Haemophilus influenzae tiết men beta-lactamase - kết quả nghiên cứu đa trung tâm trên 248 chủng phân lập được tại Việt Nam

ứ ế ả ế c t i Vi t Nam Haemophilus influenzae ti ch ng phân l p đ ậ ượ ạ t men beta-lactamase - k t qu nghiên c u đa trung tâm trên 248 ệ

ủ P. H. Van(1), P. T. Binh(2), B. T. T. Thuy(3), V. T. C. Hai(4), L. Q. Thinh(5), N. T. N. Lan(6), N. T. Ninh(7), N. T. Cuc(8), T.T.T. Trinh(9), L. T. K. Anh(10), P. V. Ca(11), D. M. Phuong(12).

i Vi

t Nam v t

ấ

ủ

ứ ạ

l ề ỷ ệ ế

ộ t beta-lactamse c a H. influenzae, do v y m t các nhà lâm sàng cũng nh vi sinh

ẩ

ệ ộ

t t ế ừ

ậ ư

ti ỏ ấ

ề Có r t ít các nghiên c u t ề

i Vi

ệ

ề

ế

ự

ộ t beta-lactamase và đ kháng kháng sinh d c trên m t

ệ

ứ ng pháp nghiên c u:

i Vi ừ

ứ Tìm hi u tình hình ụ ể t k nghiên c u đa trung tâm ti n hành t ế ế ươ

i Vi

c thu nh n t

ệ

ậ ừ ẵ

t Nam. 1/2003 đ n 6/2005, có 248 ch ng ế 10 b nh vi n khác nhau t ạ ệ ồ

ử

ệ ớ ạ ượ

ủ H. influenzae bao g m 194 ch ng ủ ồ t Nam, bao g m hai b nh ệ ồ ẩ i TP.H Chí Minh. Các ch ng vi khu n ủ ng pháp khu ch tán kháng sinh trong ươ

H. influenzae ti ạ ế ứ Trong th i gian t ấ ủ ấ ượ i Hà N i, m t b nh vi n l n t ệ ớ ạ ộ ệ ệ ệ

ế

ồ

ộ

ư ấ ả

t đ ế ượ

ủ

ế

ầ

c men beta-lactamase và h u nh t ề

ế

t men beta-lactamase đ kháng kháng sinh này cao h n (78%) vi khu n không ti

ề

ẩ

t v t

ơ l

t đ

ệ ề ỷ ệ ề

ự

ẩ

t đ

ượ

ế

ẩ

ớ

ư

ề

ẩ

ậ

ẩ ạ ả

ượ

ế

ậ

ti

l

ệ ề ỷ ệ ế

ớ

đ kháng kháng sinh gi a vi khu n

ấ

tr em có t

ng

ti

ư t beta-lactamase (65%) cao h n là các ch ng phân l p t ậ ừ

ữ ậ ừ ẻ

ủ

ơ

i Vi

ti

ệ

ạ

ẩ H. influenzae phân l p t ậ ừ ứ

các b nh ph m khác nhau t ẩ ế

l ộ ỷ ệ ế ệ ử ụ

ế

tắ Tóm t Đ t v n đ : ặ ấ nghiên c u đa trung tâm v vi khu n này là m t trong các đòi h i c p thi ứ lâm sàng t t Nam ạ M c tiêu nghiên c u: thi Ph ờ không xâm l n và 54 ch ng xâm l n đ i Đà N ng, và 7 b nh vi n t vi n l n t ệ ạ ộ c làm th nghi m phát hi n beta-lactamase và làm kháng đ ph này đ ồ th ch m t s kháng sinh th ng dùng trong c ng đ ng. ộ ố ạ ườ ủ t c các ch ng ả K t qu cho th y có đ n 49% các ch ng ti K t qu : ả ấ ế ế ẩ t beta-lactamase; 60% đ kháng sulfamethoxazol/trimethoprim và vi khu n kháng ampicillin đ u là các ch ng ti ủ ề t men betalactamase (44%); 8% ti ế ế ế ượ đ kháng azithromycin gi a hai nhóm vi khu n ti c đ kháng azithromycin và không có s khác bi ữ ề c men beta-lactamase. Nghiên c u cũng ghi nh n không có vi khu n nào đ kháng hay không ti ậ ề ứ ư amoxicillin/clavulanic acid. Không có vi khu n beta-lactamase [-] nào đ kháng v i cefaclor và cefuroxim, nh ng ề c ghi nh n đ kháng cefuroxim nh ng có trong nhóm vi khu n beta-lactamase [+], dù không có vi khu n nào đ ượ ạ c cefaclor, 2% đ 1% vi khu n kháng đ c ghi nh n nh y c m trung gian v i cefuroxim và có đ n 17% là nh y ớ ẩ t men beta-lactamase và c m trung gian v i cefaclor. Nghiên c u cũng cho th y không có s khác bi t v t ự ứ ả ấ ủ H. influenzae không xâm l n, nh ng các ch ng ẩ H. influenzae xâm l n và l t ỷ ệ ề H. influenzae phân l p t ườ ớ i l n l ỷ ệ ế (36%). t Nam mang m t t K t lu n: Vi khu n t men ậ ế beta-lactamase khá cao, và k t qu nghiên c u này đã khi n các nhà lâm sàng ph i xem xét vi c s d ng kháng ả H. influenzae. sinh amoxicillin-clavulanic acid nh là kháng sinh hàng đ u đi u tr nhi m trùng do ầ

ả ư

ề

ễ

ị

t Nam

ệ

Abstract Haemophilus influenzae with beta-lactamase – Results from the multicenter study on 248 strains isolated from Vi Background: There are very few studies in Viet Nam on the ratio of beta-lactamase producing H. influenzae, and the muticenter study on this target bacteria is one of the hot requirements from the clinical physicians as well as the clinical microbiologists in Viet Nam. Objectives: Surveillance the ratio af beta-lactamase producing H. influenzae and the antibiotic resistance of this bacteria based on the multicenter study in Viet Nam Methods: From 1/2003 to 6/2005, 248 H. influenzae isolates with 194 non-invasive and 54 invasive were collected t Nam; including two big hospitals in Hanoi, one in Danang, and 7 in Hochiminh from 10 different hospitals in Vi city. These isolates were carried out the beta-lactamase detection and the sensitivity testing by diffusion method against some most common used antibiotics in community. Results: The received results have demonstrated that 49% of the isolates were the beta-lactamase producers and all of the ampicillin resistant isolates were belong to these producers; 60% of the isolates were resistant to sulfamethoxazol/trimethoprim and the lactamase producers were resistant to this antibiotic with the higher ratio (78%) than the non-betalactamase producer (44%); 8% of the isolates were resistant to azythromycin and no difference in the resistant ratio between the producers and the nonproducers. The study has also reported that none of the isolates were resistant to amoxicillin/clavulanic acid; none of the isolates with beta-lactamase [-] were reported resistant to cefaclor and cefuroxime; but among the beta-lactamase [+], 1% were reported resistant to cefaclor, 2% intermediate to cefuroxime and 17% to cefaclor. The study also reported that there were no difference in the beta-lactamase produced ratio and the antibiotic resistant ratio between the invasive and non-invasive H. influenzae isolates, but the beta- lactamase producer ratio in the H. influenzae isolated from children were higher (65%) than from the adult (36%). Conclusions: The H. influenzae isolated from the different clinical samples in Vietnam did carry the beta-lactamase producing at the quite high ratio, and these findings have required the physicians to consider amoxicillin-clavulanic acid as the first antibiotic line for the treatment of infection causing by this pathogen.

