Đồ án phân tích thực phẩm: Một số đặc điểm tính chất, ứng dụng, quy trình sản xuất và tiêu chí chất lượng cũng như các phương pháp kiểm tra chất lượng của Đường Glucose

Ủ

Ậ

ƯỚ

Ẫ

NH N XÉT C A GIÁO VIÊN H

NG D N

………………………………………………………………………………………………

.……………………………………………………………………………………………...

………………………………………………………………………………………………

Ụ

M C L C

Ụ Ụ Ầ Ế PH N PH L C TI NG ANH 77

Ụ Ụ Ầ Ế PH N PH L C TI NG VI T Ệ 100

Ệ TÀI LI U THAM KH O Ả 101

Ọ

Ệ

Ụ NHI M V MÔN H C

1. Gi

ớ ệ ổ ề ườ i thi u t ng quan v đ ng glucose.

2. Tìm các TCVN, QCVN v đ

ề ườ ng glucose.

3. Tìm và t ng h p các ph

ổ ợ ươ ể ỉ ườ ng pháp ki m tra các ch tiêu đ ng glucose theo

TCVN, TC Codex.

4. Tìm và t ng h p các ph

ổ ợ ươ ể ỉ ườ ng pháp ki m tra các ch tiêu đ ng glucose, TC

ế ả ả ị ệ ụ ụ ế ầ Codex. B n sao báo cáo, b n d ch ti ng Vi ề t, ti ng Anh đ ph n ph l c.

5. Tìm và t ng h p các ph

ổ ợ ươ ể ỉ ườ ng pháp ki m tra các ch tiêu đ ng glucose, TC

ế ả ả ị ệ ụ ụ ế ầ AOAC. B n sao báo cáo, b n d ch ti ng Vi ề t, ti ng Anh đ ph n ph l c.

6. So sánh các ph

ươ ể ườ ng pháp ki m tra đ ng glucosetheo các TC trên.

Ờ Ở Ầ L I M Đ U

ượ ả ừ ế ỷ ế ỷ ở ế Đ c tinh ch trong kho ng t ế th k IV đ n th k VII ậ vùng C n Đông,

ườ ế ươ ả ờ ườ đ ng là món ăn quý hi m dành riêng cho hàng v ng gi th i đó. Ngày nay, đ ng là

ổ ế ị ấ ộ ươ ố ẻ ượ ả ơ ừ ấ ắ ữ m t gia v r t ph bi n, giá t ng đ i r , đ c s n xu t kh p n i t ồ nh ng ngu n

ổ ế ư ườ ủ ả ườ ượ ữ ph bi n nh mía đ ng, c c i đ ng... ườ Đ ng đ ộ c dùng trong các b a ăn m t

ấ ộ ổ ế cách r t quen thu c và ph bi n:

ộ ồ ộ ồ ấ ở ộ ộ N u m t n i canh tôm, m t n i ph thì các bà n i tr ợ ườ th ng cho m t thìa

ườ ể đ ng đ làm ng t n ọ ướ c.

ầ ộ ộ ườ ấ ớ Pha d u tr n xà lách, thêm m t chút đ ng cho gi m b t chua.

ọ ể ữ ệ ề ộ Sau b a ăn thì m t ít bánh ng t đ tráng mi ng là đi u ai cũng thích.

ỉ ầ ẹ ể ế ệ ẻ ộ ọ Tr con khóc nhè ch c n m t viên k o là có th khi n chúng cho qua m i vi c.

ự ả ẩ ườ ườ ả ả ấ Trong s n xu t th c ph m ng i ta th ng ph i cho thêm đ ẩ ườ vào s n ph m ng

ụ ớ v i 3 m c đích sau:

ị ự ủ ự ẩ ẩ ỗ ộ Nâng cao giá tr th c ph m và đ calo c a th c ph m : m i gam đ ườ ng

ơ ể ẽ ượ khi tiêu hoá trong c th s cho 17.1 kj ( 4.1kcal) năng l ng.

ọ ễ ị ả ẩ ị Làm cho s n ph m có v ng t d ch u.

ử ụ ủ ả ả ả ườ ộ ườ S d ng kh năng b o qu n c a đ ồ ng. Khi n ng đ đ ng cao, trong

ể ủ ế ự ẽ ạ ấ ẩ ị ậ ấ ớ dung d ch s gây ra áp su t th m th u l n, h n ch s phát tri n c a vi sinh v t. Kh ả

ả ủ ứ ứ ứ ề ả ả ạ ị năng b o qu n c a lo i m t rim, m t m n và m t qu nghi n không qua thanh trùng.

ự ế ạ ườ ấ ớ Tuy nhiên, trên th c t ề có nhi u lo i đ ứ ng khác nhau v i tính ch t và ng

ườ ề ạ ấ ọ ọ ỉ ọ ụ d ng khác nhau. Đ ng ch là tên g i chung cho nhi u lo i ch t ng t có tên khoa h c

ư ườ ườ ữ khác nhau nh dextrose, fructose (đ ng trái cây), lactose (đ ng s a), maltose (đ ườ ng

ấ ọ ậ nha), levulose, galactose, saccharose, glucose.... Ngoài ra ch t ng t còn có trong m t

ườ ậ ậ ong, m t ngô, đ ng vàng, m t mía.

ộ ố ặ ấ ứ ụ ề ể Trong đ tài này, em xin trình bày m t s đ c đi m tính ch t, ng d ng, quy

ấ ượ ả ấ ư ươ trình s n xu t và tiêu chí ch t l ng cũng nh các ph ể ng pháp ki m tra ch t l ấ ượ ng

ủ ườ c a đ ng glucose.

Ữ Ế

Ụ

Ắ

DANH M C CH VI T T T

AOAC: Association of Official Analytical Chemists.

HGMF: Hydrophobic grid membrane filter.

ICUMSA: International Commission for Uniform Methods of Sugar Analysis.

LIA: Lysine iron agar.

MAC: MacConkey agar.

NFDM–BG: NonFat Dry Milk with Brilliant Green dye

TC: Tiêu chu n.ẩ

ẩ ệ TCVN: Tiêu Chu n Vi t Nam.

TSI: Triple sugar iron agar.

PE: PolyEtylen.

RSD: Relative standard deviation

ƯƠ Ổ CH NG 1: T NG QUAN

1. Gi

ớ ệ i thi u chung.

ấ ọ ườ ộ ả ơ ạ Glucose là m t lo i glucid (ch t b t đ ấ ng hay carbonhydrate) đ n gi n nh t

ể ủ ạ ơ ờ ượ ổ ế ở ộ (đ n đ n monosacchride, lo i glucid không th th y phân đ c) ph bi n ậ đ ng v t

ả ự ậ ề ả ượ ọ ườ và c th c v t. Nó có nhi u trong qu nho chín nên còn đ c g i là đ ng nho.

ố ị ễ ậ ộ Ở ườ ng ầ i và đ ng v t, glucose là thành ph n c đ nh trong máu, d dàng đ ượ c

ườ ễ ị ấ ụ ấ ấ ấ ơ ể c th con ng i tiêu hóa và h p th nh t do đó cũng d b n m men nh t. Chính vì

ấ ầ ế ơ ả ủ ậ ồ ề ờ ộ ậ v y nó là m t ch t c n thi t c b n c a nhi u vi sinh v t.đ ng th i nó cũng đ ượ ứ c ng

ự ề ộ ụ d ng r ng rãi trong nhi u lĩnh v c.

6H12O6, là m t lo i đ

ứ ạ ườ ộ ủ ử ả ẩ Glucose có công th c là C ng kh , là s n ph m c a quá

ộ ủ ủ ộ ằ ủ ể ặ ặ trình th y phân tinh b t b ng acid ho c enzyme. Có th dùng tinh b t c a c ho c hòa

ả Ở ướ ủ ế ộ th o. các n ộ ắ c ch y u dùng tinh b t b p và tinh b t khoai tây. Ở ướ n c ta thì ch ủ

ể ả ấ ườ ộ ắ ế y u dùng tinh b t s n đ s n xu t đ ng glucose.

0C,

ấ ắ ộ ệ ộ ả ở ế Glucose là m t ch t r n, k t tinh, không màu, có nhi t đ nóng ch y 146

ướ ộ ố ỉ ề hòa tan nhi u trong n c, acid axetic và m t s dung môi khác. Chúng ch ít hòa tan

ọ ằ ư ọ ườ ị trong methanol và ethanol. Có v ng t nh ng không ng t b ng đ ng mía (đ ườ ng

ọ ằ ớ ườ ầ ộ ộ saccharose C12H22O11). Glucose có đ ng t b ng 0,6 l n so v i đ ọ ng mía (cho đ ng t

ọ ườ ộ ằ ủ ườ c a đ ng mía là 1 thì đ ng t đ ng glucose b ng 0,6).

ứ ấ ạ ạ ạ ạ ạ ạ ồ ở Glucose có hai d ng công th c c u t o g m d ng m ch h và d ng m ch vòng

ướ ạ ự ể ằ ị ((cid:0) , (cid:0) ). Khi hòa tan trong n c t o thành dung d ch glucose có s cân b ng, chuy n hóa

ạ ồ ạ ả ấ ạ ư ề ạ ấ ạ ơ ỉ qua l i và t n t ệ i c ba d ng c u t o nh ng ch có d ng vòng b n h n nên xu t hi n

ề ơ nhi u h n.

ơ ể ườ ậ ộ ườ Glucose có trong c th ng i và đ ng v t. trong máu ng ả i có kho ng 0,1%

ố ượ ề ậ glucose (v kh i l ng) và trong m t ong có 30% glucose.

Ứ ườ ụ ng d ng đ ng glucose.

ệ ả ấ ườ ộ ứ ụ ặ ệ ủ Vi c s n xu t đ ng glucose là m t ng d ng quan trong đ c bi t c a amilase.

ườ ườ ỉ ố ườ ử ế Các đ ng glucose thông th ng có ch s đ ng kh (tính theo glucose) là 20 đ n 65.

ị ườ ấ ớ ườ ượ ả ở ả Dung d ch đ ộ ng glucose có đ nh t th p và th ng đ c b o qu n pH 3.5 5.5

ặ ườ ể ộ ọ ị (thêm acetate, citrate ho c lactate). Ng i ta dùng dung d ch này đ đo đ ng t, đ ể

ả ự ế ả ệ ộ ạ ị ngăn c n s k t tinh saccharose và làm gi m nhi ỗ ủ t đ đông l nh c a dung d ch (h n

ạ ị ườ ả ộ ợ h p kem l nh). Ngoài ra dung d ch đ ng glucose có kh năng lên men và có đ hút

ẩ m cao.

ố ạ ư ạ ả ố Glucose có kh năng hoá nâu, có tính t o kh i, t o viên. Gi ng nh các đ ườ ng

ở ấ ủ ậ ơ ị ơ đ n khác, glucose b lên men b i n m men và các ch ng vi sinh v t khác nhanh h n so

ấ ồ ơ ộ ử ỉ ằ ớ v i các ngu n c ch t khác. Do phân t ử ượ l ng ch b ng m t n a so v i đ ớ ườ ng

ở ố ượ ử ụ ả ứ ứ ấ ớ ợ saccharose ộ cùng m t kh i l ng s d ng. Khi ph n ng v i các h p ch t ch a nit ơ ,

ả ứ ư ề ệ ạ ấ ộ ỳ glucose t o ra các ch t màu tu thu c vào đi u ki n ph n ng nh pH, nhi ệ ộ ồ t đ , n ng

ứ ả ấ ấ ợ ộ đ và b n ch t các h p ch t ch a nit ơ .

ả ứ ườ ư Đ ng glucose cũng tham gia các ph n ng nh isomer hoá trong môi tr ườ ng

ả ứ ể ạ ề ề ạ ỷ ki m đ t o thành fructose và mannos, ph n ng phân hu ki m t o thành acid

ỷ ề ả ứ ả ứ ạ carboxylic, ph n ng hydro hoá t o thành sorbitol, ph n ng phân hu ki m và hydro

ả ứ ể ạ ể ạ hoá đ t o thành glycol; 1,2 propanediol và glycerol, ph n ng oxy hoá đ t o thành

acid gluconic và acid glucaric.

ấ ậ ự ọ ẩ Các tính ch t v t lý, hoá h c và dinh d ưỡ ng ệ Trong công ngh p th c ph m:

ượ ứ ụ ự ề ệ ẩ ọ ườ h c đ ng glucose đ ự c ng d ng trong nhi u lĩnh v c công nghi p th c ph m nh ư

ồ ố ệ ả ấ ồ ệ công nghi p lên men (bia, đ u ng có c n…), s n xu t bánh mì, trong công nghi p

ồ ộ ứ ữ ự ư ẹ ệ ấ bánh k o, đ h p, th c ăn nhanh và nh ng lĩnh v c khác nh công nghi p hoá ch t và

ượ d ẩ c ph m.

ườ ượ ử ụ ể ả ấ ả Đ ng glucose đ c s d ng trong s n xu t bánh mì đ tăng kh năng lên men,

ể ễ ắ ễ ầ ệ ả ấ ỏ ộ ị tăng đ dai cho v bánh đ d c t, d c m bánh, c i thi n màu, mùi v và c u trúc

ố ủ ể ấ ọ bánh. Trong bánh ng t glucose giúp tăng th tích, c u trúc, tính cân đ i c a bánh.

ể ạ ộ ọ ị ượ ủ Glucose ki m soát đ ng t và v trong các lo i bánh bích quy, nó đ c ph lên trong

ướ ể ạ ề quá trình n ề ặ ng đ t o màu cho b m t và làm m m bánh.

ạ ấ ề ệ ạ ả ị Glucose cũng mang l ọ i c u trúc m m m i, v ng t di u và kh năng ch y t ả ố t

ạ ả ẩ ồ ệ cho các s n ph m kem và đ tráng mi ng l nh. Trong lên men bia glucose đ ượ ử c s

ư ơ ể ả ấ ả ổ ượ ụ d ng nh c ch t có kh năng lên men b sung đ làm gi m l ng cacbohydrate và

ạ ượ ấ ượ l ng calori trong các lo i bia năng l ng th p.

ượ ượ ử ụ ể ả ị Trong r u vang glucose đ c s d ng đ tăng kh năng lên men, tăng v và đ ộ

ạ ồ ố ấ ấ ả ẩ ọ ọ ộ ẩ ng t cho s n ph m. Trong các lo i đ u ng, glucose cung c p đ ng t, áp su t th m

ấ ộ ả ấ ộ ờ ị ể th u, nó cũng là ch t đ n giúp tăng v , ki m soát kh năng di đ ng và tăng th i gian

ả ạ ộ ồ ố ả b o qu n cho đ u ng d ng b t.

ấ ẹ ộ ề ấ ạ ả ả ộ ọ ẩ Trong s n xu t k o, glucose cung c p đ ng t, đ m m m i cho s n ph m

ệ ượ ể ờ ế ợ ế ồ đ ng th i giúp ki m soát hi n t ng k t tinh. K t h p glucose và saccharose giúp tăng

ệ ả ạ ắ ộ ở ệ ồ ờ ị ả v , c i thi n màu s c, đ bóng, tăng c m giác mát l nh ằ mi ng, đ ng th i cân b ng

ượ ộ ứ ụ ẹ ả ẩ ọ ộ ộ đ c đ ng t, đ dai, đ c ng cho s n ph m k o. Glucose cũng là ph gia lý t ưở ng

ờ ố ư ế ả ả cho quá trình đóng viên do tính ch y, kh năng k t dính cũng nh tách r i t t. Glucose

ộ ề ấ ạ ễ ắ ẹ ẻ ả ẩ ộ ọ ẻ cũng là ch t t o đ ng t, đ m m d o và d c t trong s n ph m k o d o.

ạ ồ ộ ư ướ ủ ồ ộ ứ ấ Trong các lo i đ h p nh n ạ c ch m, súp rau c , đ h p trái cây, m t, th ch

ả ượ ử ụ ộ ề ể ấ ấ ộ ọ ị qu , glucose đ ẩ c s d ng đ cung c p đ ng t và v , tăng đ b n và áp su t th m

ệ ấ ấ ượ ấ ả ỹ ủ ả ẩ th u, c i thi n c u trúc và ch t l ẩ ng th m m c a s n ph m. Glucose cũng tham gia

ơ ậ ư ạ ả ộ ẩ vào quá trình t o màu cho s n ph m nh xúc xích, b đ u ph ng…

ượ ử ụ ể ạ ề c s d ng đ truy n tĩnh m ch, hay đ ể Trong công nghi p d ệ ượ glucose đ c:

ượ ử ụ ệ ủ ư ả đóng viên. Nó cũng đ ấ c s d ng nh nguyên li u c a các quá trình lên men s n xu t

ữ ơ ầ các acid h u c , vitamine, kháng sinh, emzyme, acid amine, polysaccharide… Nhu c u

ấ ồ ệ ấ ự ả glucose cao nh t là trong lĩnh v c s n xu t c n ethanol nhiên li u.

ộ ứ ấ ướ ụ ự ễ ả ặ Đ c bi ệ ườ t đ ng glucose là m t ng d ng th c ti n trong s n xu t n ả c qu ,

ệ ượ ố ộ ả ằ ị ươ ị đây là nguyên li u đ c ph i tr n vào d ch qu nh m làm tăng h ng v và giúp cho

ấ ượ ẩ ạ ệ ả ơ ồ ờ ả s n ph m đ t ch t l ng tuy t h o h n đ ng th i nó cũng chính là nguyên nhân giúp

ấ ở ả ườ ế ế ẻ ơ ệ ạ h chi phí s n xu t b i vì đ ề ễ ng glucose là nguyên li u d ch bi n và r h n nhi u

ọ ớ ườ ẫ ườ ử ụ ằ so v i saccharose hay còn g i là đ ng kính mà ta v n th ng hay s d ng h ng ngày

ộ ố ả ế ế ư ệ ẩ trong gia đình cũng nh làm nguyên li u ch bi n m t s s n ph m khác trong công

ả ướ ự ứ ệ ẹ ẩ ả nghi p th c ph m: bánh k o, m t qu , n c gi i khát…

ườ ậ ườ ễ ấ ầ Glucose là ch t c n cho môi tr ng nuôi vi sinh v t, là đ ạ ng d lên men t o

ữ ơ ư ượ r u, acid acetic, acid lactic, acid h u c khác nh acid glutamic, acid citric.

3. Ngu n nguyên li u s n xu t đ

3.1.

ệ ả ấ ườ ồ ng

ộ ắ Tinh b t s n.

ấ ạ ừ ộ ắ ạ ộ ạ Tinh b t s n là m t lo i polysaccharide có c u t o t hai lo i glucan là amylose

(AM) và amylopectin (AP).

ồ ử ế ớ ằ + Amylose: g m 2001000 phân t glucose liên k t v i nhau b ng liên k t ế (cid:0) 1,4

ạ ạ ẳ ử ỗ ế ề ồ glucoside t o thành m ch th ng. Phân t ớ amylose g m nhi u chu i x p song song v i

ộ ạ ỗ ắ ố ứ ắ nhau, trong đó có các chu i cu n l ố ỗ i thành hình xo n c m i vòng xo n ch a 6 g c

ắ ạ ẽ ấ ụ ữ ư ẫ ặ glucose, I2 s h p th vào gi a vòng xo n t o màu xanh th m đ c tr ng. Phân t ử

ộ ầ ộ ầ ử ử amylose có m t đ u kh và m t đ u không kh .

ả ạ ấ Hình nh 1: C u trúc m ch Amylose

ử ạ ồ ồ + Amylopectin: g m 6006000 phân t glucose g m hai lo i liên k t ế (cid:0) 1,4

ấ ườ glucoside và (cid:0) 1,6 glucoside vì v y nó có c u trúc phân nhánh, th ậ ố ng có 2030 g c

ữ ể ử ử ề glucose gi a hai đi m phân nhánh. Phân t ầ ộ ầ amylopectin có m t đ u kh và nhi u đ u

ử ỉ ướ ộ ớ không kh . Amylopectin ch tan trong n ơ ị c nóng và cho dung d ch có đ nh t cao h n

amylose.

ả ấ ạ Hình nh 2: C u trúc m ch Amylopectin

ộ ắ ủ ế ể ả ướ ệ  N c ta ch y u dùng tinh b t s n làm nguyên li u chính đ s n xu t đ ấ ườ ng

glucose vì:

ệ ồ ữ ề ể ầ ắ ạ ặ S n có th thu ho ch quanh năm không c n nhi u chi phí cho vi c t n tr . M t

ả ượ ắ ạ ơ ơ khác s n cho s n l ế ng carbohydrate cao h n g o đ n 40% và cao h n ngô vàng 25%

ộ ẻ ề ơ ữ ụ ề ắ ồ ợ ị ệ ớ và là ngu n tinh b t r ti n. H n n a so v i các v mùa khác s n ch u đu c đi u ki n

ồ ệ ơ ắ ứ ượ ứ ồ ắ tr ng kh c nghi t h n nên đ p ng đ c ngu n cung ng cho nhà máy trong quá trình

ờ ắ ấ ồ ượ ộ ượ ả s n xu t. Đ ng th i s n có hàm l ng tinh b t cao và hàm l ấ ng các ch t khác nh ư

ấ ồ ưở ể ả ấ ộ ế protein và lipit th p do đó nó là ngu n lý t ng đ s n xu t tinh b t tinh khi t.

ộ ắ ủ ạ ặ ọ ộ Đ c tính quan tr ng c a tinh b t s n là không mùi, t o b t nhão trong và kh ả

ố ộ ắ ễ ộ ữ ặ ớ ế năng k t dính t t. nh ng đ c tính này giúp cho tinh b t s n d tr n v i các tác nhân

ươ ị ượ ễ ắ màu s c và h ộ ắ ng v . Tinh b t s n có hàm l ng amylopetin cao nên d hòa tan trong

0C h n các lo i tinh b t giàu amylose, do c u t o nhi u m ch nhánh c ng ồ

ấ ạ ề ạ ạ ơ ộ n ướ ở c 95

ướ ở ạ ế ả ề k nh nên không có xu h ng k t tinh tr l i và do đó có kh năng gi ữ ượ ướ ớ c n c l n. đ

ẩ ủ ộ ắ Tiêu chu n c a tinh b t s n:

 Nh ng tiêu chu n chung:

ữ ẩ

 An toàn và phù h p cho ng

ợ ườ ử ụ i s d ng.

 Không có mùi v khác th

ị ườ ạ ng và côn trùng gây h i.

ễ ẩ ị  Không b nhi m b n.

 Ch tiêu c m quan:

ả ỉ

C u trúc: b t màu tr ng, khô và m n.

ắ ấ ộ ị

Màu s c: đ ng đ u và đ c tr ng.

ư ề ặ ắ ồ

Mùi: có mùi t

ươ ố i và không có mùi m c và ôi.

ể ẩ ị Không b nhi m b n.

ọ ầ  Thành ph n hóa h c:

ộ ẩ Đ m: 7%

ượ ấ ộ ơ Hàm l ấ ng tinh b t: không th p h n 89,2% ch t khô.

ớ ơ Protein: không l n h n 0,8%.

ấ ớ ơ Ch t béo: không l n h n 0,15%.

ơ ớ Tro: không l n h n 0,15%.

ấ ớ ơ Các ch t hòa tan khác: không l n h n 0,1%.

ấ ớ ộ ơ ị Đ chua: không l n h n 30ml dung d ch NaOH 0,1N/100g ch t khô.

pH: 4.5 – 6.5.

 Ch tiêu sinh h c:

ọ ỉ

 Không có vi sinh v t gây b nh.

 Không có côn trùng gây h i.ạ

ệ ậ

3.2. H enzyme th y phân dùng trong s n xu t đ

ấ ườ ủ ệ ả ng glucose.

3.2.1. Amilase.

ệ  Khái ni m chung.

ữ ộ ượ ứ ơ ả ặ ụ ộ ệ Amilase là m t trong nh ng enzyme đ c ng d ng r ng rãi h n c , đ c bi t là

ự ẩ ệ trong công nghi p th c ph m.

ề ộ ọ ộ ồ ỷ Amilase là tên g i m t nhóm enzyme thu phân tinh b t, bao g m nhi u enzyme

ụ ề ệ ạ ặ ộ ị ộ khác nhau v tính đ c hi u tác d ng lên tinh b t (v trí khác nhau trên m ch tinh b t)

nh : ư (cid:0) amilase, (cid:0) amilase, (cid:0) amilase…

ế ậ ẩ ế ượ ả ấ ở ạ Ch ph m enzyme amilase kĩ thu t và tinh khi c s n xu t ặ ị d ng d ch đ c t đ

ộ ấ ồ ở ạ ộ ế có n ng đ ch t khô 50% hay d ng b t khô thô hay tinh khi t.

 Ph

ươ ấ ng pháp thu và nuôi c y amilase.

ươ ừ ưở ơ ả ắ ỏ Ph ng pháp thu amilase t canh tr ố ng r n hay l ng, trên c b n gi ng

ươ ừ ậ ph ng pháp chung thu enzyme t vi sinh v t.

ề ươ ể ử ụ ươ ề ặ ề V ph ng pháp nuôi, ta có th s d ng ph ng pháp b sâu hay b m t.

(cid:0) Đ c đi m

ặ ố ố ư ớ ể (cid:0) amilase n m m c là có pH t ấ ệ i u 4,7 4,9 v i Ca là nguyên li u

ạ ộ ể ả ấ ố ượ ủ tăng ho t đ ng c a enzyme này. (cid:0) amilase n m m c có kh năng chuy n đ c 80

ộ ố ụ ụ ộ ỉ ộ 82% tinh b t thành maltose, không tác d ng lên tinh b t s ng ch tác d ng lên tinh b t

ủ ả ạ ẩ ồ ị ả đã h hoá. Amilase c a vi khu n có kh năng d ch hoá cao (t o dextrin), kh năng

ườ ủ ư ư ể ấ ơ ị ượ ố đ ng hoá kém h n amilase c a n m m c, nh ng có u đi m là ch u đ c nhi ệ ộ t đ

Ở ậ ấ ấ ả ừ ẩ ấ cao (900C). Nh t hàng năm s n xu t 7000 t n amilase t ố vi khu n. Các n m m c

ề ợ ổ Asp. Awamori; Asp. Oryzae; Asp. Usami t ng h p nhi u Olygo16glucozidase thu ỷ

ủ ế ộ phân liên k t 16glucoside c a tinh b t.

3.2.2 Glucoamylase.

α γ ọ Glucoamylase ( 1,4glucanglucohydrolase) hay cũng g i là amilase.

ắ ứ ừ ả ơ ị ừ ầ ử ủ Glucoamylase có kh năng c t đ t t ng đ n v glucose t ộ đ u không kh c a tinh b t.

ể ạ ủ ạ ộ Khi th y phân tinh b t glucoamylase bên c nh glucose cũng có th t o ra

α ế ể ủ oligosaccharide. Glucoamylase cũng có th th y phân liên k t 1,6glucoside trong các

ả ắ oligo và polysaccharide. Ngoài ra glucoamylase cũng có kh năng phân c t glucogen,

ớ ạ amylopectin, dextrin gi ủ ế i h n, isomaltose và maltose đ n glucose. Glucoamylase c a

ố ớ ồ ộ ề ộ Aspergillus và Rhizopus có đ b n cao đ i v i n ng đ ion H+.

ấ ườ ế ả ẩ ừ 3.2.3 Ch ph m amilase trong s n xu t đ ng glucose t ộ . tinh b t

ừ ở ậ ượ ấ ằ ả ươ T năm 1960 Nh t, 100% glucose đ c s n xu t b ng ph ng pháp thu ỷ

Ở ướ ế ươ ậ phân enzyme. các n c tiên ti n khác, ph ng pháp dùng enzyme vi sinh v t trong

ự ượ ổ ế ố ợ ụ ệ ả lĩnh v c này cũng đã đ c áp d ng có hi u qu và ph bi n, hay ph i h p ph ươ ng

pháp acid và enzyme.

ủ ế ả ấ ậ ộ Trong s n xu t m t tinh b tglucose 2 enzyme ch y u là (cid:0) amilase và

ừ ấ ẩ ố glucoamilase t n m m c và vi khu n.

ể ị ạ ộ Enzyme (cid:0) amilase đ d ch hoá tinh b t và t o maltose còn glucoamilase dùng đ ể

ườ ế ả ấ ạ ẩ ượ ả đ ng hoá t o glucose, ch ph m amilase cho s n xu t glucose đ c s n xu t t ấ ừ vi

ế ẩ ườ ả khu n ẩ B. subtilis, B. mesentericus. Ch ph m glucoamilase th ng s n xu t t ấ ừ ấ n m

m c ố Asp. Niger; Asp. Awamori; Asp. Batatae; Rhizopus delamar; Mucor… hay t ừ ộ m t

3.3. N c.ướ

ố ấ s n m men Sacchromyce, Endomycoppis…

ả ứ ướ ủ ộ N c tham gia vào các ph n ng trong quá trình th y phân tinh b t. Do đó, yêu

ướ ộ ứ ấ ầ c u chung là n c có đ c ng càng th p càng t ố . t

ỉ ấ 3.4. Ch t ch nh pH.

ộ ạ ả ứ ủ ể ế ệ ẩ ả Đ các ch ph m enzyme xác tác ph n ng th y phân tinh b t đ t hi u qu cao,

ườ ấ ề ị ố ệ ầ ơ ỉ ị ủ ng i ta c n hi u ch nh pH dung d ch c ch t v giá tr t ấ i thích c a enzyme. Ch t

ụ ỉ ch nh pH thông d ng là NaOH 0,1N và HCl 0,1N.

3.5. Các nguyên li u khác.

ệ

 CaCl2 đ

ượ ể ổ ạ ị c dùng đ n đ nh ho t tính (cid:0) amylase.

 Than ho t tính đ

ạ ượ ử ụ ể ạ ị ườ c s d ng đ tinh s ch dung d ch đ ủ ng sau quá trình th y

ủ ả ệ ẩ ả ộ phân, c i thi n đ màu c a s n ph m.

 B tr l c diatomite đ

4. Quy trình công ngh . ệ

4.1.

ộ ợ ọ ượ ể ỗ ợ ọ c dùng đ h tr cho quá trình l c syrup.

ơ ồ ố S đ kh i.

4.2. Gi

ả i thích quy trình.

ề ẩ ộ ộ ị 4.2.1. Hòa b t (chu n b huy n phù tinh b t)

ụ ệ ẩ ằ ộ ồ ị ủ  M c đích công ngh : Chu n b cho quá trình h hóa nh m tăng đ phân tán c a

ề huy n phù.

 Các bi n đ i:

ế ổ

ổ ậ ế ộ ướ ạ ộ ượ Bi n đ i v t lý: khi cho tinh b t vào n c, các h t tinh b t không tan đ c trong

ướ ộ ố ử ướ ẽ ế ấ ạ n c. Tuy nhiên, m t s phân t c s khu ch tán vào bên trong c u trúc h t tinh n

ế ẫ ộ b t. D n đ n:

 Tăng th tích.

ể

ệ ệ ố ẫ  H s d n nhi t tăng.

 S khu ch tán c a các h t tinh b t tăng.

ủ ự ế ạ ộ

ế ụ ộ ộ ấ ầ ướ ể ổ Bi n đ i hóa lý: khi tinh b t h p ph m t ph n n c thì th tích tăng lên. Tuy

ể ế ự ề ẩ ổ ị nhiên, s t hay đ i này không đáng k n u quá trình chu n b huy n phù tinh b t đ ộ ượ c

ệ ở ự ệ ộ th c hi n nhi t đ phòng.

ộ ượ ạ ỏ ướ ộ ị ộ ấ  H t tinh b t h p thu m t l ng nh n ậ c m t cách thu n ngh ch (25

ướ ư ư ươ 50% n c) nh ng ch a tr ở ng n .

