Nội dung Bài thuyết trình: Một số phương pháp sắc ký trình bày khái niệm sắc ký, sắc ký bản mỏng, sắc ký giấy, sắc ký trao đổi ion, sắc ký lọc gel.
AMBIENT/
Chủ đề:
Nội dung Text: Bài thuyết trình: Một số phương pháp sắc ký
- L/O/G/O
MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP
SẮC KÝ
- NỘI DUNG
1 KHÁI NIỆM SẮC KÝ
2 SẮC KÝ BẢN MỎNG
3 SẮC KÝ GIẤY
4 SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION
5 SẮC KÝ LỌC GEL
www.themegallery.com
- KHÁI NIỆM
Là quá trình tách dựa trên sự phân bố liên tục các cấu tử chất
phân tử trên hai pha:
- Pha tĩnh: Đứng yên có khả năng hấp thụ chất phân tích.
- Pha động: Di chuyển qua pha tĩnh
Các chất phân tích có ái lực khác nhau với pha tĩnh, chúng di
chuyển với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhau.
www.themegallery.com
- PHÂN LOẠI
Phương pháp sắc ký
Sắc ký khí (GC) Sắc ký lỏng (LC)
SK khí - rắn SK khí - lỏng HPLC SK Phẳng
Hệ
pha
SK điện di SK phân bố SK SK lớp mỏng SK giấy
mao quản lỏng - lỏng rắn - lỏng
SK hấp phụ SK phân bố SK ion SK rây phân tử Cơ
chế
www.themegallery.com
- PHÂN LOẠI
Pha động có thể là một chất lỏng hay chất khí
HỆ PHA Pha tĩnh có thể là một chất rắn (hạt xốp hay
bột mắn) hay một chất lỏng (được giữ trên
một chất mang rắn).
www.themegallery.com
- PHÂN LOẠI
1. Sắc ký hấp phụ: pha tĩnh là một chất rắn có khả năng
3.
hấpSắc ký đó
phụ, traolàđổi
cácion: pha tĩnh
phương pháplàsắc
chất
kýnhựa
lỏng -trao
rắn đổi ion,-
và khí
cao
rắn. phân tử có mang những ion có khả năng trao đổi với
các ion cùng dấu của dung dịch hỗn hợp sắc ký.
CƠ CHẾ
2. Sắc ký phân bố: pha tĩnh là chất lỏng được bao trên bề
mặt
4. Sắccủa một chất
ký theo rắn
loại cỡ là phân
(rây chất mang trơ,
tử): còn gọikhông
là sắc hoà lẫn
ký trên
được vớiphân
gel. Các pha động
tử cỡ lớn sẽ được loạt các phân tử nhỏ hơn
- Bao
sẽ gồmtách
được sắc ký lỏng
theo - lỏng
kích và sắc
thước dokýcác
khíphân
- lỏng.tử nhỏ di
chuyển chậm hơn.
www.themegallery.com
- SẮC KÝ BẢN MỎNG
- Tách dung dịch dựa trên Là chất hấp phụ được trải
tính phân cực của các thành lớp mỏng, mịn, đồng
PHA TĨNH
thành phần trong dung nhất trên phiến kính hoặc
dịch kim loại
PHÂN TÁCH KHÁI NIỆM BẢN SẮC
KÝ
- Là một hay hỗn hợp nhiều Trộn chất hấp phụ (silicagel)
dung môi phối hợp theo tỷ lệ với chất trơ (calcium sulfate)
nhất định PHA ĐỘNG
và nước để tạo kết dính sau đó
- Hút lên bản sắc bởi mao dẫn được trải trên bề mặt chất trơ
(thủy tinh).
www.themegallery.com
- SẮC KÝ BẢN MỎNG
Nguyên tắc hoạt động
- Giọt dịch mẫu được nhỏ trên
đường xuất, rìa bản được nhúng
vào dung môi.