HCM, (2)Công ty Nam Khoa, (3)Công ty GSK, (4)BV. Nhân Dân Gia Đ nh,

(5)BV. Nhi Đ ng 1,

(1)Đ iạ Hoc Y D c TP.

ị

ồ

ng,

(8)BV. Tai Mũi H ng TP. HCM,

ễ

ượ ươ

ọ

(9)BV. An Bình, (10)BV. Đa Khoa Đà N ng, ẵ

(6)BV. Ph m Ng c ọ ạ (11)BV. Lâm Sàng B nh Nhi t Đ i, ớ

ệ

*Tác gi chính, ả (7)BV. Nguy n Tri Ph Th ch, ạ (12)BV. B ch Mai ạ

1

Đặt v n đấ ề ộ ọ ầ ừ ẩ ị ừ ộ ấ ứ ệ ị ữ ướ ặ

ộ ượ ễ ờ ng h p vi khu n ợ ề

ầ ề ộ ể ừ

ậ (11). Ngoài s ự ằ ở gia tăng t ế ế ẩ ơ

ể ư ơ ề ể ề ắ

ế ệ ơ ề ế ng đ ướ

ở ả ượ ố

ng h p nhi m khu n ễ ặ ấ ườ ẩ ượ H. influenzae là m t trong các vi khu n đ c các nhà y h c th a nh n là hàng đ u, ch u trách ậ ẩ nhi m t 10-30% các tác nhân gây nhi m khu n ễ ệ ợ hô h p c p trong c ng đ ng tuỳ tr ng h p ườ ồ ấ ổ (1,2,3,4). Tr b nh lý và l a tu i c đây ampicillin ệ v n đ c coi là kháng sinh đ c tr h u hi u cho ẫ ẩ H. influenzae. Tuy nhiên chỉ các nhi m khu n m t th i gian ng n sau đó, vào năm 1974 đã có ắ ẩ H. các báo cáo v các tr ườ influenzae kháng ampicillin (5,6,7,8). Cho đ n nay ế ọ tình hình đ kháng này ngày càng tr m tr ng M ch trong m t th i gian h n, đi n hình nh ỉ ờ ư ở ỹ ơ ẩ H. l ng n t vi khu n 1984 đ n 1997, t ỷ ệ ế ắ t influenzae kháng ampicillin b ng c ch ti ế ế ơ ằ men b -lactamase gia tăng h n g p đôi: t ừ ấ ơ 15%(9,10) lên đ n 42% và th m chí vài bang lên ế vi l đ n trên 50% ỷ ệ ế b - khu n kháng ampicillin b ng c ch ti t men ơ ế lactamase, H. influenzae còn có th có các c ch ế ế khác giúp đ kháng kháng sinh nh c ch bi n đ i protein g n penicillin (PBP) đ đ kháng ổ ampicillin(12,13), amoxicillin/clavulanate(14) và các (15), c ch tăng th i ả cephalosporin th h 2 khác ế và bi n đ i ribosome đ đ kháng các ể ổ macrolides(9)...Chính nh ng khuynh h ề ữ ộ kháng này đã khi n ế H. influenzae tr thành m t c giám sát đ i t ng vi khu n r t c n ph i đ ố ượ ẩ ấ ầ không ch trong ph m vi qu c gia mà c ph m vi ả ỉ ạ ạ c đ giúp các nhà y h c có th có đ qu c t ượ ể ọ ố ế ể ị c phòng ch ng cũng nh đi u tr các chi n l ư ề ố ế ượ kháng sinh h p lý và h u hi u h n tr c các ữ ướ ệ ợ ẩ H. influenzae, m tộ tr ườ ợ nhi m khu n r t th ng g p đ i v i các nhà ố ớ ễ lâm sàng.

V t li u và ph ng pháp nghiên c u

ệ ớ ươ ứ ắ ệ ệ ạ ệ ề ệ ạ ị ệ ệ ệ ệ ợ ẫ ễ ệ ồ ệ

ậ ệ ệ ệ ng qui t ệ ạ ứ ậ ệ ệ Đây là nghiên c u đa trung tâm v i hai b nh ớ i mi n B c là B nh vi n B ch Mai và vi n t ạ ệ ề ệ ạ ệ t Đ i, m t b nh vi n Vi n Lâm Sàng B nh Nhi ệ ộ ệ ệ i mi n Trung là B nh vi n đa khoa Đà N ng, t ệ ẵ ạ ệ b y b nh vi n t i TP. H Chí Minh là B nh ả ồ vi n Ph m Ng c Th ch, B nh vi n Nhân Dân ệ ọ ạ ệ Gia Đ nh, B nh vi n Ch R y, B nh vi n Nhi ệ ng, B nh Đ ng 1, B nh vi n Nguy n Tri Ph ệ ươ ệ ờ vi n An Bình và B nh vi n Tai Mũi H ng. Th i ọ ệ ệ 1/2003 đ n 6/2005. gian nghiên c u b t đ u t ế ắ ầ ừ ứ ẩ H. influenzae v i tiêu ng là vi khu n Đ i t ớ ố ượ ượ ừ chu n đ a vào là các ch ng phân l p đ c t ủ ư ẩ các b nh ph m g i đ n xét nghi m vi sinh ẩ ế ử i các phòng thí nghi m vi sinh các th ạ ườ b nh vi n k c các b nh ph m là qu t h ng ệ ọ ẩ ể ả ệ ệ ẩ H. n u trên m t th ch phân l p, vi khu n ậ ặ ế ừ influenzae chi m đa s . Tiêu chu n lo i tr ạ ố ế ẩ

2

tích sau này. ủ ư c phân l p tr ậ ướ ờ c tháng 1/2003 và đ ệ K t qu ả ậ ủ i phòng thí nghi m tr ượ ừ ở ẩ ấ ế c thu nh n t ậ ừ ệ ể qu t h ng c a b nh nhân kho ọ ậ ệ ủ ừ ớ ạ ệ ệ ị ạ ấ

ạ ữ ượ ậ ặ ọ ạ ị ẵ ạ ế ừ ồ ệ ệ ệ ệ ầ ứ ự ế ủ ộ ệ ủ ệ ệ ồ ọ ạ ượ ọ ạ ố ồ ẩ ề ượ ượ ủ ị ế ệ ầ ẻ ệ ủ ệ ệ ể ứ ủ ị ẳ ạ ượ ủ ế ậ ậ ủ c trung tâm nghiên c u gi ượ ỷ ườ em t ữ ở ế ử ổ ị ư ạ c c y l i trên môi tr ư ữ ệ ị ạ ượ ề ứ ẩ ệ ủ ế