 Tr ng thái c a nguyên li u sau khu y tr n

ộ ở ạ ề ủ ệ ấ ạ d ng huy n phù.

 Tăng kh năng ti p xúc gi a h t tinh b t và n

ữ ạ ế ả ộ ướ c.

ế ổ ạ ủ ị ự ộ ổ ả Bi n đ i c m quan: s thay đ i tr ng thái c a d ch b t.

ụ ứ ộ ố ệ  Dùng thùng hòa tinh b t hình tr đ ng có các thông s công ngh :

(cid:0) Nhi

0C.

ệ ộ t đ : 4550

(cid:0) ố ộ ấ T c đ cánh khu y 20 vòng/phút.

(cid:0) ờ Th i gian: 3040 phút.

(cid:0) ộ ố ượ ặ ộ Tinh b t và n ướ ượ c đ c tr n theo t ỷ ệ l kh i l ng là 1:2 ho c 1:3. Ng ườ i

ẽ ướ ế ị ố ộ ướ ạ ộ ấ ớ ồ ta s cho n c vào thi t b ph i tr n tr c, sau đó cánh khu y ho t đ ng r i m i cho

ộ ừ ừ ế ị ể ư ấ ố ổ ị tinh b t t t vào thi ủ ỗ ỉ t b . Cu i cùng b sung ch t ch nh pH đ đ a giá tr pH c a h n

2+ v i hàmớ

ị ố ạ ộ ờ ổ ể ồ ợ h p vè giá tr t i thích đ amylase ho t đ ng xúc tác, đ ng th i b sung Ca

ể ổ ủ ạ ị ượ l ng 100 ppm đ n đ nh ho t tính c a enzyme.

ồ 4.2.2. H hóa.

 M c đích công ngh : Chu n b cho quá trình d ch hóa, các h t tinh b t hút n

ụ ệ ạ ẩ ộ ị ị ướ c

ươ ở ố ậ ợ ệ ề ạ ị và tr ng n t i đa t o đi u ki n thu n l i cho quá trình d ch hóa.

ế ổ ạ  Các lo i bi n đ i:

ổ ậ ế Bi n đ i v t lý:

 Đ nh t tăng c c đ i.

ự ạ ớ ộ

 H t tinh b t r

ộ ươ ạ ở ố ng n t i đa.

 Nhi

ệ ộ ủ ị t đ c a dung d ch tăng.

ồ ộ ấ  N ng đ ch t khô tăng.

ế ổ ọ Bi n đ i hóa h c:

 X y ra s hydrat hóa các nhóm hydroxyl t

ự ả ự ế do và hình thành liên k t

ớ ướ hydro v i n c.

ế ổ Bi n đ i hóa lý:

 H t tinh b t ti p t c h p thu n

ộ ế ụ ấ ạ ướ ệ ộ ả c, khi nhi t đ càng tăng thì kh năng

ướ ế ướ hút n c càng tăng, lên đ n 2500% n c.

 H chuy n s d ng huy n phù sang dung d ch nh t đ ng nh t.

ể ử ụ ớ ồ ề ệ ấ ị

ả  Tăng kh năng hòa tan.

ế ổ ọ Bi n đ i sinh h c:

 Vi sinh v t b c ch ho c tiêu di

ậ ị ứ ế ặ ệ t.

ế ắ ừ ụ ể ơ ổ ả Bi n đ i c m quan: màu s c t đ c chuy n sang trong h n.

ế ị ố Dùng thi ệ t b Henze cooker có thông s công ngh :

(cid:0) Nhi

ệ ộ ồ t đ h hóa: 52:64

(cid:0) ầ ờ ả Th i gian x : 20 phút/l n.

ị 4.2.3. D ch hóa.

 M c đích công ngh : Chu n b cho quá trình đ

ụ ệ ẩ ị ườ ng hóa.

 Các bi n đ i:

ế ổ

ế ổ ậ Bi n đ i v t lý:

 Đ nh t gi m.

ả ộ ớ

 Kh năng truy n nhi

ề ả ệ ướ ử ỏ ơ t tăng (do kích th c phân t nh h n).

ồ ộ ấ  N ng đ ch t khô tăng.

ế ổ Bi n đ i hóa h c ọ :

 H t tinh b t b phá tung, phá v các liên k t hydro gi a n

ộ ị ữ ướ ế ạ ỡ ợ c và các s i

tinh b t.ộ

 Ph n ng Maillard gi a đ

ả ứ ữ ườ ẩ ạ ả ng và acid amine t o ra s n ph m có màu.

ộ ạ ủ ữ ề ạ ầ ộ ạ  Th y phân m t ph n tinh b t t o nh ng m ch dextrin có chi u dài m ch

ắ ơ ng n h n,

ế ổ Bi n đ i hóa lý:

 S b c h i n

ự ố ơ ướ c tăng.

 Kh năng hòa tan c a tinh b t tăng.

ủ ả ộ

ế ổ Bi n đ i hóa sinh :

 Enzym amylase ho t đ ng c t các m ch amylose và amylopectin thành

α ạ ộ ạ ắ

ắ ả ạ các dextrin m ch ng n có kh năng hòa tan .

ế ọ ổ Bi n đ i sinh h c:

 Vi sinh v t b c ch ho c tiêu di

ậ ị ứ ế ặ ệ t

 Thi

ế ị ệ ớ ố t b : Henze cooker v i các thông s công ngh :

(cid:0) Nhi

ệ ộ t đ : 105

(cid:0) pH: 66.5

(cid:0) Hàm l

ượ ế ẩ ượ ộ α ng ch ph m enzym amylase: 0.250.3% l ng tinh b t khô

(cid:0) Chú ý: Quá trình d ch hóa ti n hành đ n hàm l

ế ế ị ượ ườ ử ạ ng đ ng kh đ t 1015% DE.

4.2.4. Làm ngu i.ộ

 M c đích công ngh : chu n b cho quá trình đ

ụ ệ ẩ ị ườ ề ạ ố ng hóa, t o đi u kiên t i thích

ườ cho enzyme glucoamylase trong quá trình đ ế ng hóa ti p theo.

 Các bi n đ i:

ế ổ

ổ ậ ế ệ ộ ả Bi n đ i v t lý : nhi t đ gi m.

ế ổ ể Các bi n đ i khác không đáng k .

 Dùng thi

ế ị ổ ệ ạ ớ ỏ ạ t b trao đ i nhi t d ng bán m ng v i nhi ệ ộ ượ t đ đ ố c h xu ng còn

55600C.

ườ 4.2.5. Đ ng hóa .

 M c đích công ngh :

ụ ệ

 Khai thác: T o thành syrup có thành ph n ch y u là glucose, các đ

ủ ế ầ ạ ườ ơ ng đ n

ạ ắ và các dextrin m ch ng n.

 Các bi n đ i:

ế ổ

ế ổ ậ Bi n đ i v t lý:

 Đ nh t c a dung d ch s gi m d n theo th i gian th y phân.

ẽ ả ớ ủ ủ ầ ộ ờ ị

 Tăng kh năng truy n nhi

ề ả ệ ủ ị t c a dung d ch.

 Tăng hàm l

ượ ấ ượ ướ ng ch t khô do hàm l ng n ả c gi m.

ế ổ ọ Bi n đ i hóa h c:

ả ứ ủ ắ ẩ ả ị ạ  Ph n ng th y phân c t dextrin m ch dài (s n ph m sau quá trình d ch

ẩ ả ườ ả ơ hóa) thành s n ph m chính là glucose, các đ ạ ng đ n gi n khác và dextrin m ch

ng n…ắ

 Ph n ng Maillard t o thành các ch t màu làm s m màu d ch th y phân.

ả ứ ủ ạ ẫ ấ ị

ế ổ Bi n đ i hóa lý:

 Tăng kh năng hòa tan c a dung d ch.

ủ ả ị

ế ổ Bi n đ i hóa sinh:

 Có t

ươ ờ ủ ồ ng tác đ ng th i c a enzyme (cid:0) amylase và glucoamylase lên các

ợ ả ạ ẩ ạ ồ ỗ m ch polysaccharide và oligosaccharide t o h n h p s n ph m g m maltose, glucose,

ạ ộ ề ớ triose và các oligosaccharide khác. Trong đó, glucoamylase ho t đ ng v i đi u ki n t ệ ố i

ư ế ạ ẫ ơ thích còn (cid:0) amylase v n ho t đ ng nh ng ho t tính y u h n. ạ ộ

ế ệ ộ ườ ẽ ổ ẩ  Tùy theo ch ph m enzyme mà nhi t đ quá trình đ ng hóa s thay đ i. Nhi ệ t

0C.

ổ ế ệ ộ ườ đ đ ng hóa ph bi n hi n nay là 5560

ượ ử ụ ờ ườ ạ  Tùy theo ho t tính và hàm l ng enzyme s d ng mà th i gian đ ng hóa có

ể ừ ờ ế ụ ờ ờ ườ th kéo dài t vài gi đ n hàng ch c gi . Tuy nhiên th i gian đ ng hóa không

ượ v t quá 48 gi ờ .

(cid:0) ị ườ ằ ả pH dung d ch đ ng hóa n m trong kho ng 5.05.5.

(cid:0) ượ ượ L ng enzyme: 2000 U/kg hàm l ấ ng ch t khô.

4.2.6. Làm s chạ .

ườ ử ụ ể ạ ạ ộ ị Ng i ta s d ng than ho t tính đ làm s ch dung d ch tinh b t sau khi đ ườ ng

hóa.

ọ ạ ụ ệ ấ ị ẩ  M c đích công ngh : chu n b cho quá trình l c t p ch t.

ổ ủ ủ ế ế ế ệ ấ ả ổ ộ  Các bi n đ i c a nguyên li u: ch y u x y ra bi n đ i hóa lý, ch t màu và m t

ẫ ủ ẽ ấ ủ ụ ạ ấ ị ố ạ s t p ch t trong d ch th y phân s h p ph trong mao d n c a các than ho t tính.

 Thi

ế ị ệ ế ị ụ ứ ố t b và thông s công ngh : thi ạ t b có d ng hình tr đ ng, bên trong có

ể ề ấ ớ ỏ ệ ượ ạ cánh khu y, bên ngoài là l p v áo đ đi u nhi t. hàm l ử ụ ng than ho t tính s d ng

0C, th iờ

ượ ủ ấ ị ệ ộ ử ỉ ấ x p x 0,75% l ng ch t khô trong dung d ch th y phân. Nhi t đ x lý là 70

ử ả ườ ẽ ề ẩ ạ ị gian x lý kho ng 2530 phút. Ng ớ ồ i ta s chu n b huy n phù than ho t tính v i n ng

ề ạ ổ ị ị ủ ộ đ 15%, sau đó b sung dung d ch huy n phù than ho t tính này vào dung d ch th y

0C.

ượ ệ phân đã đ c gia nhi ế t lên đ n 70

4.2.7. L cọ .

 M c đích công ngh : khai thác, chu n b cho quá trình cô đ c.

ụ ệ ặ ẩ ị

 Các bi n đ i:

ế ổ

ổ ậ ế Bi n đ i v t lý:

 Kh i l

ố ượ ị ng dung d ch.

 T tr ng thay đ i.

ỷ ọ ổ

 H s truy n nhi

ệ ố ề ệ t.

ể ổ Bi n đ i hóa lý:

ự ạ ả ồ ấ  X y ra s phân riêng hai pha: pha phân tán bao g m các h t than đã h p

ộ ố ạ ấ ị ẫ ụ ụ ấ ị ị ph các ch t màu và m t s t p ch t b l n trong dung d ch. Pha liên t c là d ch đ ườ ng

ượ ạ đã đ c làm s ch.

 Thi

ế ị ệ ố t b và thông s công ngh :

ườ ườ ế ị ọ ả ả ớ Thông th ng, ng ử ụ i ta s d ng thi t b l c khung b n v i màng v i có ph ủ

ộ ớ ộ ợ ọ m t l p b t tr l c diatomite.

ườ ể ư ệ ơ ế ị ọ ộ ọ ố Ng i ta dùng b m đ đ a nguyên li u vào thi ộ t b l c. T c đ l c dao đ ng

2.gi

ả ọ ế ườ ổ trong kho ng 200400L/m ạ i ta th i không khí s ch .ờ Khi quá trình l c k t thúc, ng

ế ị ể ậ ầ ọ ị ệ ộ ả vào thi t b đ t n thu ph n d ch l c còn sót trong bã. Nhi ị t đ dung d ch kho ng 55

ượ ệ ấ thi thu đ ấ ọ c hi u su t l c cao nh t.

ổ 4.2.8. Trao đ i ion.

 M c đích: Quá trình trao đ i ion có th tách đ

ụ ể ổ ượ ấ c 95% ch t khoáng, 70% các

ứ ấ ơ ấ ợ h p ch t có ch a nit và 80% ch t màu có trong syrup.

 Chu n b cho quá trình cô đ c.

ặ ẩ ị

 Tách các ion và h p th đ

ụ ượ ấ ấ ữ ơ ữ ợ c nh ng h p ch t h u c khác.

 Các bi n đ i: Các t p ch t tích đi n trong d ch th y phân s th ch các anion

ẽ ế ủ ệ ế ấ ạ ổ ỗ ị

ữ ự ạ ế ị ổ trên nh ng h t nh a trong thi t b trao đ i ion. Sau khi qua ộ c t cationit, pH syrup s ẽ

ả ấ ấ ố ượ ẽ ộ gi m xu ng r t th p (pH 2,0). Tuy nhiên, khi syrup đ c qua c t anionit, pH s tăng

ơ ặ lên 5,0 ho c cao h n.

ế ẽ ế ổ ọ ỗ ố Bi n đ i hóa h c: các anion và cation s khu ch tán qua các l ổ x p và trao đ i

ệ ớ ả ấ ắ ion v i ch t r n đi n gi i.

 Trao đ i cation

+ ho c Na ặ

+. Tuy nhiên, nên l a ch n H

+ vì

ổ ệ ự ọ : ion làm vi c là H

ượ ả ể có th tách đ c c ion Na

ơ ế Mn+ + nHR  MRn + nH+ C ch :

Trong đó:

+, Ca+, Mg+, Cu2+, Fe3+, Fe2+,

ư ị Mn+: Là các ion trong dung d ch nh là Na

Al3+…

ấ ữ ơ ữ ệ ươ ị Là nh ng ch t h u c mang đi n tích d ng trong dung d ch.

ứ ự ạ ổ ợ HR: là các lo i nh a polymer t ng h p không tan có ch a nhóm sulfonic,

ố ị ự ể ễ ầ carboxylic hay phenolic. (R là bi u di n ph n anion c đ nh trong nh a).

 Trao đ i anion

ho c OHặ

ổ ệ : ion làm vi c là Cl

ơ ế mRNH3OH + Am  (RNH3)m – A + mOH C ch :

H+ + OH  H2O

Trong đó:

2, NO3 4

…

ữ ư ị Am: Là nh ng anion trong dung d ch nh là SO

ấ ữ ơ ữ ệ ị Là nh ng ch t h u c mang đi n tích âm trong dung d ch.

ự ạ ứ RNH3 – OH hay RNH3 – Cl: là các lo i nh a polimer không tan có ch a

+ là bi u di n ph n cation c đ nh ầ 3

ể ổ ố ị ễ ể nhóm amin và các anion đ trao đ i. (RNH

trong nh a).ự

 Thi

ế ị ử ụ ứ ầ ượ ộ t b : S d ng hai c t ch a l n l t cationit và anionit.

(cid:0) Nguyên lý ho t đ ng:

ạ ộ

Dung d ch s đ

ẽ ượ ị ạ ổ ộ c cho đi qua c t trao đ i anion. T i đây, các anion s b ẽ ị

ộ gi ữ ạ l i trên c t.

Dung d ch ti p t c đi qua c t trao đ i cation. T i đây, các cation s b gi

ế ụ ạ ổ ộ ị ẽ ị ữ

ử ế ả ể ữ ạ l i. Ti n hành r a gi i đ tách nh ng ion.

ả ế ệ ổ ộ Sau quá trình trao đ i ion ph i ti n hành tái sinh ion làm vi c trên c t

ữ ộ ị ợ ằ b ng cách ngâm c t vào nh ng dung d ch thích h p.

ệ ố  Thông s công ngh :

ế ờ Th i gian ti n hành : 20 – 25 phút.

0C.

ệ ộ ế Nhi t đ ti n hành: 70 – 75

ề ườ ả ấ ổ ỗ ộ Chi u cao và đ ẽ ng kính c t trao đ i ion s do m i hãng s n xu t quy

ị đ nh.

ượ ả ế ử ấ ộ ng ch t đã bão hòa trên c t thì ta ph i ti n hành r a gi ả i Chú ý: Khi l

ồ ư ể ạ ơ ị ị ộ c t và h i l u dung d ch đi ra đ dung d ch s ch h n.

ặ 4.2.9. Cô đ c chân không.

 M c đích công ngh : quá trình cô đ c chân không s tách b t n

ớ ướ ụ ệ ẽ ặ c và làm tăng

ủ ấ ộ ờ ị ưỡ ủ ồ n ng đ ch t khô c a syrup. Nh đó, giá tr dinh d ệ ẽ ng c a syrup s gia tăng và vi c

ộ ườ ể ố ồ ồ ờ ơ ễ ậ v n chuy n và phân ph i syrup d dàng h n. Đ ng th i, n ng đ đ ứ ng cao làm c

ậ ợ ế ậ ệ ủ ụ ệ ả ả ch vi sinh v t thu n l i cho vi c b o qu n. M c đích công ngh c a quá trình này là

khai thác và hoàn thi n.ệ

ế ệ ổ ủ  Các bi n đ i c a nguyên li u:

ế ổ ậ Bi n đ i v t lý:

ủ ẽ ầ ặ ồ ộ ấ  Trong quá trình cô đ c, n ng đ ch t khô c a syrup s tăng d n, do đó t ỷ

ẽ ộ ọ ớ ủ tr ng và đ nh t c a nó s gia tăng.

 Kh i l

ố ượ ố ượ ả ộ ướ ấ ng gi m do m t đi m t kh i l ng n c.

ế ự ố ơ ướ ả ộ ố ấ ơ ố ổ Bi n đ i hóa lý : x y ra s b c h i n ế c và lôi cu n bay h i m t s ch t mùi. N u

ẻ ị ẫ ụ syrup còn l n các protein hòa tan thì chúng có th b đông t .

ư ượ ế ế ặ ổ ạ ỏ Bi n đ i hóa h c ọ : n u các acid amine ho c petide ch a đ c lo i b hhoanf toàn

ạ ướ ớ ườ ẽ trong quá trình tinh s ch tr c đó thì chúng s cùng v i đ ả ứ ng tham gia ph n ng

ị ậ maillar là cho syrup b s m màu.

Thi

ế ị ể ế ệ ượ ấ ủ ụ ả ặ t b cô đ c: đ ti t ki m năng l ệ ố ng, các nhà s n xu t s d ng h th ng

ề ấ ườ ừ ế ấ chân không nhi u c p, thông th ng t 3 đ n 7 c p. Khi đó h i n ơ ướ ẽ ượ ư c s đ c đ a vào

ể ệ ế ị ấ ứ ồ ơ ừ ế ị ấ ể ệ đ gia nhi t thi t b c p 1, r i dùng h i th phát sinh t thi t b c p 1 đ gia nhi t cho

ế ị ấ ư ế ế ế ị ệ ấ ứ ừ ố ơ thi t b c p 2…và nh th cho đ n thi t b gia nhi t c p cu i cùng. H i th t thi ế ị t b

ệ ấ ẽ ượ ố ệ ố ư ể ạ ẫ ụ ạ gia nhi t c p cu i cùng s đ c d n qua h th ng làm l nh đ ng ng t t o chân

ư ầ ờ ơ không. Ph n không khí ng ng t ụ ẽ ượ s đ c tháo ra ngoài nh b m chân không.

ệ ố  Thông s công ngh :

(cid:0) N ng đ sau khi cô đ c đ t đ

ặ ạ ượ ồ ộ c 3050%.

ấ ơ ố (cid:0) (cid:0) Áp su t h i đ t: 2kg/cm3.

(cid:0) Nhi

0C.

ệ ộ ặ t đ cô đ c: 6065

(cid:0) ặ ờ Th i gian cô đ c: 23 gi ờ .

(cid:0) Áp su t ch t không: 720 mmHg.

ấ ấ

4.2.10. Làm ngu iộ .

 M c đích: h nhi

ụ ạ ệ ộ ế ẩ ị ị t đ dung d ch chu n b cho quá trình k t tinh. Nhi ệ ộ t đ

0C xu ng còn 4045

0C.

ườ ả ừ ố đ ng glucose gi m t 6065

 Bi n đ i và thi

ế ổ ế ị ố ộ ở ầ ư t b gi ng nh làm ngu i ph n trên.

ế 4.2.11. K t tinh .

ượ ế ụ ượ ẩ ớ ế ắ ộ ị Sau khi đ c là ngu i dung d ch ti p t c đ ồ c t y tr ng r i m i k t tinh.

 M c đích công ngh : chu n b t o ra tinh th đ

ị ạ ể ườ ụ ệ ẩ ẩ ị ng và chu n b cho quá trình

ể ế ly tâm tách tinh th ti p theo.

 Các bi n đ i:

ế ổ

ổ ậ ế Bi n đ i v t lý:

 Quá trình k t tinh glucose là quá trình t a nhi

ế ỏ ệ ế t (1mol hydrat glucose k t

ỏ tinh t a ra 19,8 kJ).

ế ộ ẩ ế ể ạ ổ Bi n đ i hóa lý : k t tinh t o tinh th glucose có đ m cao.

ế ề ể ệ ậ ộ ổ ả Bi n đ i c m quan ế : tùy thu c vào đi u ki n k t tinh ta có th thu nh n đ ượ c

ệ ố ề ể ộ tinh th thu c nhi u h th ng khác nhau.

ố ệ  Các thông s công ngh :

(cid:0) ầ ấ ờ ớ ộ Th i gian khu y tr n v i m m là 1224 gi ờ .

(cid:0) Nhi

0C.

ệ ộ ế t đ k t tinh 24

(cid:0) ế ả ờ Th i gian k t tinh kho ng 100120 gi ờ .

(cid:0) Đ ng non m tr

ườ ẻ ướ ể ạ ể c đ l i là 1/3 th tích.

(cid:0) ộ ố ệ ấ ộ ộ ị ả T c đ gi m theo nhi ự ế ộ t đ theo m t ch đ nh t đ nh do th c

ự ệ nghi m xây d ng.

ườ ả ả ệ ộ ế Hình nh 3: Đ ng gi m nhi t đ k t tinh

— Đ ng gi m nhi

ườ ả ệ ộ ự ế ằ ầ ườ ưở t đ th c t n m g n đ ẳ ng th ng lý t ng.

ế ậ ả ạ ữ ậ — N u gi m quá ch m, trong m t còn l ể ớ i nh ng tinh th l n, sau đó chngs l ạ ớ i l n

ị ấ r t nhanh do đó b vàng.

— Ng

ượ ạ ế ệ ộ ả ề ể i n u nhi c l ả t đ gi m quá nhanh, nhi u tinh th bé khó li tâm, gi m

ấ ượ ả ẩ ượ ế ộ ế ủ ể ờ ch t l ng s n ph m. Nh c đi m c a ch đ k t tinh này là th i gian quá dài.

— Quá trình k t tinh k t thúc khi nhi

ế ế ệ ộ ấ ậ ơ ể t đ bao quanh tinh th (m t cái) th p h n

ộ ườ ế ể ố ị ồ n ng đ đ ư ng non (kh i dung d ch và các tinh th sau khi k t tinh xong ch a

ộ ế ủ ệ ly tâm) 12140Bx, đ tinh khi t c a chúng chênh l ch 911%.

ủ ế ỉ Các ch tiêu c a quá trình k t tinh

0Bx)

ộ ậ ế ồ N ng đ m t vào k t tinh ( 74.3 75.5 77 78

0C)

ế ậ ộ t m t vào (% kh i l ố ượ ng 91 93 84 85

ổ ầ

0C)

ố ượ ố

ớ ế

ậ

ướ khi ly tâm c

(cid:0) 48 50 30 43 44 100 120 62 63 78 80 88 90 24 25 4.2 4.3 1.15 1.2 48 50 30 35 43 44 220 265 65 67 68 71 ….. 27 28 4.2 4.3 2.9 1.4 ệ ố Đ tinh khi ấ ớ glucose so v i ch t khô) ệ ộ ậ Nhi t đ m t vào ( ượ ng m m b sung (% kh i l L ng) ộ ệ ộ t đ sau khi tr n v i gi ng cái ( Nhi ộ ờ Th i gian sau khi tr n đ n ly tâm (h) 0Bx) ộ ậ ồ N ng đ m t cái ( ậ ế ộ Đ tinh khi t m t nâu (%)m t 1 ế ậ ậ ắ ộ t m t tr ng (%)m t 2 Đ tinh khi t ệ đ đ ộ ườ Nhi ng non tr ườ ng non pH đ H s bão hòa

4.2.12. Ly tâm.

 M c đích: chu n b cho quá trình s y.

ụ ấ ẩ ị

 Các bi n đ i:

ế ổ

ế ổ Bi n đ i vât lý :

 Kh i l

ố ượ ả ị ng dung d ch gi m.

 T tr ng thay đ i.

ỷ ọ ổ

ế ượ ướ ợ ổ Bi n đ i hóa lý : tách l ng n ỏ ỗ c ra kh i h n h p.

ả ế ị Hình nh 4: Thi ọ t b ly tâm l c

ị ườ ế Sau quá trình ly tâm, dung d ch đ ng không k t tinh đ ượ ẽ ượ c s đ c đánh giá và

phân thành 2 lo i: ạ

ộ ế ố ượ ấ ớ ượ M t 1:ậ có đ tinh khi t là 7880% kh i l ng glucose so v i ch t khô, đ c pha

0Bx r i tr l ồ

ớ ướ ở ạ ườ loãng v i n ế c đ n 30 i quá trình đ ế ng hóa, sau đó ti n hành các quá

ư ế ệ trình ti p theo nh quy trình công ngh .

ộ ế ố ượ ấ ớ M t 2:ậ có đ tinh khi t là 8890% kh i l ng glucose so v i ch t khô.

ụ ả ẩ  Ngoài ra trong quy trình 2 còn có s n ph m ph là hydron.

ậ ỏ ủ ộ ố ơ ả ỉ ộ ấ Hydron là m t b c a nhà máy s n xu t glucose, ch có m t s n i dùng m t

ấ ỉ ườ ằ ả ả ẩ ượ ể ượ l ể ng r t ít đ ch nh lí đ ng non s n ph m II nh m gi m l ng tinh th trong

ườ đ ng non.

ầ ủ ư Thành ph n c a nó nh sau:

(cid:0) N ng đ ch t khô 66°Bx ộ ấ

ồ

(cid:0) RS 6872%

(cid:0) Tro 56%

(cid:0) pH 4,04,2

(cid:0) Không ch a t p ch t vô c . ơ ứ ạ

ấ

ư ạ ơ ộ ỷ ậ Trong hydron còn h n 20% glucose t o thành khi thu phân tinh b t nh ng t n

ượ ế ự ế ế ậ thu l ng glucose đó không kinh t nên th c t không ti n hành quá trình t n thu.

ượ ứ ủ ế ụ ư ệ Hydron đ c ng d ng ch y u trong các ngành công nghi p nh : làm môi

ấ ơ ử ế ề ấ ả ấ ườ r ộ ng đi u ch các ch t kháng sinh, thu c da, làm ch t kh trong s n xu t t nhân

ộ ượ ứ ể ỗ ỏ ợ ạ t o, làm th c ăn gia súc h n h p… Chúng có th dùng m t l ng nh trong quá trình

lên men r u.ượ

ề V n đấ Quy trình 1

ơ ầ

ả ấ Quy trình s n xu t ụ Quá trình ki mể soát ít nghiêm ặ ơ ng t h n. ượ Quy trình 2 ể ứ ạ Ph c t p h n: c n ki m soát nghiêm ằ ệ ố ặ ơ ng t h n vè thông s công ngh nh m ế ị ứ t b , đáp ng các hàm đa m c tiêu (thi năng l ng, kinh t …)

ấ ấ ế Cao h nơ ề thi ơ Th p h n ơ Th p h n Cao h n do chi phí nhi u cho thi ế ị t b .

ơ ơ ổ ấ ề Cao h nơ ngượ Chi phí năng l ầ ư ế ị Đ u t t b ồ ả ấ ệ Hi u su t thu h i s n ph mẩ

ồ ư

ấ ượ ả ẩ ầ ở ư ạ ạ Ch t l ng s n ph m Kém h nơ

ấ Th p h n do t n th t nhi u trong quá trình. ố ơ ả T t h n do có quá trình h i l u s n ẩ ph m ch a đ t yêu c u gia đo n ly tâm.

ễ ườ ậ ụ ậ ỏ ơ Ô nhi m môi tr ng ơ ề Nhi u h n Ít h n do t n d ng m t b hydron.

ấ ạ 4.2.13. S y và phân lo i.

ộ ẩ ụ ằ ự ườ ư ườ ệ ấ M c đích công ngh : s y nh m tách đ m t do có trong đ ng, đ a đ ng v ề

ượ ả ố ẩ ấ ạ đ t hàm l ả ng m b o qu n t t nh t.

ổ ế Các bi n đ i:

ế ổ ậ Bi n đ i v t lý:

 Kh i l

ố ượ ả ng gi m.

 Th tích gi m.

ể ả

ế ổ ọ Bi n đ i hóa h c:

ồ ộ ấ  N ng đ ch t khô tăng.

ế ổ Bi n đ i hóa lý:

 Tách đ m t

ộ ẩ ự ộ ẩ ế ế ậ do còn đ m liên k t 89% (theo lý thuy t glucose ng m

ướ ấ ấ ỏ ơ ộ ẩ ộ ẩ ư ế ể ả n c có đ m 9.09%, nh ng trong s n xu t s y đ n đ m nh h n đ glucose

ụ ả ả ị không b vón c c trong quá trình b o qu n).

Thi

ế ị ấ ế ị ấ ầ t b s y: thi t b s y t ng sôi.

ệ ố  Thông s công ngh :

(cid:0) ấ ẻ Công su t máy: 80120 kg/m

3/h

(cid:0) ượ ư ủ ạ L ng gió l u thông c a qu t: 4723 m

(cid:0) Áp l c t

ự ố ủ ạ i đa c a qu t hút : 9590 Pa

(cid:0) Áp l c c a h i nóng: 0.40.6 Mpa

ự ủ ơ

(cid:0) Nhi

0C (đi u ch nh đ

ệ ộ ề ỉ ượ t đ khí vào: 6110 c)

ượ ạ ướ ằ ấ  Sau khi s y glucose đ c phân lo i theo kích th ệ ố c b ng h th ng sàng.

ườ ụ ề ấ ạ Th c t ự ế ướ n ế c ta glucose sau khi s y qua giai đo n nghi n. Đ ng c c trên sàng chi m

ả ườ ồ ư ớ ườ ể kho ng 10% th ng đem đi hòa tan, cho h i l u v i đ ng thô (cũng có th đem

ẽ ả ớ ả ấ ự ư ề ệ ả ẩ ẩ ộ nghi n tr n v i s n ph m, nh ng ch t l ong s n ph m s gi m đi rõ r t).

ẩ ả 4.2.14. S n ph m.

