<br /> hoặc s2 còn có vùng trung gian (intermediate)<br /> ký hiệu là i. Ở vùng trung gian có 2 cặp alleles<br /> khác nhau gồm i1 (vacuolating) và i2<br /> (nonvacuolating). Tất cả các cặp gen vacA s1/m1<br /> thuộc týp i 1, tất cả các gen vacA s2/m2 thuộc týp<br /> i 2, và vacA s1/m2 có thể thuộc týp i 1 hoặc i 2.<br /> <br /> Phương pháp nghiên cứu<br /> <br /> Việt Nam là một trong những nước có tỷ lệ<br /> nhiễm H. pylori cao, và ung thư dạ dày hiện<br /> đang là một vấn đề lớn, thời sự trong các bệnh<br /> ung thư đường tiêu hóa. Vì vậy việc nghiên cứu<br /> để hiểu rõ hơn về bệnh sinh của ung thư dạ dày<br /> nhằm tìm ra những chiến lược can thiệp có hiệu<br /> quả để điều trị và phòng ngừa là vấn đề hết sức<br /> quan trọng và cấp thiết.<br /> Công trình nghiên cứu này của chúng tôi<br /> dựa trên phương pháp multiplex PCR<br /> (Polymerase Chain Reaction) để xác định các týp<br /> gen cagA và vacA với các týp gen vacA s1/s2;<br /> vacA m1/m2 của H. pylori, và mối liên quan giữa<br /> các týp gen này với ung thư dạ dày ở bệnh nhân<br /> khu vực thành phố Hồ Chí Minh và miền Nam<br /> Việt Nam. Trên cơ sở đó nhằm mục đích tầm<br /> sóat và theo dõi những bệnh nhân nhiễm H.<br /> pylori với các týp gen mắc phải có nguy cơ cao<br /> của bệnh ung thư dạ dày.<br /> <br /> ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU<br /> Đối tượng nghiên cứu<br /> Trong khoảng thời gian từ tháng 12/2008<br /> đến tháng 5/2010, tại Bệnh viện Đại học Y Dược<br /> TP. Hồ Chí Minh, chúng tôi tiến hành nghiên<br /> cứu các týp gen của vi khuẩn H. pylori.<br /> Thiết kế nghiên cứu bệnh chứng gồm 2<br /> nhóm: (1) 126 bệnh nhân ung thư dạ dày (hang<br /> vị) được mổ cắt 2/3 dạ dày, nạo hạch R2, trong<br /> số này có 96 bệnh nhân ung thư dạ dày có H.<br /> pylori-dương tính và 30 H. pylori-âm tính ; và (2)<br /> <br /> Tiêu chuẩn chọn bệnh và loại trừ<br /> Chọn các bệnh nhân sau mổ cắt bán phần<br /> dưới dạ dày do ung thư biểu mô tuyến<br /> (carcinoma). Loại trừ các trường hợp: bệnh<br /> phẩm không đạt yêu cầu về kích thước và bảo<br /> quản, các thương tổn khác như lymphôm,<br /> sarcôm dạ dày.<br /> Thu thập mẫu<br /> Bệnh nhân sau mổ cắt bán phần dưới dạ dày<br /> do ung thư<br /> Tiến hành lấy 6 mẫu mô : Mẫu mô ung thư<br /> (mô bệnh) được lấy ở ranh giới mô lành và mô<br /> ung thư, mẫu mô lành lấy cách thương tổn ít<br /> nhất 5 cm về phía trên của bờ cắt dạ dày. Hai<br /> mẫu mô (khoảng 0,5 cm) chẩn đoán CLO test.<br /> Bốn mẫu mô kích thước khoảng 1 cm - 1,5 cm<br /> gồm : 1 mô lành và 1 mô bệnh được gửi làm mô<br /> bệnh học tại Bộ môn Giải phẫu bệnh, Đại học Y<br /> Dược TP. Hồ Chí Minh. Hai mẫu mô còn lại<br /> được gửi xác định týp gen tại Trường Đại học<br /> Khoa học Tự nhiên TP. Hồ Chí Minh.<br /> Nhóm chứng bệnh nhân viêm dạ dày có H.<br /> pylori-dương tính được lấy từ 3 mẫu sinh thiết<br /> dạ dày trong lúc nội soi, kích thước các mẫu<br /> khoảng 0,5 cm gồm : 1 chẩn đoán CLO test, 1<br /> chẩn đoán mô bệnh học, và 1 gửi định danh týp<br /> gen của H. pylori.