ậ ừ ệ

acid cefaclor (30mcg),

ườ ườ ứ ủ ế

ủ ư

ả ề ề ớ ế ượ c trình bày trong bi u đ 1 ượ ể c làm th ằ ệ ế Trong th i gian t 1/2003 đ n 6/2005, có 248 ờ ệ 10 b nh ch ng ủ H. influenzae đ ượ ệ vi n khác nhau, bao g m: Vi n Lâm Sàng B nh ồ ệ Nhi t Đ i (33 ch ng), B nh Vi n B ch Mai (50 ủ ệ ch ng), B nh Vi n Nhân Dân Gia Đ nh (39 ệ ủ Ch ng), B nh Vi n Đa Khoa Đà N ng (17 ệ ủ ch ng), B nh Vi n Ph m Ng c Th ch (62 ệ ủ ch ng), B nh Vi n Nhi Đ ng 1 (28 ch ng), ủ ệ ủ B nh Vi n Ch R y (9 ch ng), B nh Vi n An ệ ợ ẫ ệ ệ ệ ng, và B nh Bình, B nh Vi n Nguy n Tri Ph ươ ễ ệ Vi n Tai Mũi H ng TP. H Chí Minh (10 ồ ệ ch ng). Xét v ngu n g c b nh ph m, có 194 ủ ệ c coi là ch ng không xâm l n (nin- ch ng đ ấ ủ ủ ủ ế ừ c phân l p ch y u t INV=non-invasive) vì đ ậ ượ ị các b nh ph m là đàm, d ch ph qu n hay d ch t ị ả ị ẩ b nh nhân b viêm ph i hay h u (tr em) l y t ổ ị ấ ừ ệ ầ các b nh nhân b viêm là m xoang l y t ị ừ ấ ấ i là các ch ng xâm l n xoang; 54 ch ng còn l ủ ạ ừ c phân l p ch y u t (INV=invasive) vì đ ượ ị các b nh nhân b d ch não tu hay máu l y t ệ ấ ừ ị viêm màng não m v i h u h t là tr ừ 2 ế ủ ớ ầ ẻ ổ ấ tràn d ch màng ph i l y tháng đ n 2 tu i, hay t ị ừ b nh nhân b viêm ph i, hay m tai gi a l y t ữ ấ ủ ổ ừ ệ ổ t các b nh nhân b viêm tai gi a. V l a tu i ừ c a các b nh nhân, có 92 ch ng vi khu n phân ủ ủ b nh nhân 2 tháng đ n 2 tu i, 22 ch ng l p t ổ ậ ừ ệ b nh nhân trên 2 tu i đ n 15 tu i, phân l p t ổ ổ ế ậ ừ ệ b nh nhân 16 đ n 69 tu i, 79 ch ng phân l p t ổ ế ủ b nh nhân trên 60 tu i. và 55 ch ng phân l p t ổ ậ ừ ệ ủ ậ ừ ệ b nh i tính, 133 ch ng phân l p t Xét v gi ủ ề ớ b nh nhân n . nhân nam và 115 phân l p t ậ ừ ệ ữ Phân tích tình hình đ kháng kháng sinh c a ủ ề ượ c, các 248 ch ng ủ H. influenzae nghiên c u đ chúng tôi nh n th y có 49% (122 ch ng) các ậ ấ c men beta-lactamase, và g n ch ng là ti ầ t đ ế ượ ề t beta-lactamase là đ nh 100% các ch ng ti ế ủ kháng v i Ampicillin. K t qu v tính hình vi ế t beta-lactamase và đ kháng các kháng khu n ti ẩ sinh khác đ ồ sau đây:

ể ng d n kèm theo. Vi khu n đ ượ ẩ

ớ ỉ ậ ượ ạ ả ề ế ể ạ ả ớ ủ ớ ớ ượ ệ ồ , chúng tôi nh nậ Qua phân tích trên bi u đ 1 ủ H. influenzae là nh y c m th y 100% các ch ng ạ ả ấ v i Amoxicillin/clavulanic acid. Không có ch ng ủ ớ ủ nào là kháng v i cefuroxime và ch có 1 ch ng ề ỷ ệ l c ghi nh n là đ kháng cefaclor. Xét v t đ ượ nh y c m thì có đ n 99% là nh y c m và 1% là ạ ả trung gian v i cefuroxime, 92% nh y c m và 8% ề là trung gian v i cefaclor. Có 8% các ch ng đ kháng v i azithromycin, 48% kháng ampicillin, và 60% kháng sulfamethxazol-trimethoprim. ấ ượ ử ng đ ệ ạ ấ ậ ồ B ng 1 theo sau đây trình bày t ti l ả ỷ ệ ế ẩ không đ a vào nghiên c u là các ch ng vi khu n ứ ượ ư đ c l u ượ c th i gian này, hay tr t ướ ữ ạ ộ ệ là các ch ng phân l p đ c trên cùng m t b nh hai v trí l y b nh ph m khác nhau hay là nhân ệ ị hai th i đi m khác nhau, hay là các ch ng ủ ở ờ ẻ phân l p t ệ m nh hay không b nhi m khu n hô h p. Các ẩ ễ ệ c t các b nh ch ng ủ H. influenzae phân l p đ ượ ừ vi n đ trên m t các ng th ch nâu c c y gi ấ ố ệ máu ng a và g i ngay trong vòng (CA) ch t ử không quá m t tu n đ n trung tâm nghiên c u là ộ phòng thí nghi m vi sinh c a B môn Vi Sinh, Khoa Y, Đ i H c Y D c TP. H Chí Minh. H. T i trung tâm nghiên c u, các ch ng ứ ủ c c y phân l p l influenzae đ i trên m t các ấ ặ ậ ạ trong bình h p th ch nâu ch t máu ng a và ự ế ừ ạ ộ oC qua đêm, sau đó đ nh danh xác đ nh 37 n n ế ở ị ớ H. influenzae d a trên nhu c u X và V v i l i là ự ạ các que X và V mua t hãng Becton Dickenson ừ (BD). Đ thu n ti n cho vi c nghiên c u hàng H. c kh ng đ nh là lo t, các ch ng đ ữ ủ influenzae đ ch ng ứ ng TSB (trypticase soy trong các ng môi tr ố oC. Khi -70 broth) có 20% glycerol và l u tr H. làm th nghi m hàng lo t, các ch ng ủ ệ ườ influenzae l u tr đ ng ữ ượ ấ ạ th ch nâu máu ng a và sau đó đ c làm kháng ự sinh đ theo ph ng pháp khu ch tán kháng sinh ế ươ ồ trong th ch theo các chu n m c c a NCCLS v i ớ ự ủ ẩ ạ các đĩa kháng sinh ampicillin (10mcg), (10-5mcg), amoxicillin-clavulanic (30mcg), cefuroxime azithromycin (15mcg) và sulfamethoxazol- trimethoprim (27.75-1.25mcg) mua t hãng ừ Biorad. Môi tr ng làm kháng sinh đ là môi ồ ng HTM (Haemophilus Test Media) do trung tr ủ tâm nghiên c u pha ch theo h ng d n c a ẫ ướ ứ môi tr ng th ch Mueller Hinton NCCLS t ạ ườ ừ hãng BD, y u t Agar mua t V và bovine hemin ế ố ừ ồ Sigma. Song song v i làm kháng sinh đ , mua t ớ ừ ử vi khu n ẩ H. influenzae cũng đ nghi m phát hi n men beta-lactamase b ng đĩa ệ hãng BD theo qui trình gi y cefinase cũng mua t ừ ấ ể c dùng ki m h ẫ ướ ng các đĩa kháng sinh và qui trình tra ch t l ấ ượ ng pháp khu ch tán kháng kháng sinh đ ph ồ ế ươ H. influenzae ATCC 49247 và sinh trong th ch là ạ c dùng H. influenzae ATCC 49766; vi khu n đ ẩ ng đĩa Cefinase và qui trình ki m tra ch t l ấ ượ phát hi n beta-lactamase là S. aureus ATCC ệ 29213 và S. aureus ATCC 25922. Các thử nghi m ki m tra ch t l c làm song song ể ế v i m i l n làm th nghi m hàng lo t. Các k t ớ ỗ ầ c ghi nh n đ ng th i trên gi y và trên qu đ ờ ả ượ file Exel đ d dàng cho vi c th ng kê và phân ệ ể ễ ồ t men beta-lactamse và đ kháng m t s kháng sinh ộ ố ề