Mô t

ả ả ể ề ắ ẩ ả ả ẩ ờ s n ph m glucose: S n ph m glucose ph i tr ng, tinh th đ u, khô, r i,

ạ ộ ế ễ ướ ượ ả không có mùi l , đ tinh khi t cao, d hòa tan trong n ả c. Đ c b o qu n trong bao bì

ọ ủ ể ơ ạ PE (Polyethylene) hay l ẻ th y tinh, kín s ch đ n i mát m .

 Các ch tiêu s n ph m:

ẩ ả ỉ

(cid:0) 9.0

ế ộ ẩ ộ t (DE) (cid:0)

(cid:0) 99.7 0.1 0.004

ạ ặ ơ Không cho phép

Đ m (%) Đ tinh khi Tro (%) ố ắ Mu i s t Các acid vô c , kim lo i n ng và ạ ấ t p ch t. ộ Đ acid (ml) ộ ị Đ m n ộ Đ trong < 0.1 < 3 < 4

ƯƠ ƯƠ Ẩ Ả Ể CH NG 2: CÁC PH Ỉ NG PHÁP KI M TRA CH TIÊU S N PH M THEO

Ẩ Ệ TIÊU CHU N VI T NAM.

I. L Y M U.

ượ Ấ ệ ự Ẫ Đ c th c hi n theo TCVN 4837 : 2009

ụ ạ 1. Ph m vi áp d ng

ệ ấ ề ế ẫ ẩ ị ệ Tiêu chu n này quy đ nh các đi u ki n chung liên quan đ n vi c l y m u đ ể

ấ ượ ủ ẩ ả ườ ạ ạ ườ đánh giá ch t l ng c a các s n ph m đ ng d ng h t và đ ng viên.

ữ ậ ị 2. Thu t ng và đ nh nghĩa

ử ụ ữ ậ ẩ ị Trong tiêu chu n này s d ng các thu t ng và đ nh nghĩa sau:

2.1. Lô hàng (lot)

ượ ườ ượ ừ ề ể ậ ồ L ng đ ng đ ặ c th a nh n có các đ c đi m đ ng đ u, đ ượ ấ ừ ộ m t c l y t

ế ượ ấ ượ ể chuy n hàng và đ c dùng đ đánh giá ch t l ng.

ẫ ầ 2.2. M u ban đ u (increment)

ẫ M u riêng

ượ ườ ấ ạ ể ở ộ ề ặ ộ ị L ng đ ng l y t ờ i m t th i đi m m t ho c nhi u v trí khác nhau t ừ ơ đ n

ặ ừ ố ớ ườ ộ ị v bao gói ho c t ề băng chuy n (đ i v i đ ầ ể ạ ng không bao gói) đ t o thành m t ph n

ẫ ủ c a m u chung.

ẫ 2.3. M u chung (bulk sample)

ượ ườ ượ ầ ừ ộ ề ẫ ằ ộ ộ L ng đ ng thu đ c b ng cách g p và tr n đ u các m u ban đ u t m t lô

ị xác đ nh.

ử ệ ẫ 2.4. M u phòng th nghi m (laboratory sample)

ượ ườ ượ ấ ừ ẫ ặ ể ể ể L ng đ ng đ c l y ra t m u chung, dùng đ phân tích ho c đ ki m tra.

ầ 3. Yêu c u chung

ả ượ ẫ ườ ạ ệ ủ ặ ượ ấ ấ M u ph i đ c ng i đ i di n c a bên mua và bên bán l y ho c đ c l y do

ườ ủ ng i c a hai bên giám sát.

ủ ố ượ ầ ấ ả ạ ệ ẫ ầ ẫ ộ M u ph i đ i di n cho lô hàng. C n l y đ s l ng m u ban đ u và tr n k ỹ

ể ế ể ằ ặ ẫ ằ ượ đ có m u chung và b ng cách chia liên ti p ho c b ng cách khác đ thu đ ẫ c m u

ệ ử phòng th nghi m.

ẫ ượ ử ụ ầ ấ ụ ẩ ả ẫ ợ ụ ấ D ng c l y m u đ ầ ớ ả c s d ng ph i phù h p v i s n ph m c n l y m u. C n

ả ằ ể ả ấ ả ả ạ ụ ấ ụ ẫ chú ý đ đ m b o r ng t t c các d ng c l y m u ph i s ch, khô và không có mùi

.ạ l

ả ế ệ ấ ẩ ừ ự ễ ẫ Vi c l y m u ph i ti n hành sao cho tránh s nhi m b n t ư ư bên ngoài nh m a,

ụ ấ ụ ứ ẫ ậ ẫ ẫ ụ b i. v.v… vào m u, các d ng c l y m u và các v t ch a m u.

ấ ầ ẫ 4. L y m u ban đ u.

ố ớ ườ ạ 4.1. Đ i v i đ ạ ng d ng h t đóng bao.

ầ ừ ộ ấ ị ườ ẫ L y các m u ban đ u t m t hay hai v trí khác nhau trong bao đ ng đ ượ c

ể ấ ố ượ ớ ọ ử ụ ỏ ơ ể ấ ẫ ch n đ l y m u, v i khgđ i l ẫ ng không nh h n 25 g. S d ng xiên đ l y m u

ố ớ ầ ấ ầ ả ườ ự ban đ u. Đ i v i bao v i không màng lót c n dùng xiên l y đ ả ế ng tr c ti p qua v i

ố ớ ặ ấ ấ ở ệ ấ bao, còn đ i v i bao có màng lót PE hay gi y ho c bao gi y thì l y sau khi m mi ng

bao.

ố ớ ườ 4.2. Đ i v i đ ng viên đóng bao

ể ấ ầ ừ ỗ ẫ ượ ố ượ ọ Dùng thìa đ l y các m u ban đ u t m i bao đ ớ c ch n v i kh i l ng không

ỏ ơ nh h n 200 g.

ố ớ ườ 4.3. Đ i v i đ ng không đóng bao

ể ấ ố ượ ỏ ơ ẫ Dùng các c c đ l y các l ề ng m u không nh h n 100 g trên băng chuy n

ỡ ườ ặ ừ ử ứ ữ ề ả ờ ho c khi d đ ng t ằ c a hay băng chuy n ra. C sau nh ng kho ng th i gian b ng

ữ ượ ườ ỏ ơ ư ấ ẫ ố ấ nhau thì l y nh ng l ng đ ng nh nhau vào c c và l y không nh h n 10 m u ban

đ u.ầ

ố ớ ươ ứ ể ẩ ậ 4.4. Đ i v i bao bì th ng ph m ch a trong bao bì v n chuy n.

ả ị ỉ Xác đ nh các ch tiêu c m quan và lý – hóa.

ừ ỗ ể ậ ượ ể ấ ấ ọ ươ T m i bao bì v n chuy n đ ẫ c ch n đ l y m u, l y hai bao bì th ẩ ng ph m

ố ượ ộ ơ ị ớ ố ượ ả ị ừ ở có kh i l ặ ng t nh kho ng 0,5 kg ho c m t đ n v v i kh i l ị ng t nh t 1 kg tr lên,

ố ượ ặ ỏ ừ ữ ế ả ị ho c 10 gói nh có kh i l ng t nh kho ng 5 g đ n 20 g. T nh ng bao bì th ươ ng

ế ầ ặ ẩ ấ ấ ẫ ph m đã l y, ti n hành l y các m u ban đ u theo 4.1 ho c 4.2.

ố ượ ị Xác đ nh kh i l ị ng t nh.

ừ ỗ ể ậ ượ ể ấ ẫ ấ ọ ố T m i bao bì v n chuy n đ c ch n đ l y m u, l y b n bao bì th ươ ng

ố ượ ẩ ặ ả ị ươ ẩ ph m có kh i l ng t nh kho ng 0,5 kg ho c hai bao bì th ng ph m có kh i l ố ượ ng

ừ ở ố ượ ườ ặ ỏ ế ả ị ị t nh t 1 kg tr lên, ho c m i gói nh kh i l ng t nh kho ng 5 g đ n 20 g. T ừ

ữ ươ ế ấ ẫ ầ ặ ẩ ấ nh ng bao bì th ng ph m đã l y, ti n hành l y các m u ban đ u theo 4.1 ho c 4.2.

ỷ ệ ạ ụ ườ ị Xác đ nh t l h t v n trong đ . ng viên

ừ ỗ ể ậ ượ ể ấ ấ ọ ươ T m i bao bì v n chuy n đ ẫ c ch n đ l y m u, l y hai bao bì th ẩ ng ph m

ố ượ ế ặ ộ ị ươ ố ượ ẩ có kh i l ng t nh đ n 0,5 kg ho c m t bao bì th ng ph m có kh i l ị ng t nh t ừ 1

ừ ữ ở ươ ế ẫ ấ ầ ấ ẩ kg tr lên. T nh ng bao bì th ng ph m đã l y, ti n hành l y các m u ban đ u theo

4.2.

ậ ẫ 5. L p m u chung

ẫ ượ ậ ầ ẫ ằ ộ ộ ỹ M u chung đ c l p b ng cách g p và tr n k các m u ban đ u. Kh i l ố ượ ng

ẫ ượ ố ớ ườ ỏ ơ ắ ườ ủ c a m u chung không đ c nh h n 1,0 kg đ i v i đ ng cát tr ng, đ ệ ng tinh luy n,

ườ ố ớ ườ ườ ườ đ ỏ ơ ng thô và không nh h n 2,0 kg đ i v i đ ng viên. Tr ợ ng h p đ ự ng đ ng

ố ượ ố ượ ế ả ị ỏ trong gói nh có kh i l ng t nh kho ng 5 g đ n 20 g thì cho phép kh i l ẫ ng m u

chung là 0,5 kg.

ử ệ ậ ẫ 6. L p m u phòng th nghi m

ẫ ượ ố ượ ử ề ệ ẫ Chia m u chung thu đ c thành nhi u m u th nghi m theo s l ầ ng yêu c u

ặ ằ ụ ụ ụ ố ằ b ng cách chia theo hình nón sau đó chia b n ho c b ng d ng c chuyên d ng.

ố ượ ầ ấ ử ể ệ ể ẫ ẫ ọ S l ng m u phòng th nghi m c n l y đ phân tích và đ làm m u tr ng tài

ượ ậ ủ ự ỏ ặ ồ ợ ị ẫ ư (m u l u) đ c quy đ nh trong h p đ ng ho c theo s th a thu n c a các bên có liên

quan.

7. Bao gói và ghi nhãn

7.1. Bao gói m uẫ

ả ượ ệ ẫ ụ ậ ớ ợ ử M u phòng th nghi m ph i đ ứ c bao gói trong v t ch a phù h p v i m c đích

ử ệ ủ c a phép th nghi m.

ộ ẩ ử ệ ể ả ặ ầ ẫ ị M u dùng đ xác đ nh đ m ho c các th nghi m khác mà c n ph i tránh s ự

ả ượ ụ ơ ứ ẩ ậ ấ hao h t các ch t bay h i ph i đ c bao gói trong các v t ch a cách m, ví d l ụ ọ ủ th y

ạ ượ ả ậ ả ợ tinh có nút mài hay bao bì PE khô, s ch, kín và đ ứ c b o qu n thích h p. Các v t ch a

ả ượ ổ ầ ả ượ ph i đ c đ đ y hoàn toàn và ph i đ c hàn kín.

ả ượ ứ ườ ấ ấ ẫ ậ Bao gói và các v t ch a khác ph i đ c ng i l y m u đóng d u niêm phong.

ủ ẫ 7.2. Nhãn c a m u

ấ ượ ế ả ằ ớ ợ ấ N u dùng nhãn b ng gi y thì chúng ph i có ch t l ụ ng cao, phù h p v i m c

ử ụ ế ườ ộ ẩ ặ ả ẩ ố ệ đích s d ng. N u đ ng có đ m cao thì ph i dùng nhãn ch ng m đ c bi t.

ế ả ượ ự ế ẽ ặ Thông tin vi t trên nhãn ho c tr c ti p trên bao s ph i đ ấ ằ c đánh b ng d u

ượ ử ụ ễ ẫ ấ ẩ không t y xóa đ c, s d ng d u mà không thôi mi n mùi vào m u.

ầ ủ ợ ư ồ ồ ộ Thông tin trên nhãn bao g m các n i dung theo yêu c u c a h p đ ng nh sau:

ố ả ẩ ồ a) Ngu n g c s n ph m;

ể ấ b) Đi m xu t phát;

ế ể ậ ị ể c) Ngày tháng và đ a đi m nh n (n u có th );

ơ ử ế d) N i g i đ n;

e) Ngày đ n;ế

ố ượ ạ ặ ờ ồ f) D ng r i ho c bao gói (bao g m s l ng bao gói);

ạ g) Lo i hàng hóa;

ậ ấ ế ặ ố ệ h) D u hi u nh n bi t ho c s lô hàng;

ố ợ ồ ồ ợ i) S h p đ ng và ngày ký h p đ ng;

ẫ ấ j) Ngày l y m u;

ỡ ố k) Ngày d hàng cu i cùng;

ơ ấ ể ẫ ẫ ấ l) N i l y m u và đi m l y m u;

ạ ụ ụ ấ ẫ m) Lo i d ng c l y m u;

ủ ườ ấ ẫ n) Tên c a ng i l y m u;

ẫ ấ o) Lý do l y m u;

ố ượ ượ ấ p) S l ẫ ng m u kép đ c l y.

ử ẫ 8. G i m u

ả ượ ử ệ ẫ ố ể ặ ờ ử M u phòng th nghi m ph i đ ớ c g i đi s m càng t t ho c theo th i đi m đã

ượ ả ượ ể ẫ ợ ồ ị ả ả ượ đ c xác đ nh trong h p đ ng. Khi có th , m u ph i đ c b o qu n và đ ậ c v n

ể ở ệ ộ ự ế ợ chuy n nhi ắ t đ thích h p, tránh ánh n ng tr c ti p và không đ ể ở ơ ẩ ướ n i m t.

ẫ ấ 9. Báo cáo l y m u

ủ ườ ế ạ ầ ấ ẫ ượ ấ ề ậ Báo cáo l y m u c n đ c p đ n tình tr ng c a đ ng đ ẫ c l y m u, các k ỹ

ậ ấ ử ụ ế ậ ẫ ớ ị ả ỹ thu t l y m u đã s d ng, n u k thu t đó khác v i quy đ nh mô t ẩ trong tiêu chu n

ể ả ọ ưở ớ ệ ấ ẫ ố này và m i tình hu ng có th gây nh h ng t i vi c l y m u

II. CÁC CH TIÊU C M QUAN C A Đ

Ủ Ả Ỉ ƯỜ NG GLUCOSE.

ượ ệ ị ự 1. Xác đ nh mùi. Đ c th c hi n theo TCVN 1696:87.

ườ ọ ủ ệ ắ ộ ườ ế Cho đ ẫ ng m u vào l th y tinh nút nh m, mi ng r ng sao cho đ ả ng chi m kho ng

ọ ể ạ ậ ộ ờ ở ể ¾ th tích l . Đ y nút đ yên trong phòng thoáng, s ch trong m t gi sau đó m nút và

ế ả ti n hành c m quan ngay mùi.

ị ượ ự ệ ị Xác đ nh v . Đ c th c hi n theo TCVN 1696:87.

ườ ẫ ướ ấ ồ ị Cân 25 g đ ng m u hòa tan trông 100 ml n ị c c t r i xác đ nh v .

ượ ự ộ ạ ị 3. Xác đ nh đ trong và t p ch t l ệ ấ ạ. Đ c th c hi n theo TCVN 1696:87

ườ ẫ ướ ấ ủ Cân 50 g đ ng m u, hòa tan trong 100 ml n ấ c c t nóng, dùng đũa th y tinh khu y

0C. Để

ị ườ ủ ế ồ ệ ộ ề đ u. sau đó đem đun dung d ch đ ng trên n i cách th y đ n nhi t đ 80 90

ị ườ ệ ộ ấ ạ ồ dung d ch đ ộ ế ng ngu i đ n nhi ư ụ ộ t đ phòng r i quan sát đ trong và t p ch t nh b i

ủ ườ ợ ẫ than, s i bao c a đ ng m u.

ươ ầ ỡ ạ ượ ự ệ ị 4. Ph ng pháp xác đ nh thành ph n c h t. Đ c th c hi n theo TCVN

4838:1989.

ắ ươ 4.1. Nguyên t c ph ng pháp.

ầ ầ ạ ị ượ ẫ Xác đ nh thành ph n các ph n h t thu đ c khi sàng m u trên các sàng có kích

th ướ ỗ c l ị xác đ nh.

ế 4.2. Ti n hành th ử.

ấ ẫ L y m u theo TCVN 48372009.

ầ ố ầ ừ ướ C n b trí các sàng theo kích th ướ ỗ c l tăng d n t d i lên,

ẫ ườ ặ ộ ả ề Cân (100 ± 0,1)g m u đ ẫ ng và r i đ u lên sàng trên cùng. Đ t b sàng có m u

ầ ố ử ộ ỳ ủ th vào máy sàng và sàng trong vòng 5 10 phút tu theo t n s dao đ ng c a

ầ ạ ừ máy. Sau khi sàng xong, thu riêng các ph n còn l ớ i trên t ng sàng và đem cân v i

ố sai s không quá 0,1g.

ạ ụ ổ ộ ớ ạ ọ ầ Dùng ch i quét các h t v n bám ở ỗ l sàng và đem g p v i ph n h t l t qua d ướ i

sàng.

ử ế ả 4.3. X lý k t qu

ầ ủ ằ ầ ạ ượ ứ ị + Thành ph n c a ph n h t (X), tính b ng %, đ c xác đ nh theo công th c:

Trong đó:

ố ượ ử ẫ ằ m kh i l ng m u th , tính b ng gam;

ố ượ ủ ạ ầ ằ ng c a ph n h t, tính b ng gam; m1 kh i l

ế ổ ố ượ ủ ấ ả ố ượ ớ ạ ầ + N u t ng kh i l ng c a t t c các ph n h t sai khác v i kh i l ủ ng c a

ạ ượ ử ố ệ ầ ả ẫ ỉ m u th (100g), thì ph i hi u ch nh sai s đó vào ph n h t đ ề c tách ra nhi u

nh t. ấ

ả ử ả ủ ộ ế ầ ị ế + K t qu th là trung bình c ng các k t qu c a hai l n xác đ nh song song.

Ủ Ỉ ƯỜ III. CÁC CH TIÊU LÝHÓA C A Đ NG GLUCOSE.

ấ ạ ị ướ ượ ệ Xác đ nh t p ch t không tan trong n ự c. Đ c th c hi n theo

TCVN 7273 : 2003.

ẩ ị ươ ọ Tiêu chu n này quy đ nh ph ủ ng pháp l c qua màng c a Hibbert và Phillipson

ể ượ ấ ị đ xác đ nh hàm l ng ch t không tan trong n ướ ủ ườ c c a đ ng.

ườ ệ ượ ướ ọ ọ ử Đ ng th nghi m đ c hòa tan trong n c nóng và l c qua màng l c có c l ỡ ỗ

ấ ọ ượ ử ạ 8.0 (cid:0) m. Màng l c và ch t không tan gi ữ ạ l i trên màng đ ấ c r a s ch, s y khô và cân.

ượ ấ ượ ừ ố ượ ầ ủ Hàm l ng ch t không tan đ c tính t ph n kh i l ng tăng thêm c a màng

l c.ọ

ế 1.1. Cách ti n hành

ọ ướ ỡ ỗ ọ ườ ị ướ L c 5 lít n c qua màng l c có c l là 8.0 (cid:0) m đ ng kính ẩ Chu n b n c:

ị ư ướ ẩ ọ ượ ắ ệ ố ầ ọ 50mm đã chu n b nh d i. Sau khi l c đ c 500 ml đ u tiên, ng t h th ng l c chân

ế ụ ọ ổ ỏ ề không. Dùng 500 ml này tráng đ u bên trong bình và đ b . Ti p t c l c 4.5 lít còn l ạ i.

ẽ ượ ử ụ ướ ấ ả ầ ừ ử ẩ ọ ị N c này s đ c s d ng cho t t c các yêu c u t r a màng l c, chu n b dung

ẫ ị ườ ấ ả ọ ầ ử ố ế ị ọ ị d ch m u, l c dung d ch đ ng, r a màng l c l n cu i. T t c các thi t b (bình, que

ộ ẹ ắ ướ ấ ả ượ ướ ướ khu y, b k p, rây có m t l i) ph i đ c tráng trong n ọ c đã l c tr ế c khi ti n hành

ti p.ế

ẩ ử ọ ướ ấ ị ằ ọ R a màng l c b ng cách ngâm trong n c c t sôi trong 6 Chu n b màng l c:

ế ướ ư ể ừ ỏ ọ ộ phút; cho thoát h t n ộ ẹ c d kh i màng l c và dùng b k p chuy n t ng cái m t sang

ạ các đĩa Petri s ch, khô.

ủ ậ ắ ấ ọ S y màng l c trong các đĩa c a chúng mà không đ y n p trong 1 gi ờ ở nhi ệ ộ t đ

oC đ n 65 ế

oC trong t

ủ ấ ắ ạ ậ 60ừ t ấ s y. Sau khi s y, đ y n p l ộ i và làm ngu i 30 phút trong

ạ ố ượ ủ ế ẩ bình hút m. Ghi l i kh i l ộ ng c a màng đã làm ngu i chính xác đ n 0.1 mg.

ẩ ự ế ẫ ị ị ằ ẫ Cân 1000 g ± 1 g m u tr c ti p cho vào bình b ng Chu n b dung d ch m u:

ặ ượ ọ ỉ ị ớ ạ ể ả ế ẫ ế thép không g . N u khó l c, ho c l ẫ ng m u b gi i h n thì m u có th gi m đ n 500

ể ị ả ỏ ơ ặ ộ ượ ẫ ả g ± 1 g ho c nh h n. Đ chính xác có th b gi m khi l ng m u gi m.

oC vào trong bình đ n th tích cu i cùng kho ng ả ể

ướ ấ ả ế ố Thêm n c c t nóng kho ng 95

oC:

ế ấ ằ ả ấ ằ ỗ ợ ỉ 1800 ml. Khu y h n h p b ng que khu y b ng thép không g và đun đ n kho ng 95

ế ụ ế ườ ượ ấ ti p t c khu y đ n khi t ấ ả ượ t c l ng đ ng đã đ c hòa tan.

ả ế ị ể ể ẩ ồ Chú thích – Dùng v i lau khô thi ễ t b có th là ngu n nhi m b n nguy hi m. Vì

ế ề ọ ấ ả ế ị ả ượ ỹ ằ ướ ấ th , đi u quan tr ng là t t c các thi t b ph i đ c tráng k b ng n c c t ngay

ướ ử ụ ư ượ ằ ả tr c khi s d ng nh ng không đ c lau khô b ng v i.

ọ ị ườ ể ẩ ọ ằ Làm m màng l c đã cân b ng cách di chuy n nó trong L c dung d ch đ ng:

ướ ấ ỡ ộ ọ ẩ ặ ọ ị n c c t trên đĩa Petri. Đ t màng l c đã m vào trong giá đ b l c và cho dung d ch

ườ ọ ướ ấ ậ ẩ ấ ả đ ng nóng qua màng l c d i áp su t gi m. Tráng c n th n bình và que khu y trong

ỡ ộ ọ ằ ướ ử ụ ể ả ấ ổ giá đ b l c b ng n c c t nóng. S d ng t ng th tích kho ng 1000 ml n ướ ấ c c t

ể ử ượ ỡ ộ ọ ọ ấ nóng đ r a ch t không tan đ c gi ữ ạ l i và màng l c trong giá đ b l c.

ượ ử ể ể Chú thích – Không đ ọ c đ không khí qua màng l c sau khi r a, vì có th có

ộ ượ ể ạ ớ m t l ng l n các h t trong khí quy n.

ọ ầ ử ậ ấ ẩ ặ ọ ỏ ỡ ố C n th n l y màng l c ra kh i giá đ và đ t trên rây R a màng l c l n cu i:

ỗ ườ ỡ ỗ ả ướ ỗ ể (rây có l vuông, đ ng kính 20 cm, c l kho ng 0.4 mm) t, có l vuông, đ trong

ả kho ng 1 gi ờ .

ầ ử ạ ấ ở ạ ư ố ọ ọ Sau l n r a l i cu i cùng đ a màng l c tr l i đĩa Petri S y và cân màng l c:

ủ ậ ắ ầ ấ ủ ấ ban đ u c a nó. S y khô đĩa không đ y n p trong t s y trong 1 gi ờ ở nhi ệ ộ ừ t đ t

oC. Đ y n p l ậ

ắ ạ ẩ ộ 60oC đ n 65 ế i và làm ngu i đĩa trong 30 phút trong bình hút m. Cân l ạ i

ế ọ màng l c chính xác đ n 0.1 mg.

ệ ử ọ ầ ả ủ ố ả ệ ưở ủ ế ộ Hi u qu c a vi c r a màng l c l n cu i nh h ế ng ch y u đ n đ chính xác

ể ượ ử ề ể ằ ả ố ủ c a phép th . Đi u này có th đ ỉ c ki m tra b ng cách th nh tho ng phun thu c th ử

ử ụ ắ ạ d ng phun dùng cho s c ký 1 naphthol/axit phosphoric lên màng, sau khi s d ng, và

oC. Màng l c ph i không có b t k v t b t màu tím nào.

ệ ấ ỳ ế ắ ả ọ nâng nhi ế t lên đ n 105

ị ế ể ả 1.2. Bi u th k t qu

ượ ủ ấ ườ ượ ể ng ch t không tan c a đ ng đ ị ằ c bi u th b ng miligam Tính toán: Hàm l

ẫ ượ ấ ư ủ c a ch t không tan trên kilogam m u đ c tính nh sau:

ấ Ch t không tan (mg/kg) =

Trong đó

ố ượ ủ ằ ọ m1 là kh i l ng c a màng l c (6.2), tính b ng gam;

ố ượ ủ ấ ằ ọ m2 là kh i l ng c a màng l c + ch t không tan (6.6), tính b ng gam;

ố ượ ể ử ẫ ấ ủ ằ m0 là kh i l ng c a m u l y đ th (6.3), tính b ng gam.

ị ế ể ế ả Bi u th k t qu chính xác đ n mg/kg.

ụ ộ ộ ặ ạ ậ ỏ ộ Đ l p l i và đ tái t p là không th a mãn trong các phép th ử Đ ch m:

ệ ượ ử ệ ế ế nghi m công tác đ c ti n hành năm 1996. Các phép th nghi m ti p theo trên các

ủ ườ ẫ ấ ấ ượ ư ế m u đã “bi n tính” c a đ ng có ch t không tan th p đ ồ c l u ý do tính không đ ng

ấ ủ ườ ườ ấ nh t c a ch t không tan th ặ ng có m t trong đ ng.

ượ ượ ự ị 2. Xác đ nh hàm l ệ ng tro. Đ c th c hi n theo TCVN 1696:87

ụ ố ử ụ 2.1. D ng c và thu c th .

ế ộ Cân phân tích có đ chính xác đ n 0,1 mg.

Bát s ứ (cid:0) 100mm.

ứ ạ Chén s lo i 50mm.

Lò nung.

Axit sunfuric H2SO4 d = 1,84 g/cm3.

ế ử 2.2. Ti n hành th .

ạ ườ ừ ườ ườ ề ạ Tùy theo tùng lo i đ ng mà cân t 10 – 20g đ ng (đ ấ ng có nhi u t p ch t

ầ ườ ế ồ thì c n 10g, đ ng tinh khi ứ (cid:0) t cân 20g) r i cho vào bát s 100mm, sau đó cho vào bát

ỗ ầ ừ ộ ượ ế ể m i l n t 0,5 đ n 1 ml axit sunfuric. Toàn b l ng axit sunfuric dùng đ than hóa

ườ đ ng là 4 – 5ml.

ệ ế ặ ố ườ Đ t bát lên b p đi n đ t nóng t ừ ừ t cho đ ng trong bát than hóa. Sau khi than

ộ ượ ể ứ ứ ế hóa xong chuy n toàn b l ng than trên bát s vào chén s (đã nung đ n kh i l ố ượ ng

ấ ọ ứ ặ ứ ạ ổ ế không đ i) dùng gi y l c không tàn lau s ch bát s cho vào chén s , đ t chén lên b p

ấ ọ ế ồ ệ ể ế đi n đ cho gi y l c bên trong ch n cháy h t r i cho vào lò nung. Nâng t ừ ừ t nhi ệ ộ t đ

lò lên 5500C.

ể ấ ộ ọ ặ L y chén ra đ ngu i và thêm vài gi t axit sunfuric (H ế 2SO4) đ t chén lên b p

0C trong kho ng 1 – 2

ế ụ ể ố ế ệ ở ệ ộ ả ế đi n đ đ t cho đ n h t khói và ti p t c nung nhi t đ 800

ờ ẩ ấ ờ ế ụ gi ộ . L y chén ra làm ngu i trong bình hút m 1 gi và cân. Sau đó ti p t c nung ở

0C trong 30 phút, làm ngu i và l

ệ ộ ạ ế ụ ư ậ ế nhi t đó 800 ố i cân. Ti p t c làm nh v y đ n kh i

ổ ượ l ng không đ i.

ế ả 2.3. Tính toán k t qu .

ượ ượ ứ ị Hàm l ng tro (X ằ 7) tính b ng % đ ằ c xác đ nh b ng công th c:

Trong đó:

(cid:0) G kh i l

ố ượ ằ ng tro, tính b ng g.

(cid:0) G’ kh i l

ố ượ ử ằ ẫ ng m u th , tính b ng g.

(cid:0) ố ữ ầ ị Sai s gi a hai l n xác đ nh song song không đ ượ ượ c v t quá 0,001%.

ộ ẩ ị 3. Xác đ nh đ m.

ộ ẩ ị ượ ượ ự ệ ấ 3.1. Xác đ nh đ m và hàm l ng ch t khô. Đ c th c hi n theo TCVN

4839:1989.

ắ ươ ẫ ấ ườ ố ượ ế Nguyên t c ph ng pháp: S y m u đ ng đ n kh i l ổ ng không đ i

ề ị ệ trong đi u ki n qui đ nh.

ặ ộ ấ ở ắ ứ ế ẫ Ti n hành th : ử Đ t h p s y không ch a m u đã m n p vào trong t ủ ấ s y

ượ ố ồ ấ ể ắ ậ đã đ ẩ c đ t nóng, đ trong 30 phút r i l y ra, đ y n p và cho vào bình hút m

ệ ế ầ ớ ộ ấ ệ ộ ớ cùng v i nhi t k . C n đeo găng tay khi thao tác v i h p s y. Khi nhi t đ trong

ẩ ằ ệ ộ ộ ấ ớ ộ bình hút m b ng nhi t đ phòng thì mang h p s y ra và cân v i đ chính xác ±

0,1 mg.

ẫ ườ ộ ấ ạ ậ ắ Cho 10 30 g m u đ ấ ng vào h p s y s ch đã s y khô, đ y kín n p và cân

ế ớ ộ v i đ chính xác đ n ± 0,1 mg.

Chú thích:

ườ ủ ộ ấ ấ ượ ườ ỳ 1. Tu theo đ ng kính c a h p s y đem dùng mà l y l ng đ ng t ươ ng

ứ ớ ườ ng sao cho l p đ ng dày không quá 10 mm;

ầ ượ ườ ỏ ướ ề 2. Đ ng viên c n đ c nghi n nh tr ử c khi th .