<br /> Chẩn đoán nhiễm H. pylori :<br /> Bệnh nhân trong nghiên cứu ở cả 2 nhóm ung<br /> thư và viêm dạ dày có H. pylori-dương tính được<br /> chẩn đoán đồng thời bằng 3 thử nghiệm : (1) thử<br /> nghiệm urease (CLO test) ; (2) Giải phẫu bệnh ; và<br /> (3) Phản ứng chuỗi trùng hợp (PCR). H. pyloridương tính được định nghĩa khi có ít nhất 2 trong<br /> 3, và hoặc cả 3 thử nghiệm dương tính.<br /> Xác định các týp gen của H. pylori<br /> Sử dụng Master mix PCR kết hợp với các<br /> cặp mồi đặc hiệu. Mồi được tổng hợp từ công ty<br /> IDT (Hoa Kỳ). Mồi dùng cho phản ứng PCR xác<br /> <br /> 45<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> định VacA và cagA được lấy từ công trình của<br /> Kumar S, Kumar A, Dixit V K và cs năm 2008(9)<br /> và Chattopadhyay và cs năm 2004(5). Mồi dùng<br /> phát hiện gene urease được chúng tôi thiết kế<br /> dựa trên các phần mềm chuyên dụng. Chúng tôi<br /> cũng khảo sát tính đặc hiệu của mồi đã chọn<br /> trên chứng dương là các chủng H. pylori J99<br /> (s1m1cagA+) ; và chứng âm là trên một số vi<br /> khuẩn khác và trên mẫu không chứa H. pylori.<br /> DNA bộ gen H. pylori sau khi tách chiết được<br /> dùng để tiến hành phản ứng multiplex PCR<br /> trong hệ thống PCR CFX96TM Real-Time<br /> (BioRad). Mẫu DNA H. pylori chứng trong các<br /> phản ứng PCR là các sản phẩm nhân bản có týp<br /> gen cagA (+) vacA s1m1 và cagA (+) vacA s1m2<br /> được xác định bằng phương pháp giải trình tự.<br /> Kết quả điện di các sản phẩm của phản ứng<br /> multiplex PCR (hình 1) tương ứng với các kiểu<br /> gen cagA (+)/(-), vacA s1/s2, vacA m1/m2 và gen<br /> hGSTP từ mẫu sinh thiết chứa H. pylori của 4<br /> bệnh nhân. Kết quả cho thấy các sản phẩm PCR<br /> tạo ra có kích thước phù hợp với kích thước dự<br /> kiến: vacA m1/m2 (567/642 bp), cagA (349 bp),<br /> vacA s1/s2 (259/286 bp) và hGSTP (192 bp). Tín<br /> hiệu thu được mạnh và đặc hiệu, không có sản<br /> phẩm ký sinh. Điều này cho thấy bộ mồi gồm 4<br /> cặp mồi sử dụng trong phản ứng multiplex PCR<br /> hoạt động tốt với nồng độ và chương trình đã<br /> xác định. Các sản phẩm nhân bản được kiểm tra<br /> bằng giải trình tự cho thấy phù hợp với trình tự<br /> gen của H. pylori đã công bố. Phản ứng<br /> multiplex PCR dùng phát hiện và định týp gen<br /> của vi khuẩn H. pylori đạt hiệu quả và độ chính<br /> xác cao, với cường độ tín hiệu đặc trưng cho<br /> từng gen không chênh lệch. Điều này cho thấy<br /> các điều kiện của phản ứng đã được tối ưu hóa<br /> và phù hợp cho sự nhân bản của các gen.<br /> Kết quả áp dụng quy trình trên một số bệnh<br /> phẩm của bệnh nhân viêm và ung thư dạ dày<br /> trong nghiên cứu của chúng tôi cho thấy ưu thế<br /> của týp gen cagA (+), vacA s1m1; và cagA (+),<br /> vacA s1m2.<br /> <br /> 46<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Số 1 * 2011<br /> <br /> Hình 1: Kết quả multiplex PCR phát hiện và phân týp<br /> gen cagA và vacA của H. pylori Giếng (+), chứng dương<br /> là DNA H. pylori có kiểu gen cagA (+), vacA s1m2; giếng<br /> (-), chứng âm; giếng 1, cagA (-), vacA s1m2; giếng 2, cagA<br /> (+), vacA s1m2; giếng 3, cagA (+), vacA s1m1. Giếng 4,<br /> cagA (-), vacA s2m2; giếng M, thang phân tử 100-bp (BioRad)<br /> <br /> Xử lý và phân tích thống kê<br /> Dữ liệu thu thập được nhập, xử lý và phân<br /> tích bằng phần mềm SPSS 15.0. Các phép kiểm<br /> T-test, Fisher’s exact, chi bình phương (χ2) được<br /> dùng trong nghiên cứu có ý nghĩa thống kê khi<br /> p < 0,05. Xác định các yếu tố nguy cơ bằng tỷ số<br /> chênh (Odds Ratio) với khoảng tin cậy 95%.