3

ạ ệ ệ ệ ệ ệ ệ ồ ậ ừ ệ ế ẩ H. influenzae phân l p t ẩ ệ ti ớ ệ ệ ẵ ấ ừ ẻ ệ ng ườ ớ ự ti ạ t beta-lactamase ậ ừ ừ t này đã t o nên s khác bi ở ớ ệ ẵ ệ ậ ợ ớ ệ ệ ạ ệ l ỷ ệ ế ệ ệ ệ l ti ậ ừ ệ ườ ớ ơ ỉ ệ ệ b nh vi n B ch Mai (28/50), vi n LSNĐ ệ (30/33), b nh vi n đa khoa Đà N ng (17/17), b nh vi n Nhi Đ ng 1 (28/28) là l y t tr em ệ so v i 100% b nh ph m t b nh vi n PNT (62) ừ ệ ệ i l n và và b nh vi n NDGĐ (39) là t ệ t chính s khác bi ệ ự hai b nh vi n v t ệ l ề ỷ ệ ế ệ ệ NDGĐ và b nh vi n PNT so v i các b nh vi n ệ ệ khác. Nh n xét này hoàn toàn phù h p v i phân tích mà chúng tôi đã th c hi n trên công trình ự ủ H. t beta-lactamase c a này cho th y t ấ i l n là influenzae phân l p t b nh nhân ng ố t r t có ý nghĩa th ng ch 36% (49/135) khác bi ệ ấ ti kê (P<0.001) v i t ủ H. t beta-lactamase c a l ớ ỷ ệ ế tr em 65% (73/113). influenzae phân l p t ậ ừ ẻ l ớ ỷ ệ ấ ế

các b nh nhân t ệ ệ ệ ệ

ạ ệ ệ ự c a ủ H. influenzae theo các b nh vi n tham gia ậ t chúng tôi nh n nghiên c u. Phân tích chi ti ứ các th y các vi khu n ấ i B nh vi n B ch Mai và Vi n b nh nhân t ệ ệ ạ ạ ệ t Đ i có t t men beta- l Lâm Sàng Nhi ỷ ệ ế ớ ệ lactamase cao nh t, 78% và 61%; k đó là các ế ấ các b nh nhân ch ng ủ H. influenzae phân l p t ệ b nh vi n đa khoa Đà N ng, 59%. T i TP. H ồ ạ ệ Chí Minh, các ch ng ủ H. influenzae phân l p tậ ừ i b nh vi n Ph m Ng c Th ch ạ các b nh nhân t ọ ạ ỷ ệ ế và b nh vi n Nhân Dân Gia Đ nh có t t ti ị men beta-lactamase th p h n khá nhi u, 27% và ề ấ ủ H. influenzae phân l p tậ ừ 26%; nh ng các ch ng ư các b nh nhân t i b nh vi n Nhi Đ ng 1 và các ồ ạ ệ b nh vi n khác tham gia nghiên c u l i khá cao, ứ ạ ệ ệ 57% và 53%. Đi kèm v i t t men th p h n ti ơ beta-lactamse, các vi khu n ẩ H. influenzae phân ạ i các b nh vi n Ph m l p t ạ ậ ừ Ng c Th ch và b nh vi n Nhân Dân Gia Đ nh ạ ị ệ ọ kháng ampicillin và azithromycin l cũng có t ỷ ệ ẩ H. influenzae phân cũng th p h n các vi khu n ơ ấ i b nh vi n B ch Mai, l p t các b nh nhân t ệ ạ ệ ệ ậ ừ vi n Lâm Sàng B nh Nhi t Đ i, b nh vi n Nhi ệ ệ ệ ớ ệ Đ ng 1, và các b nh vi n khác. ệ ồ Nguyên nhân c a các s khác bi ệ ủ ố ệ

ố ậ l ượ t men beta-lactamase t l t v t ệ ề ỷ ệ ế ự

ệ ố ớ ố ả t này có ph i ẩ khác nhau v ngu n g c b nh ph m là do t l ồ ề ỷ ệ c vi khu n hay không? Phân tích phân l p đ ượ ẩ ậ trình bày v ngu n g c các vi khu n ẩ trên b ng 2ả ồ ề ệ c theo các b nh vi n H. influenzae phân l p đ ệ ti ng ng, ứ và t ươ ỷ ệ ế t beta- ti chúng ta th y s khác bi ấ ệ lactamase c a ủ H. influenzae theo b nh vi n ệ không có m i quan h rõ nét v i ngu n g c vi ồ khu n là invasive hay non-invasive. ẩ ả bi u đ 2 ợ ể

ồ ố đ ủ

ữ ư ầ

Kháng

Trung gian

70%

Nh n xét này cũng phù h p v i k t qu phân ậ ớ ế c trình bày trong tích đ ồ cho th y tấ ỷ ượ ủ H. influenzae là hoàn t beta-lactamase c a ti l ệ ế toàn không liên quan đ n ngu n g c invasive hay ế non-invasive c a vi khu n (R=0.29). T l ỷ ệ ề ẩ kháng azithromycin và sulfamethoxazol- trimethoprim gi a hai nhóm invasive và non- invasive cũng h u nh không khác nhau (P>0.05). Tuy nhiên n u xét v tu i c a b nh ệ ế ừ nhân thì chúng ta s th y đa s b nh ph m t ẽ ấ ề ổ ủ ố ệ ẩ

4%

Ac

60%

7%

Amoxicillin- Clavulanic acid

50%

49%

Cu

48%

Cefuroxime

40%

Cr

Cefaclor

30%

Am

Ampicillin

20%

Az

10%

Azithromycin

1%

0% 8%

Bt

8% 0%

0%

Bi u đ 1:

ể

ề

Sultamethoxazol- Ac Cu Cr Trimethoprim T l ồ ỷ ệ ế BLM Beta-lactamase kháng sinh c a vi khu n ủ

BLM(+) t men beta-lactamase và đ kháng ẩ H. influenzae

4 B ng 1:

T l

t men beta-lactamase và đ kháng m t s kháng sinh c a

ả

ỷ ệ ế

ộ ố

ủ H. influenzae theo các b nh vi n tham gia nghiên c u ứ ệ

ệ

ề

Amox/Clav.acid

Cefuroxime

Cefaclor

Ampicillin

Azithromycin

SMX/TMP

BLM

(+)

100%

96%

18%

78%

14%

86%

78%

18%

12%

88%

78%

BV. B ch Mai ạ

Vi n LSNĐ

100%

39%

61%

21%

76%

58%

15%

27%

12%

88%

58%

ệ

BV. NDGĐ

100%

49%

26%

100%

26%

72%

95%

49%

100%

12%

59%

94%

59%

35%

100%

71%

18%

BVĐK. Đà N ngẵ

BV. PNT

100%

27%

0% 0%

50% 29%

5% 0%

95% 100%

26% 54%

6% 11%

68% 36%

5% 11%

0% 0%

95% 89%

50% 64%

0% 7%

BV. NĐ1

100%

57%

37%

58%

16%

84%

Các BV. Khác

100%

53%

ồ

36%

16% 84% B ng 2: ả 8% 91%

48%

100%

99%

49%

T ngổ

63% ẩ H. influenzae phân l p ậ 92% 60% t beta-lactamase

c theo b nh vi n và t

5% Ngu n g c các vi khu n 7% ệ

37% ố 45% ệ

8% 0% l ỷ ệ ế

ượ

B nh vi nInvasiveNon-invasive

ệ

BLM (+)BV. B ch Mai1( 2%)49( 98%)78%

BV.

ạ

LSNĐ7( 21%)26( 79%)61%BV. NDGD0( 0%)39(100%)26%BVĐK.

Đà N ng17(100%)0( 0%)59%

BV. PNT0( 0%)62(100%)27%BV.

