TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘITRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI
KỸ THUẬT MIỄN DỊCH MIỄN DỊCH HUỲNH QUANG
TRONG XÉT NGHIỆM GIẢI PHẪU BỆNH
Bộ môn Giải phẫu bệnh lâm sàng -
Khoa Kỹ thuật Y học
Mục tiêu học tập
1. Trình bày được nguyên lý và ứng dụng của
kỹ thuật hoá mô miễn dịch huỳnh quang (IF).
2. Mô tả được quy trình kỹ thuật IF trên mô vùi
paraffin và mảnh cắt lạnh.
3. Đảm bảo chất lượng: nhận diện lỗi thường
gặp, nguyên nhân và khắc phục; thực hiện
nội kiểm.
Tổng quan & Ứng dụng lâm sàng
•Mục đích
–Phát hiện/định vị kháng nguyên trong mô/tế bào.
–Hỗ trợ chẩn đoán, phân loại, theo dõi điều trị.
•Ứng dụng lâm sàng tiêu biểu
–Bệnh tự miễn: lupus, viêm cầu thận màng, IgA nephropathy,
pemphigus…
–Ung thư: biểu hiện thụ thể (ER/PR/HER2), protein tín hiệu.
–Bệnh thận: lắng đọng IgG/IgA/C3, mô hình lắng đọng dọc/bờ…
•Nghiên cứu
–Cơ chế bệnh sinh, đánh giá đáp ứng điều trị, đồng định vị protein
(co-localization).
Tổng quan & Ứng dụng lâm sàng
Nhuộm IF để phát hiện phân
bố kháng nguyên ACE2 và
ADAM17 trong mô thận,
minh hoạ ứng dụng của IF
trong chẩn đoán bệnh lý (ví
dụ bệnh thận)
Nguyên lý hoá mô miễn dịch huỳnh quang
Phản ứng đặc hiệu kháng nguyên – kháng thể
Kháng thể gắn fluorochrome → phát huỳnh quang khi
kích thích ánh sáng.
Thu nhận tín hiệu bằng kính hiển vi huỳnh quang.
Phương pháp
Trực tiếp (kháng thể gắn fluorochrome).
Gián tiếp (kháng thể thứ cấp gắn fluorochrome).
Fluorochrome thường dùng
FITC, TRITC, Alexa Fluor (488, 555, 594, 647)…