<br /> <br /> KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU<br /> Đặc điểm bệnh nhân xác định týp gen<br /> 96 bệnh nhân ung thư dạ dày có H. pyloridương tính được xác định týp gen, trong số này:<br /> - 25 trường hợp PCR không có kết quả cả<br /> vacA và cagA<br /> - 2 trường hợp cagA (+) nhưng không xác<br /> định được m<br /> - 3 trường hợp cagA (+) nhưng không xác<br /> định được s.<br /> Nhóm chứng 93 viêm dạ dày có H. pyloridương tính, trong số này 2 trường hợp PCR<br /> không có kết quả cả cagA và vacA.<br /> Tuổi của bệnh nhân<br /> Bảng 1. Tuổi trung bình của bệnh nhân<br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày<br /> <br /> Số bệnh nhân<br /> 71<br /> <br /> Tuổi trung bình<br /> <br /> Viêm dạ dày<br /> <br /> 91<br /> <br /> 46,42 ± 12,75<br /> <br /> 59,54 ± 12,74<br /> <br /> Nhận xét: Tuổi trung bình của bệnh nhân ở 2<br /> nhóm bệnh nhân ung thư và viêm dạ dày khác<br /> biệt có ý nghĩa với p< 0,001 (T test).<br /> <br /> Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 15 * Số 1 * 2011<br /> Giới tính<br /> Bảng 2. Giới tính<br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày<br /> Viêm dạ dày<br /> Nam<br /> 48 (67,6%)<br /> 43 (47,3%)<br /> Nữ<br /> 23 (32,4%)<br /> 48 (52,7%)<br /> Tổng cộng<br /> 71 (100%)<br /> 91 (100%)<br /> Giới tính<br /> <br /> Tổng cộng<br /> 91 (56,2%)<br /> 71 (43,8%)<br /> 162 (100%)<br /> <br /> Nhận xét: Có sự khác biệt về giới ở nhóm<br /> bệnh nhân ung thư dạ dày, với p = 0,01(χ2). Tỷ<br /> số chênh = 2,33 (Khoảng tin cậy 95%: 1,222 –<br /> 4,442).<br /> <br /> Nghiên cứu Y học<br /> Nhận xét: * 3 trường hợp cagA (+) nhưng<br /> không xác định được s nên không đưa vào<br /> trong phân tích. Không có sự khác biệt týp gen<br /> vacA s1 giữa 2 nhóm ung thư và viêm dạ dày,<br /> với p= 0,261 (Fisher’s exact). Týp gen vacA s2<br /> chỉ gặp trong nhóm bệnh nhân viêm dạ dày.<br /> Kết quả định týp gen vacA m1 và vacA m2<br /> Bảng 5 : Kết quả định týp gen vacA m1/ vacA m2<br /> của H. pylori<br /> Gen vacA<br /> <br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày Viêm dạ dày<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> Đặc điểm các thử nghiệm chẩn đoán H. pylori<br /> <br /> vacA m1<br /> <br /> 44 (63,8%)<br /> <br /> 37 (40,7%)<br /> <br /> 81 (50,6%)<br /> <br /> Tất cả trường hợp trong nghiên cứu ở 2<br /> nhóm ung thư dạ dày (n=71) ; và nhóm viêm dạ<br /> dày (n=91) đều có cùng kết quả H. pylori-dương<br /> tính với cả 2 thử nghiệm : urease (CLO test)<br /> dương tính, và PCR dương tính.