ẵ

NĐ128(100%)0( 0%)57%Các BV khác1( 5%)18( 95%)53%Total54( 22%)194( 78%)49%

70%

H. influenzae non-INV

H. influenzae INV

H. influenzae

61%

60%

59%

54%

52%

49%

Ac Amoxicillin-

48%

50%

47%

Clavulanic acid

40%

30%

20%

Cu Cefuroxime Cr Cefaclor Am Ampicillin Az Azithromycin Bt Sultamethoxazol- Trimethoprim BLM Beta-lactamase

9%

8%

10%

0%

0% 0%

0%

BLM (+)

Am

Ac

Az

Bt

0%0% 1% Cr Cu Biểu đồ 2: Tỷ lệ tiết men beta-lactamase và tỷ lệ đề kháng kháng sinh

của các vi khuẩn H. influenzae so với non-invasive

98%

100%

BLM (+)

BLM (-)

90%

78%

80%

Ac

70%

Amoxicillin- Clavulanic acid

60%

Cu

44%

50%

Cefuroxime

40%

Cefaclor Ampicillin

30%

Cr Am Az

Azithromycin

20%

9% 8%

Bt

10%

0% 0%

1%

Bi u đ 3:

ể

Ac ồ

Bt ủ H. t

Sultamethoxazol- 1% 0% Trimethoprim Cr T l đ kháng kháng sinh c a ỷ ệ ề t men beta-lactamase so v i không ti

ớ

ế

Bi u đ 3 ể ấ t beta-lactamase có t ớ ế ố

ư ề ả c 1% ả ế ậ ề ả

influenzae ti men beta-lactamase ồ trình bày trên đây cho th y vi l khu n ẩ H. influenzae ti ỷ ệ ế đ kháng cao SMX/TMP (Bt) so v i vi khu n ẩ ề t beta-lactamase, tuy nhiên đ i v i không ti ớ ế t azithromycin thì vi khu n ti t hay không ti ế ẩ đ kháng nh nhau beta-lactamase đ u có t l ỷ ệ ề ậ (P>0.05). K t qu nghiên c u cũng ghi nh n ứ ế t men beta-lactamase là H. influenzae ti đ ế ượ ớ đ kháng và 17% nh y c m trung gian v i ạ ề t beta- cefaclor, trong khi đó trong nhóm không ti lactamase, chúng tôi ghi nh n không có vi khu n ẩ ớ nào đ kháng hay nh y c m trung gian v i ạ kháng sinh này. Đ i v i kháng sinh cefuroxime, ố ớ

5

ẩ ế ạ ẩ c th ượ ươ ả t beta-lactamase là nh y c m có 2% vi khu n ti trung gian, và không có vi khu n nào trong nhóm các vi khu n không ti ề t beta-lactamase là đ ế ẩ kháng hay nh y c m trung gian v i cefuroxime. ạ ả ớ pha ch đ

ộ

ệ ữ ệ ấ ạ ố ấ ấ (Haemophilus Test Media) mà NCCLS khuy nế cáo(26) cũng nh đ c đánh giá qua các nghiên ư ượ c u so sánh v i các ph ươ ng ti n đ ng ớ ứ ệ (27,28,29,30) dành cho vi khu n ẩ H. m i hoá khác ạ ế ượ c ng khó có th t influenzae th ể ự ườ i các phòng thí nghi m lâm sàng; và đây cũng t ệ ạ ề ề i sao các nghiên c u v đ chính là m t lý do t ứ ạ ỉ kháng kháng sinh c a ủ H. influenzae th ng ch ườ có th th c hi n đ c trong các công trình ượ ự ể nghiên c u t i các qu c gia i Âu M mà r t ít t ỹ ứ ạ đang phát tri n nh Vi ư ệ ể ế ấ t Nam. ế ớ ậ ự ấ ỷ ệ ệ ỉ i các n ế l ạ ệ t men c tiên ti n dao đ ng t ộ Các nghiên c u trên th gi ứ ế ẩ H. influenzae ti vi khu n ướ ế ả ệ ẽ

ủ ệ ệ ố ồ ề ệ ặ ậ ả ấ ợ ế i r t khó m c nh ng g p nh ng l ẩ ọ ườ ư ặ ứ ố ế Bàn lu n ậ M c dù H. influenzae là m t trong các tác nhân ặ ộ ng g p trong nh ng b nh lý vi khu n r t th ấ ẩ ườ ặ ng g p đ i v i các nhà lâm sàng – cũng r t th ặ ườ ấ ố ớ b nh lý nhi m khu n hô h p c p c ng ộ ễ ẩ ệ đ ngồ (1,2,3,4) – nh ng cho đ n nay các nghiên c u ứ ư vi sinh lâm sàng v tác nhân này r t ít khi đ ượ c ề ế i Vi t Nam. Do v y chúng ta hi m th c hi n t ệ ệ ạ c các tài li u, không ch trên các khi tìm th y đ ượ ấ ậ y văn qu c t c, ghi nh n mà c y văn trong n ướ ố ế l v t n su t gây b nh cũng nh t đ kháng ư ỷ ệ ề ấ ề ầ ượ ạ i c t kháng sinh c a ủ H. influenzae phân l p đ ậ này là Vi t Nam. Nguyên nhân chính c a th c t ự ế ệ i Vi vì đa s các phòng thí nghi m lâm sàng t t ạ Nam không phát tri n m y v các xét nghi m vi ệ ấ ể ườ ng t không có các môi tr sinh lâm sàng, đ c bi nuôi c y thích h p cho các vi khu n dù r t ấ th ư H. ạ ấ influenzae(16). ố ấ Vì men b -lactamse c a vi khu n ơ ả ụ

ỏ c ể cao ạ

ị ầ ề ậ l ộ ỷ ệ ề ớ ả ọ đ kháng này là khá cao, t ậ ể ẩ H. influenzae có th có kh ng v i Đài Loan 51-62% ỷ ệ ề ớ ấ ơ i cho đ n hi n nay b - cho th y t ế ừ lactamase t ố 15% đ n trên 50% và có khác nhau tuỳ qu c gia(31,32,21,22,23, 24,25,10), trong đó có l đáng chú ý là Tây Ban Nha 26-32%(31), Pháp 28-32%(32,22), Hoa Kỳ 34->50%(31,22,23,10), Singapore 25-27%(22,24), (31,32), và Đài Loan 56- H ng Kông 29-39% 60%(24,25). Trong công trình nghiên c u này c a ủ ứ ấ ỷ ệ H. l chúng tôi, k t qu ghi nh n cho th y t ế t ế b -lactamase là 49%, n u so sánh influenzae ti t Nam đ ng thì Vi v i các nghiên c u qu c t ứ ệ ớ ỷ ệ H. influenzae l trong hàng các qu c gia có t t ế b -lactamase cao nh t th gi i ch sau Đài ti ỉ ế ớ t Loan, h n c Hong Kong và Singapore. Có l ẽ ỷ t ế b -lactamase t iạ cao vi khu n l ẩ H. influenzae ti ệ t Nam có liên quan khá nhi u v i tình hình Vi ớ ề ệ (33). s d ng kháng sinh không ki m soát hi n nay ử ụ ệ tế H. influenzae ti Bên c nh ghi nh n t l ậ ỷ ệ men b -lactamase, công trình nghiên c u c a ủ ứ đ kháng cao chúng tôi cũng ghi nh n m t t v i kháng sinh sulfamethoxazol-trimethoprim ớ (60%). T l ươ ng (24,25) và Trung Qu cố đ ươ 65%(24). ổ ậ ế ề ự ề ể t men ẫ ế ế ư ượ ế ắ ổ

