BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
TỐI ƯU HÓA MÔI TRƯỜNG SINH TỔNG HỢP
ENZYME CELLULASE TỪ NẤM MỐC TRICHODERMA
KONINGII VÀ TINH SẠCH BẰNG SẮC KÝ LỌC GEL
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : CN. ĐỖ THỊ TUYẾN
Sinh viên thực hiện : TRẦN THỊ YẾN NHI
MSSV: 1151110242 Lớp: 11DSH03
TP. Hồ Chí Minh, 2015
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Em xin cam đoan đây là đề tài nghiên cứu của cá nhân em. Những kết quả và
số liệu trong báo cáo tốt nghiệp được thực hiện tại Viện sinh học nhiệt đới và phòng
thí nghiệm trường Đại học Công Nghệ Tp. Hồ Chí Minh, không sao chép bất kỳ
nguồn nào khác. Em hoàn toàn chịu trách nhiệm trước nhà trường về lời cam đoan
này.
Tp. Hồ Chí Minh, ngày 02 tháng 08 năm 2015
Sinh viên
Trần Thị Yến Nhi
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CẢM ƠN
Đầu tiên em xin bày tỏ lòng biết ơn đến Ban Giám Hiệu trường Đại học Kỹ
Thuật Công Nghệ Thành phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học
– Thực phẩm – Môi trường cùng tất cả quý thầy cô đã tận tình chỉ dạy, truyền đạt
những kiến thức và kinh nghiệm quý báu cho em trong suốt quá trình học tập tại
trường. Đó là những hành trang quý giá giúp em hòa nhập tốt vào xã hội, góp một
phần sức lực nhỏ bé của mình vào công cuộc xây dựng đất nước.
Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Đỗ Thị Tuyến – người đã tạo
điều kiện tốt nhất, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ và động viên em trong suốt thời gian
nghiên cứu và hoàn thành đồ án tốt nghiệp.
Em xin cảm ơn Viện Sinh Học Nhiệt Đới Tp. HCM và các anh chị phụ trách
phòng các hoạt chất có hoạt tính sinh học đã tạo điều kiện và hướng dẫn em hoàn
thành một số thí nghiệm trong quá trình nghiên cứu tại đây.
Chân thành cảm ơn các thầy phòng thí nghiệm công nghệ sinh học và tất cả
các bạn trong phòng thí nghiệm đã nhiệt tình giúp đỡ, chia sẻ trong lúc thực hiện đề
tài này.
Con xin gửi tình thương yêu và lòng biết ơn sâu sắc đến ba mẹ, mọi người
trong gia đình và những người luôn bên cạnh luôn sẵn sàng ủng hộ, chăm sóc, động
viên và là chỗ dựa tinh thần vững chắc cho con trong mọi bước đường đi.
Tp. Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2015
Sinh viên
Trần Thị Yến Nhi
Đồ án tốt nghiệp
i
MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ....................................................................... vii
DANH SÁCH CÁC BẢNG ................................................................................... viii
DANH SÁCH CÁC HÌNH...................................................................................... ix
DANH SÁCH CÁC ĐỒ THỊ .................................................................................... x
CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU .............................................................................................. 1
1.1. Tính cấp thiết của đề tài .............................................................................. 1
1.2. Tình hình nghiên cứu .................................................................................. 2
1.3. Mục đích nghiên cứu ................................................................................... 3
1.4. Nhiệm vụ nghiên cứu ................................................................................... 3
1.5. Phương pháp nghiên cứu ............................................................................ 3
1.6. Các kết quả đạt được của đề tài ................................................................. 3
1.7. Kết cấu của đồ án ......................................................................................... 4
CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU ................................................................... 5
2.1. Khái quát chung về enzyme ........................................................................... 5
2.1.1. Sơ lược về enzyme ..................................................................................... 5
2.1.2. Tính chất của enzyme ................................................................................ 6
2.1.2.1. Bản chất sinh học ................................................................................. 6
2.1.2.2. Bản chất hóa học .................................................................................. 7
2.2. Giới thiệu sơ lược về cellulose. ....................................................................... 7
2.3. Giới thiệu sơ lược về enzyme cellulase .......................................................... 9
2.3.1. Định nghĩa ................................................................................................. 9
2.3.2. Phân loại .................................................................................................. 10
2.3.3. Tính chất .................................................................................................. 10
Đồ án tốt nghiệp
ii
2.3.3.1. Tính đặc hiệu ...................................................................................... 10
2.3.3.2. Đặc tính vật lý và hóa học .................................................................. 10
2.3.3.3. Các chất ức chế .................................................................................. 10
2.3.4. Cơ chế tác động của enzyme ................................................................... 11
2.3.4.1. Cơ chế 1,4-β-D-glucan cellobiohydrolase (EC 3.2.1.91) .................. 11
2.3.4.2. Cơ chế 1,4-β-D-glucanohydrolase (EC 3.2.1.14) .............................. 11
2.3.4.3. Cơ chế β-D-glucoside glucohydrolase (EC 3.2.1.21) ........................ 12
2.3.5. Các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase . 12
2.3.5.1. Thành phần môi trường nuôi cấy ....................................................... 12
2.3.5.2. Nhiệt độ nuôi cấy ............................................................................... 13
2.3.5.3. pH môi trường .................................................................................... 14
2.3.5.4. Độ ẩm ................................................................................................. 14
2.3.5.5. Môi trường không khí ........................................................................ 14
2.3.6. Ứng dụng của enzyme cellulase ............................................................. 14
2.3.6.1. Cải thiện giá trị dinh dưỡng của thức ăn gia súc ............................... 14
2.3.6.2. Tăng hiệu suất trích ly các chất từ nguyên liệu thực vật ................... 15
2.3.6.3. Thủy phân gỗ và các phế liệu giàu cellulose ..................................... 15
2.4. Vi sinh vật tổng hợp cellulase ...................................................................... 15
2.4.1. Nấm sợi .................................................................................................... 15
2.4.2. Nấm mốc Trichoderma koningii ............................................................. 16
2.5. Cơ chất cảm ứng nấm mốc sinh tổng hợp enzyme cellulase ..................... 17
2.5.1. Bã mía ...................................................................................................... 17
2.5.2. Cám gạo ................................................................................................... 17
2.6. Phương pháp lên men bề mặt ...................................................................... 19