<br /> <br /> vacA m2<br /> <br /> 25 (36,2%)<br /> <br /> 54 (59,3%)<br /> <br /> 79 (49,4%)<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> 69 (100%)*<br /> <br /> 91 (100%)<br /> <br /> 160<br /> <br /> Kết quả giải phẫu bệnh chẩn đoán H. pylori ở<br /> nhóm bệnh nhân ung thư dạ dày là 57,7%<br /> (41/71), và ở nhóm viêm dạ dày là 44% (40/91)<br /> trường hợp. Giải phẫu bệnh chẩn đoán H. pylori<br /> có kết quả thấp hơn so với 2 thử nghiệm CLO<br /> test, và PCR.<br /> Kết quả định týp gen cagA của H. pylori<br /> Bảng 3 : Kết quả định týp gen cagA của H. pylori<br /> Gen cagA<br /> cagA (+)<br /> <br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Tổng cộng<br /> Ung thư dạ dày Viêm dạ dày<br /> 155<br /> 71 (100%)<br /> 84 (92,3%)<br /> (95,7%)<br /> <br /> cagA (-)<br /> <br /> 0 (0%)<br /> <br /> 7 (7,7%)<br /> <br /> 7 (4,3%)<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> 71 (100%)<br /> <br /> 91 (100%)<br /> <br /> 162<br /> <br /> Nhận xét: cagA (+) có trong 100% các trường<br /> hợp ung thư dạ dày so với 92,3% trong viêm dạ<br /> dày, với p = 0,018 (Fisher’s exact). Tỉ số chênh =<br /> 1,845 (Khoảng tin cậy 95%, 1,597 – 2,133).<br /> Kết quả định týp gen vacA s1 và vacA s2<br /> Bảng 4 : Kết quả định týp gen vacA s1/ vacA s2 của<br /> H. pylori<br /> Gen vacA<br /> <br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày Viêm dạ dày<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> vacA s1<br /> <br /> 68 (100%)<br /> <br /> 88 (96,7%)<br /> <br /> 156 (98,1%)<br /> <br /> vacA s2<br /> <br /> 0 (0%)<br /> <br /> 3 (3,3%)<br /> <br /> 3 (1,9%)<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> 68 (100%)*<br /> <br /> 91 (100%)<br /> <br /> 159<br /> <br /> Nhận xét: * 2 trường hợp cagA (+) nhưng<br /> không xác định được m nên không đưa vào<br /> trong phân tích. Có sự khác biệt giữa týp gen<br /> vacA m1 và vacA m2 giữa 2 nhóm ung thư và<br /> viêm dạ dày, với p= 0,004 (χ2). Tỉ số chênh =<br /> 2,569 (Khoảng tin cậy 95%, 1,348 – 4,895).<br /> Kết quả định týp gen vacA s1/s2 và vacA<br /> m1/m2<br /> Bảng 6: Kết quả định týp gen vacA s1/m1; vacA<br /> s1/m2; và vacA s2/m2 của H. pylori<br /> Gen vacA<br /> <br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày Viêm dạ dày<br /> <br /> Tổng<br /> cộng<br /> <br /> vacA s1/m1<br /> <br /> 42 (63,6%)<br /> <br /> 38 (41,8%)<br /> <br /> 80<br /> <br /> vacA s1/m2<br /> <br /> 24 (36,4%)<br /> <br /> 50 (54,9%)<br /> <br /> 74<br /> <br /> vacA s2/m2<br /> <br /> 0 (0%)<br /> <br /> 3 (3,3%)<br /> <br /> 3<br /> <br /> Tổng cộng<br /> <br /> 66 (100%)<br /> <br /> 91 (100%)<br /> <br /> 157*<br /> <br /> Nhận xét: * 5 trường hợp cagA (+) nhưng<br /> không xác định được s, hoặc m nên không đưa<br /> vào trong phân tích. Các týp gen vacA giũa 2<br /> nhóm bệnh nhân ung thư và viêm dạ dày khác<br /> biệt có ý nghĩa thống kê với p= 0,014 (χ2). Týp<br /> gen vacA s2/m2 có số liệu nhỏ và chỉ gặp ở<br /> nhóm viêm dạ dày. Khi tính gộp nhóm s1/m2<br /> với nhóm s2/m2, kết quả thu được như sau<br /> (bảng 7):<br /> Bảng 7 : Kết quả định týp gen vacA s1/m1; vacA<br /> s1/m2; và vacA s2/m2 của H. pylori<br /> Gen vacA<br /> vacA s1/m1<br /> <br /> Nhóm bệnh nhân<br /> Ung thư dạ dày<br /> Viêm dạ dày<br /> 42 (63,6%)<br /> 38 (41,8%)<br /> <br /> Tổng<br /> cộng<br /> 80<br /> <br /> 47<br /> <br />