ơ ư ể ệ c ghi nh n t ắ ầ ượ ế ậ ở ằ ứ ế ậ ừ ậ l ỷ ệ ấ ồ t trong các nghiên c u giám sát kh ể ề ệ ị ỉ ượ ế ố ườ ẩ H. influenzae ủ ế ệ không có tác d ng trên các cephalosporin th h b -lactamase 2 cũng nh không b n vói các ư ề (17,18,19); do inhibitor nh clavulnate, sulbactam.. ư c câu h i vi khu n ẩ H. influenzae v y tr l i đ ả ờ ượ ậ ế ượ b -lactamase hay không sẽ t đ có kh năng ti ả c kháng giúp các nhà lâm sàng quy t đ nh đ ượ ế ị ế sinh đi u tr thích h p mà không c n ph i có k t ợ ả qu kháng sinh đ đ i v i các kháng sinh ồ ố khác(17,18,19). Tuy nhiên, hi n nay các nhà y h c đã ệ ả ghi nh n vi khu n c các kháng năng, dù còn r t hi m, đ kháng đ ề ế ượ sinh b -lactam không ph i do c ch ti b - t men ả ế ế (20,11) v i các lactamase mà do các c ch khác ơ ớ ế b -lactamase t ki u hình đ kháng nh không ti ư ề (20,11,12,13) (g i là BLNAR mà v n kháng ampicillin ọ = b -lactamase negative ampicillin resistance) hay t ế b -lactamase và kháng đ c amoxicillin- ti b - clavulanate(20,11,14,12) (g i là BLPACR = ọ lactamase positive amoxicillin clavulanate c các resistance), hay các ki u hình kháng đ ượ ể (21,22,23,24,25), cephalosporin th h 2 nh cefuroxime ế ệ cefaclor(22,23,25)..Chính vì v y vi c th c hi n ệ ự ậ ẩ H. influenzae cũng kháng sinh đ trên vi khu n ả r t c n thi ấ ầ năng phát tri n các đ kháng này, hay là trong ị ứ ng h p trên lâm sàng b nh nhân b d ng tr ợ ườ b -lactam và c n ph i s d ng ả ử ụ v i các kháng sinh ầ ớ các kháng sinh khác thay th . Tuy nhiên, khác ự v i đa s các vi khu n khác, môi tr ng th c ớ ẩ chu n m c HTM hi n kháng sinh đ ệ ườ ự ẩ ồ ủ H. N i b t trong đ kháng kháng sinh c a influenzae là s đ kháng ampicillin, ch y u ủ ế b -lactamase, đó là TEM-1 b ng c ch ti ế ế ơ ằ (35,36). và ROB-1(34) v i TEM-1 chi m đ n 90-92% ớ Tuy nhiên các nhà lâm sàng cũng nh nghiên c u ứ ế cũng đã ghi nh n ậ H. influenzae còn có c chơ bi n đ i protein g n penicillin (PBP=penicillin binding protein) giúp chúng có th đ kháng ể ề c ampicillin mà không qua c ch ti đ t men ế ế ượ b -lactamase(12,13,37,38,39,40). Ki u hình đ kháng ề th p niên BLNAR này b t đ u đ 80(41,42), và dù r ng khá cao Nh t chi m t (38,39,40), nh ng v n còn r t th p t đ n 28-29% ấ ạ i ẫ ư ế (22,25,37). Trong công Hoa Kỳ hay các n c khác ướ ủ trình nghiên c u c a chúng tôi, ch có m t ch ng ộ ứ ủ H. BLNAR đ c ghi nh n trong 126 ch ng ủ ậ t ế b -lactamase, nh ng có đ n influenzae không ti ế ư ả 23/128 (18%) ch ng có đ ng kính nh y c m ủ trung gian v i ampicillin. Chính k t qu này đã ớ ạ ả ế

6

ượ i Vi ượ ệ i Vi ầ ươ ệ ổ ề ọ ế ế ủ ứ ữ ế ơ c quan tâm vì cũng qua c ch này, ượ ả ộ ả ể ượ

Fang G, Fine M, Orloff J, et al (1990). New and emerging etiologies for community-acquired pneumonia with implications for therapy. Medicine 69, 307-316.

vi khu n l ỷ ệ t đ ế ượ ứ ệ t hay không ti ư nhi u nghiên c u t c ghi nh n ứ ạ ậ ở ế ư ứ ộ H. influenzae t ạ ệ ế ề ậ ộ ỷ ệ ể ủ ấ 2 và c làm chúng tôi lo ng i c ch bi n đ i PBP giúp ổ ế ế ạ ơ ể ẽ c ampicillin có th s H. influenzae đ kháng đ tr nên tr m tr ng trong t t Nam. ng lai t ạ ở ệ H. influenzae S dĩ c ch bi n đ i PBP trên ở H. c n đ ơ ầ influenzae có th kháng đ c amoxicillin- clavulanate(14,12) hay cefuroxim(15). Tuy nhiên cũng r t may m n là hi n nay t ẩ H. ắ ấ ế b - lactamase kháng t influenzae ti ế c amoxicillin-clavulanate hay cefuroxim dù đ ượ i các đã đ ề ượ ấ qu c gia tiên ti n nh ng hãy còn r t ố th pấ (21,22,23,25). Trong công trình nghiên c u này ủ H. influenzae nào c a chúng tôi, không có ch ng ủ c ghi nh n đ kháng amoxicillin/clavulanate đ ượ l hay cefuroxime, tuy nhiên cũng có m t t khá ế b -lactamase nh y c m ạ ả t th p là 2% các ch ng ti trung gian v i cefuroxim. ớ ừ ứ ẩ ẩ ự ớ ợ ớ ả ứ ị ặ ị ử ộ ượ ấ ủ ề ẩ ạ i c trên các b nh nhân t influenzae phân l p đ ệ ậ ế t Nam hi n nay. K t các b nh vi n l n t ệ ệ ệ ớ ạ t Nam cũng là qu nghiên c u đã cho th y Vi ấ ế ớ ấ ầ i r t c n m t trong nh ng đi m nóng c a th gi ể ph i quan tâm đ giám sát tình hình đ kháng ề ể khá cao vi kháng sinh c a ủ H. influenzae vì t l ỷ ệ b -lactamase. M c d u k t ế khu n ti c men ặ ầ ẩ hãy còn qu nghiên c u cũng đã cho th y t l ấ ỷ ệ ả t ế b -lactamase và ấ H. influenzae không ti r t th p ấ i có đ n 18% c ampicillin, nh ng l kháng đ ế ạ ượ ế b -lactamase có ki u hình t các ch ng không ti ủ ể nh y c m trung gian v i ampicillin và có th đây ạ ả ể ớ t Nam i Vi là d u hi u báo đ ng ệ ấ ố đã có bi n đ i PBP và s tr thành m t m i ộ ẽ ở ổ nguy trong đi u tr vì c ch kháng thu c này ố ế ơ ị ề còn có th giúp vi khu n kháng đ c các ẩ ượ ả h th cephalosporin ệ ế amoxicillin/clavulanate, m t kháng sinh hi n nay ộ ệ c th a nh n là hi u qu nh t đ đi u tr đ ị ấ ể ề ệ ả ậ ượ H. influenzae. Tuy nhi m khu n hô h p c p do ấ ấ ễ c nghiên nhiên nh n đ nh và d báo này c n đ ượ ầ ậ t là ph i có các nghiên c u c u thêm, đ c bi ứ ả ệ ứ ế phân t xác đ nh các đ t bi n gen gây nên bi n ế đ i PBP c a vi khu n nh đã đ c r t nhi u tác ổ ư c ngoài th c hi n n gi ả ướ ệ (14-34,38-15). ự ế t men TEM-1 ệ ả ứ Tài li u tham kh o 1. ả

2.

(22).

Zeckel ML, Jacobson JD, Guerra FJ,Therasse DG, Farlow D (1992). Loracarbef (LY163892) versus amoxicillin/clavulanate in the treatment of acute bacterial exacerbations of chronic bronchitis. Clin Ther 14, 214-229.

l ậ ể Công trình nghiên c u c a chúng tôi cũng ghi ủ b -lactamase là t men nh n có 1% vi khu n ti ế ậ k t qu này cũng kháng v i cefaclor, và có l ẽ ế H. phù h p v i các công trình nghiên c u cho là ế ế c cefaclor qua c ch ti t influenzae kháng đ ượ ơ men b -lactamase lo i ROB-1 (43), và t vi l ỷ ệ ạ t men ROB-1 r t th p so khu n ẩ H. influenzae ti ấ ấ (10). Tuy nhiên n u tìmế v i t ti l ớ ỷ ệ ế hi u trên các công trình nghiên c u khác, ể ả cefaclor không ph i là kháng sinh có hi u qu ệ c ghi trên H. influenzae vì t đ kháng đ l ượ ỷ ệ ề (22,23,25), đ c bi t n u so v i nh n là khác cao ớ ế ệ ặ đi m gãy PK/PD c a kháng sinh này thì t ỷ ệ ề đ ủ kháng có th lên đ n 97-100% ế ể

ứ

3.

Hoberman A, Paradise JL, Block S, et al. (1996). Efficacy of amoxicillin/clavulanate for acute otitis media: Relation to Streptococcus pneumoniae susceptibility. Pediatr Infect Dis J 15, 955-962.

ẩ ế ượ ệ ế

4.

Gwaltney JM. Sinusitis. In: Mandell GL, Bennett JE, Dolin R, eds. (1995). Mandell, Douglas and Bennett’s Principles and Practices of Infectious Diseases, 4th ed. New York, NY: Churchill Livingstone Inc; 585-590.

ế ề ượ ệ

Gunn BA, Woodall JB, Jones JF, Thornsberry C (1974)

ả ế ế

5.

Ampicillin-resistant Haemophilus influenzae. Lancet 11:845.

ẩ ủ

6.

Khan W, Ross S, Rodriguez W, Controni G, Saz AR (1974) Haemophilus influenzae type b resistant to ampicillin. JAMA 229:298.

ủ ượ ứ ủ

7.

Thomas WJ, McReynolds JW, Mock CR, Bailey DW (1974) Ampicillin-reistant Haemophilus influenzae. Lancet 1:313.

ạ

8.

Tomeh M, Starr SE, McGowan JE, Terry PM, Nahmias AJ (1974) Ampicillin-resistant Haemophilus influenzae type b infection. JAMA 229:295-297.

ỹ ấ ỉ ế

9.

ớ ớ ố ấ Công trình nghiên c u c a chúng tôi cho th y ủ c azithromycin và có đ n 8% vi khu n kháng đ t gi a hai nhóm ti t và không có s khác bi ế ữ ự b -lactamase. Có l sẽ ự c men t đ không ti không khác bi t này là do c ch đ kháng ơ azithromycin c a ủ H. influenzae hoàn toàn không b - t men có liên quan gì đ n kh năng ti ế lactamase c a vi khu n mà chính là do c ch ơ bôm đ y (efflux pump) kháng sinh ra ngoài và c ơ ẩ ẩ (44,45). T lỷ ệ ch bi n đ i ribosome c a vi khu n ổ ế ế đ kháng azithromycin đ c ghi nh n trong công ậ ề ớ trình nghiên c u c a chúng tôi là khá cao so v i các công trình nghiên c u khác t i M ch 0.2- ứ 0.5%(21,23,9), tuy nhiên hãy còn khá th p n u so l v i t đ kháng 97% trong công trình nghiên ớ ỷ ệ ề ủ H. c u c a Jacobs khi so sánh MIC c a ủ ứ influenzae đ i v i Azithromycin v i đi m gãy ể PK/PD(22).

Doern, G. V., A. B. Brueggemann, G. Pierce, H. P. Holley, Jr., and A. Rauch (1997). Antibiotic resistance among clinical isolates of Haemophilus influenzae in the United States in 1994 and 1995 and detection of beta-lactamasepositive strains resistant to amoxicillin-clavulanate: results of a national multicenter surveillance study. Antimicrob. Agents Chemother. 41:292–297.

K t lu n ậ

ứ

10.

Michael R. Jacobs (1999). Emergence of Antibiotic Resistance in Upper and Lower Respiratory Tract Infections. The American Journal Of Managed Care 5:11, S651-S661

ượ ệ ụ c men ế Công trình nghiên c u này đ nh m m c đích chính là phát hi n t ằ đ ượ c th c hi n ệ ự l ỷ ệ ế t ti b -lactamase c a vi khu n ẩ H. ủ

7

11.

Multicenter Surveillance of Antimicrobial Resistance of Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, and Moraxella catarrhalis in Taiwan during the 1998–1999 Respiratory Season. Antimicrobial Agents And Chemotherapy 44:5, 1342–1345

26.

Jacobs MR, Bajaksouzian S, Lin G, Appelbaum PC (1998). Susceptibility of Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae to oral agents: Results of a 1997 epidemiological study. Presented at the 98th General Meeting of the American Society for Microbiology; May 17-21, 1998; Atlanta, GA. [Abstract A-31].

12.

Susceptibility Testing;

Antimicrobial

NCCLS (2004). In Table 2E: Zone Diameter Interpretive Standars and Equivalent Minimal Inhibitory Concentration (MIC) breakpoints for Haemophilus spp. Performance Standards for Fourteenth Informational Supplement. 52-54

27.

Henri Dabernat, Catherine Delmas, Martine Seguy, Roseline Pelissier, Genevieve Faucon, Safia Bennamani, and Christophe Pasquier (2002). Diversity of beta-Lactam Resistance- Conferring Amino Acid Substitutions in Penicillin-Binding Protein 3 of Haemophilus influenzae. Antimicrobial Agents And Chemotherapy 46:7 2208–2218

13.

Michael R. Jacobs and Saralee Bajaksouzian (1997). Evaluation of Haemophilus influenzaeIsolates with Elevated MICs to Amoxicillin/Clavulanic Acid. Diagn Microbiol Infect Dis 28, 105-112.

28.

(1996).

Frank S. Kaczmarek, Thomas D. Gootz, Fadia Dib-Hajj, Wenchi Shang, Shawn Hallowell, and Melissa Cronan (2004). Genetic and Molecular Characterization of beta-Lactamase- Negative Ampicillin-Resistant Haemophilus influenzae with Unusually High Resistance to Ampicillin. Antimicrobial Agents And Chemotherapy 48:5, 1630–1639

Jane M. Gould, Gwendolyn J. Heidecker, and John J. LiPuma Haemophilus Nontypeable influenzaeSusceptibility: Effect of Inoculum Size and b - Lactamase Production. Diagn Microbiol Infect Dis 26, 95-98

Matic V;

Bozdogan B;

Jacobs MR;

14.

29.

amoxicillin/

Ubukata K; Appelbaum PC (2003). Contribution of beta-lactamase and PBP amino acid substitutions to amoxicillin/clavulanate resistance in b -lactamase-positive, clavulanate resistant Haemophilus influenzae. J Antimicrob Chemother 52(6):1018-21

Olarae Giger, Joel E. Mortensen, Richard B. Clark, and Alan Evangelista (1996). Comparison of Five Different Susceptibility Test Methods for Detecting Antimicrobial Agent Resistance Among Haemophilus influenzae Isolates. Diagn Microbiol Infect Dis 24, 145-153

15.