- Pha động di chuyển qua pha
tĩnh trên đó đã được đặt chất
cần phân tách.
- Dưới lực mao quản dung môi
chuyển động theo lớp hấp phụ
mang theo cấu tử di chuyển với
tốc độ khác nhau làm tách cấu tử
www.themegallery.com
- SẮC KÝ BẢN MỎNG
www.themegallery.com
- SẮC KÝ BẢN MỎNG
Ứng dụng của sắc ký bản mỏng
- Xét nghiệm độ tinh khiết của các hóa chất phóng xạ trong dược khoa
- Xác định các sắc tố trong tế bào thực vật
- Phát hiện thuốc trừ sâu, thuốc diệt côn trùng trong thức ăn
- Nhận biết những hóa chất trong một chất cho sẵn
- Giám sát các phản ứng hữu cơ
www.themegallery.com
- SẮC KÝ GIẤY
Nguyên tắc hoạt động
Khái niệm
- Tác động của mao dẫn - sự chuyển dịch
- Là loại sắc ký lỏng - lỏng.
của chất lỏng trong những lỗ hổng vật
- Pha động là chất lỏng, là hỗn
liệu xốp gây ra bởi lực bám, lực liên kết
hợp của hai hay nhiều dung môi
và sức căng bề mặt.
khác nhau.
- Các chất tan tan trong dung môi nhất
- Pha tĩnh lỏng được tẩm vào
định. Nên các chất tan khác nhau sẽ bị
chất mang là giấy sắc ký
tách ra khi kết hợp nhiều dung môi khác
nhau
- Việc tách các chất dựa vào tính tan của
nó trong pha động và ái lực khác nhau
của chúng mới pha động và pha tĩnh.
www.themegallery.com
- SẮC KÝ GIẤY
www.themegallery.com
- SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION
Khái niệm
- Dựa trên cơ sở trao đổi ion giữa protein
tan trong nước hoặc dung dịch đệm loãng
và các tác nhân trao đổi ion.
- Các chất giá trơ có bản chất cellulose
hoặc sephadex kết hợp với nhóm ion hóa.
+ Cellulose-O-CH2-COOH: Phân ly cho ra
COO- là chất trao đổi cation
+ Cellulose-O-C2H4-N-(C2H5)2 nhận ion H+
của nước tích điện dương
www.themegallery.com
- SẮC KÝ TRAO ĐỔI ION
www.themegallery.com
- SẮC KÝ LỌC GEL
Khái niệm
- Là phương pháp phổ biến dùng để tách chiết và tinh sạch protein.
- Dựa vào sự khác nhau về kích thước, hình dạng và phân tử lượng của protein có
trong hỗn hợp cần phân tách.
Tính chất các loại gel
- Phải là chất trơ, không phản ứng với enzyme.
- Không hòa tan, tương đối bền với các yếu tố cơ học và sinh học
- Không có tính đàn hồi (không co), ưa nước
Gel Sephadex
www.themegallery.com
- SẮC KÝ LỌC GEL
Các bước tiến hành
- Cho sephadex vào cột thủy tinh dài
và cân bằng bằng dung dịch đệm có
pH nhất định.
- Cho enzyme vào cột
- Các hạt nhỏ sẽ khuyết tán qua hạt
sephadex bị trương phồng
- Các hạt lớn không có khả năng đi vào
mà lách nhanh qua các hạt sephadex
và được chiết nhanh ra khỏi cột.
www.themegallery.com
- SẮC KÝ LỌC GEL
Ứng dụng
- Tách các chất có trọng lượng khác nhau có trong hỗn hợp
- Loại muối thay cho quá trình thẩm tích
- Sử dụng để cô đặc protein enzyme
- Xác định khối lượng phân tử
www.themegallery.com
- SẮC KÝ LỌC GEL
www.themegallery.com
- L/O/G/O
Thank You!
www.themegallery.com
Thêm vào BST
Báo xấu
Download
Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ
