BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC
CHỊU NHIỆT SỬ DỤNG TRONG THỨC ĂN CHO
CHĂN NUÔI HEO, GÀ QUY MÔ PILOT
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : TS. Phạm Huỳnh Ninh
Sinh viên thực hiện : Trần Lệ Quyên
MSSV: 1311100608 Lớp: 13DSH04
TP. Hồ Chí Minh, 2017
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu khoa học. Các số liệu, kết quả
nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình
nào. Các tài liệu tham khảo trích dẫn đều có nguồn gốc xác thực
Sinh viên thực hiện
Trần Lệ Quyên
LỜI CẢM ƠN
Trong thời gian thực hiện đồ án tốt nghiệp tốt nghiệp ở Phân Viện Chăn Nuôi
Nam Bộ, được sự hướng dẫn tận tình của các Thầy Cô, các anh chị và các bạn, em đã
hoàn thành tốt đồ án này. Em xin chân thành gửi lời cám ơn đến:
Em xin kính dâng lời cảm ơn chân thành và sâu sắc đến Ba Mẹ cùng tất cả
những người thân trong gia đình đã nuôi em khuôn lớn nên người và tận tâm lo lắng,
tạo mọi điều kiện cho em được học tập và hoàn thành đồ án tốt nghiệp .
Ngôi trường Đại học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh, nơi em đã gắn bó suốt bốn
năm qua, giúp em có thể tiếp cận được những điều bổ ích, những kinh nghiệm trong
cuộc sống.
Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm – Môi trường, các Thầy
Cô trong bộ môn Công Nghệ Sinh Học, trường Đại học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh
đã trang bị cho em những kiến thức cơ bản, làm nền móng để em thực hiện đề tài và
làm tốt công việc sau này.
TS. Phạm Huỳnh Ninh, Phó bộ môn Dinh Dưỡng và Thức Ăn Chăn nuôi, Phân
Viện Chăn Nuôi Nam Bộ, Thầy đã tạo điều kiện cho em được làm đề tài tại đây, nhiệt
tình hướng dẫn và hỗ trợ cho em trong quá trình hoàn thành đồ án tốt nghiệp
Chị Lê Hoàng Bảo Vi, anh Vũ Minh, anh Lê Quang Trí phòng Dinh Dưỡng và
Thức Ăn Chăn nuôi, Phân Viện Chăn Nuôi Nam Bộ đã tận tình chỉ bảo, giảng dạy và
giúp đỡ em trong suốt thời gian thực hiện đồ án
Cô Nguyễn Hoài Hương, phòng vi sinh, khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm
– Môi trường, trường Đại Học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh đã tận tình giúp đỡ em
trong quá trình nhận đề tài
i
MỤC LỤC
MỤC LỤC ........................................................................................................................ i
DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ......................................................................................... iv
DANH MỤC BẢNG BIỂU ............................................................................................ v
DANH MỤC HÌNH ẢNH ............................................................................................ vii
LỜI MỞ ĐẦU ................................................................................................................. 1
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU ......................................................................... 3
1.1 Đại cương về probiotic .............................................................................................................3
1.1.1 Lịch sử nghiên cứu probiotic ..................................................................................................3
1.1.2 Định nghĩa probiotic .................................................................................................................4
1.1.3 Các VSV probiotic thường gặp ..............................................................................................4
1.1.4 Tiêu chuẩn lựa chọn chủng vi sinh vật probiotic ..............................................................7
1.1.5 Cơ chế tác động của Probiotic................................................................................................8
1.1.6 Vai trò của probiotic đối với vật nuôi ...............................................................................11
1.1.7 Probiotic từ bào tử ...................................................................................................................12
1.1.8 Tình hình nghiên cứu và sử dụng Probiotic trên thế giới và Việt Nam ....................13
1.2 Đại cương về vi khuẩn Bacillus ...........................................................................................18
1.2.1 Đặc điểm sinh học của Bacillus ...........................................................................................18
1.2.2 Bào tử Bacillus .........................................................................................................................22
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP .......................................................... 25
2.1 Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài……...………...…………………………...... .........25
2.2 Vật liệu ........................................................................................................................25
2.2.1 Chủng vi sinh vật:..................……………………………….……… ......................... ………25
2.2.2 Hóa chất, thiết bị và dụng cụ……………………………………….…. ...................... …....25
2.3 Môi trường nghiên cứu……………………………………………… .. …………26
2.4 Các phương pháp nghiên cứu (theo sơ đồ bố trí TN tổng quát)…………........... 30
2.5 Phương pháp nhuộm Gram……………………………………………… ....... …31
ii
2.6 Phương pháp nhuộm bào tử theo Schaeffer và Fulton......................... ............ ….32
2.7 Xác định mật độ TB bằng phương pháp đếm khuẩn lạc……………… ..... ..…………32
2.7.1 Xác định mật độ TB bằng phương pháp đo mật độ quang………… ................... ..….33
2.7.2 Lập đường cong tăng trưởng………………………………........... .......................... ...........34
2.7.3 Khảo sát sự tạo thành bào tử…………………………………….... ........................... ..........35
2.8 Khảo sát các đặc điểm probiotic……………………………………… ............ …...…..….35
2.8.1 Khảo sát khả năng chịu axit dạ dày…………………………………… ........................ …35
2.8.2 Khảo sát khả năng chịu muối mật…………………………………… ......................... …..36
2.8.3 Khảo sát khả năng sinh enzyme ngoại bào ….…………………… .......................... …..37
2.8.4 Khảo sát khả năng đối kháng với vi khuẩn kiểm định bằng phương pháp đường
vuông góc Cross Streak……………………………………………… ....................................... ….40
2.8.5 Khảo sát môi trường tạo bào tử…………………………………… ........................... …….40
2.8.6 Khảo sát các phương pháp tạo bào tử nhiều nhất……………………....................... ….41
2.8.7 Sản xuất bào tử dạng pilot…………………………………………… ............................ ….42
2.8.8 Phân tích thống kê dữ liệu…………………………………………… ............................ ….44
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN……………… ................................... ….45
3.1 Khảo sát các đặc điểm probiotic………………………… ............ ………………………..45
3.1.1 Khả năng chịu axit dạ dày…………………………………… ................... ………………..45
3.1.2 Khả năng chịu muối mật………………………………………… ............................ ………46
3.1.3 Khả năng sinh enzyme ngoại bào ( amylase, protease, cellulase)…… ................. .…48
3.1.4 Khả năng đối kháng kháng với vi khuẩn kiểm định bằng phương pháp đường
vuông góc Cross Streak………………………………………….… .................... ……51
3.2 Đặc tính sinh học và phân loại chủng đã tuyển chọn………………… ....... …………..53
3.2.1 Đặc tính hình thái của chủng Sub và Yoi………………………… ........................ ……..53
3.2.2 Tổng hợp một số đặc tính probiotic của chủng Sub và Yoi……… ................... ……..54
3.3 Thiết lập đường cong tăng trưởng chủng Sub…………… ......... ……………………….54
3.3.1 Thiết lập đường chuẩn……………………………………………… ............................. …...54