30.

K. Straker, M. Wootton, A. M. Simm, P. M. Bennett, A. P. MacGowan and T. R. Walsh (2003). Cefuroxime resistance in non--lactamase Haemophilus influenzae is linked to mutations in ftsI. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 51, 523–530

16.

Michael R. Jacobs, Saralee Bajaksouzian, Anne Windau, Peter C. Appelbaum, Gengrong Lin, David Felmingham, Christine Dencer, Laura Koeth, Mendel E. Singer, and Caryn E. Good (2002). Effects of Various Test Media on the Activities of 21 Antimicrobial Agents against Haemophilus influenzae. Journal Of Clinical Microbiology 40:9,. 3269–3276

31.

P. H. Van (2006). In: Cay dam va cac benh pham co dam – Cac cau hoi thuong gap. Cac ky thuat xet nghiem vi sinh lam sang cac benh pham khac nhau. Nha xuat ban Y hoc. Xuat ban lan 1 (đang in). 85-86.

17.

David Felmingham, Reuben N. Gruneberg and the Alexander Project Group (2000). The Alexander Project 1996-97: Latest susceptibility from this international study of bacterial pathogens from community-acquired lower respiratory tract infections. Journal of Antimicrobial Therapy 45, 191-203

Geo. F. Brooks, Janet S Butel, Stephen A Morse (2004). Jawetz, Melnick, & Adelberg’ s Medical Microbiology. Mc Graw Hill 23rd edition, 279-289

32.

18.

Betty A. Forbes, Daniel F. Sahm, Alice S Weissfeld (2002). Baily & Scott’ s Diagnostic Microbiology. Mosby 11th edition, 462-469

19.

Susan E. Beekmann, Kris P. Heilmann, Sandra S. Richter, Juan Garc´ıa-de-Lomas, Gary V. Doern, The GRASP Study Group (2005). Antimicrobial resistance in Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis and group A b -haemolytic streptococci in 2002–2003. Results of the multinational GRASP Surveillance Program. International Journal of Antimicrobial Agents 25, 148–156

NCCLS (2004). In Introduction to Table 1 through 1A and 2A through 2I for Use With M2-A8 – Disk Diffusion. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Fourteenth Informational Supplement. 17-29

33.

20.

Okumura J; Wakai S; Umenai T(2002). Drug utilisation and self-medication in rural communities in Vietnam. Soc Sci Med. 54(12),1875-86

Jones RN, Jacobs MR, Washington JA, Pfaller MA (1997). A 1994-95 survey of Haemophilus influenzae susceptibility to ten orally administered agents. Diagn Microbiol Infect Dis 27, 75-83.

34.

21.

Scriver, S. R., Walmsley, S. L., Kau, C. L. et al. (1994). Determination of antimicrobial susceptibilities of Canadian isolates of Haemophilus influenzae and characterization of their beta-lactamases. Canadian Haemophilus Study Group. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38, 1678–80.

35.

D.M. Johnson, H.S. Sader, T.R. Fritsche, D.J. Biedenbach, Ronald N. Jones (2003). Susceptibility trends of Haemophilus influenzae and Moraxella catarrhalis against orally administered antimicrobial agents: five-year report from the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 47, 373–376

22.

Daum RS, Murphey-Corb M, Shapira E, Dipp S. Epidemiology of Rob ß-lactamase among ampicillin-resistant Haemophilus influenzae isolates in the United States. J Infect Dis 1988;157:450-455.

36.

Michael R. Jacobs, David Felmingham, Peter C. Appelbaum, Reuben N. Grüneberg and the Alexander Project Group (2003). The Alexander Project 1998–2000: susceptibility of pathogens isolated from community-acquired respiratory tract infection to commonly used antimicrobial agents. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 52, 229–246

Scriver SR, Walmsley SL, Kau CL, et al. Determination of antimicrobial susceptibilities of Canadian isolates of Haemophilus influenzae and characterization of their ßlactamases. Antimicrob Agents Chemother 1994;38:1678-1680.

23.

37.

Jacobs, M. R., Bajaksouzian, S., Zilles, A. et al. (1999). Susceptibilities of Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae to 10 oral antimicrobial agents based on pharmacodynamic parameters: 1997 USA surveillance study. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 43, 1901–8.

Gary v. Doern, Ronald N. Jones, Michael A. Pfaller, Kari Kugler, and the Sentry Participants group (1999). Haemophilus influenzae and Moraxella catarrhalis from Patients with Community-Acquired Respiratory Tract Infections: Antimicrobial Susceptibility Patterns from the SENTRY Antimicrobial Surveillance Program (United States and Canada, 1997). Antimicrobial Agents and Chemotherapy 43: 2, 385–389

38.

24.

Seki, H., Kasahara, Y., Ohta, K. et al. (1999). Increasing prevalence of ampicillin-resistant, non-beta-lactamase-producing strains of Haemophilus influenzae in children in Japan. Chemotherapy 45, 15–21.

J. D. Turnidge, J. M. Bell, and the SENTRY Western Major Regional Variation in Pacific Plus Participants. Haemophilus influenzae Resistance in the Western Pacific: Results from SENTRY Western Pacific Plus (WP+) 1998-2000

39.

25.

Ubukata, K., Shibasaki, Y., Yamamoto, K. et al. (2001). Association of amino acid substitutions in penicillin-binding protein 3 with betalactam resistance in beta-lactamase-negative

Po-Ren Hsueh, Yung-Ching Liu, Jainn-Ming Shyr, Tsu- Lan Wu, Jing-Jou Yan, Jiunn-Jong Wu, Hsieh-Shong Leu, Yin- Ching Chuang, Yeu-Jen Lau, and Kwen-Tay Luh (2000).

8

43.

ampicillin-resistant Haemophilus influenzae. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 45, 1693–9

40.

James A Karlowsky, Geetika Verma, George G. Zhanel, Daryl J Hoban (2000). Presence of ROB-1 beta-lactamase correlates with cefaclor resistance among recent isolates of Haemophilus influenzae. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 45, 871–875

44.

Keiko Hasegawa, Naoko Chiba, Reiko Kobayashi, Somay Y. Murayama, Satoshi Iwata, Keisuke Sunakawa, and Kimiko Ubukata. Rapidly Increasing Prevalence of beta-Lactamase- Nonproducing, Ampicillin-Resistant Haemophilus influenzae Type b in Patients with Meningitis. Antimicrobial Agents And Chemotherapy 48:5, 1509–1514

41.

Mihaela Peric, Bu¨lent Bozdogan, Michael R. Jacobs, and Peter C. Appelbaum (2003). Effects of an Efflux Mechanism and Ribosomal Mutations on Macrolide Susceptibility of Haemophilus influenzae Clinical Isolates. Antimicrobial Agents And Chemotherapy 47:3, 1017–1022

Markowitz, S. M. 1980. Isolation of an ampicillin- resistant, non-beta-lactamase-producing strain of Haemophilus influenzae. Antimicrob. Agents Chemother. 17:80–83.

45.

42.

resistance

26. Mendelman, P. M., D. O. Chaffin, T. L. Stull, C. E. Rubens, K. D. Mack, and A. L. Smith. 1984. Characterization of non-beta-lactamase-mediated ampicillin in Haemophilus influenzae. Antimicrob. Agents Chemother. 26:235–244.

Mihaela Peric, Bu¨ lent Bozdogan, Chad Galderisi, Dan Krissinger, Terry Rager and Peter C. Appelbaum1 (2004). Inability of L22 ribosomal protein alteration to increase macrolide MICs in the absence of efflux mechanism in Haemophilus influenzae HMC-S. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 54, 393–400