ẫ ồ ặ ộ ấ ở ắ ứ ủ ấ ạ M n p h p s y có ch a m u r i đ t vào trong t s y s ch không có ch t l ấ ạ và

0C trong 3 gi

ệ ộ ờ ộ ạ ậ ắ ấ ể ấ ở s y nhi t đ 105 . Sau khi s y xong đ y n p h p l ộ i, đ ngu i

ế ẩ ệ ộ ế ụ ớ ộ trong bình hút m đ n nhi t đ phòng và ti p t c mang ra cân v i đ chính xác

ố ượ ế ả ủ ổ ế ầ đ n ± 0,1 mg. Kh i l ệ ng coi là không đ i khi sai l ch k t qu c a hai l n cân

ế ượ liên ti p không v t quá 0,001 g.

ướ ộ ộ ấ ỗ ầ ể ầ ẩ Tr c m i l n cân c n đ ngu i h p s y trong bình hút m.

ử ả ế X lý k t qu

ộ ẩ  Đ m (W)

ứ ị Tính theo %, xác đ nh theo công th c:

Trong đó:

ố ượ ộ ấ ứ ẫ ướ ng h p s y có ch a m u tr ấ c khi s y, g; m1 kh i l

ố ượ ộ ấ ứ ẫ ấ ng h p s y có ch a m u sau khi s y, g; m2 kh i l

ố ượ ộ ấ ng h p s y, g. m0 – kh i l

ữ ệ ế ầ ị Ti n hành hai xác đ nh song song mà sai l ch cho phép gi a hai l n xác

ị ượ đ nh đó không v t quá 20%.

ế ượ ầ ả K t qu thu đ ế c làm tròn đ n ph n trăm.

 Hàm l

ượ ấ ng ch t khô (X)

ứ ị Tính theo %, xác đ nh theo công th c X = 100 W

ộ ẩ Trong đó: W Đ m, tính theo %.

ộ ẩ ượ ệ ị ự 3.2. Xác đ nh đ m. Đ c th c hi n theo TCVN 7963: 2008.

ươ ự ệ Có ba ph ng pháp th c hi n:

ươ ấ ở ấ ườ ố ượ ế ổ a) Ph ng pháp I: s y áp su t th ng đ n kh i l ng không đ i (ph ươ ng

ọ pháp tr ng tài).

ươ ố ượ ế ấ ổ b) Ph ng pháp II: s y chân không đ n kh i l ng không đ i.

ươ ư c) Ph ữ ơ ấ ớ ng pháp III: Ch ng c t v i dung môi h u c .

ươ ấ ở ấ ườ ố ượ ế ổ ph ngươ 3.2.1. Ph ng pháp I S y áp su t th ng đ n kh i l ng không đ i (

pháp chu nẩ )

oC và cân

ẫ ấ ệ ộ ủ ấ ở s y áp su t không khí, nhi t đ 105 ấ Nguyên t c: ắ S y m u trong t

ố ượ ổ ế đ n kh i l ng không đ i.

ị ẫ ẩ ẫ ấ ế ấ ẩ ẫ ị ẫ Ti n hành l y m u và chu n b m u theo TCVN L y m u và chu n b m u:

4837 : 2009.

ế ế ẫ ả ộ ấ Cân kho ng 5 g đ n 7 g m u, chính xác đ n 1 mg vào h p s y ế Cách ti n hành:

oC đ n kh i ố ế

ứ ủ ế ả ộ ch a kho ng 10 g đ n 15 g cát và m t đũa th y tinh đã đ ượ ấ ở c s y 105

oC trong 3 h.

ấ ở ề ộ ổ ớ ệ ộ ượ l ẫ ng không đ i. Tr n đ u m u v i cát sau đó đem s y nhi t đ 105

ắ ạ ứ ấ ậ ộ ẩ ộ ẫ L y h p ch a m u ra, đ y n p l i và làm ngu i trong bình hút m trong 30 phút và

ế ụ ấ ế ượ ố ượ đem cân. Ti p t c s y và cân cho đ n khi thu đ c kh i l ệ ổ ng không đ i (chênh l ch

ỗ ầ ấ ả ủ ế ế ầ ớ ờ ơ ế k t qu c a hai l n cân liên ti p không l n h n 2 mg), th i gian m i l n s y ti p theo

là 30 phút.

ị ế ể ộ ẩ ể ầ ẫ ủ ả Đ m c a m u th , ị ằ ử X1, bi u th b ng ph n trăm Tính và bi u th k t qu :

ố ượ ượ ứ kh i l ng, đ c tính theo công th c:

X1 = (1)

Trong đó:

ố ượ ẫ ộ ướ ấ ằ m1 là kh i l ng h p và m u tr c khi s y, tính b ng gam (g);

ố ượ ằ ẫ ấ ộ m2 là kh i l ng h p và m u sau khi s y, tính b ng gam (g);

ố ượ ằ ẫ m là kh i l ng m u, tính b ng gam (g).

ả ữ ế ệ ế ấ ầ ờ ồ ị Chênh l ch k t qu gi a hai l n xác đ nh đ ng th i là ± 0,01 %. L y k t qu ả

ế chính xác đ n 0,01 %.

ươ ố ượ ế ấ 3.2.2. Ph ng pháp II: s y chân không đ n kh i l ổ ng không đ i

oC, áp su t chân

ẫ ệ ộ ấ ủ ấ ở s y nhi t đ không quá 70 ấ Nguyên t c: ắ S y m u trong t

ế ượ ố ượ ổ không và cân cho đ n khi thu đ c kh i l ng không đ i.

ị ẫ ế ẩ ẫ ấ Ti n hành l y m u và chu n b m u, theo TCVN 4837:2009.

ừ ế ế ẫ Cân t 2 g đ n 5 g m u khô, chính xác đ n 1 mg, cho vào đĩa ế Cách ti n hành:

ứ ế ấ ẳ ủ ấ ở ệ ộ ẫ đáy ph ng. Cân đĩa ch a m u và ti n hành s y trong t s y 2 h nhi t đ không quá

ố ấ ướ ấ 70 oC (t t nh t 60 °C), d i áp su t không quá 6,7 kPa (50 mmHg). Trong quá trình

ượ ằ ấ ẩ ấ s y, cho dòng không khí [đã đ c làm khô b ng cách cho qua ch t hút m] đi qua đ ể

ạ ỏ ơ ướ ắ ạ ứ ẫ ậ ấ ẩ ộ lo i b h i n c. L y đĩa ch a m u ra, đ y n p l i và làm ngu i trong bình hút m và

ế ụ ấ ế ượ ố ượ đem cân. Ti p t c s y và cân cho đ n khi thu đ c kh i l ệ ổ ng không đ i (chênh l ch

ỗ ầ ấ ả ủ ế ế ầ ớ ờ ơ ế k t qu c a 2 l n cân liên ti p không l n h n 2 mg), th i gian m i l n s y ti p theo là

1 h.

ị ế ể ộ ẩ ể ẫ ầ ủ ả Đ m c a m u th , ị ằ ử X2, bi u th b ng ph n trăm Tính và bi u th k t qu :

ố ượ ượ ứ kh i l ng, đ c tính theo công th c:

X2 = (2)

Trong đó.

ố ượ ẫ ướ ấ ằ m1 là kh i l ng đĩa và m u tr c khi s y, tính b ng gam (g);

ố ượ ằ ẫ m2 là kh i l ấ ng đĩa và m u sau khi s y, tính b ng gam (g);

ố ượ ằ ẫ m là kh i l ng m u, tính b ng gam (g).

ả ữ ệ ế ế ầ ấ ồ ờ ị Chênh l ch k t qu gi a hai l n xác đ nh đ ng th i là ± 0,01 %. L y k t qu ả

ế chính xác đ n 0,01 %.

ươ ấ ớ ữ ơ ư 3.2.3. Ph ng pháp III: Ch ng c t v i dung môi h u c

ữ ơ ư ẫ ấ ị ượ ng n ướ c ử ớ Nguyên t c: ắ Ch ng c t m u th v i dung môi h u c và xác đ nh l

ượ ố đ c lôi cu n theo dung môi.

ị ẫ ấ ẫ ẩ ế ấ ẫ ẩ ị ẫ Ti n hành l y m u và chu n b m u, theo TCVN L y m u và chu n b m u:

4837 : 2009.

ế ế ả ẫ : Cân kho ng 10 g đ n 15 g m u, chính xác đ n 1 mg cho vào ế Cách ti n hành

ư ủ ấ ạ ế ị ứ ặ bình ch ng c t khô, s ch c a thi t b DeanStark có ch a toluen ho c xylen, thêm

ộ ư ế ế ả ắ ấ ặ ư toluen ho c xylen vào bình đ n kho ng 200 ml, l p b ch ng c t và ti n hành ch ng

ặ ố ơ ố ướ ư ụ ố ướ ấ c t. Toluen (ho c xylen) b c h i cu n theo n c và ng ng t trong ng tách n c có

ầ ấ ớ ố ộ ậ ắ ạ ế ụ ư ầ ấ ế kh c v ch. Lúc đ u c t v i t c đ ch m, sau đó tăng d n, ti p t c ch ng c t cho đ n

ướ ướ ữ ế ả ổ ể khi th tích n ố c trong ng tách n c không đ i (kho ng 3 h). N u có nh ng gi ọ t

ướ ặ ẩ ố ố n ặ ủ c dính trên ng sinh hàn thì dùng đũa th y tinh đ y xu ng ho c dùng toluen ho c

ộ ế ử ể ố ệ ộ ể ố ọ xylen r a xu ng. Đ ngu i đ n nhi t đ phòng và đ c th tích trong ng.

Ố 1 ng sinh hàn

Ố ướ ắ ạ 2 ng tách n c (có kh c v ch)

ư ấ 3 Bình ch ng c t

ả ế ị Hình nh 5: Thi t b DeanStark

ị ế ể ộ ẩ ể ẫ ầ ủ ả Đ m c a m u th , ị ằ ử X3, bi u th b ng ph n trăm Tính và bi u th k t qu :

ố ượ ứ kh i l ng, tính theo công th c:

X3 = (3)

Trong đó:

ướ ướ ắ ạ ằ ể V1 th tích n ố c có trong ng tách n c có kh c v ch, tính b ng mililit (ml);

ố ượ ủ ướ ụ ệ ộ ụ ụ d kh i l ng riêng c a n ộ c, ph thu c vào nhi t đ , tra theo Ph l c A, tính

ằ b ng gam trên mililit (g/ml);

ố ượ ằ ẫ m là kh i l ng m u, tính b ng gam (g).

ả ữ ế ệ ế ấ ầ ồ ờ ị Chênh l ch k t qu gi a hai l n xác đ nh đ ng th i là ± 0,01 %. L y k t qu ả

ế chính xác đ n 0,01 %.

ệ ử ệ ả Báo cáo th nghi m ph i ghi rõ: ử Báo cáo th nghi m:

ầ ọ ế ể ậ ế ầ ủ ề ẫ M i thông tin c n thi t đ nh n bi ử t đ y đ v m u th ;

ươ ử ụ ế ẫ ấ ế Ph ng pháp l y m u đã s d ng, n u bi t;

ươ ử ụ ử ệ ẩ ẫ Ph ng pháp th đã s d ng và vi n d n tiêu chu n này;

ọ ế ẩ ớ ị M i chi ti t thao tác không quy đ nh trong tiêu chu n này, cùng v i các chi ti ế t

ườ ể ả ưở ớ ế ấ b t th ng khác có th nh h ng t ả i k t qu .

0C trong vòng 3

ự ấ ố ượ ị ẫ ở ệ ộ 4. Xác đ nh s m t kh i l ấ ng khi s y m u nhi t đ 105

ượ ự ủ ệ gi ờ ươ ph ng pháp c a ICUMSA. Đ c th c hi n theo TCVN 6332:1997.

ử 4.1. M u thẫ

ượ ẫ ượ ố ớ ườ ơ ượ L ử ng m u th không đ c ít h n 10 g, riêng đ i v i đ ắ ng tr ng l ẫ ng m u

ử th là 20 g.

ế 4.2. Cách ti n hành

ơ ườ ạ Cân chính xác không ít h n 10 g đ ắ ng cho vào chén nhôm lo i nông, có n p

0C trong 3 gi

ấ ở ờ ấ ộ ậ đ y kín và s y 105 trong dòng không khí khô. L y ra, làm ngu i trong

ẩ ồ ạ ấ bình hút m có t m đ ng và cân l i.

ế ề 4.3. Chú thích v cách ti n hành

ế ườ ướ ớ ề ướ ấ N u đ ng có kích th ả c l n thì ph i nghi n tr c khi s y.

ị ế ể ả 4.4. Tính toán và bi u th k t qu

ố ượ ầ ứ ấ ấ Ph n trăm kh i l ng m t đi khi s y tính theo công th c:

ố ượ ố ượ ẫ ẫ ấ Kh i l ng m u (g) – Kh i l ng m u sau khi s y (g)

x 100

ố ượ Kh i l ẫ ng m u (g)

ươ ộ ụ ượ ự ệ ị 5. Ph ng pháp xác đ nh đ đ c. Đ c th c hi n theo TCVN 7269:2003.

ộ ấ ị ườ ế ướ ồ ụ ủ Đo đ h p th c a dung d ch đ ng glucose đã bi c n ng đ t tr ộ ở ướ b c sóng

ộ ấ ụ ủ ọ ọ ị ổ 420 nm sau khi đã l c qua màng l c và đu i khí. Đo đ h p th c a cùng dung d ch đó

ư ượ ọ ổ ở ướ ộ ấ ừ ụ ch a đ c l c, đã đu i khí cùng b c sóng 420 nm. T các đ h p th này có th ể

ượ ộ ụ ủ ị tính đ c đ đ c c a dung d ch.

ế 5.1.Cách ti n hành :

ướ ấ ể ỉ ổ ề ị Dùng n c c t đ ch nh máy đo quang ph v giá tr zero ở ướ b c sóng 420 nm

ỉ ẫ ủ ể ạ ế ạ ấ ả theo ch d n c a nhà s n xu t. Chú ý sao cho các cuvet s ch và không đ l i v t ngón

tay.

ẫ ườ ỏ ố Cân chính xác 100g m u đ ng cho vào c c có m 300 ml.

ướ ấ ượ ố ượ Cân 100g n ố c c t cho vào c c trên (tránh v t quá kh i l ng, nên cân n ướ c

ướ ồ vào bình tr ẫ c r i cho m u vào sau).

ụ ế ế ấ Khu y cho đ n tan h t (tránh s c khí).

ầ ằ ị Chia dung d ch thành hai ph n b ng nhau.

ắ ọ ọ ớ L p bình l c chân không dung tích 300ml v i màng l c xenlulo nitrat 0,45 μm.

ể ử ụ ợ ọ ủ Chú thích 2 – Có th s d ng màng s i l c th y tinh 0,5 μm đ l c s b tr ể ọ ơ ộ ướ c

ọ khi cho qua túi l c xenlulo nitrat 0,45 μm.

ế ầ ấ ầ ọ ộ ọ ị ị Ti n hành l c chân không m t trong hai ph n dung d ch. Thu l y ph n d ch l c.

ổ ử ụ ụ ế ạ ạ ơ ụ ằ N u máy đo quang ph s d ng là lo i chùm tia đ n thì làm s ch d ng c b ng

ướ ấ n c c t.

ử ế ằ ẫ ầ ỗ ọ ị ầ R a cuvet r ng 2 l n đ n 3 l n b ng dung d ch m u đã l c.

ẫ ằ ầ ọ ị Làm đ y cuvet 10cm b ng dung d ch m u đã l c.

ử ẫ ằ ộ Kh khí trong m u b ng m t trong hai cách sau:

ể ặ ẫ Ngâm cuvet m u trong b siêu âm trong 30 giây, ho c

ạ ượ ộ ấ ể ế ụ ổ ế ể ị Đ yên cho đ n khi đ t đ c đ h p th n đ nh. Có th đ n 10 phút.

ẫ ạ ọ Lau khô cuvet. Chú ý sao cho không t o b t khí trong m u.

ộ ấ ị ườ ụ ủ Ghi đ h p th c a dung d ch đ ng đã l c ọ ở ướ b ổ c sóng 420 nm sau khi đã n

đ nh Aị

ướ ế ớ ị ườ ạ ộ ấ ặ ạ l p l i các b c 5.9 đ n 5.12 v i dung d ch đ ư ọ ng ch a l c, ghi l i đ h p th ụ

A1.

ế ả 5.2. Tính toán k t qu

ộ ụ ủ ị ườ ượ ứ Đ đ c c a dung d ch đ ng, AU, đ c tính theo công th c sau:

AU = 1000 x

Trong đó:

ộ ấ ụ ủ ẫ ướ ượ ở ướ A1: là đ h p th c a m u tr ọ c khi l c đo đ b c c sóng 420 nm;

ộ ấ ụ ủ ẫ ọ ượ ở ướ A2: là đ h p th c a m u sau khi l c đo đ b c c sóng 420 nm;

ổ ự ế ỉ ố ấ ệ ố ụ ể 1000 là h s chuy n đ i tr c ti p ch s h p th thành IU:

ườ ủ ằ ế b là chi u dài đ ng quang c a cuvet, tính b ng xentimet;

ượ ấ ắ ủ ằ ẫ c là hàm l ng ch t r n c a m u, tính b ng gam trên mililit.

Ứ ề ớ ườ ủ ượ ng v i chi u dài đ ng quang 10,0 cm c a cuvet và hàm l ấ ắ ủ ng ch t r n c a

ứ ư ể ẫ ọ m u 0,61478 g/ml (50 Bx), thì công th c trên có th rút g n nh sau: AU = (A1 – A2) x

162,66

ươ ự ệ ượ ộ ị 6. Ph ng pháp xác đ nh đ màu. Đ c th c hi n theo TCVN 6333:2001.

ườ ượ ệ ạ ị ị ng đ c hòa tan trong dung d ch đ m t o ra dung d ch 6.1. Nguyên t c:ắ đ

ườ ị ượ ọ ể ạ ỏ ấ ơ ử ọ đ ng có pH=7. Dung d ch đ c l c qua màng l c đ lo i b các ch t l l ng. Đ ộ

ụ ủ ọ ượ ị ừ ủ ộ ấ h p th c a dung d ch l c đ c đo ở ướ b c sóng 420 nm và t đó tính đ màu c a dung

ườ ị d ch đ ng.

ế 6.2.Cách ti n hành.

ị ẫ ẩ ẫ ộ ườ ị ỹ Tr n k m u đ ệ ng. Cân 50,0 g± 0,1 g dung d ch đ m Chu n b m u:

ườ ề ở ấ ằ ệ ộ TEA/HCl và hòa tan đ ng b ng cách khu y đ u nhi t đ phòng.

ẫ ọ ọ ị ằ L c dung d ch m u trong chân không b ng màng l c và cho vào bình tam giác

ạ s ch và khô.

ổ ị ệ ộ ặ Đu i khí dung d ch trong 1 gi ờ ở nhi t đ phòng trong lò chân không ho c bình

ể ế ứ ằ ẩ ổ ị hút m. có th ti n hành đu i khí b ng cách nhúng bình tam giác có ch a dung d ch

ườ đ ng vào bình siêu âm trong vòng 3 phút.

ớ ộ ạ ế ằ ấ ị ủ Đo ch t khô b ng khúc x k (RDS) c a dung d ch v i đ chính xác = 0,1 g/100

ươ ả gtheo ph ng pháp ICUMSA mô t trong GS413.

ẩ ị ế ị ể t b đo màu là máy đo quang hay máy đo màu có th đo Đo màu: Chu n b thi

ượ ủ ề ộ ớ ả ự ế ẹ đ c đ truy n quang c a ánh sáng ở ướ b c sóng 420 nm v i d i đo th c t ấ h p nh t

ề ướ ả ỉ ằ ị ườ kho ng ± 10nm. Ch nh v b c sóng 420 nm, tráng cuvet đo b ng dung d ch đ ng và

10Ts) c a dung d ch, s d ng dung d ch

ộ ấ ổ ầ ụ ặ ị ử ụ ủ ị ị sau đó đ đ y. xác đ nh đ h p th (A ho c –log

ượ ọ ể ẩ ổ ộ ệ đ m TEA/HCl đã đ ị c l c và đu i khí đ làm dung d ch chu n có đ màu “không”.

ị ế ể ả 6.3. Tính toán và bi u th k t qu .

ấ ắ ộ ồ ị ừ ấ ằ ch t khô đo b ng khúc Tính toán: Tính n ng đ ch t r n trong dung d ch c t

ộ ủ ị ẫ ể ế ầ ồ ị ẩ ạ ế x k (RDS) đã xác đ nh trong ph n chu n b m u. Đ tính đ n n ng đ c a dung

ể ệ ị ượ ầ ả ớ ị d ch đ m TEA/HCl trong dung d ch ki m tra, RDS đo đ c c n ph i nhân v i 0,989 và

ế ệ ả ỉ cho k t qu “RDS hi u ch nh”.

3) c a dung d ch ki m tra ị

ρ ố ượ ừ ệ ị ủ ể ỉ T RDS hi u ch nh, xác đ nh kh i l ng riêng (kg/m

ả ằ ươ ả ộ ươ ứ theo b ng 1 sau b ng ph ng pháp n i suy, thoe b ng ICUMSA t ặ ằ ng ng ho c b ng

ươ ươ ươ ộ ủ ồ ị ượ các ph ng trình t ng đ ng. Sau đó n ng đ c a dung d ch đ c tính theo công

th c:ứ

B ng 1ả

ố ượ Kh i l

% RDS 47 48 49 50 51 52 53 ng riêng (kg/m 1213,3 1218,7 1224,2 1229,7 1235,2 1240,7 1246,3

ậ ộ V y đ màu ICUMSA =

ả ớ ố ễ ễ ế ầ ấ Bi u di n k t qu t i s nguyên g n nh t.

ộ ụ 6.4.Đ ch m.

ố ớ ạ ườ ệ ố ữ ế ệ ộ Đ i v i các lo i đ ế ng có đ màu đ n 50 IU, chênh l ch tuy t d i gi a hai k t

ậ ượ ả ộ ặ ạ ệ ề ộ ượ ớ qu nh n đ c trong cùng m t đi u ki n, đ l p l i không đ ơ c l n h n 3 IU.

ố ớ ạ ườ ệ ố ữ ế ế ệ ộ Đ i v i các lo i đ ng có đ màu đ n 50 IU, chênh l ch tuy t d i gi a hai k t qu ả

ậ ượ ề ệ ặ ộ ộ ượ ớ nh n đ c trong cùng m t đi u ki n, đ tái l p không đ ơ c l n h n 7 IU.

7. Ph

ươ ượ ự ự ộ ệ ị ng pháp xác đ nh đ phân c c. Đ c th c hi n theo TCVN

6333:1997.

ử ụ ộ ườ ể ế ộ ị ị ự ủ ng k qui đ nh đ xác đ nh đ phân c c c a 7.1. Nguyên t c:ắ S d ng m t đ

ị ườ ượ ằ dung d ch đ ng sau khi đ ơ c làm trong b ng chì axetat baz .

ế 7.2. Cách ti n hành .

ẩ ị ị ườ ề ặ ạ ỏ ớ G t b l p đ ng trên b m t 1,27 cm (1/2 inch) tr ướ c Chu n b dung d ch:

(cid:0) ẫ ườ ố ể khi cân m u. Cân chính xác 26 0,002 g đ ng càng nhanh càng t t và chuy n vào

ử ả ằ ớ ướ ạ ệ ấ bình dung tích 100 ml b ng cách r a v i kho ng 60ml n c l nh. Vi c c p n ướ c

ướ ấ ặ ướ ả ế ử ở ệ ộ ằ (n c c t ho c n c đã kh ion) ph i ti n hành nhi t đ phòng. Hòa tan b ng cách

ấ khu y và không đun nóng.

0C (cid:0)

ừ ử ề ả ị Ở ờ T lúc này v sau dung d ch th ph i gi ữ ở 20 0,5 0C. ể th i đi m thêm

ướ ớ ạ ổ ầ ự ề ả ố ọ ỉ n c t i v ch, đ đ y vào ng phân c c và trong khi đ c ph i đi u ch nh dung d ch ị ở

ế 20 0C (cid:0) 0,1 0C. Pha loãng đ n 80 ml.

ớ ộ ử ằ ắ ố ị Thêm 1,0 ml thu c th chì đã quy đ nh b ng buret l p v i b ngăn CO

ử ề ế ấ ằ ộ ị ạ Tr n đ u dung d ch chì b ng cách khu y và r a thành bình cho đ n khi đ t

ượ ắ ỹ ế ữ ứ ấ ở đ c 95 ml. L c k và pha loãng đ n 99,5 ml. Gi bình và ch t ch a bên trong 20

(cid:0) ề ặ ấ ỏ ằ ộ ọ 0,10C trong vòng 15 phút. Làm tan b t trên b m t ch t l ng b ng m t gi ọ t etanola.

ấ ọ ộ ạ ằ ầ ổ ị Làm khô ph n trong c bình phía trên dung d ch b ng gi y l c cu n l ư i. Đ a

ế ể ể ẩ ậ ỏ ị ằ th tích dung d ch chính xác đ n 100 ml b ng tia phun nh và c n th n không đ cho

ắ ỹ ậ ấ ỏ ượ ầ ề ặ ọ ạ b t t o thành trên b m t ch t l ng. L c k , l t ng ấ c bình ít nh t là ba l n.

ứ ể ấ Đ yên bình và ch t ch a bên trong 5 phút.

ấ ọ ấ ế ọ ượ ặ ễ ố ơ L c qua gi y l c g p n p 18,5 cm đ ằ c đ t trong ph u không cu ng tr n b ng

ấ ọ ứ ứ ứ ả ấ ộ ị cách rót toàn b ch t ch a trong bình đ nh m c lên gi y l c. Bình h ng ph i có hình

ướ ả ả ọ ố ị ừ ễ ề ặ ế dáng và kích th c sao cho kho ng cách d ch l c ch y xu ng t ấ ph u đ n b m t ch t

ượ ỏ l ng không v t quá 4 cm.

ộ ắ ủ ễ ặ ậ ằ ắ ợ Đ y ngay ph u b ng n p th y tinh, ho c m t n p thích h p khác.

ọ ầ ạ ỏ ị ọ Lo i b 10 ml d ch l c đ u tiên, sau đó gi ữ ạ l ị i 30 ml d ch l c.

ử ố ự ầ ớ ị ế ằ ự R a ng phân c c k b ng cách tráng 2 l n v i hai ộ Xác đ nh đ phân c c:

ủ ể ầ ằ ị ườ ổ ầ ố ị ườ ở ph n ba th tích c a nó b ng dung d ch đ ng. Đ đ y ng dung d ch đ ng 20

(cid:0) ổ ầ ắ ố ị ườ ủ ườ ế ể 0,10C. L p ng đã đ đ y dung d ch đ ng vào máng c a đ ng k và đ yên ít

ấ ướ ọ nh t là 5 phút tr c khi đ c.

0S, k t qu đ phân c c là trung bình c ng c a ủ ự

ế ế ả ọ ả ộ ế ộ Đ c k t qu chính xác đ n 0,05

ầ ọ ố ấ ầ các l n đ c, t t nh t là 5 l n.

ả ườ ế ạ ể ằ ạ ờ ẩ Ph i chu n hóa đ ng k t ẩ i th i đi m quan sát b ng các đĩa th ch anh chu n

ớ ộ ự ượ ị ủ ầ mà giá tr c a nó sát g n v i đ phân c c đ c quan sát.

ị ườ ẩ Không dùng dung d ch đ ể ng sacaroza đ chu n hóa.

ố ọ ủ ấ ự ệ ạ ẩ ượ Hi u chu n thang đo d a vào s đ c c a t m th ch anh đ c dùng đ i v i s ố ớ ự

ự ượ phân c c đ c quan sát.

ố ớ ố ọ ỉ ệ ế ậ ủ ữ ụ ệ ấ ẩ Ch hi u chu n đ i v i nh ng s đ c xu t hi n do khuy t t t c a d ng c ụ

ệ ẩ ặ ế ị ệ ẩ (hi u chu n thang đo) ho c thi t b (hi u chu n bình).

ề ế Chú thích v cách ti n hành:

ử ẫ ườ ư ế ệ ẫ ầ ả X lý m u đ ng: khi đ a m u đ n phòng thí nghi m c n ph i xem xét k v ỹ ề

ả ượ ủ ẹ ẫ ể ườ ượ ự s nguyên v n c a bao gói và các m u ph i đ c ki m tra xem đ ng có đ c bao

ị ả ể ẫ ưở ổ ộ ẩ ự gói, dán kín hay không, đ cho các m u không b nh h ng do s thay đ i đ m t ừ

ẫ ượ ế ệ ể ẫ ế lúc bao gói đ n lúc m u đ c đem đ n phòng thí nghi m đ phân tích. M u nguyên

ộ ạ ầ ẹ v n không c n tr n l i.

ị ế ể ả 7.3. Bi u th k t qu

0S.

ả ượ ế ộ ườ ể ộ ị ế ấ K t qu đ c bi u th theo đ S (đ đ ng) và l y chính xác đ n 0,01

8. Ph

ươ ượ ự ệ ệ ẫ ị ng pháp xác đ nh tro d n đi n. Đ c th c hi n theo TCVN

6327:1997.

ắ ủ ươ 8.1. Nguyên t c c a ph ng pháp

ể ệ ộ ẫ ộ ủ ệ ệ ồ ố Đ d n đi n riêng th hi n n ng đ c a các mu i đi n ly hòa tan. Trên th c t ự ế

ả ủ ộ ẫ ở ấ ệ ệ ượ ầ ẫ ị nó chính là đi n tr su t ngh ch đ o c a đ d n đi n đo đ ệ c. Ph n trăm tro d n đi n

ẫ ầ ượ ế ệ ể ằ ả ẫ ủ c a m u c n phân tích thu đ c b ng cách nhân k t qu phân tích đi n d n bi u th ị

ộ ệ ố ỷ ệ ộ ớ ỷ ố ợ ằ b ng micro ôm trên m t centimet v i m t h s t l thích h p (T s C).

ằ ươ ọ ượ ể Chú thích – Tro phân tích b ng ph ng pháp tr ng l ị ổ ng bi u th t ng tro tan và

ướ ữ ể ươ không tan trong n c. Đây là đi m khác nhau gi a 2 ph ng pháp.

ế 8.2. Cách ti n hành

ổ ầ ố ủ ằ ằ ị ị Xác đ nh h ng s c a ácqui. Đ đ y ácqui b ng dung d ch kali clorua 0,01 M,

0C, đo đi n tr r i nhân s Ôm v i 141,2 (đ d n đi n riêng

ề ế ỉ ộ ẫ ở ồ ệ ệ ố ớ đi u ch nh đ n 20 ± 0,1

ổ ầ ằ ằ ị ị ủ c a KCl 0,01M). Tráng b ng dung d ch kali clorua 0,02M, đ đ y ácqui b ng dung d ch

0C và nhân v i 276,1 (đ d n đi n riêng c a KCl 0,02M).

ở ủ ệ ở ộ ẫ ủ ệ ớ này, đo đi n tr c a nó 20

ố ủ ủ ế ằ ả ấ ị ả L y giá tr trung bình c a 2 k t qu . H ng s c a ácqui ph i là Ca.0,15.

ệ ẫ ị Xác đ nh tro d n đi n

ế ẫ ướ ẫ ặ ợ ườ Hòa tan 10 g m u n u tro d ỗ i 1% (ho c 10 g h n h p m u và đ ng sacaroza

ế ể ượ ế ẫ ấ ộ ỉ ướ tinh khi t đ thu đ c tro x p x 0,5% n u m u có đ tro trên 1%). Thêm n ế c đ n

0C. Đo đ d n di n c a dung d ch ệ

0C.

ộ ẫ ủ ị ở Ở ệ ộ 200 ml 20ở 20 ệ ố ệ t đ này h s hi u nhi

ẩ ủ ướ chu n c a n c K = 0,9.

ề ế Chú thích v cách ti n hành

0C.

ệ ộ ứ ả ẩ Nhi t đ chu n chính th c ph i là 20

0C ± 0,50C thì ph i ti n hành hi u ệ ả

ế ệ ộ ả ế Tuy nhiên, n u nhi t đ không ph i là 20

ư ẩ chu n nh sau:

0C thì tr đi 2% cho 1

ệ ộ ừ Nhi t đ trên 20

0C thì thêm 2% cho 10C

Nhi ệ ộ ướ t đ d i 20

ấ ủ ướ ộ ẫ ệ ớ Đ d n đi n l n nh t c a n c là 2 micro siemen/cm

ể ử ụ ồ ườ ệ ợ ộ Có th s d ng n ng đ 28 g/ 100 ml, trong tr ẩ ng h p này sau khi hi u chu n

ủ ướ ệ ớ ệ ố ệ ộ ẫ ủ ệ ẩ ộ ẫ đ d n đi n riêng c a n c v i h s hi u chu n là 0,5, đ d n đi n riêng c a dung

ộ ẫ ệ ể ệ ẩ ổ ở ồ ộ ị d ch đã hi u chu n chuy n đ i thành đ d n đi n riêng ằ n ng đ 5 g/100 ml b ng

ớ ệ ố ể ể ể ả ổ ổ ẫ ế cách nhân v i h s chuy n đ i 0,32. K t qu có th chuy n đ i thành % tro d n

ệ ằ ỷ ố đi n, b ng cách dùng t ẩ s C chu n là 18 x 10

ị ế ể ả 8.3. Tính toán và bi u th k t qu

4 và

ộ ẫ ủ ệ ị ườ ớ ệ ố ỷ ố Đ d n đi n riêng c a dung d ch đ ng nhân v i h s t s C = 18 x 10

ệ ượ ả ẫ ố ượ ể ầ ị ế k t qu tro d n đi n đ c bi u th theo ph n trăm kh i l ng (% m/m).

ố ượ ệ ầ ẫ Tro d n đi n tính theo ph n trăm kh i l ộ ẫ ng (% m/m) = 0,9 x 0,0018 x đ d n

ệ . đi n riêng (micro ôm)

ươ ị ượ ấ ườ 9. Ph ng pháp xác đ nh hàm l ng ch t khô trong đ ự ượ ng. Đ c th c

ệ hi n theo TCVN 7964:2008.

ươ ỷ ọ 9.1. Ph ng pháp 1: Đo t tr ng

ẫ ố ủ ạ ị : Cho m u vào ng đong lo i th y tinh ch u nhi ệ cách mi ngệ t ế Cách ti n hành

ố ể ẫ ả ẩ ậ ố ng kho ng 10 cm, c n th n không đ m u bám vào thành ng.

ặ ướ ủ ể ậ ắ ậ ố G n nút đ y kín vào ng đong, đ cho m t d ề ặ ủ i c a nút đ y cách b m t c a

oC sao cho

ở ẫ ả ố ồ m u kho ng 1 cm. Ngâm ng đong trong n i cách thu ỷ có que khu y ấ 60

ứ ủ ấ ướ ẫ ứ ủ ướ ả m c c a m u th p d i m c c a n c kho ng 5 cm.

ụ ỷ ọ ụ Nhúng d ng c đo t tr ng ồ Bôme vào n i cách thu ỷ có cánh khu y. ấ Khi m uẫ

ạ ế ố ệ ộ ủ ồ ả ỷ ạ ế trong ng đong đã lo i h t khí và đ t đ n nhi t đ c a n i cách thu (kho ng 90 min),

ớ ầ ấ ố ắ ể thì nh c ng đong lên đ ngang v i t m m t nhìn.

ặ ụ ụ ậ ở ả ố M nút đ y và đ t d ng c đo t ỷ ọng Bomoe vào ng. Sau kho ng 10 phút thì tr

ụ ọ ụ đ c d ng c đo t ỷ ọ Bôme. tr ng

ể ượ ộ ươ ố ọ ạ ượ ụ ụ Đ thu đ c đ Bôme th ấ ng m i, thì l y s đ c đ c trên d ng c đo t ỷ

oBé.

ọ ộ tr ng c ng thêm 1

oBé (140 oF/60 oC) + 1 oBé

ộ ươ Đ Bôme th ạ ng m i =

ừ ả ữ ộ ể ả ươ ạ ượ T B ng 1 ổ B ng chuy n đ i gi a đ Bôme th ng m i và hàm l ấ ng ch t khô

ứ ượ ị ượ trong xirô và xirô ch a hàm l ng fructoza cao, xác đ nh hàm l ấ ng ch t khô t ươ ng

ngứ .

ả ở ụ ụ ầ B ng 1 xem ph n ph l c.

ươ 9.2. Ph ng pháp 2. Đo khúc x ạ 1[1]

ướ ề ầ ả ậ ộ ệ ủ c ch y tu n hoàn qua b ph n đi u nhi t c a máy đo ế Cách ti n hành : Cho n

ủ ể ờ ủ ẫ ằ khúc xạ trong th i gian đ dài đ cho nhi ệ ộ ủa lăng kính và c a m u b ng nhau, t đ c

ế ụ ể ả ế ể ậ ẩ ầ ti p t c đ ch y tu n hoàn trong quá trình quan sát và ti n hành c n th n đ cho nhi ệ t

oC.

ố ọ ạ ở ị ị ộ ữ ổ đ gi n đ nh. Xác đ nh s đ c trên máy đo khúc x 45

ừ ả ả ượ ươ ạ ươ ứ ỉ ố ớ T b ng 2 vá b ng 3 thu đ c Bôme th ng m i t ng ng v i ch s khúc x ạ

quan sát đ c.ượ

ả ươ ạ ố ớ ườ ỉ ố ạ ả B ng 2 B ng Bôme th ng m i và ch s khúc x đ i v i đ ứ ng và xirô ch a

oC.

ượ ở hàm l ng fructoza cao 45

ạ ấ ả ả ố ườ ứ B ng 3 B ng chi s khúc x và ch t khô trong đ ng và xirô ch a hàm l ượ ng

fructoza cao.

ả ả ở ụ ụ ầ B ng 2 và b ng 3 xem ph n ph l c.

ươ ư ụ ạ ỏ ỉ [1] Ph ấ ắ ẫ ng pháp này ch áp d ng cho các m u d ng l ng không ch a ch t r n

không hòa tan đ c.ượ

III. D L

2 TRONG Đ

Ư ƯỢ ƯỜ NG SO NG GLUCOSE.

ươ ượ ự ệ ươ 1. Ph ng pháp 1. Đ c th c hi n theo TCVN 6328:1997 Ph ng pháp

. ủ c a Carruther, Heaney và Oldfield

ắ ủ ươ 1.1. Nguyên t c c a ph ng pháp.

ươ ẩ Ph ắ ng pháp so màu, dùng rosalin t y tr ng có tính axit và focmandehyt làm

ố ử ạ thu c th t o màu.

ử ố 1.2. Thu c th .

ạ ượ ố ể ậ ử ả Thu c th ph i là lo i đ c công nh n dùng đ phân tích.

ị ướ ề ả ạ Dung d ch n c bão hòa rosanilin hidroclorua: t o huy n phù (kho ng 1 g cho

oC và l c cho đ n ế

ướ ấ ế ả ắ 100 ml) rosanilin hidroclorua trong n c c t, đun nóng đ n kho ng 50

ộ ờ ỉ ắ ả ọ ể ngu i, sau đó đ yên trong 48 gi th nh tho ng l c và l c.

ặ ậ ắ ẩ ị Dung d ch rosanilin t y tr ng: thêm 6 ml axit clohidric đ m đ c vào 4 ml dung

ướ ử ự ế ắ ị d ch n c bão hòa rosanilin hidroclorua, l c và pha loãng đ n 100 ml. S kh màu

ử ỉ ử ụ ậ ứ ấ ả ờ ẩ ố không ph i ngay l p t c và thu c th ch s d ng ít nh t là 1 gi ị sau khi chu n b .

ớ ướ ị Dung d ch focmandehyt 0,2%: pha loãng 5 ml focmandehyt 40% v i n ế c đ n 1

lít.

ử ố ị Các thu c th khác: natri hidroxit dung d ch 0,1 N và 0,004N. Natri sunfit

ẩ ẩ ị ườ ị (Na2SO3.7H2O) dung d ch chu n, dung d ch iot chu n và sunfua dioxit không có đ ng.

ử ặ ố ỹ ượ ề ướ ậ ủ Các đ c tính k thu t c a các thu c th này đ c nêu trong đi u 5, 6 d i đây

ụ ế ẩ ấ (Cách ti n hành và cuvet h p th chu n).

1.3. Thi t bế ị

ộ ấ ộ ọ ụ ặ ổ Máy đo quang ph ho c máy đo đ h p th có cuvet dày 1 cm và b l c thích

ự ạ ừ ề ộ ợ h p có đ truy n quang c c đ i t ế 545 nm đ n 560 nm.

ế 1.4. Cách ti n hành

ườ ướ ẹ ể ấ ấ Hòa tan đ ng trong n c c t và khu y nh , thêm natri hidroxit loãng đ có

ứ ừ ị ộ ủ ồ dung d ch ch a t 0,5 (cid:0) g đ n 30 ế (cid:0) g sunfua dioxit trong 10 ml và n ng đ c a natri

ấ ỉ hidroxit x p x 0,004N.

ạ ườ ế ầ ể ạ ượ ứ ồ ộ ớ ị H u h t các lo i đ ng có th đ t đ c n ng đ này v i dung d ch ch a 4 ml

ặ ặ ườ ứ natri hidroxit 0,1N và ho c 10 g ho c 20 g đ ủ ế ng trong 100 ml. N u m c chung c a

ỏ ơ ộ ườ ồ ể sunfua dioxit nh h n 2 ppm thì n ng đ đ ng có th tăng lên 40g trong 100 ml.

ị ườ ế ằ ử ể ạ ố Cho 10 ml dung d ch đ ế ng vào ng th khô, s ch (có th thay th b ng 1 g đ n

ườ ử ượ ạ ộ ở ố 4 g đ ự ế ng khô và hòa tan tr c ti p trong ng th đ c v ch đ 10 ml và thêm 0,4 ml

ướ ế ạ ị natri hidroxit 0,1N và thêm n ẩ c cho đ n v ch); thêm 2 ml dung d ch rosanilin t y

ề ể ấ ắ ị ở tr ng, sau đó thêm 2 ml dung d ch focmandehyt 0,2%. Khu y đ u và đ yên nhi ệ ộ t đ

phòng trong 30 ± 5 phút.

ậ ộ ủ ị ở ả ị Đo m t đ quang c a dung d ch trong cuvet 1 cm kho ng 560 nm và xác đ nh

ượ ớ ườ ằ ụ ấ ẩ hàm l ng sunfua dioxit b ng cách so sánh v i đ ng cong h p th chu n đo đ ượ c

ư ề ệ ộ cùng m t đi u ki n nh nhau.

ườ ụ ấ ẩ 1.5. Đ ng cong h p th chu n

ườ ụ ẩ ượ ị ằ ộ ượ ẩ ấ Đ ng cong h p th chu n đ c chu n b b ng cách thêm m t l ng dung

ế ướ ượ ườ ứ ẩ ị d ch chu n đã bi t tr c l ng natri sunfit vào đ ng không ch a sunfua dioxit đã hòa

ườ ượ ấ ả ẩ tan trong natri hidroxit 0,004N. Đ ng đ c thêm vào t ớ ị t c các dung d ch chu n v i

ể ạ ế ự ụ ẩ ả ả ị ị m c đích đ h n ch s oxi hóa sunfit trong quá trình chu n b và b o qu n dung d ch

ả ả ấ ẩ ả ồ ộ ị ỉ ướ chu n. Ph i đ m b o các dung d ch có n ng đ natri hidroxit x p x 0,004N tr c khi

ặ ủ ự ẩ ắ ị ườ thêm dung d ch rosanilin t y tr ng có tính axit, s có m t c a đ ứ ng không ch a

ở ồ ộ ế ả ưở ế ệ ấ sunfua dioxit n ng đ đ n 40 g trong 100 ml không nh h ng đ n hi u su t màu và

ầ ế ộ ườ ế ả ồ ẩ ồ ị không c n thi t ph i quan tâm đ n n ng đ đ ng trong dung d ch chu n và n ng đ ộ

ườ ị đ ử ng trong dung d ch th .

2SO3.7H2O trong dung d ch đ

ứ ả ẩ ị ị ị Chu n b dung d ch ch a kho ng 0,5% Na ườ ng

ộ ằ ằ ẩ ộ ồ ộ ị 10% và xác đ nh m t cách chính xác n ng đ sunfit b ng cách chu n đ b ng dung

ẩ ị d ch chu n iot.

ế ớ ị ị ườ ể Pha loãng 5 ml dung d ch sunfit đ n 100 ml v i dung d ch đ ng 10% đ có

ộ ủ ẩ ầ ồ ở ừ ể ẩ chu n ban đ u mà n ng đ c a nó ả kho ng t 50 (cid:0) g SO2 trong 1 ml. Đ chu n b ị

ệ ẩ ầ ẩ ấ ị dung d ch hi u chu n, l y 1,0 ml, 2,0 ml… và 6,0ml chu n ban đ u và thêm 4 ml natri

ằ ị ườ ị ế hidroxit 0,1N và pha loãng đ n 100 ml b ng dung d ch đ ẩ ẩ ng 10%. Chu n b chu n

ứ ẩ ị zero không ch a dung d ch chu n.

ẩ ắ ị ị Thêm dung d ch rosanilin t y tr ng và dung d ch focmandehyt vào 10 ml các dung

ậ ộ ư ươ ẩ ẩ ị d ch chu n và đo m t đ quang nh ph ng pháp chu n.

2/kg.

ả ể ế ị K t qu bi u th theo mg SO

ế ề 1.6. Chú thích v cách ti n hành

ị ườ ượ ử ề ằ ướ ố Dung d ch đ ng đ c x lý b ng ki m loãng tr ử ạ c khi thêm thu c th t o

ể ả ẹ ế ượ ị màu đ gi i phóng sunfua dioxit liên k t nh không đ c xác đ nh theo qui trình này.

ị ượ ề ấ ỉ ỉ Dung d ch đ ế c đi u ch nh đ n pH x p x 11.

ươ ượ ự ệ ươ 2. Ph ng pháp 2. Đ c th c hi n theo TCVN 6329:1997 Ph ng pháp

ủ c a MonierWilliams.

ắ ủ ươ 2.1. Nguyên t c c a ph ng pháp

ử ư ẫ ộ ị Ch ng dung d ch m u th đã axit hóa trong dòng cacbon dioxit qua b sinh hàn

ị ế ộ ể ẩ vào dung d ch hidro peroxit loãng tinh khi t và chu n đ th tích axit sunfuric đ ượ ạ c t o

ể ằ ươ ọ ượ ượ ị thành. Cũng có th xác đ nh axit sunfuric b ng ph ng pháp tr ng l ng khi l ng SO

ỏ ấ r t nh .

ụ ự 2.2. Lĩnh v c áp d ng

ươ ụ ể ấ ợ ơ Ph ặ ng pháp này có th áp d ng khi có m t các h p ch t sunfua bay h i khác

ữ ơ và các axit h u c .

ử 2.3. Thu c thố

ạ ượ ố ể ậ ử ả Thu c th ph i là lo i đ c công nh n dùng đ phân tích.

ặ ế ứ ậ Axit clohidric đ m đ c, tinh khi t và không ch a clo.

2 l ng có

ế ể ấ ừ ứ ứ ỏ Cacbon dioxit tinh khi t, không ch a clo. Có th l y t bình ch a CO

ể ề ố ố ỉ ị ượ ế ố ộ trang b van đi u ch nh đ kh ng ch t c đ dòng khí theo ý mu n và sau đó đ c làm

s ch.ạ

ế ứ ượ ẩ Hidro peroxit (3%) tinh khi t không ch a axit sunfuric đ ị ằ c chu n b b ng cách

ạ ế ớ ướ ấ ế pha loãng 10 ml H2O2 trung tính 30% lo i tinh khi t phân tích v i n c c t đ n 100 ml.

ị Natri hidroxit dung d ch 0,1N.

ỉ ị ị Dung d ch ch th xanh bromophenol.

2.4. Thi t bế ị

ế ị ặ ệ ượ ỉ Thi t b đ c bi t theo MonierWilliams đ c ch ra theo hình 1.

ổ ượ ầ ộ ố ớ ộ M t bình c u đáy tròn dung tích 1 500 ml (A) có 2 c đ c n i v i b sinh hàn

ủ ố ớ ố ứ ẳ ầ ườ ố (B), đ u trên c a ng sinh hàn n i v i ng th ng đ ng (C) có đ ng kính trong

ừ ố ớ ế ả kho ng t 4 mm đ n 4,5 mm và n i v i bình

ế ị ể ị Hình 6: Thi t b đ xác đ nh sunfua dioxit theo MonierWilliams

ế 2.5. Cách ti n hành

ứ ấ ố ổ ỗ Đ vào bình nón (D) và ng Peligot th nh t (E) m i bình 10 ml H ổ 2O2. Đ vào

2O2 và dung d ch bari clorua đã đ

ố ứ ợ ỗ ị ượ ng Pedigot th 2 (F) 5ml h n h p H ằ c axit hóa b ng

HCl (vài gi t). ọ

Ố ệ ể ể ự ấ ộ ố ứ ụ ả ng th 2 đóng vai trò là m t ng b o v đ ki m tra s h p th hoàn toàn SO

ườ ầ ứ ấ trong hai bình th nh t. Tuy nhiên nó th ng là không c n.

ố ế ị ướ ấ ớ Sau khi n i thi t b xong, cho 500 ml n c c t vào bình (A) cùng v i 20 ml HCI

2 đi qua cho đ n khi không khí đ

ế ượ ổ ị và đun sôi dung d ch có dòng khí CO ỏ c đu i ra kh i

ế ị thi t b .

ộ ằ ả ộ ướ Sau đó làm ngu i b ng cách nhúng bình vào m t ch o n c. Trong khi làm

2 và sau đó tháo nút (S) th t nhanh và cho

ả ế ụ ạ ẫ ộ ậ ngu i bình v n ph i ti p t c cho ch y CO

ấ ỏ ễ ể ế ẫ ẫ m u vào. N u m u là ch t l ng nên dùng ph u có khóa đ cho vào (không có trên hình

ẽ v ) qua nút (S).

2 ch y ch m và ng ng c p n

ỗ ợ ờ ớ ư ậ ạ ấ ướ Đun sôi h n h p trong 1 gi v i dòng CO c trong

ố ẫ ừ ừ ề ố ố ng sinh hàn. Đi u này làm cho ng sinh hàn và ng d n t t nóng lên và b t k ấ ỳ

2 nào b gi

ị ữ ạ ở ơ ướ ở ề ố ượ ể ượ l ng SO i b i h i n l ư c ng ng trong ng đ u đ c chuy n vào bình

ầ ả ữ ằ ộ ố ộ ứ h ng (D), bình này c n ph i gi ngu i trong su t quá trình thao tác b ng m t bình nh ỏ

ướ ạ ẫ ạ ố ứ ở ể ể ị ự đ ng n c l nh. Ngay khi ng d n t i đi m H b nóng thì tháo bình h ng đi m K.

ử ố ộ ướ ấ ứ ủ ứ ấ ằ R a ng b ng m t ít n c c t vào bình h ng D và ch t ch a c a bình E cũng

ượ ấ ỏ ớ ị ử ượ ể ả ộ đ c chuy n toàn b vào bình D kho ng 40 50 ml ch t l ng v i d ch r a đ ẩ c chu n

ệ ộ ị ố ấ ớ ỉ ộ ở đ nhi t đ phòng v i NaOH 0,1N, dùng bromophenol xanh làm ch t ch th (t ấ t nh t

ể ẩ ộ nên dùng microburet đ chu n đ ).

ươ ứ ớ 1 ml NaOH 0,1N t ng ng v i 32 ppm SO ẫ 2 trên 100 g m u. Nên dùng ph ươ ng

ố ượ ố ệ ỏ ơ ẩ ộ ườ ợ pháp kh i l ng khi s li u chu n đ nh h n 0,5 ml. Trong tr ế ng h p n u dùng

ươ ố ượ ể ể ế ủ ố ệ ệ ẩ ọ ộ ph ng pháp kh i l ng đ ki m tra s li u chu n đ thì vi c k t t a, l c bari

ỏ ị ế ầ ằ ấ sunphat kh i d ch c t đã axit hóa b ng bari clorua c n ti n hành trong bình có m ỏ ở

ệ ạ ề đi u ki n l nh.

ị ế ể ả 2.6. Tính toán và bi u th k t qu

2 trên kilogam và tính nh sau:

ả ượ ế ể ị ư K t qu đ c bi u th theo miligam SO

ố ớ ế ả ươ ẩ a) Đ i v i k t qu dùng ph ộ ng pháp chu n đ :

ố ớ ế ả ươ ố ượ b) Đ i v i k t qu dùng ph ng pháp kh i l ng:

ượ ứ ạ ằ ị 1) CO2 đ c làm s ch b ng cách cho qua bình ch a dung d ch natri cacbonat

ử ể ử ạ ố ướ ư ấ loãng lo i thu c th đ kh clo, tr c khi cho qua bình ch ng c t.

ộ ố ự ụ ớ ườ 2) Bromophenol xanh v i m c đích này trong m t s lĩnh v c th ợ ng thích h p

ể ừ ẹ ạ ơ h n metyl da cam, do chuy n t màu vàng sang xanh qua giai đo n màu xám nh khá rõ

ể ỉ ị ừ ị ả ưở ệ r t. Ch th này chuy n màu pH t 2,8 ÷ 4,6 và hoàn toàn không b nh h ở ng b i CO

ơ ễ ẹ ủ ữ ế ậ ơ ượ ạ và các v t nh c a các axit h u c d bay h i nh n đ ố ủ c trong giai đo n cu i c a

ử ụ ư ầ ỏ ồ ơ ượ ằ ẩ lu ng h i ra kh i bình ng ng. NaOH 0,1 N s d ng c n đ c chu n hóa b ng axit

ấ ộ ớ ỉ ị sunfuric v i cùng m t ch t ch th .

2 thoát ra s làm đ c bari sunfat

ấ ủ ẹ ế ụ ẽ ở ố ứ 3) V t nh nh t c a SO ng th 2 (F). Trong

ự ư ệ ườ ề ấ ợ th c nghi m MonierWilliams ch a có tr ng h p nào quan sát th y đi u này.

ở ề ệ ạ ặ 4) Hydro peroxit, ữ đi u ki n l nh không oxi hóa hidrosunfua ho c sunfua h u

ơ ị ứ ự ẩ ơ ễ c d bay h i thành axit sunfuric và khi xác đ nh SO ợ 2 trong các th c ph m ch a h p

2O2 th

ấ ơ ườ ấ ớ ề ế ậ ả ễ ch t sunfua d bay h i, thì H ệ ng cho k t qu đáng tin c y nh t v i đi u ki n

ế ủ ệ ượ ể ề ế ọ vi c k t t a, l c bari sunfat đ ệ ạ c ti n hành trong đi u ki n l nh. Tuy nhiên đ tránh

ấ ỏ ỏ ị ể ắ ễ ầ ẩ ở ở ủ t a bari sunfat kh i b nhi m b n b i bari clorua thì c n đ l ng, ch t l ng ầ trên c n

ộ ọ ả ạ ả ử ằ ầ ỏ ph i rót qua b l c và bari sunfat còn l i trong bình có m ph i r a 3 l n b ng cách

ớ ướ ướ ộ ọ ạ g n v i n c sôi tr c khi rót qua b l c.

ƯƠ ƯƠ Ẩ Ả Ể CH NG 3: CÁC PH Ỉ NG PHÁP KI M TRA CH TIÊU S N PH M THEO

Ẩ TIÊU CHU N AOAC.

Ị Ẫ Ẩ Ệ ươ Ử I. CHU N B M U TH NGHI M. AOAC Ph ứ ng pháp chính th c

920.175.

ấ ắ ườ ỏ ế ề ầ ế ế ộ a) Các ch t r n (đ ng, vv.): nghi n nh n u c n thi ề t và tr n đ u đ n khi

ỹ ườ ẫ ộ ồ ấ ắ ằ ờ ỡ ấ m u đ ng nh t. Tr n k đ ạ ng b ng thìa trong th i gian ng n nh t. Làm v các h t

ướ ớ kích th c l n.

ắ ấ ườ ử ẫ b) Ch t bán r n (đ ng non, vv.): Cân 50 g m u th , hòa tan các tinh th đ ể ườ ng

ướ ử ạ ứ ấ ổ ị ị ớ ượ v i l ng n c ít nh t, đ vào bình đ nh m c 250 ml đã r a s ch, đ nh m c t ứ ớ ạ i v ch

ớ ướ ử ề ẫ ặ ặ ộ ứ ế và tr n đ u; ho c cân n ng 50 g m u th và pha loãng v i n ế c đ n m c 100 g. N u

ườ ư ề ắ ằ ộ ướ ầ ị đ ng ch a hòa tan, tr n đ u b ng cách l c tr c khi dùng ph n dung d ch pha loãng

ố ượ ể ặ ể ỉ theo th tích ho c theo kh i l ng đi ki m tra các ch tiêu.

ấ ỏ ậ ườ ử ế ề ặ ẫ ộ c) Ch t l ng (m t đ ng, xirô, vv): tr n đ u m u th . N u còn có m t các tinh

ể ườ ơ ướ ẹ ằ ố ặ th đ ng, hòa tan chúng b ng cách đun nh (tránh b c h i n c), ho c cân toàn b ộ

ố ượ ướ ể ị ế kh i l ng sau đó thêm n c, đun nóng cho đ n khi các tinh th b hòa tan hoàn toàn,

ộ ạ ấ ả ế ả ượ ầ ấ sau đó làm ngu i, cân l i. Tính toán t t c các k t qu trong l ng ch t ban đ u.

II. CÁC CH TIÊU C M QUAN C A Đ

Ủ Ả Ỉ ƯỜ NG GLUCOSE.

ượ ấ ạ ườ ị 1. Xác đ nh hàm l ng t p ch t không tan trong đ ng. AOAC – Ph ươ ng

ứ pháp chính th c 945.80.

ử ẫ ướ Hòa tan 100 g m u th trong 200 ml n c nóng . ấ ọ ọ Đun sôi và l c qua gi y l c

ễ ể ể ể ặ đ t trong ph u Hirsch . Sau đó dùng kính hi n vi đ ki m tra.

Ủ Ỉ ƯỜ III. CÁC CH TIÊU LÝHÓA C A Đ NG GLUCOSE

ị ươ ứ ộ ẩ 1. Xác đ nh đ m. AOAC Ph ng pháp chính th c 925.45.

ươ ươ ữ ớ Theo ph ứ ng pháp chính th c này có 4 ba ph ạ ng pháp v i nh ng lo i

ẫ m u khác nhau:

ươ ố ượ ế ấ ổ a) Ph ng pháp I: S y chân không đ n kh i l ng không đ i.

ươ ấ ở ấ ườ ố ượ ế ổ b) Ph ng pháp II: S y áp su t th ng đ n kh i l ng không đ i (ph ươ ng

ọ pháp tr ng tài).

ươ ấ ọ c) Ph ng pháp III: S y trên đá đá b t.

ươ ạ ấ c) Ph ng pháp IV: S y trên cát th ch anh.

ươ ố ượ ế ấ ổ Ph ng pháp I: S y chân không đ n kh i l ng không đ i.

ẫ ẫ ấ ươ ẫ Cân 25 g m u khô, l y m u theo ph ấ ng pháp 920.175 (l y m u khô) (xem

ể ằ ặ ắ ấ ẳ 44.1.01), đ trong đĩa đáy ph ng (làm b ng Ni, Pt, ho c Al có n p kín), s y trong t ủ

ệ ộ ố ấ ướ ấ ấ s y 2 gi ờ ở ả kho ng nhi t đ 70°C (t t nh t là 60°C) , d ả i áp su t kho ng 50 mm Hg

(6,7 kPa).

ấ ủ ượ Trong quá trình s y, cho dòng khí nóng vào t (dòng khí này đã đ c làm khô

4 khan, P2O5 ho c ch t hút m có hi u qu khác) trong su t quá

ệ ặ ấ ẩ ả ố ằ b ng cách đi qua CaSO

ể ạ ỏ ơ ấ ỏ ủ ấ ắ ạ ẫ ấ trình s y đ lo i b h i H ứ 2O. L y đĩa ch a m u ra kh i t ậ s y , đ y n p l i và làm

ỗ ầ ấ ế ấ ẩ ộ ngu i trong bình hút m, sau đó đem đi cân. M i l n s y ti p theo thì s y thêm 1 gi ờ

ặ ạ ố ượ ự ế ệ ấ ữ ầ và l p l i quá trình s y cho đ n khi s chênh l ch kh i l ng gi a hai l n cân liên

ế ti p không quá 2mg.

ươ ấ ở ấ ườ ố ượ ế ổ Ph ng pháp II: S y áp su t th ng đ n kh i l ng không đ i.

ẫ ắ ử ể ẳ ẫ ấ Cân 5 g m u th khô, xem 920.175 (al y m u r n), đ trong dĩa đáy ph ng (làm

ặ ặ ắ ậ ủ ấ ấ ằ b ng Ni, Pt, ho c Al có n p đ y kín), đ t trong t s y, s y trong vòng 3 gi ờ ở 100° C.

ỏ ủ ấ ắ ạ ứ ấ ẫ ẩ ộ L y đĩa ch a m u ra kh i t ậ s y, đ y n p l i và làm ngu i trong bình hút m sau đó

ặ ạ ố ượ ự ế ệ ề ấ đem đi cân. L p l i quá trình s y trên cho đ n khi s chênh l ch v kh i l ữ ng gi a

ầ ấ ầ ấ ế ế ớ ơ ờ ờ hai l n s y liên ti p không l n h n 2mg, th i gian l n s y ti p theo là 1 gi ố ớ . Đ i v i

ạ ớ ườ ệ ộ ấ ờ ố lo i l n đ ố ng ngũ c c, tăng nhi ể ạ t đ 105110°C trong th i gian s y cu i cùng đ lo i

ướ ạ ượ ướ ị ấ ỏ ượ b l ng n c còn l i. Sau đó báo cáo hàm l ng n c b m t .

ượ ươ ứ ị 2.Xác đ nh hàm l ng tro. AOAC Ph ng pháp chính th c 900.02.

ươ A. Ph ng pháp I xem 31.012.

ố ượ ẩ ả ẫ ợ ượ ể ườ Cân kh i l ng m u thích h p cho s n ph m đ c ki m tra (th ng là 510 g)

ấ ở ể ế ướ vào trong chén Platin có th tích 50100 ml s y 100°C cho đ n khi n ơ ế c bay h i h t;

ọ ầ ấ ả ệ ộ ấ ể ướ ặ thêm vài gi t d u ô liu nguyên ch t và gi m nhi t đ s y ho c đ d ồ i đèn h ng

ế ạ ẫ ở ngo i cho đ n khi m u trong chén không còn n lên.

ặ ở ệ ộ ế Đ t chén trong lò nung ả kho ng nhi t đ 525°C và nung cho đ n khi thu đ ượ c

ớ ướ ắ ẩ ế ụ ệ ế ơ ố ở tro tr ng. Làm m tro v i n c, cho b c h i trên b p đi n và ti p t c nung 525°C

ố ượ ổ ế đ n kh i l ng không đ i.

ươ B. Ph ng pháp II xem 31.013.

ố ượ ộ ẫ ả ẩ ợ ượ ể Than hóa m t kh i l ng m u thích h p cho s n ph m đ c ki m tra (th ườ ng

ể ở ử là 510 g) vào trong chén Platin có th tích 50100ml và nung ố 525°C sau đó x lý kh i

ớ ướ ể ố ỏ ị ượ l ng cháy v i n c nóng đ hòa tan mu i thành dung d ch keo l ng. (Trong tr ườ ng

ả ộ ế ấ ọ ầ ấ ẩ ợ h p các s n ph m có đ tinh khi t th p, thêm vài gi t d u ô liu nguyên ch t, nh ư

trong 31,012).

ấ ọ ấ ầ ọ ượ ố L c qua gi y l c không tan, đ t cháy gi y và ph n tro thu đ ấ c trên gi y, thêm

ấ ố ỏ ị ở ố ượ ọ ủ l c c a dung d ch mu i keo l ng, s y khô và nung ế 525°C đ n kh i l ổ ng không đ i.

C. Tro sunfat

2SO4 10%, đun

ử ể ẫ Cân 5 g m u th vào đĩa Petri có th tích 50100ml, thêm 5 ml H

ế ả ẩ ượ ở nóng cho đ n khi s n ph m là đ c than hóa, và sau đó tro hóa trong lò nung nhi ệ t

2SO4 10%, cho bay h i b ng thi

ể ằ ơ ế ị ư ộ ộ đ 550°C. Đ ngu i, thêm 23 ml H ấ ơ t b ch ng c t h i

ộ ầ ở ế ụ ế ệ ố ượ và làm khô trên b p đi n và ti p t c nung m t l n ế 550°C đ n kh i l ổ ng không đ i.

ể ệ ế ả ướ ạ ầ Th hi n k t qu tro sunfat d i d ng ph n trăm.

D. Tro hòa tan và tro không hòa tan xem 31.015.

31.015. Tro hòa tan và tro không hòa tan.

ư ặ ấ ẫ ướ L y m u nh trong 31.012 ho c 31.013. Thêm 10 ml n c vào trong các chén

ấ ọ ứ ế ầ ẫ ọ Platin đã ch a m u, đun nóng đ n g n sôi, l c qua gi y l c không tan và r a l ử ạ ằ i b ng

ướ ớ ướ ử ế ế ấ ả ọ ị n c nóng cho đ n khi d ch l c cùng v i n c r a đ n kho ng 60 ml. Cho gi y và

ấ ắ ọ ượ ậ ộ ộ ch t r n l c đ ẩ c vào chén Platin, nung m t cách c n th n, làm ngu i và đem đi cân.

Tính toán % tro tan và tro không hòa tan.

ộ ề ủ E. Đ ki m c a tro hòa tan.

ạ ọ ị ừ ộ ớ ẩ Làm l nh dung d ch l c thu t 31,015 và chu n đ v i HCl 0,1N (50.01150.012).

ẩ ẩ ị ị 50.011: Chu n b dung d ch chu n HCl

ả ướ ể ầ ấ ế B ng d ủ i đây cung c p th tích c a HCl 36,538% c n thi t pha loãng

ẩ ị thành 10 lít dung d ch HCl chu n:

ể ml HCl c n đ c l y đ pha loãng

ồ N ng đ đ ượ l ộ ươ ng ố ng HCl g c

ầ ượ ấ ị ế đ n 10 lít dung d ch HCl 0,1N chu n:ẩ (N)

8,6 17,2 86,0 430,1 840,1 0,01 0,02 0,10 0,50 1,0

ươ ẩ ng pháp tiêu chu n Sodium Hydroxide NaOH. 50.012: Ph

ẩ ộ ượ ề ẩ ớ ị Chu n đ ng c v i 40 ml dung d ch ki m chu n (50.03450.036) cùng 1

kho ngả

ộ ượ ẩ ư ồ n ng đ nh axit đã đ c chu n hóa trong bình 300 ml đã đ ượ ụ ừ c s c t CO ử ụ 2, s d ng

ọ CO2, H2O và 3 gi t phenophtalein.

ộ ươ ề ẩ ồ ượ ề NHCl = (ml ki m chu n x n ng đ đ ng l ng ki m) / ml HCl.

ộ ớ ế ẩ ồ ơ ố ị ườ ế N u có n ng đ l n h n mong mu n, dung d ch chu n bình th ầ ng c n thi t

1 = V2 x N2 / N1

ứ ị giá tr theo công th c sau: V

ủ ể ồ ị ượ ộ Trong đó: N2 và V2 n ng đ và th tích c a dung d ch đ c pha loãng.

ố ầ ể ượ ồ ủ ể ị V1 th tích c a dung d ch g c c n pha loãng đ đ ộ 2 c n ng đ N

ộ ủ ở ự ư ể ẩ ồ ố ị Ki m tra chính xác n ng đ c a dung d ch cu i cùng b i s chu n nh trên.

ị ượ ử ụ ể ẽ ấ ộ ị ỉ ỉ S chính xác ch khi dùng m t ch t ch th đ c s d ng trong xác đ nh đi m t ươ ng

ươ ẩ đ ộ ng trong quá trình chu n đ .

ả ướ ủ ể ấ ẩ ị ố ầ i đây cung c p th tích c a dung d ch NaOH chu n g c c n 50.034: B ng d

ế ể ẩ ẩ ị thi t đ pha loãng thành10 lít dung d ch chu n NaOH chu n:

ể

ầ ượ ấ ị ồ N ng đ đ ượ l ộ ươ ng ố ng NaOH g c

ml NaOH c n đ c l y đ pha ế loãng đ n 10 lít dung d ch NaOH 0,1N chu n:ẩ (N)

0,01 0,02 0,10 0,50 1,0 5,4 10,8 54,0 270,0 540,0

2 và H2O. Để

ụ ể ế ể ị Th tích dung d ch NaOH thêm vào đ pha đ n 10 lít đã s c qua CO

ứ ụ ư ộ ố ị ồ n ng đ dung d ch pha loãng nh mong mu n ta áp d ng công th c sau:

V1 = V2 x N2/N1

ể ồ ộ ị Trong đó: V2, N2 là th tích và n ng đ dung d ch sau khi pha.

ể ẩ ố ồ ộ ị V1, N1 là th tích và n ng đ dung d ch chu n g c.

ộ ề ủ F. Đ ki m c a tro không hòa tan xem 31.017

ộ ượ ư ườ Thêm m t l ng HCI 0.1N d (th ứ ng là 1015 ml) vào trong chén Platin (ch a

ể ẹ ế ộ ồ ẩ tro không tan 31.015), đun nh trên b p đun r i làm ngu i. Chuy n vào erlen và chu n

ể ệ ộ ề ề ơ ệ ẫ ấ ị ộ ế đ đ n khi xu t hi n màu da cam. Th hi n đ ki m v đ n v ml 1N acid/100 g m u.

ấ ạ G. T p ch t khoáng trong tro xem 31.018.

ứ ớ ẫ ộ ớ ể ỗ ề ắ ợ Trong chén s l n tr n 100 g m u v i 35g H ồ 2S04 và l c đ u đ h n h p đ ng

ự ệ ệ ấ ằ ặ ấ ạ ộ nh t. Cho dòng đi n ch y qua nó trong khi khu y b ng cách đ t m t đi n c c Pt ở

ướ ủ ệ ự ầ ở ộ ể ả ắ ố ỷ phía d i c a chén và g n đi n c c khác g n m t bên đ gi m cu i đũa thu tinh

ợ ượ ắ ầ ớ ườ ấ ộ ệ ầ ầ ộ ớ ỗ v i h n h p đ c khu y đ ng. B t đ u v i c ng đ dòng đi n là 1và d n d n tăng

lên 4.

ố ượ ể ượ ả ố ễ Trong 1015 phút kh i l ng gi m xu ng, than khô có th đ ị ố c d dàng b đ t

ọ ử ặ ắ ố cháy thành tro tr ng trong chén g c trên ng n l a ho c trong lò.

ươ ượ ư ơ ươ ườ L u ýư : Ph ng pháp này đ ộ c a chu ng h n ph ng pháp thông th ủ ng c a

2S04, đ c bi

ớ ặ ệ ườ ậ ườ ợ ế ở ệ ố h th ng lò v i H t là trong tr ng h p m t đ ng, b i vì, n u thao tác

ậ ệ ộ ặ ấ ặ ị ệ đúng cách, v t li u nhanh chóng than hóa r t m n ho c b t đ c bi ử t thích nghi l a

ệ ạ ệ ế ử ẵ ẫ nhanh chóng sau đó. N u đi n hi n t i không có s n, x lý 100 g m u trong món ăn

ể ồ ứ ớ ố ượ ắ ằ b ng chén s l n, l c đ đ ng nh t v i đ H ể ấ ớ ủ 2S04 đ than hóa kh i l ng thoroly, và

ườ ố ủ ể ạ ặ ố đ t cháy theo cách thông th ng. T p sau đây có th có m t: mu i c a Sn, đ ượ ử c s

4 trong

ậ ườ ể ẩ ắ ố ắ ư ả ẳ ạ ụ d ng trong m t đ ng đ t y tr ng; s c t khoáng s n, ch ng h n nh PbCr0

ủ ẹ ượ ể ỏ bánh k o màu vàng; oxit c a Fe, đôi khi đ c dùng đ mô ph ng màu sô cô la; và Cu.

ế ố ữ ể ượ ể ệ ở ườ Nh ng y u t này có th đ c phát hi n b i ki m tra thông th ng.

ượ ấ ườ ươ ị 3. Xác đ nh hàm l ng ch t khô trong đ ng. AOAC Ph ng pháp chính

ứ th c 943.05.

ượ ơ ở ự TCVN 7964:2008 đ c xây d ng trên c s AOAC 943.05 Dry substance in com

ụ ươ ị ượ ấ syrups and sugars. Do đó, xem m c 9 Ph ng pháp xác đ nh hàm l ng ch t khô trong

ườ ượ ự ệ ươ đ ng. Đ c th c hi n theo TCVN 7964:2008 trên ch ng 2.

Ủ Ậ Ỉ ƯỜ IV. CÁC CH TIÊU VI SINH V T C A Đ NG GLUCOSE.

1. Vi khu n a nhi

ẩ ư ệ ử ườ ươ tbào t trong đ ng. AOAC Ph ng pháp chính

ứ th c 972.45.

ả ủ ả ườ ườ ử ủ ấ ả Đ ng, c c c i đ ể ng và mía có th mang các bào t c a t t c 3 nhóm vi

ệ ư ỏ ư ự ẩ ấ ọ ộ ẩ ư khu n a nhi t quan tr ng gây h h ng, nh trong th c ph m đóng h p axit th p là vi

ẩ ư ẩ ỵ ệ khu n lên men [Bacillus stearothermophilus], vi khu n k khí a nhi t không sinh

ư ỏ ẩ H2S [Clostridium thermosaccharolyticum], và các vi khu n sulfua gây h h ng ho c k ặ ỵ

2S [C. nigrificans].

ệ ư khí a nhi t sinh H

ữ ả ẩ ưở ớ ứ ố ế ư ế ỏ Nh ng vi khu n này không có nh h ng t i s c kh e, nh ng n u s t bào

ượ ể ồ ạ ứ ệ ươ ạ v t quá m c cho phép có th t n t i quá trình nhi t th ng m i.)

ẫ ấ A. L y m u

ệ ấ ẫ ừ ệ ặ L y 225 g (0.5 lb) m u trong phòng thí nghi m t 5 túi riêng bi t ho c thùng

ể ặ ạ hàng ho c lô, đ vào trong bình s ch và niêm phong.

ẫ ị ườ ượ ấ ằ ố ệ M u là dung d ch đ ng thì đ c l y b ng cách hút 5 ng riêng bi ả t kho ng

ượ ấ ể ừ ơ ể ứ ồ 200250 ml (68 oz) đ c l y trong quá trình b m chuy n t ặ xe b n vào b ch a ho c

ạ ọ ườ ủ ệ ơ b m t i nhà máy l c đ ở ng c a xe ch nguyên li u.

ố ượ ẽ ẫ ớ ổ ướ ủ S l ệ ng m u trong phòng thí nghi m s thay đ i so v i kích th c c a thùng

ặ ự ế ế ể ổ ẽ ở ho c lô hàng. N u có thay đ i đáng k trong lô, th c t này s tr nên rõ ràng, trong đa

ể ệ ẫ ợ ố ườ s tr ng h p, thông qua các bài ki m tra cá nhân trên 5 m u trong phòng thí nghi m.

ử ệ ẩ ầ ẫ ị B. Chu n b ph n m u th nghi m.

ườ ử ẫ ấ Đ tặ 20 g m u th trong bình nón vô trùng 150250 ml đánh d u (a) Đ ng khô:

ể ỉ ướ ứ ế đ ch 100 ml. Thêm n ế c đã vô trùng đ n m c 100 ml. ể Mang nhanh đun đ n đi m

ố ơ ớ ướ ấ ỏ ể sôi và đ đun sôi trong 5 phút. Cho ch t l ng b c h i v i n c vô trùng.

ườ ỏ ể ầ ườ Thêm vào ph n ki m tra 20 g đ ơ ở ị ng khô, xác đ nh trên c s ° (b) Đ ng l ng:

ụ ườ ươ ươ ớ ườ Brix (ví d , 29,41 g 68 ° Brix [%] đ ỏ ng l ng t ng đ ng v i 20 g đ ng khô), đ ể

ư ế ổ vào bình có c 250 ml đã vô trùng và bình ti n hành nh trong D (a).

ườ ấ C. Môi tr ng c y

ạ ệ ẩ ử ụ Để phát hi n vi khu n lên men. ẩ S d ng tiêu chu n (a) Th ch tryptone Glucose:

ươ ạ ườ ế ướ ố ơ ườ ạ th ng m i môi tr ng thi u n t h n (môi tr c t ng th ch Tryptone Dextrose),

ư ặ ẩ ấ ị ườ ho c chu n b nh sau: Khu y10,0 g tryptone, 5,0 g đ ạ ng, 15,0 g th ch, và 0,04 g

ử ố ướ ượ thu c th bromocresol tím vào trong 1 lít n ộ c và tr n đ u. ố ề pH cu i cùng nên đ c 6,7

ở ộ ế ấ ± 0,1. H p 30 phút 121 ° C và làm ngu i đ n 55 ° C.

2S (C.

ư ệ ẩ ỵ ệ t không sinh H (b) Thang canh gan: Để phát hi n vi khu n k khí a nhi

ộ ớ ỗ thermosaccharolyticum). Tr n 500 g gan bò băm v i 1lít n ướ Dun sôi h n h p t ợ ừ ừ c. t

ờ ề ể ả ỉ ọ trong vòng 1 gi , đi u ch nh đ kho ng pH 7,0 và đun sôi thêm 10 phút. L c nguyên

ấ ỏ ệ ả ớ ế li u qua v i và pha loãng ch t l ng t i 1 lít. Đ n thang canh, thêm 10,0 g peptone và 1,0

ề ể ệ ệ ỉ ố ớ ố g K 2 HPO 4, và đi u ch nh đ pH 7,0. Đ i v i ng nghi m làm thí nghi m, thêm 12 cm

ị ượ ử dung d ch gan bò đã đ c đun sôi và 1012 ml thang canh. Kh trùng 20 phút ở

ướ ử ụ ườ ể ẩ ả ị 121°C. Tr c khi s d ng môi tr ng, tr ừ ướ b ả c chu n b đ đào th i khí nên ph i

ạ ấ ớ ớ ưỡ ả ấ n u ch y h n ầ ơ 20 phút và sau khi c y phân t ng v i 56 cm l p th ch dinh d ơ ng đ n

ả ượ ế ạ gi n đã đ c làm l nh đ n 50°C.

ư ỏ ệ ẩ ấ Khu y 10,0 g (c)Th chạ Sulfite: Để phát hi n vi khu n gây h h ng sulfide.

ướ ạ tryptone, 1,0 g Na2SO3, và 20,0 g agar trong 1 lít n ộ c và tr n đ u. ề Lúc th ch đ ượ c

ỗ ố ệ ặ ặ ả ố ỏ ắ ạ thêm vào ng nghi m,đ t m nh s t s ch ho c đinh nh trong m i ng. Không đi uề

2SO3, n u đ

ả ứ ầ ỉ ẩ ị ườ ị ế ch nh ph n ng là c n thi ế Chu n b môi tr t. ng và dung d ch Na ượ ử c s

2SO 3 thì dung d ch đ

ấ ắ ị ượ ấ ớ ồ ụ d ng là ch t r n Na c pha m i hàng tu n . ầ H p trong n i trung

ở ộ ế bình 20 phút 121°C và làm ngu i đ n 55°C.

ậ ấ ỹ D. K thu t c y.

ử ệ ị lên men: Dùng 5 đĩa Petri riêng bi t, cho vào 2 ml dung d ch đ ườ ng (a) Bào t

ượ ằ ỗ ấ ạ ộ ớ đun sôi đ c hút b ng pipet vào m i đĩa. C y, tr n v i th ch tryptone glucose và bao

Ủ ạ ẩ ố gói. 3548 gi ờ ở 55°C và tránh làm quá khô th ch nên làm m t ế ủ ấ Đ m s bào t m. ử

ố ượ ệ ấ ử ườ ố ừ t ể ạ 1 trong 5 t m đ đ i di n cho s l ng bào t trong 2 g đ ng g c. ố Nhân s này

ượ ế ả ề ố ử ườ ằ b ng 5 ta đ c k t qu v s bào t /10 g đ ng.

ẩ ạ ặ ườ ớ ố ư Khu n l c đ c tr ng có hình tròn, đ ể ng kính 15 mm, đi n hình v i "đ m'' m ờ

ở ườ ượ ầ ở trung tâm và thông th ng đ c bao quanh b i qu ng vàng trong vùng màu tím.

ở ự ộ ố ủ ể ể ệ ặ ấ ấ ầ Qu ng này có th là không đáng k ho c m t tích b i s xu t hi n c a m t s axit

ẩ ạ ướ ề ặ ặ ặ ộ ế y u ho c dày đ c toàn b đĩa có màu vàng. Khu n l c d ể i b m t đi n hình là nh ỏ

g n.ọ

ẩ ạ ướ ề ặ ế ự ủ ậ ạ ờ N u s nh n d ng c a các khu n l c d i b m t đang còn nghi ng , quan sát

ế ề ạ ộ ế ợ ề ặ ủ tr ng thái b m t c a khu n l c. ẩ ạ N u b ngoài chúng có đ tinh khi t h p lý c a h ủ ệ

ự ậ ả ị ẩ ạ ướ ề ặ ằ ượ th c v t hình thành, gi đ nh r ng các khu n l c d i b m t đã đ ở c hình thành b i

ẩ ươ các nhóm vi khu n t ng t ự .

ẩ ạ ố ượ ế ấ ượ ề N u đĩa là r t nhi u khu n l c, s l ể ng có th không đ ẩ c chính xác và khu n

ướ ể ể ượ ư ậ ấ ế ấ ạ l c và kích th c có th không đi n hình. ế N u đ ề c nh v y r t nhi u ch m đ m đó

ự ế ả ạ ặ ạ ầ ị ướ là không th c t , gi i pháp là pha loãng l i dung d ch ban đ u và l p l i các b c.

ẩ ạ ướ ề ặ ể ể ậ ị Đ xác đ nh xem các khu n l c d ữ i b m t đi n hình là nh ng sinh v t lên men, áp

ẩ ạ ở ỗ ề ặ ể ể ứ ụ d ng chu i các khu n l c ạ trên b m t đĩa th ch đ ki m ch ng.

2S: Chia đ u ề 20 ml

ư ệ t không sinh hydrogen sulfide H ẩ ế (b) Vi khu n y m khí a nhi

ị ườ ứ ệ ầ ố dung d ch đ ng đun sôi cho 6 ng nghi m ch a canh thang gan và phân t ng môi

ườ ỏ ườ ạ ưỡ ạ ặ tr ớ ng l ng v i môi tr ng th ch dinh d ng c b n. ơ ả Sau khi th ch đã đông đ c, làm

ế ủ ệ ộ nóng đ n 55 ° C và 72 gi ờ ở nhi t đ đó.

2S đ

ư ẩ ệ ượ ự ằ ị ỵ Vi khu n k khí a nhi t không sinh H c xác đ nh b ng s phân chia tách

ệ ủ ự ệ ạ ươ th ch, có s hi n di n c a acid và đôi khi là mùi hôi. Ph ư ể ợ ng pháp phù h p nh ki m

ấ ượ ấ ướ ượ ư ế ả ượ tra ch t l ỉ ng nh ng ch cung c p c l ng thô;k t qu không đ ể ệ c th hi n nh ư

ử ơ ị ọ ượ ườ ố ượ s l ng bào t /đ n v tr ng l ng đ ng.

ư ỏ ị ườ Chia đ u ề 20 ml dung d ch đ ng đun sôi cho 6 (c) Vi khu nẩ Sulfide gây h h ng:

ố ị ế ổ Ủ ứ ế ạ ạ ng nghi m ệ s ch đã hút h t không khí và ch a th ch sulfite đã b bi n đ i. 48 gi ờ ở

550C.

ườ ư ỏ ẩ ạ Trong môi tr ng th ch sulfite, vi khu n sulfide gây h h ng hình thành các

ủ ả ầ ặ ố ị vùng hình c u màu đen đ c tr ng. ư Do kh năng hòa tan c a H ằ 2S và c đ nh nó b ng

2S nh ngư

ượ ư ộ ố ư ỵ ệ ấ Fe, không khí đ c l u ý. ẩ M t s vi khu n k khí a nhi ả t không s n xu t H

ộ ượ ươ ố ớ ạ ạ t o ra m t l ng t ng đ i l n khí H ả 2, chia tách th ch và gi m sulfite, do đó làm môi

ườ ệ ấ ễ ạ ệ ớ tr ng chung xu t hi n màu đen. Tình tr ng này d dàng phân bi ự t v i các khu v c

ẩ ạ ế ế ể ạ ượ ế ả ị ượ đen h n ch nêu trên. Đ m các khu n l c đen đ có đ c k t qu đ nh l ng.

ả E. Báo cáo k t quế

ư ỏ ư ố ế ả ẩ ử Báo cáo k t qu vi khu n lên men và sulfide h h ng nh s bào t /10 g

ườ ư ỵ ệ ươ đ ng. ẩ Báo cáo vi khu n k khí a nhi t không sinh H ố ố 2S là s ng d ặ ng ho c âm (+

ặ ho c ).

ẩ ươ ứ ự 2. Salmonella trong th c ph m. AOAC Ph ng pháp chính th c 991.12.

ươ Ph ng pháp sàng l c ọ màng l ướ ỵ ướ i k n c.

ụ ệ ẩ ấ ả ự ạ ẩ Áp d ng cho phát hi n vi khu n Salmonella trong t t c các lo i th c ph m.

ọ ử ụ ắ ọ 2.1.Nguyên t cắ : L c màng l ướ ỵ ướ i k n c (HGMF) s d ng màng l c có g n các

ỵ ướ ướ ỵ ướ ả ậ ệ v t li u k n c trong mô hình l i . Dòng k n ố ớ ư c đóng vai trò nh rào c n đ i v i

ề ặ ọ ủ ự s lây lan c a các bào t ử ừ , t đó phân chia b m t màng l c thành các ngăn riêng bi ệ t

ế ằ b ng nhau và kích th ướ ượ c đ c bi t.

ế ị ườ ấ ấ 2.2.Thi t b , môi tr ng nuôi c y và hóa ch t.

ộ ọ ượ ậ ệ ắ ướ ỗ c l 0,45 (cid:0) m và đ c g n v t li u k ỵ (a) B l c HGMF: màng có kích th

ướ ạ ộ ướ ỗ ố ọ n c không đ c h i trong mô hình l i. ISOGRID (QA Khoa h c cu s ng, Inc 6645

ặ ươ ế ỳ ươ Ti n sĩ Nancy Ridge, San Diego, CA 92121, Hoa K ), ho c t ng đ ứ ng, đáp ng các

ậ ố ỹ thông s k thu t.

ị ọ ớ ướ ọ ơ i l c kích th ướ ỗ (cid:0) m l c s đ lo i b ọ ơ ể ạ ỏ 5 c l (b) Đ n v l c cho HGMF: V i l

ộ ơ ự ừ ẫ ẩ ọ ọ ị th c ph m trong quá trình l c. M t đ n v cho t ng m u. ISOGRID (QA Khoa h c

ặ ươ ươ ố ỹ ứ ậ ờ ố đ i s ng, Inc), ho c t ng đ ng, đáp ng các thông s k thu t.

ớ ạ ữ ặ ạ ộ (c) Pipets: 1.0 ml v i v ch chia đ 0,1 ml. 1.1 ho c 2.2 ml pipets s a là đ t yêu

c u. ầ

ố ộ ạ ộ ể ộ ở ớ ố ặ 20000 rpm , v i c c 500 ml ho c máy (d) Máy tr n: t c đ cao đ ho t đ ng

ử ệ ẫ ằ ắ ậ ạ ỗ ộ xay b ng kim lo i bình có n p đ y. M t bình cho m i m u th nghi m.

ơ ướ ầ ạ ồ c ngu n chân không là đ t yêu c u. (e) B m chân không: máy hút n

ặ ậ ộ ố (f) B ph n phân ph i ho c bình chân không.

ướ ủ ể c. Pha cho đ th tích (g) Pha loãng peptone.: Hòa tan 1,0 g peptone trong 1 lít n

ể ấ ệ ở vào bình pha loãng đ sau khi h p ti t trùng 15 phút ấ ủ 121°C cung c p đ 99 ± 1 ml.

ướ ế ấ ấ ề c 55°C, khu y đ u 3,0 g chi ị t xu t th t bò và (h) Canh Lactose . Hòa tan trong n

ướ ườ ặ 5,0 g Polypeptone ho c peptone trong 1 lít n c. Thêm 5,0 g đ ng lactose. Phân chia 225

ấ ở ệ ể ề ỉ ml vào bình 500 ml. H p 15 phút 121°C. Ti ế ị t trùng th tích xác đ nh và đi u ch nh n u

ế ế ố ượ ầ c n thi t đ n 225 ml. pH cu i cùng nên đ c 6,7 ± 0,2.

ấ ặ (i) Thang canh Trypticase (tryptic) Soy. Khu y 17,0 g Trypticase ho c tryptone, 3,0

ướ g Pytone, 5,0 g NaCl, 2,5 g K2HPO4 và 2,5 g glucose trong 1 lít n ẹ ể c. Đun nh đ hòa tan

ấ ở ệ ị hoàn toàn. Phân chia 225 ml vào bình 500 ml. H p 15 phút 121°C. Ti t trùng xác đ nh

ế ầ ể ề ỉ ế ế ố ượ th tích và đi u ch nh n u c n thi t đ n 225 ml. pH cu i cùng nên đ c 7,3 ± 0,2.

ổ ợ ữ ấ ớ ố ử h p s a khô không béo v i thu c th màu xanh (NFDMBG): Khu y 100 (j) Tái t

ượ ử ướ ướ ế ộ ở ộ g NFDM đ c kh n c trong 1 lít n ẫ c; tr n b i máy tr n m u cho đ n khi hòa tan.

ấ ở ộ ỗ ợ ẫ ố ộ H p 15 phút 121°C. Thêm thu c nhu m màu xanh lá cây, sau khi tr n h n h p m u th ử

ư / canh nh trong D (e).

ớ ố ấ (k) Canh tetrathionate (v i i t và màu xanh lá cây). Khu y 5,0 g Polypeptone, 1,0 g

3, và 30 g Na2S 2O3.5H2O trong 1 lít n

ậ ố ướ ộ ỹ mu i m t, 10 g CaCO ế c, tr n k và đun sôi (k t

ộ ế ướ ả ở ả ủ ẽ t a s không hòa tan hoàn toàn). Làm ngu i đ n d i 45°C và b o qu n ẩ 58°C. Chu n

2KI b ng cách hòa tan 5 g KI trong 5 ml n

2 thăng

ị ằ ướ ị b dung d ch I c vô trùng, thêm 6 g I

ớ ướ ế ẩ ị hoa, hòa tan và pha loãng đ n 20 ml v i n ằ ị c vô trùng. Chu n b dung d ch xanh b ng

ử ố ướ ế ườ cách hòa tan 0,1 g thu c th trong n c vô trùng và pha loãng đ n 100 ml. Môi tr ng s ử

ị ị ụ d ng trong ngày, thêm 20 ml dung d ch I ỗ 2KI và 10 ml dung d ch màu xanh lá cây m i 1

ạ ủ ở ẹ ấ ầ ộ ơ ả lít canh c b n. Làm l i t a b i khu y tr n nh nhàng và phân chia vô trùng ph n 10 ml

ử ệ ố ườ ổ vào ng nghi m 16 x150 mm đã kh trùng . Không làm nóng môi tr ng sau khi b sung

ử ề ị ỉ ệ ộ ế ướ ử ụ ố I2KI và dung d ch thu c th . Đi u ch nh nhi t đ đ n 2535 ° C tr c khi s d ng.

ấ ạ ế ấ t xu t men , (l) Th ch EF 18 ( EF 18). Khu y 5,0 g proteose peptone , 3,0 g chi

10,0 g Llysine monohydrochloride , 2,5 g D glucose, 15,0 g sucrose, 1,5 g MgSO 4∙7H2O ,

ậ ố ố 1,5 g mu i m t , 0,3 g Sulfapyridine , 0,03 g mu i natri bromothymol màu xanh, và 15,0 g

ạ ướ ề ấ ớ th ch vào trong 1 lít n ấ ể c và đun sôi v i khu y đ u đ hòa tan hoàn toàn . Không h p

ườ ộ ế ẩ ị ể ị môi tr ng này. Làm ngu i đ n 4550° C. Đ chu n b dung d ch kháng sinh novobiocin,

ướ ử ụ ử ọ ọ làm tan 0,15 g novobiocin trong 10 ml n c và l c kh trùng s d ng màng l c 0,45 (cid:0) m.

ơ ở ế ề ạ ộ ị Thêm 1,0 ml dung d ch vô trùng novobiocin đ n 1,0 lít th ch EF 18 c s . Tr n đ u và

ủ ố ườ ặ ả ổ đ 20 ml vào các đĩa Petri . pH cu i cùng c a môi tr ả ng đông đ c là 6,8 ± 0,1. B o qu n

ử ụ ở ầ ị ế ầ ế ư ề ỉ ph n dung d ch novobiocin không s d ng 46°C đ n khi c n thi t. (L u ý: đi u ch nh

ể ự ệ ấ ọ ươ ử ụ ệ ộ đ pH chính xác là r t quan tr ng đ th c hi n các ph ề ặ ng ti n này s d ng b m t

ể ề ạ ặ ẳ ầ ộ ỉ ph ng đ u dò pH đ xác minh đ pH th ch đông đ c. Ngoài ra, vô trùng đi u ch nh đ ộ

ủ ặ ạ ả ạ ớ pH c a th ch nóng ch y, th ch nóng lên 6,6 ± 0,1 v i vô trùng 1M HCl ho c NaOH

ướ ổ ngay tr c khi đ vào đĩa Petri)

ạ ấ ướ ộ ề c , tr n đ u , (m) Th ch TSI . Khu y các thành ph n ầ ( 1) ho c ặ (2) trong 1lít n

ế ầ ấ ả ộ ỉ đun nóng th nh tho ng khu y tr n . Đun sôi 1 phút cho đ n khi các thành ph n hòa tan .

ệ ệ ậ ổ ố ố ị ặ ắ Đ vào ng nghi m 16 x150 mm dung d ch cho vào ½ ng nghi m và đ y nút ho c c m

ử ụ ế ệ ấ ờ ở ướ ể ề đ đi u ki n hi u khí duy trì trong th i gian s d ng . H p 12 phút 120°C. Tr c khi

ạ ạ ặ ố ở ị ể ố ả th ch quá đông l i, đ t ng v trí nghiêng đ g c sâu (kho ng 3 cm) và nghiêng đ y đ ầ ủ

ả ượ ố (kho ng 5 cm) đ c đình hình kiên c .

ườ ng, 0,2 g (1) 20 g Polypeptone, 5,0 g NaCl, 10 g lactose, sucrose 10 g, 1 g đ

ỏ ố Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O , 0,2 g Na2S2O3 , 0,025 g phenol đ , và 13 g agar . pH cu i cùng nên

ượ đ c 7,3 ± 0,2.

ế ấ ế ấ ấ t xu t bò, 3,0 g chi t xu t n m men , 15 g peptone , 5,0 g proteose (2) 3,0 g chi

4 , 5,0 g NaCl , 0,3 g

ườ peptone, 1,0 g đ ng , 10 g lactose , sucrose 10 g , 0,2 g FeSO

ỏ ố ượ Na2S2O3 , 0,024 g phenol đ , và 12 g agar . pH cu i cùng nên đ c 7,4 ± 0,2.

ặ ạ ế ấ ấ (n) Th ch LIA: Hòa tan 5,0 g Gelysate ho c peptone , 3,0 g chi t xu t n m men , 1,0 g

2S2O3 , 0,02 g bromocresol

ắ ườ đ ng , 10 g L lysine, 0,5 g amoni s t citrate , 0,04 g khan Na

ướ ệ ế ổ tím, và 15 g agar trong 1lít n c và gia nhi ố t cho đ n khi hòa tan . Đ 4ml vào ng

ướ ậ ắ ề ệ ế ượ nghiêm có kích th ặ ặ c 13x100 mm và đ y n p ho c đ t vào đi u ki n hi u khí đ c duy

ấ ờ ở ướ ặ ố ứ ử ụ trì trong th i gian s d ng . H p 12 phút 120°C. Tr c khi đông c ng, đ t ng n i ơ ở ị v

ể ố ể ị ả ố ố trí nghiêng đ g c nghiêng kho ng 3 mm đ đ nh hình kiên c . pH cu i cùng nên đ ượ c

6,7 ± 0,2.

ấ ặ ạ (o) Th ch MacConkey (MAC); Khu y 3,0 g proteose peptone ho c Polypeptone, 17

ặ ỗ ợ ậ ố ậ ặ ố ố g peptone ho c Gelysate, 10 g lactose, 1,5 g mu i m t s 3 ho c h n h p mu i m t , 5,0 g

ỏ ị ị NaCl , 3,0 ml dung d ch neutral màu đ 1% ( 30 mg ) , 1 ml dung d ch crystal tím 0,1%

ướ ề ế ấ ồ ộ ( 1,0 mg) và 13,5 g agar trong 1 lít n c và tr n đ u cho đ n khi đ ng nh t. Gia nhi ệ t

ấ ườ ế ầ kem theo khu y th ng xuyên và đun sôi 12 phút cho đ n khi các thành ph n hòa tan .

ấ ở ộ ế ổ H p 15 phút 120 ° C. Làm ngu i đ n 4550 ° C và đ 20 ml vào đĩa Petri 15x100 mm.

ể ả ờ ớ ể ả ấ ố ượ Đ khô kho ng 2 gi v i các t m b o hi m. pH cu i cùng nên đ c 7,1 ± 0,2.

ử ố ị ướ c vô (p) Dung d ch NaOH 1M: Hòa tan 42,11 g thu c th NaOH 95% trong n

trùng và pha loãng thành 1 lít.

ị ướ c vô trùng. (q) Dung d ch HCl 1M . Pha loãng 89 ml HCl trong 1 lít n

ể ấ ằ ộ ố ể ớ ỷ ệ ả i thi u kho ng 6,07,6 , v i t l hao h t t ụ ố i (r) Ki m tra đ pH b ng gi y: pH t

ơ ị ắ ổ ỗ đa 0,4 đ n v , pH m i thay đ i màu s c .

ướ ấ ổ ướ ả ậ ấ c v o bình tam giác 2 lít đ y nút. H p 20 phút (s) N c c t vô trùng. Đ 1 lít n

ở 121° C.

ử ử ố ố ị ướ c vô (t) Dung d ch thu c th màu xanh lá cây 1 %:. Hòa tan 1 g thu c th trong n

ộ ạ ấ ộ ố ộ ố ườ trùng và pha loãng thành 100 ml. ( M t s lô thu c nhu m đ c h i b t th ể ng. Ki m tra

ướ ử ụ ữ ỉ ườ ạ ế ấ ả t t c các lô tr c khi s d ng và ch có nh ng ng ả ỏ i t o ra k t qu th a đáng khi th ử

ậ ử ự ượ ự ệ ệ ớ ế ế ử ụ nghi m v i các sinh v t th nghi m tích c c hay tiêu c c đ c bi t đ n s d ng . )

ị ướ ử ẩ ố ị c vô trùng (s) , và (u) Pha dung d ch thu c th màu xanh lá cây: Chu n b n

ố ị ướ ộ ề ử thêm 2 ml dung d ch 1% thu c th màu xanh lá cây (t) vào 1 lít n c vô trùng . Tr n đ u.

ệ ẩ ị ử 2.3. Chu n b th nghi m

ộ ứ ứ ệ ẫ ở (a) B t tr ng: M thùng ch a m u trong phòng thí nghi m vô trùng và cân 25 g

ắ ặ ử ệ ẫ m u th vào bình vô trùng 500 ml mi ng có n p v n .

ằ ấ ả ỷ Thêm kho ng 15 ml canh lactose vô trùng. Khu y b ng đũa thu tinh vô trùng ,

ệ ế ậ ấ ặ ố ỉ ợ ổ thìa vô trùng , ti t trùng ho c ch t kh ng ch đình ch thu n l ầ i. B sung thêm 3 ph n

ộ ổ canh lactose , 10, 10 , và 190 ml cho t ng c ng 225 ml.

ỗ ầ ử ị ế ẫ ấ ỉ ụ Khu y sau m i l n thêm cho đ n khi m u th b đình ch mà không có c c

ậ ắ ể ở ệ ộ u . Đ y n p an toàn và đ yên trong 60 phút nhi t đ phòng .

ề ế ấ ầ ằ ằ ắ ộ ộ ỳ ị ế Tr n đ u b ng cách l c và xác đ nh đ pH b ng gi y qu . N u c n thi ề t đi u

ặ ậ ắ ớ ộ ỉ ộ ch nh đ pH 6,8 ± 0,2 v i NaOH 1M ho c HCl vô trùng; đ y n p bình an toàn và tr n

ướ ớ ỏ ắ ả ị ủ tr c khi xác đ nh pH. N i l ng n p bình kho ng ¼ vòng và 1824 gi ờ ở 35°C.

ử ẫ (b) Chocolate: Cân 25 g m u th vào bình xay vô trùng. Thêm 225 ml NFDM

ộ ở ố ộ ạ ấ ấ ấ ộ ồ BG vô trùng . Tr n 2 phút t c đ cao và g n l y ch t pha tr n đ ng nh t vào bình vô

trùng 500 ml.

ể ậ ắ ở ệ ộ ề Đ y n p bình an toàn và đ yên trong 60 phút nhi ằ ộ t đ phòng. Tr n đ u b ng

ấ ắ ằ ỳ ị ộ cách l c và xác đ nh đ pH b ng gi y qu .

ế ầ ế ề ặ ộ ớ ỉ N u c n thi ậ t đi u ch nh đ pH 6,8 ± 0,2 v i NaOH ho c HCl 1M vô trùng ; đ y

ị ắ n p bình an toàn và tr n l ộ ạ ướ i tr c khi xác đ nh pH.

ở ỏ ử ề ố ộ ị ắ Thêm 0,45 ml dung d ch thu c th xanh là cây 1% và tr n đ u. M l ng n p

ủ bình ¼ vòng và 1824 gi ờ ở 35 ° C.

ị ố ử ẫ (c ) Th t s ng: Cân 25 g m u th vào bình xay vô trùng. Thêm 225 ml canh lactose

ộ ở ố vô trùng và pha tr n 2 phút ộ t c đ cao.

ể ậ ắ ở ệ ộ ộ Đ y n p bình an toàn và đ yên trong 60 phút nhi ề t đ phòng . Tr n đ u

ấ ằ ắ ộ ỳ ị ằ b ng cách l c và xác đ nh đ pH b ng gi y qu tím .

ề ắ ậ ặ ộ ớ ỉ Đi u ch nh đ pH 6,8 ± 0,2 v i NaOH ho c HCl 1M vô trùng ; đ y n p bình

ộ ướ ẫ ị an toàn và tr n tr ộ ể c khi xác đ nh pH . M u chuy n vô trùng vào bình 500 ml r ng

ắ ặ ớ ỏ ệ ắ ủ mi ng có n p v n đã vô trùng . N i l ng n p bình ¼ vòng và 1824 gi ờ ở 35 ° C.

ử ụ ữ ể ễ ừ ừ t ẹ và nh nhàng (e) S a khô không béo: S d ng ph u vô trùng đ thêm t

ẫ ướ ử ậ ử ế 25 g m u th đ n 225 ml n ộ c th màu xanh lá cây vào trong bình đ y 500 ml r ng

ệ ể ắ ặ ộ ở ệ ộ ộ mi ng có n p v n. Không pha tr n . Đ ngâm xáo tr n 60 phút nhi t đ phòng .

ở ắ ỏ ề ỉ ủ Đi u ch nh pH m n p l ng ¼ bình và 1824 gi ờ ở 35 ° C.

2.4. Phân l pậ

ể ể ọ ọ ẹ ỗ ắ ẫ ẫ ợ ượ ủ c và (a) Làm giàu m u ch n l c: L c nh h n h p m u đ ki m tra đã đ

ế ể ộ ộ chuy n 0,1 ml đ n 10 ml canh tetrathionate nóng ( 2535 ° C). Tr n trên máy tr n Vortex

ặ ằ ẫ Ủ ệ ể ồ ể ề ề ho c b ng tay đ phân tán đ u ngu n b nh trong m u. trong b đi u nhi ệ ừ t t 68 gi ờ

ở 35 ± 0,5°C.

ọ ọ ậ ọ ộ ủ ằ ộ ặ b ng tay ho c máy tr n (b) L c và phân l p ch n l c: Tr n canh tetrathionate đã

Vort .

ế ồ ố ớ ị ố ể ằ ẩ ị Đ i v i th t s ng , chu n b pha loãng đ n n ng đ 10 ộ 2 b ng cách chuy n 1,0 ml

ộ ằ ắ vào 99 ml peptone vô trùng. Tr n b ng cách l c .

ố ớ ấ ả ử ụ ẩ ả Đ i v i t ậ t c các s n ph m khác , s d ng tetrathionate không pha loãng. B t

ặ ơ ị ọ ặ ồ ố ở ẹ ngu n chân không. Đ t đ n v l c vô trùng vào ng góp ho c bình chân không . M k p

ạ ề ặ ủ ơ ở ễ ầ ơ A. Xoay l i ph n ph u C. vô trùng n i HGMF vô trùng trên b m t c a c s D. Xoay

ướ ẹ ằ ượ ẹ ằ ỉ kênh phía tr c. Đóng k p b ng cách tr t hàm k p L làm b ng thép không g trên toàn

ủ ề ặ ừ ả ặ ủ ơ ở ễ ộ b chi u dài c a m t B kéo dài t c hai m t c a ph u C và c s D, xoay cánh tay di

ể ả ị ị ướ chuy n K vào ngang ( b khóa) v trí . Vô trùng thêm kho ng 1520 ml n c vô trùng .

ầ ự ể ễ ầ ấ ợ Dùng Pipet l y th tích theo yêu c u pha loãng thích h p vào ph u . Áp đ u t ủ do c a

ố ế ỗ ộ ọ ướ ấ ỏ ể ổ ng chân không E đ n l hút F đ hút ch t l ng thông qua b l c l i G. B sung thêm

ướ ễ ế ướ ư ướ 1015 ml n c vô trùng đ n ph u và rút ra thông qua l i nh tr ế ẹ c. Đóng k p A đ n

ế ơ ở ủ ơ ự ế ấ ỏ ở ẹ ị ọ chân không tr c ti p đ n c s c a đ n v l c ch t l ng và rút qua HGMF. M k p A.

ủ ẹ ể ằ ả ở ỉ Xoay chuy n cánh tay c a K k p làm b ng thép không g vào m khóa ( kho ng góc 45

ị ượ ở ạ ặ ỏ ỏ ỡ ỏ ụ ụ ễ ° ) v trí và tr t kh i L kh i m t bích B. Xoay tr l i ph u C. G b d ng c vô trùng

ề ặ ệ ấ ạ ặ ữ HGMF và đ t trên b m t th ch EF 18. Tránh làm xu t hi n bong bóng không khí gi a

ạ Ủ ạ ủ ấ ế ộ ọ b l c và th ch. th ch EF 18 trong 1824 gi ờ ở 42 °C trong t m. N u HGMF không

ẩ ạ ứ ể ặ ặ ờ ưở ả có khu n l c đi n hình ho c nghi ng ho c không ch a tăng tr ế ng, ghi k t qu xét

ệ nghi m âm tính .

ứ ế ả ươ ự ẩ ả B ng 991,12 : k t qu nghiên c u cho ph ng pháp HGMF Salmonella trong th c ph m

ệ ủ ẩ ạ ể ấ ọ (c) Xu t hi n c a khu n l c Salmonella đi n hình: xanh , màu xanh ng c bích,

ẩ ạ ặ ươ ả ứ ươ màu xanh lá cây , ho c (đôi khi ) khu n l c màu xanh d ng ( ph n ng d ng tính

ườ ẩ ạ lysine và sucrose âm tính) . Thông th ả ng, Salmonella sinh khu n l c mà không ch y

ẩ ấ ẩ ầ ươ ướ n c hay ch t nh y . Vi khu n lysine âm và vi khu n sucrose d ẩ ạ ng sinh khu n l c

vàng.

ẩ ạ ử ặ ể 2.5. X lý khu n l c đi n hình ho c đáng nghi ng ờ.

ấ ủ ẩ ạ ể ặ ạ ọ ờ (a) Th ch c y c a TSI, LIA và MAC: Ch n 3 khu n l c đi n hình ho c nghi ng

ử ụ ấ ệ ỗ ộ ừ ỗ t m i HGMF. S d ng que c y riêng bi ẩ t, vô trùng, hoàn toàn làm ngu i cho m i khu n

ẩ ạ ượ ự ấ ọ ỗ ố ạ l c, m i khu n l c đ ằ c l a ch n và c y TSI nghiêng b ng cách đâm sâu vào g c và trên

ệ v t nghiêng.

ẩ ạ ằ ấ ấ ớ ở ơ Làm nóng que c y, c y LIA v i khu n l c b ng cách đâm sâu ệ 2 n i và v t

nghiêng.

ệ ấ ạ ể ấ Ủ Làm nóng que c y, v t còn l i đ c y trên MAC. TSI, LIA và MAC trong 24 ± 2

ơ ỏ ể ế ề ệ ậ ắ ủ ể gi ờ ở 35 ° C. Đ y n p h i l ng đ duy trì đi u ki n hi u khí trong khi ặ đ ngăn ch n

ả s n xu t H ấ 2S quá m c.ứ

ươ ả ườ ả ử ế ệ ng tính gi : Môi tr ng TSI k t qu th nghi m salmonella ả ứ (b) Ph n ng d

ườ ề ặ ầ ầ ỏ th ng có tính ki m (màu đ ) ph n nghiêng và acid (màu vàng) ph n sâu, có ho c không

ườ ườ ề có H2S. Trong LIA, môi tr ng Salmonella th ả ứ ng có tính ki m (màu tím) ph n ng

trong sâu.

ỉ ở ủ ố ứ ầ ỏ ả ứ Ch xem xét màu vàng ph n sâu c a ng LIA ch ng t sinh axit ph n ng âm

ạ ỏ ườ ự ổ ơ ở ầ ỉ tính. Không lo i b các môi tr ng sinh ra s đ i màu trong ph n sâu ch trên c s này.

2S trong LIA. Gi

ế ầ ườ ả ấ H u h t các môi tr ng Salmonella s n xu t H ữ ạ ấ ả i t t c các môi l

ườ ươ ả ề tr ng d ng tính gi ệ Salmonella trên TSI (nghiêng ki m và axit sâu) cho xét nghi m

ả ứ ế ọ ươ ứ ươ ề sinh hóa và huy t thanh h c hay không ph n ng LIA t ng ng d ng tính (ki m sâu)

ặ ho c âm tính (sâu axit).

ạ ừ ườ ợ ườ ả Không lo i tr tr ng h p môi tr ả ng TSI không ph i là Salmonella mà ph n

ứ ạ ả ứ ủ ể ề ng trong LIA l i là ph n ng đi n hình (ki m sâu) c a Salmonella.

ọ ị 2.6. L c và xác đ nh.

ệ ủ ẩ ạ ự ấ ườ ẩ ạ ng MAC: khu n l c (a) S xu t hi n c a các khu n l c Salmonella trên môi tr

ể ấ ố ở ẽ đi n hình trong su t, không màu, đôi khi có ch m đen tâm. Salmonella s phá các khu

ặ ậ ậ ườ ự ế ủ v c k t t a m t do các sinh v t khác có m t trong môi tr ng gây ra.

ườ ỗ ợ ể ế ế ế ng h n h p: Ki m tra MAC. N u tinh khi ậ t, ti n hành nh n ạ (b) Làm s ch môi tr

ườ ẩ ạ ể ấ ặ ọ ế ạ d ng. N u môi tr ng có pha, dùng que c y ch n hai khu n l c đi n hình ho c nghi

ư ấ ờ Ủ ả ứ ể ươ ng và c y TSI, LIA và MAC nh mô t ả ở trên. và ki m tra cho ph n ng d ng tính

ả ị gi đ nh.

ự ệ ế ằ ọ ị ị (c) Xác đ nh: Th c hi n xác đ nh b ng các test sinh hóa và huy t thanh h c trên 3

ườ ươ ả ị ừ ỗ ư ả môi tr ng d ng tính gi đ nh TSI t m i HGMF nh mô t trong 967.27BE (xem

17.9.03) và 967.28AD (xem 17.9.07).

ệ ố ư ế ườ ữ Nh thay th cho h th ng thông th ấ ỳ ộ ng Salmonella, b t k m t trong nh ng b ộ

ụ ươ ể ượ ử ụ ể ậ ạ ị ụ d ng c sinh hóa th ấ ng m i AOAC ch p thu n có th đ c s d ng đ xác đ nh chung

ự ươ ả ự chung s d ng tính gi ẩ Salmonella trong th c ph m. Xem 978.24 (xem 17.9.04),

989.12 (xem 17.9.05) và 991.13 (xem 17.9.06).

ƯƠ

Ẩ

Ả

Ể

SÁNH CÁC PH

ƯƠ

Ỉ NG PHÁP KI M TRA CH TIÊU S N PH M THEO

CÁC TIÊU CHU NẨ

CH NG 4:

ươ ề ượ ể ẩ ỉ ầ Đa ph n các ph ả ng pháp ki m tra ch tiêu s n ph m theo TCVN đ u đ c tham

ả ừ ự ặ kh o t AOAC ho c Codex. Tuy nhiên, các khu v c khác nhau trong cùng m t đ t n ộ ấ ướ c

ự ố ướ ế ớ đã có s khác nhau hu ng gì là các n c khác nhau trên toàn th gi ữ i. Có nh ng ph ươ ng

ượ ư ướ ạ ể ặ pháp ở ệ Vi t Nam dùng đ c nh ng các n c khác l i không th dùng ho c ng ượ ạ c l i.

ứ ộ ủ ả ầ ặ ấ ẩ Tùy theo m c đ cho phép c a các ch t, các thành ph n có m t trong s n ph m

ữ ươ ể ử ụ mà chúng ta s d ng nh ng ph ợ ng pháp ki m tra cho phù h p. Tuy nhiên, trong bài báo

ể ượ ự ữ ặ cáo này không th so sánh đ c s khác nhau gi a TCVN và AOAC ho c Codex.

ứ ấ ế ệ ầ ủ Th nh t: Tài li u tìm ki m không đ y đ (không có Codex) nên không cho phép

so sánh.

ứ ượ ấ ữ ự ố ư ế ệ ệ ượ Th hai: Tìm đ c tài li u, nh ng s đ ng nh t gi a tài li u tìm ki m đ c trong

ạ ấ Ở ươ ể TCVN và AOAC l ồ i không đ ng nh t. TCVNcó các ph ng pháp ki m tra mùi, v , đ ị ộ

ạ ấ ặ ệ trong…thì trong AOAC l i không tìm th y ho c ng ượ ạ c l i, tài li u AOAC có các ph ươ ng

ự ể ậ ườ ở ầ ạ ặ ủ pháp ki m tra s có m t c a vinh sinh v t trong đ ng thì ph n TCVN l i không tìm

th y.ấ

ữ ể Có th có nh ng lý do khác, tuy nhiên hai lý do trên là chính nên trong bài báo cáo

ụ ươ ấ ượ ườ này không có m c Các ph ể ng pháp ki m ch t l ng đ ầ ng glucose theo Codex và ph n

ệ ữ ẩ ự so sánh s khác bi t gi a các tiêu chu n trên.

Ụ Ụ

Ầ

Ế

PH N PH L C TI NG ANH

AOAC Official Method 920.175

Preparation of Test Sample

First Action 1920

Final Action

(a) Solids (sugars, etc.).—Grind, if necessary, and mix to uniformity. Thoroughly

mix raw sugars with spatula in minimum time. Break up any lumps either on glass plate

with glass or iron rolling pin, or in large, clean, dry mortar, with pestle.

(b) Semisolids (massecuites, etc.).—Weigh 50 g test sample, dissolve crystals of

sugar in minimum volume of H2O, wash into 250 mL volumetric flask, dilute to volume,

and mix thoroughly; or weigh 50 g test sample and dilute with H2O to 100 g. If insoluble

material remains, mix uniformly by shaking before taking aliquots by volume or weighed

portions for determinations.

sugar are present, dissolve them by heating gently (avoiding loss of H2O by evaporation),

or by weighing whole mass, then adding H2O, heating until completely dissolved, and

after cooling, reweighing. Calculate all results to weight original substance.

AOAC Official Method 945.80

Filth in Sugars

Filtration Method

First Action 1945

Final Action 1988

Dissolve 100 g test portion in ca 200 mL hot H2O. Boil, and filter at once through

rapid paper in Hirsch funnel. Examine microscopically.

AOAC Official Method 925.45

Moisture in Sugars

First Action 1925

A. Vacuum Drying

—Final Action

(Applicable to cane and beet, raw and refined sugars.)

Dry 2–5 g test portion, 920.175(a) (see 44.1.01), in flat dish (Ni, Pt, or Al with

tightfit cover), 2 h at (cid:0) 70°C (preferably 60°C), under pressure (cid:0) 50 mm Hg (6.7 kPa).

Bleed oven with current of air (dried by passing through anhydrous CaSO 4, P2O5, or other

efficient desiccant) during drying to remove H2O vapor. Remove dish from oven, cover,

cool in desiccator, and weigh. Redry 1 h and repeat process until change in weight

between successive dryings at 1 h intervals is (cid:0) 2 mg.

B. Drying at Atmospheric Pressure

—Procedure 1960

(Applicable to cane and beet, raw and refined sugars.)

Dry ca 5 g test portion, 920.175(a) (see 44.1.01), in flat dish (Ni, Pt, or Al with

tightfit cover), 3 h at 100°C. Remove dish, cover, cool in desiccator, and weigh. Redry 1

h and repeat process until change in weight between successive dryings at 1 h intervals is

(cid:0) 2 mg. For largegrain sugars, increase temperature to 105–110°C in final heating

periods to expel last traces of occluded H2O. Report loss in weight as H2O.

C. Drying on Pumice Stone

—Final Action

—Surplus 1989

(Applicable to massecuites, molasses, and other liquid and semiliquid products.)

See 31.007, 14th Ed.

D. Drying on Quartz Sand

—Final Action

(Applicable to massecuites, molasses, and other liquid and semiliquid products.)

Digest pure quartz sand that passes No. 40 but not No. 60 sieve with HCl, wash

acidfree, dry, and ignite. Preserve in stoppered bottle. Place 25–30 g prepared sand and

short stirring rod in dish ca 55 mm diameter and 40 mm deep, fitted with cover. Dry

thoroughly, cover dish, cool in desiccator, and weigh immediately. Add enough diluted

product of known weight to yield ca 1 g dry matter and mix thoroughly with sand. Heat

on steam bath 15–20 min, stirring at 2–3 min intervals, or until mass becomes too stiff to

manipulate readily. Dry at <70°C (preferably 60°C) under pressure (cid:0) 50 mm Hg (6.7

kPa), bleeding with dry air as in A. Make trial weighings at 2 h intervals toward end of

drying period (ca 18 h) until change in weight is (cid:0) 2 mg.

For materials containing no fructose or other readily decomposable substance, dry

8–10 h at atmospheric pressure in oven at 100°C, cool in desiccator, and weigh, repeating

heating and weighing until loss in 1 h heating is (cid:0) 2 mg. Report loss in weight as H2O.

As dry sand, as well as dried sample, absorbs appreciable moisture on standing over most

desiccating agents, make all weighings as quickly as possible after cooling in desiccator.

Reference:

JAOAC 8, 255(1925).

AOAC Official Method 900.02 Ash of Sugars and Syrups First Action 1900 Final Action

A. Method I —Surplus 1989

See 31.012, 14th Ed.

B. Method II

—Surplus 1989

See 31.013, 14th Ed.

C. Sulfated Ash

Weigh 5 g test portion into 50–100 mL Petri dish, add 5 mL 10% (by weight)

H2SO4, heat on hot plate until product is well carbonized, and then ash in furnace at ca

550°C. Cool, add 2–3 mL 10% H2SO4, evaporate on steam bath, dry on hot plate, and

again ignite at 550°C to constant weight. Express result as percent sulfated ash.

D. Soluble and Insoluble Ash

—Surplus 1989

See 31.015, 14th Ed.

E. Alkalinity of Soluble Ash

—Surplus 1989

See 31.016, 14th Ed.

F. Alkalinity of Insoluble Ash

—Surplus 1989

See 31.017, 14th Ed.

G. Mineral Adulterants in Ash

—First Action

—Surplus 1989

See 31.018, 14th Ed.

AshOfficial Final Action

31.012 Method I

Heat sample of appropriate wt for product being examined (usually 510 g) in

50100 mL Pt dish at 100° until H20 is expelled; add few drops pure olive oil

and heat slowly over flame or under IR lamp until swelling stops. Place dish in furnace

at ca 525° and leave until white ash is obtained. Moisten ash with H20, dry on

steam bath and then on hot plate, and reash at 525° to canst wt.

31.013 Method II

Carbonize sample of appropriate wt for product being examined (usually 5

10 g) in 50100 mL Pt dish at ca 525° and treat charred mass with hot H20 to

dissolve sol. salts. (In case of lowpurity products, addn of few drops pure olive oil,

as in 31.012, may be desirable.) Filter thru ashless paper, ignite paper and residue to

white ash, add filtrate of sol. salts, evap. to dryness, and ignite at ca 525° to const

wt.

31.015 Soluble and Insoluble AshOfficial Final Action

Ash sample as in 31.012 or 31.013. Add 10 mL H 2O to ash in the Pt dish, heat

nearly to boiling, filter thru ash less paper, and wash with hot H 2O until combined

filtrate and washings measure ca 60 mL. Return paper and contents to Pt dish, ignite

carefully, cool, and weigh. Calc. % H2Osol. and H2Oinsol. ash.

31.016 Alkalinity of Soluble AshOfficial Final Action

Cool filtrate from 31.015 and titr. with 0.1N HCI, 50.01150.012, using Me orange,

6.005(g). Express alky in terms of mL 1N acid/100 g sample.

50.011 Preparation of Standard Solutions

Following table gives approx. vols of 36.538% HCI required

to make 10 L std solns:

Approx. normality 0.D1 0.02 0.10 0.50 1.0 mL HCI to be dild to 10 L 8.6 17.2 86.0 430.1 860.1

50.012 Standard Sodium Hydroxide Method (6)

Titr. 40 mL against std alkali soln, 50.03450.036, of ca same concn as acid

being stdzd in 300 mL flask that has been swept free from CO2 , using CO2 free H2 0

and 3 drops phthln.

Normality = (mL std alkali x normality of alkali)/mL HCI.

If more concd than desired, dil. soln to required normality value by following

formula: V1 = V2 x N2/N1

where N2 and V2 represent normality and vol. of stock soln, resp., and V1 =

vol. to which stock soln should be dild to obtain desired normality, N1.

Check exact concn of final soln by titrn as above. Normality will be exact

only if same indicator is used in detn as in stdzn. Restdze if indicators other than

phthln are used.

50.034 Preparation of Standard Solution

Following table gives approx. vols of NaOH soln (1 +1) necessary to make

10 L of std solns:

Approx.normality 0.01 0.02 0.10 0.50 1.0 mL NaOH to bedild to 10 L 5.4 10.8 54.0 270.0 540.0

Add required vol. of NaOH soln (1 +1) to 10 L CO 2 free H2O. Check

normality, which should be slightly high, as in 50.035, and adjust to desired concn

by following formula: V1 = V2 x N2/N1

where N2 and V2 represent normality and vol. stock soln, resp., and V 1 vol. to

which stock soln should be dild to obtain desired normality, N1 . Stdze final soln as in

50.035 or 50.036.

31.017 Alkalinity of Insoluble AshOfficial Final Action

Add excess 0.1N HCI (usually 1015 mL) to ignited insol. ash in Pt dish,

31.015, heat to incipient boiling on hot plate, and cool. Transfer quant. to

erlenmeyer and titr. excess HCI with 0.1N NaOH, using Me orange. Express alky in

terms of mL 1N acid/100 g sample.

AOAC Official Method 943.05

Dry Substance in Corn Syrups and Sugars

Method I—By Hydrometer

First Action 1943

Final Action 1997

(Tables 943.05A–C—Final Action 1986.)

A. Apparatus

(a) Water bath.—Insulated H2O bath with stirrer and thermostatic control, held at

60°C.

(b) Cylinders.—Pyrex, 15 x2 1/4 in. (38 x5.7 cm), without lip.

separated on metal rod by ca 8 cm. Rod is fixed in lower stopper but does not extend

through it. Top stopper is free to move on rod, although tight enough to maintain

predetermined position, preventing evaporation during heating.

(d) Baume hydrometers.—Streamlined type, modulus 145, standardized at 15.56°

with range 35–45° Be in 0.1° Be; length overall 12–13 in. (30.5–33 cm); body diameter

0.77–0.79 in. (2 cm); scale length 147–155 mm.

B. Determination

Fill cylinder with syrup to within 10 cm of top, taking care that sides are free from

syrup. Seal cylinder with stopper seal, placing bottom stopper within 1 cm of syrup

surface and closing cylinder with top stopper. Immerse cylinder in H2O bath at 60°C

(140°F) so that level of syrup is ca 5 cm below level of H 2O. Immerse hydrometer in H2O

bath. When syrup in cylinder is free of air and has reached temperature of bath (ca 90

min), raise cylinder until surface of syrup is at eye level. Remove stopper seal and insert

previously dried hydrometer. After ca 10 min, read hydrometer. To obtain commercial

Baume, add 1° Be to observed reading of hydrometer:

Commercial Baume = Be (140°F/60°F) + 1 Be

Table 943.05A: Commercial Baume table for dry substance in corn syrup and high

fructose corn syrup

(Commercial Baume = Be 140°F/60°C + 1° Be)

Fructose, % DB

Comm ercial Baume

extrose equival ent (top); maltos e, % DB (botto m)

Dry substance,a %

fructose corn syrup

66.46 66.61 66.99 67.00 67.43 67.53 68.24 69.88

70.02 70.12 70.13

68.37 68.52 68.91 68.91 69.34 69.47 70.19 71.88

72.02 72.14 72.15

70.28 70.44 70.84 70.83 71.27 71.41 72.15 73.90

74.05 74.17

74.19

72.20 72.36 72.78 72.76 73.21 73.36 74.11 75.92

76.09 76.20 76.24

74.13 74.31 74.73 74.70 75.15 75.33 76.09 77.95

78.26 78.29

76.09 76.25 76.69 76.65 77.10 77.31 78.08 80.00

80.32 80.36

78.05 78.22 78.67 78.60 79.06 79.29 80.07 82.04

82.44

80.02 80.20 80.66 80.58 81.04 81.31 82.08

82.01 82.18 82.65 82.56 83.03 83.32 84.09

a Dry substances are left blank whenever the carbohydrate solutions are supersaturated with

respect to dextrose and, therefore, do not exist as one (liquid) phase.

Table 943.05B: Commercial Baume table of refractive index of corn syrups and high

fructose corn syrups at 45°C

Table 943.05B: Commercial Baume table of refractive index of corn syrups and

high fructose corn syrups at 45°C

(Commercial Baume = Be 140°F/60°C + 1° Be)

Fructose, % DB

Comm ercial Baum e

extros e equiva lent (top); maltos e, % DB (botto m)

28 32 42 42 50 55 63 95 42 55 90

15 13 33 50 18 30

Refractive indexa at 45°C

6 1.4588 1.4585 1.4579 1.4585 1.4583 1.4575 1.4579 1.4571 1.4566 1.4565 1.4561

1.4626

7 1.4637 1.4633 1.4632 1.4630 1.4622 1.4627 1.4618 1.4613 1.4613 1.4607

8 1.4686 1.4683 1.4675 1.4681 1.4678 1.4671 1.4675 1.4666 1.4661 1.4661 1.4654

9 1.4733 1.4732 1.4725 1.4730 1.4728 1.4720 1.4724 1.4715 1.4710 1.4709 1.4703

0 1.4784 1.4784 1.4775 1.4781 1.4778 1.4771 1.4775 1.4765 1.4758 1.4752

1 1.4837 1.4836 1.4827 1.4832 1.4829 1.4822 1.4826 1.4816 1.4810 1.4803

2 1.4890 1.4890 1.4880 1.4885 1.4881 1.4874 1.4878 1.4867 1.4854

3 1.4944 1.4945 1.4934 1.4939 1.4935 1.4928 1.4932

a Refractive indices are left blank whenever the carbohydrate solutions are

4 1.5001 1.5001 1.4990 1.4994 1.4990 1.4983 1.4986

supersaturated with respect to dextrose and, therefore, do not exist as one (liquid) phase.

Determine corresponding dry substance from Table 943.05A.

References:

Ind. Eng. Chem. Anal. Ed. 15, 193(1943).

J. Agric. Food Chem. 32, 971(1984).

JAOAC 68, 259(1985).

C. Method II—By Refractometer

(Applicable only to liquid samples containing no undissolved solids.)

Determine refractometer reading at 45°C. Circulate H2O through jackets of

refractometer long enough to let temperature of prisms and of syrup reach equilibrium,

continuing circulation during observation, and taking care that temperature is held

constant. From Table 943.05B and C obtain commercial Baume corresponding to

observed refractive index. From Table 943.05A obtain corresponding dry substance.

References:

Ind. Eng. Chem. Anal. Ed. 16, 161(1944).

J. Agric. Food Chem. 32, 971(1984).

JAOAC 68, 259(1985).

Revised: March 1998

Table 943.05C: Refractive index table for dry substance in corn syrups and high

fructose corn syrups

Table 943.05C: Refractive index table for dry substance in corn syrups and

high fructose corn syrups

extros e equiva lent (top); maltos e, % DB (botto m) Fructose, % DB

Refrac tive index at 45°C 28 32 42 42 50 55 63 95 42 55 90

15 13 33 18 30

Dry substance,a %

1.4550 64.93 65.18 65.83 65.60 66.09 66.50 66.99 68.95 69.30 69.42 69.68

1.4600 66.92 67.19 67.86 67.62 68.13 68.56 69.07 71.11 71.46 71.59 71.86

1.4650 68.93 69.16 69.86 69.62 70.14 70.59 71.12 73.23 73.60 73.72 74.00

1.4700 70.92 71.11 71.82 71.58 72.13 72.58 73.14 75.29 75.69 75.82 76.11

1.4750 72.83 73.02 73.76 73.52 74.07 74.55 75.12 77.34 77.76 77.89 78.20

1.4800 74.73 74.90 75.67 75.43 75.99 76.48 77.08 79.37 79.93 80.24

1.4850 76.58 76.76 77.55 77.31 77.88 78.40 79.01 81.37 81.94 82.27

1.4900 78.42 78.59 79.40 79.16 79.75 80.27 80.91 84.26

1.4950 80.22 80.39 81.22 80.98 81.59 82.12 82.78

1.5050 83.76 83.90 84.79 84.56 85.19 85.75 86.45

a Dry substances are left blank whenever the carbohydrate solutions are

supersaturated with respect to dextrose and, therefore, do not exist as one (liquid) phase.

AOAC Official Method 972.45

Thermophilic Bacterial

Spores in Sugars

Microbiological Method

First Action 1972

Final Action 1989

(Sugar, both beet and cane, may carry spores of all 3 groups of thermophilic

bacteria that are important as spoilage agents in lowacid canned foods, i.e., flat sour

bacteria [Bacillus stearothermophilus], thermophilic anaerobes not producing H2S

[Clostridium thermosaccharolyticum], and sulfide spoilage bacteria or thermophilic

anaerobes producing H2S [C. nigrificans]. These bacteria are not of health significance,

but excessive numbers may survive commercial heat processes.)

A. Sampling

Take 225 g (0.5 lb) laboratory samples from 5 separate bags or barrels of shipment

or lot, place in clean containers, and seal.

Sample liquid sugar by drawing 5 separate 200–250 mL (6–8 oz) portions during

pumping transfer from tank trucks to storage tanks or at refinery during filling of tank

trucks.

Number of laboratory samples will vary in relation to size of shipment or lot. If

there is significant variability in lot, this fact will become evident, in majority of cases,

through individual tests on the 5 laboratory samples.

B. Preparation of Test Portion

(a) Dry sugar.—Place 20 g test portion in sterile 150–250 mL Erlenmeyer marked

to indicate 100 mL. Add sterile H2O to 100 mL mark. Bring rapidly to bp, and boil 5 min.

Replace liquid evaporated with sterile H2O.

(b) Liquid sugar.—Add test portion containing 20 g dry sugar, determined on basis

of °Brix (e.g., 29.41 g 68° Brix [%] liquid sugar is equivalent to 20 g dry sugar), to sterile

250 mL flask and proceed as in D(a).

C. Culture Media

(a) Glucose tryptone agar.—For detection of flat sour bacteria. Use commercially

standardized dehydrated medium (Dextrose Tryptone agar) preferably, or prepare as

follows: Suspend 10.0 g tryptone, 5.0 g glucose, 15.0 g agar, and 0.04 g bromocresol

purple in 1 L H2O, and mix thoroughly. Final pH should be 6.7 ± 0.1. Autoclave 30 min

at 121°C and cool to 55°C.

(b) Liver broth.—For detection of thermophilic anaerobes not producing H2S (C.

thermosaccharolyticum). Mix 500 g chopped beef liver with 1 L H2O. Slowly boil

mixture 1 h, adjust to ca pH 7.0, and boil additional 10 min. Press boiled material through

cheesecloth and dilute liquid to 1 L. To broth, add 10.0 g peptone and 1.0 g K2HPO4, and

adjust to pH 7.0. To test tube, add 1–2 cm previously boiled ground beef liver and 10–

12 mL broth. Sterilize 20 min at 121°C. Before using medium, unless freshly prepared,

exhaust by subjecting to flowing steam (cid:0) 20 min, and, after inoculation, stratify with 5–

6 cm layer of plain nutrient agar (common formula) that has been cooled to 50°C.

10.0 g tryptone, 1.0 g Na2SO3, and 20.0 g agar in 1 L H2O, and mix thoroughly. At time

agar is added to tube, place clean iron strip or nail in each tube. No adjustment of reaction

is necessary. Prepare medium and Na2SO3 solution, if used in place of solid Na2SO3, fresh

weekly. Autoclave medium 20 min at 121°C and cool to 55°C.

D. Culture Technique

(a) Flat sour spores.—Into 5 separate Petri dishes, pipet 2 mL boiled sugar

solution. Cover and mix inoculum with glucose tryptone agar. Incubate plates 35–48 h at

55°C and, to prevent drying of agar, humidify incubator. Combined count from 5 plates

represents number of spores in 2 g original sugar. Multiply this count by 5 to express

results in terms of number of spores/10 g sugar.

Characteristic colonies are round, 1–5 mm in diameter, with typical opaque central "spot,''

and, usually, surrounded by yellow halo in field of purple. This halo may be insignificant

or missing with certain low acidproducing types or if plate is so thickly seeded that entire

plate has yellow tinge. Typical subsurface colonies are compact and may approach "pin

point" conditions.

If identity of subsurface colonies is doubtful, observe nature of surface colonies. If

they show reasonable purity of formed flora, assume that subsurface colonies have been

formed by similar bacterial groups. If plate is heavily seeded, counts may not be accurate

and colony structure and size may be atypical. If plates are so heavily seeded that

counting is impractical, dilute original solution and repeat procedure.

To determine if typical subsurface colonies are flat sour organisms, apply streak from

colonies to agar plates to determine surface characteristics.

(b) Thermophilic anaerobes not producing hydrogen sulfide.—Divide 20 mL

boiled sugar solution equally among 6 liver broth tubes and stratify liquid medium with

plain nutrient agar. After agar has solidified, preheat to 55°C and incubate 72 h at that

temperature.

Thermophilic anaerobes not producing H2S are identified by splitting of agar,

presence of acid, and, occasionally, cheesy odor. Method is suitable as qualitative test but

provides only rough estimation; results cannot be expressed as number of spores/unit

weight sugar.

6 freshly exhausted tubes containing modified sulfite agar. Incubate 48 h at 55°C.

In sulfite agar, sulfide spoilage bacteria form characteristic blackened spherical

areas. Due to solubility of H2S and its fixation by Fe, no gas is noted. Some thermophilic

anaerobes not producing H2S generate relatively large amounts of H2, which splits agar

and reduces sulfite, thereby causing general blackening of medium. This condition,

however, is readily distinguishable from restricted blackened area mentioned above.

Count blackened areas to obtain quantitative results.

E. Reporting Results

Report flat sour and sulfide spoilage results as number of spores/10 g sugar. Report

thermophilic anaerobes not producing H2S as number of tubes positive or negative (+

or).

References:

JAOAC 19, 438(1936); 21, 457(1938); 55, 445(1972).

AOAC Official Method 991.12

Salmonella in Foods

Hydrophobic Grid Membrane Filter (ISOGRID)

Screening Method

First Action 1991

Final Action 1994

(Applicable to detection of Salmonella in all foods.)

A. Principle

Hydrophobic grid membrane filter (HGMF) uses membrane filter imprinted with

hydrophobic material in grid pattern. Hydrophobic lines act as barriers to spread of

colonies, thereby dividing membrane filter surface into separate compartments of equal

and known size.

B. Interlaboratory Study

See Table 991.12 for the results of the interlaboratory study supporting the

acceptance of the method.

C. Apparatus, Culture Media, and Reagents

(a) HGMF.—Membrane filter has pore size of 0.45 (cid:0) m and is imprinted with

nontoxic hydrophobic material in grid pattern. ISOGRID (QA Life Sciences, Inc.,

6645 Nancy Ridge Dr, San Diego, CA 92121, USA), or equivalent, meets these

specifications.

(b) Filtration units for HGMF.—With 5 (cid:0) m mesh prefilter to remove food

particles during filtration. One unit for each sample. ISOGRID (QA Life Sciences, Inc.),

or equivalent, meets these specifications.

are satisfactory.

(d) Blender.—High speed to operate at 20 000 rpm (Waring or equivalent), with

500 mL glass or metal blender jars with covers. One jar for each test sample.

(e) Vacuum pump.—Water aspirator vacuum source is satisfactory.

(f) Manifold or vacuum flask.

(g) Peptone diluent.—Dissolve 1.0 g peptone (Difco or equivalent) in 1 L H2O.

Dispense sufficient volume into dilution bottles to give 99 ± 1 mL after autoclaving

15 min at 121°C.

(h) Lactose broth.—Dissolve in 55°C water bath, with stirring, 3.0 g beef extract

and 5.0 g Polypeptone or peptone in 1 L H2O. Add 5.0 g lactose. Dispense 225 mL

portions into 500 mL flasks. Autoclave 15 min at 121°C. Aseptically determine volume

and adjust if necessary to 225 mL. Final pH should be 6.7 ± 0.2.

(i) Trypticase (tryptic) soy broth.—Suspend 17.0 g Trypticase or tryptone

(pancreatic digest of casein), 3.0 g Pytone (papaic digest of soy meal), 5.0 g NaCl, 2.5 g

K2HPO4, and 2.5 g glucose in 1 L H2O. Heat gently to dissolve completely. Dispense

225 mL portions into 500 mL flasks. Autoclave 15 min at 121°C. Aseptically determine

volume and adjust if necessary to 225 mL. Final pH should be 7.3 ± 0.2.

(j) Reconstituted nonfat dry milk with brilliant green dye (NFDM–BG).—Suspend

100 g dehydrated NFDM in 1 L H2O; mix by swirling until dissolved. Autoclave 15 min

at 121°C. Add brilliant green dye solution, (t), after blending test portion/broth mixture as

in D(e).

(k) Tetrathionate broth (with iodine and brilliant green).—Suspend 5.0 g

Polypeptone, 1.0 g bile salts, 10 g CaCO3, and 30 g Na2S2O3∙5H2O (QA Life Sciences,

Inc. or equivalent) in 1 L H2O, mix thoroughly, and heat to boiling (precipitate will not

dissolve completely). Cool to <45°C and store at 5–8°C. Prepare I2–KI solution by

dissolving 5 g KI in 5 mL sterile H2O, adding 6 g resublimed I2, dissolving, and diluting

to 20 mL with sterile water. Prepare brilliant green solution by dissolving 0.1 g dye in

sterile water and diluting to 100 mL. On day medium is used, add 20 mL I2–KI solution

and 10 mL brilliant green solution per 1 L basal broth. Resuspend precipitate by gentle

agitation and aseptically dispense 10 mL portions in 16 x150 mm sterile tubes. Do not

heat medium after addition of I2–KI and dye solutions. Temper to 25–35°C before use.

(l) EF 18 agar (EF18).—Suspend 5.0 g proteose peptone, 3.0 g yeast extract,

10.0 g Llysine monohydrochloride, 2.5 g Dglucose, 15.0 g sucrose, 1.5 g MgSO4∙7H2O,

1.5 g bile salts, 0.3 g sulfapyridine, 0.03 g bromothymol blue sodium salt, and 15.0 g agar

[QA Life Sciences, Inc. A002 (EF18 dehydrate) or equivalent] in 1 L H2O and heat to

boiling with stirring to dissolve completely. Do not autoclave this medium. Cool to 45–

50°C. To prepare novobiocin solution, dissolve 0.15 g novobiocin in 10 mL H2O and

filtersterilize using 0.45 (cid:0) m membrane filter. Add 1.0 mL sterile novobiocin solution to

1.0 L tempered EF18 agar base. Mix well and dispense 20 mL volumes into Petri dishes.

Final pH of solidified medium should be 6.8 ± 0.1. Store unused portion of novobiocin

solution at 4–6°C until needed. (Note: Correct pH adjustment is crucial to performance of

this medium. Use flat surface pH probe to verify pH of solidified medium. Alternatively,

aseptically adjust pH of molten, tempered agar to 6.6 ± 0.1 with sterile 1M HCl or NaOH

just before pouring into Petri dishes.)

(m) Triple sugar iron agar (TSI).—Suspend ingredients (1) or (2) in 1 L H2O, mix

thoroughly, and heat with occasional agitation. Boil ca 1 min until ingredients dissolve.

Fill 16 150 mm tubes ½ full and cap or plug so that aerobic conditions are maintained

during use. Autoclave 12 min at 121°C. Before medium solidifies, place tubes in slanted

position so that deep butts (ca 3 cm) and adequate slants (ca 5 cm) are formed on

solidification. (1) 20 g Polypeptone, 5.0 g NaCl, 10 g lactose, 10 g sucrose, 1 g glucose,

0.2 g Fe(NH4)2(SO4)2∙6H2O, 0.2 g Na2S2O3, 0.025 g phenol red, and 13 g agar. Final pH

should be 7.3 ± 0.2. (2) 3.0 g beef extract, 3.0 g yeast extract, 15 g peptone, 5.0 g proteose

peptone, 1.0 g glucose, 10 g lactose, 10 g sucrose, 0.2 g FeSO4, 5.0 g NaCl, 0.3 g Na2S2O3,

0.024 g phenol red, and 12 g agar. Final pH should be 7.4 ± 0.2.

(n) Lysine iron agar (LIA; Edwards and Fife).—Dissolve 5.0 g Gelysate or

peptone, 3.0 g yeast extract, 1.0 g glucose, 10 g Llysine, 0.5 g ferric ammonium citrate,

0.04 g anhydrous Na2S2O3, 0.02 g bromocresol purple, and 15 g agar in 1 L H2O, and heat

until dissolved. Dispense 4 mL portions into 13 x100 mm test tubes and cap or plug so

that aerobic conditions are maintained during use. Autoclave 12 min at 121°C. Before

medium solidifies, place tubes in slanted position so that 4 cm butts and 2.5 cm slants are

formed on solidification. Final pH should be 6.7 ± 0.2.

(o) MacConkey agar (MAC).—Suspend 3.0 g proteose peptone or Polypeptone,

17 g peptone or Gelysate, 10 g lactose, 1.5 g bile salts No. 3 or bile salts mixture, 5.0 g

NaCl, 3.0 mL 1% neutral red (30 mg) solution, 1 mL 0.1% crystal violet (1.0 mg)

solution, and 13.5 g agar in 1 L H2O and mix thoroughly until homogeneous. Heat, with

occasional agitation, and boil 1–2 min until ingredients dissolve. Autoclave 15 min at

121°C. Cool to 45–50°C and pour 20 mL portions into 15 100 mm Petri dishes. Let dry ca

2 h with plates covered. Do not use wet plates. Final pH should be 7.1 ± 0.2.

(p) Sodium hydroxide solution.—1M. Dissolve 42.11 g 95% reagent NaOH in

sterile water and dilute to 1 L.

(q) Hydrochloric acid solution.—1M. Dilute 89 mL HCl to 1 L with sterile water.

(r) pH test paper.—Minimum range 6.0–7.6, with maximum gradations of 0.4 pH

unit per color change.

(s) Sterile distilled water.—Dispense 1 L H2O into 2 L widemouth flask or wide

mouth jar; plug or cap loosely. Autoclave 20 min at 121°C.

(t) Brilliant green dye solution.—1%. Dissolve 1 g dye in sterile water and dilute

to 100 mL. (Some batches of dyes are unusually toxic. Test all batches before use and use

only those that produce satisfactory results when tested with known positive or negative

test organisms.)

(u) Brilliant green dye water.—Prepare sterile water, (s), and add 2 mL 1%

aqueous brilliant green dye, (t), per liter sterile water. Mix well.

D. Preparation of Test Portions

(a) Powdered egg.—Aseptically open laboratory sample container and aseptically

weigh 25 g test portion into sterile, empty, widemouth screwcap pint (500 mL) jar. Add

ca 15 mL sterile lactose broth. Stir with sterile glass rod, sterile spoon, or sterile tongue

depressor to smooth suspension. Add 3 additional portions of lactose broth, 10, 10, and

190 mL, for total of 225 mL. Stir after each addition until test portion is suspended

without lumps. Cap jar securely and let stand 60 min at room temperature. Mix well by

shaking and determine pH with test paper. Adjust pH, if necessary, to 6.8 ± 0.2 with

sterile 1M NaOH or HCl; cap jar securely and mix contents well before determining final

pH. Loosen jar cap ca 1/4 turn and incubate 18–24 h at 35°C.

(b) Chocolate.—Aseptically weigh 25 g test portion into sterile blender jar. Add

225 mL sterile reconstituted NFDM–BG. Blend 2 min at high speed and decant blended

homogenate into sterile 500 mL jar. Cap jar securely and let stand 60 min at room

temperature. Mix well by shaking and determine pH with test paper. Adjust pH, if

necessary, to 6.8 ± 0.2 with sterile 1M NaOH or HCl; cap jar securely and mix contents

well before determining final pH. Add 0.45 mL 1% aqueous brilliant green dye and mix

well. Loosen jar cap 1/4 turn and incubate 18–24 h at 35°C.

225 mL sterile lactose broth and blend 2 min at high speed. Cap jar securely and let stand

60 min at room temperature. Mix well by shaking and determine pH with test paper.

Adjust pH, if necessary, to 6.8 ± 0.2 with sterile 1M NaOH or HCl; cap jar securely and

mix contents well before determining final pH. Aseptically transfer sample to sterile

500 mL widemouth screwcap jar. Loosen jar cap 1/4 turn and incubate 18–24 h at 35°C.

(d) Black pepper.—Aseptically weigh 25 g test portion into sterile 500 mL wide

mouth screwcap jar. Add 225 mL sterile Trypticase soy broth and mix well. Proceed as

in (a), beginning "Cap jar securely and let stand..."

(e) Nonfat dry milk.—Use sterile funnel to aseptically add 25 g test portion slowly

and gently to 225 mL sterile brilliant green dye water, C(u), in 500 mL widemouth

screwcap jar. Do not mix. Let soak undisturbed 60 min at room temperature. Do not mix

or adjust pH. Loosen jar cap 1/4 turn and incubate 18–24 h at 35°C.

(f) Whey powder.—Aseptically weigh 25 g test portion into sterile 500 mL wide

mouth screwcap jar. Add 225 mL sterile nutrient broth containing 2 mM Na2EDTA and

mix well. Proceed as in (a), beginning "Cap jar securely and let stand...".

(g) Other foods that require blending.—Aseptically weigh 25 g test portion into

sterile blender jar. Add 225 mL sterile lactose broth and blend 2 min at high speed.

Proceed as in (a) beginning "Cap jar securely and let stand...".

(h) Other foods that do not require blending.—Aseptically weigh 25 g test portion

into sterile 500 mL widemouth screwcap jar. Add 225 mL sterile lactose broth and mix

well. Continue as in (a), beginning "Cap jar securely and let stand...".

E. Isolation

(a) Selective enrichment.—Gently shake incubated test portion mixture and

transfer 0.1 mL to 10 mL tempered (25–35°C) tetrathionate broth, C(k). Mix inoculated

broth on Vortex mixer or by hand to disperse inoculum. Incubate in water bath 6–8 h at

35 ± 0.5°C.

(b) Filtration and selective isolation.—Mix incubated tetrathionate broth by hand

or Vortex mixer to resuspend. For raw meats, prepare 102 dilution by transferring 1.0 mL

into 99 mL sterile peptone diluent. Mix by shaking. For all other products, use undiluted

tetrathionate. (See Figures 986.32A and B [see 17.2.05].) Turn on vacuum source. Place

sterile filtration unit on manifold or vacuum flask. Open clamp A. Rotate back funnel

portion C. Aseptically place sterile HGMF on surface of base D. Rotate funnel forward.

Clamp shut by sliding jaws L of stainless steel clamp over entire length of flanges B

extending from both sides of funnel C and base D, rotating moving arm K into horizontal

(locked) position. Aseptically add ca 15–20 mL sterile H2O to funnel. Pipet required

volume of appropriate dilution into funnel. Apply free end of vacuum tubing E to suction

hole F to draw liquid through prefilter mesh G. Aseptically add additional 10–15 mL

sterile H2O to funnel and draw through mesh as before. Close clamp A to direct vacuum

to base of filtration unit and draw liquid through HGMF. Open clamp A. Rotate moving

arm K of stainless steel clamp into unlocked (ca 45° angle) position and slide jaws L off

of flanges B. Rotate back funnel C. Aseptically remove HGMF and place on surface of

predried EF18 agar. Avoid trapping air bubbles between filter and agar. Incubate EF18

agar 18–24 h at 42°C in nonhumidified incubator. If HGMF does not have typical or

suspicious colonies or does not contain growth, record as negative test result.

Table 991.12: Interlaboratory study results for HGMF method for Salmonella in

foods

Table 991.12: Interlaboratory study results for HGMF method for Salmonella

in foods

Food Level False negatives (%)a

100

No. test samples (MPN/g)

Positi Negat AOA HG

ve ive C/BAM MF

Choc

olate

0 0 A

54 22 (0.0) (0.0) (0.093)

1 1

36 42 (2.3) (2.3) B (0.0091)

Black

pepper

1 0 A

20 60 (1.6) (0.0) (0.023)

0 0 B

54 27 (0.0) (0.0) (0.093)

Soy

flour

0 2

6 85 (0.0) (2.3) A (0.0091)

0 0 B

22 67 (0.0) (0.0) (0.023)

Egg yolk powder

0 3 A

27 50 (0.0) (5.7) (0.023)

1 1 B

101

39 38 (2.6) (2.6) (0.093)

Nonf at dry milk

A 2 5

(0.043) 25 41 (4.7) (10.9)

B 3 0

(0.023) (6.0) (0.0) 19

47 a % False negatives = {(false negatives)/[(known negatives) + (false negatives)]}

x100.

(occasionally) blue colonies (lysinepositive and sucrosenegative reactions). Typically,

Salmonella produces colonies that are neither watery nor mucoid. Lysinenegative

bacteria and sucrosepositive bacteria produce yellow colonies.

F. Treatment of Typical or Suspicious Colonies

(a) Inoculation of TSI, LIA, and MAC.—Select 3 typical or suspicious colonies

from each HGMF. Using separate, sterile, completely cooled needle for each colony, pick

each selected colony and inoculate TSI slant with portion of colony by stabbing butt and

streaking slant. Without heating needle or obtaining more inoculum, inoculate LIA with

portion of colony by stabbing butt in 2 places and streaking slant. Without heating needle

or obtaining more inoculum, streak remainder of inoculum to MAC. Incubate TSI, LIA,

and MAC 24 ± 2 h at 35°C. Cap tubes loosely to maintain aerobic conditions while

incubating slants to prevent excessive H2S production.

(b) Presumptive positive reactions.—Salmonella cultures typically have alkaline

(red) slant and acid (yellow) butt, with or without H2S (blackening of agar) in TSI. In

LIA, Salmonella cultures typically have alkaline (purple) reaction in butt. Consider only

distinct yellow coloration in butt of LIA tube as acidic (negative) reaction. Do not

102

eliminate cultures that produce discoloration in butt solely on this basis. Most Salmonella

cultures produce H2S in LIA. Retain all presumptive positive Salmonella cultures on TSI

(alkaline slant and acid butt) for biochemical and serological tests whether or not

corresponding LIA reaction is positive (alkaline butt) or negative (acid butt). Do not

exclude TSI culture that appears to be nonSalmonella if reaction in LIA is typical

(alkaline butt) for Salmonella. Treat these cultures as presumptive positive and submit

them to further examination. LIA is useful in detection of S. arizonae and atypical

Salmonella strains that utilize lactose and/or sucrose. Discard only apparent non

Salmonella TSI cultures (acid slant and acid butt) if corresponding LIA reactions are not

typical (acid butt) for Salmonella.

G. Purification and Identification

(a) Appearance of Salmonella colonies on MAC.—Typical colonies appear

transparent and colorless, sometimes with dark centers. Salmonella will clear areas of

precipitated bile caused by other organisms sometimes present in medium.

(b) Purification of mixed cultures.—Examine MAC. If pure, proceed with

identification. If mixed culture, pick with needle 2 wellisolated typical or suspicious

colonies and inoculate TSI, LIA, and MAC as described above. Incubate and examine for

presumptive positive reaction.

on 3 presumptive positive TSI cultures from each HGMF as described in 967.27B–E (see

17.9.03) and 967.28A–D (see 17.9.07). As alternative to conventional tube system for

Salmonella, any one of the AOACapproved commercial biochemical kits may be used

for presumptive generic identification of foodborne Salmonella. See 978.24 (see 17.9.04),

989.12 (see 17.9.05), and 991.13 (see 17.9.06).

Reference:

JAOAC 73, 734(1990).

103

Ụ Ụ

Ầ

Ế

Ệ

PH N PH L C TI NG VI T

ế ầ ị ệ ấ ả ượ ư ụ ụ Ph n d ch ph l c Ti ng Vi t c đã đ t t c đ a vào trong bài báo cáo làm

104

ầ ph n chính.

Ả

Ệ

TÀI LI U THAM KH O

ủ ủ ễ ể ầ ị ị 1.Tr n Th Minh Hà (ch biên), Nguy n Th y Hà, Nguy n Th Thu Sang (2012),

ẩ ọ ườ ố ồ ệ ẩ ạ ự Hóa h c th c ph m, Tr ự ng Đ i hoc Công Nghi p Th c Ph m Thành Ph H Chí

Minh.

ệ ữ ủ ễ ề ạ ạ ẫ ố ị 2.Lê Văn Vi t M n (ch biên), L i Qu c Đ t,Nguy n Th Hi n, Tôn N Minh

ệ ầ ệ ế ế ạ ọ ự Công ngh ch bi n th c ph m ị Nguy t, Tr n Th Thu Trà (2011), ố ẩ , NXB Đ i h c Qu c

ố ồ Gia Thành ph H Chí Minh.

3.http://doan.edu.vn/doan/detaicongnghechebienduongglucose25442/

4.http://thuvienphapluat.vn/phapluat/timvanban.aspx?

105

keyword=&type=39&match=True&area=0&attempt=1

Đồ án phân tích thực phẩm: Một số đặc điểm tính chất, ứng dụng, quy trình sản xuất và tiêu chí chất lượng cũng như các phương pháp kiểm tra chất lượng của Đường Glucose

Ủ

Ậ

ƯỚ

Ẫ

NH N XÉT C A GIÁO VIÊN H

NG D N

Ụ

Ụ

M C L C

Ọ

Ệ

Ụ NHI M V MÔN H C

Ờ Ở Ầ L I M Đ U

Ữ Ế

Ụ

Ắ

ƯƠ

Ẩ

Ả

Ể

Ỉ NG PHÁP KI M TRA CH TIÊU S N PH M THEO

Ụ Ụ

Ầ

Ế

PH N PH L C TI NG ANH

Ụ Ụ

Ầ

Ế

Ệ

PH N PH L C TI NG VI T

Ả

Ệ

Có thể bạn quan tâm

Tài liêu mới

AI tóm tắt

Giới thiệu tài liệu

Đối tượng sử dụng

Từ khoá chính

Nội dung tóm tắt

Giới thiệu

Về chúng tôi

Việc làm

Quảng cáo

Liên hệ

Chính sách

Thoả thuận sử dụng

Chính sách bảo mật

Chính sách hoàn tiền

DMCA

Hỗ trợ

Hướng dẫn sử dụng

Đăng ký tài khoản VIP

093 303 0098

support@tailieu.vn

Phương thức thanh toán

Theo dõi chúng tôi

Facebook

Youtube

TikTok