M U D CH NÃO T Y VÀ K THU T C Y
MUÏC TIEÂU.
1. N m đ c ch đ nh l y d ch não t y đ xét nghi m. ượ
2. N m đ c th i đi m, cách l y, b o qu n và chuyên ch b nh ph m đ n ượ ế
phòng xét nghi m.
3. N m đ c các k thu t ti n hành kh o sát và nuôi c y b nh ph m d ch não ượ ế
t y.
4. N m đ c các tác nhân gây b nh th ng g p trong d ch não t y. ượ ườ
.
1.CH Đ NH CH C DÒ D CH NÃO T Y (DNT).
- DNT nên đ c ch c dò đ kh o sát vi sinh lâm sượ ng tr c các bướ nh nhân có
các tri u ch ng nghi ng viêm màng não.
- Không nên ch c dò DNT tr c các b nh nhân có các d u hi u tăng áp l c n i s . ướ
2.TH I ĐI M CH C DÒ DNT .
- Càng s m càng t t, ngay sau khi có ch n đoán lâm s ng.
- Tr c khi b nh nhân ướ duøng khaùng sinh h th ng.
3. CÁCH L Y VÀ CHUYÊN CH B NH PH M.
- DNT ph i đ c các bác sĩ lâm sàng ch c dò theo ph ng pháp vô trùng. ượ ươ
- Laáy ø 3 -5 ml DNT, cho vo loï voâ truøng naép chaët (coù th
duøng tube Eppendorf biopure) roài gôûi ngay ñeán phng xeùt
nghieäm, khoâng chaäm treå.
- Ctheå caáy ngay ti giöôøng vôùi chai 2 mt thaïch caáy DNT
vaø caùcch khoâng taïp nhieãm
4.KHAÛO SAÙT ÑAÏI THEÅ.
Ghi nhaän tính chaát ñaïi theå:
-Trong, keo
- Ñuïc, m
- Vaøng chanh
- Cmaùu…
5. KHAÛO SAÙT VI THEÅ.
5.1.Söûa soaïn beänh phaåm.
-Neáu DNT ñuïc, khoâng caàn ly taâm.
- Caùc tröôøng ïp khaùc, ly taâm 3000 voøng/ phuùt, trong thôøi
gian töø 10 -15 phuùt. Laáy phaàn caën ñeå khaûo saùt vi theå v
nuoâi caáy, phaànôùc laøm phaûn öùng hoaù mieãn ch phaùt
hieän khaùng nguyeân hotan vaø laøm phaûn öùng sinh hoaù.
5.2. Khaûo saùt vi theå.
-Laøm pheát soi töôi.
Nhoû mt gioït caën ly taâm vaøo lam kính, ñaäy Lamel leân.
Ñoïc döôùi quang tröôøng x400 (Vaätnh 40), ñng bôùt hay haï
ùt tuï quang ñeå thaáy roõ ñoä töông phaûn. Tìm:
+ Baïch caàu, hoàng caàu
+ Vi khuaån, naám men, …
Neáu coù naám men nghi Cryptococcus neofor ma n s , quan saùt DNT
ôùi gioït möïc taøu hay vôùi nigrosin 20%
-Laøm pheát nhuoäm.
+Gram
+Khaùng Acid (neáu coù yeâu caàu)
Keát quaû pheát nhuoäm vaø keát quaû soi töôi phaûi thoâng baùo ngay
cho baùc só laâm saøng.
5.3.Caáy phaân laäp vi khuaån.
-Vì laø maãu khoâng ngoaïi nhieãm neân coù theå caáy nhieàu
maàm caáy.
-Coù theå caáy vaøo 2 loaïi moâi tröôøng, thaïch maùu vaø thaïch
Chocolat cboå Sung XV(CAXV), ôû nhieät ñoä 37 0 C trong bình
neán.
-Neáu khoâng coù ñieàu kin maø DNT laø treû em, coù theå caáy
vaøo hoäp thaïch BA coù vaïch moät vaïch S. aureus thaúng goùc
ùi ñöôøng caáy maàm caáy ñeå kích thích H.influen z a e moïc
ñöôïc, uû ôû nhit ñoä 35- 37 o C trong bình neán.
- Phaàn DNT coøn laïi coù theå caáy döï phng vaøo dung dòch BHI.
- Theo di lieân tieáp toái ña trong 3 ngaøy, baát ù luùc naøo coù
ï hieän din cuûa khoùm vi khuaån, tieán haønh ñònh danh vaø
laøm khaùng sinh ñoà.
- Vì vieâm mng naõo mlaø moät bnh nguy hieåm, ñe do
ñeán tính maïng, nn moät khi coù vi khuaån moïc thì phaûi tieán
haønh nhuoäm Gram khoùm vi khuaån vaø keát hôïpùi tính chaát
vi khuaån moïc treân moâi tröôøng phaân laäp, phaûi traû lôøi keát
qutaïm thôøi cho baùc só laâm saøng ngay.
-Neáu cyeâu caàu tìm C. neofof m an s , caáy DNT treân thaïch
Sabouraud, treân BHI, uû ôû nhieät ñoä 35- 37 o C. Cng theo doõi
lieân tuïc trong 3 ngaøy.
- Neáu cyeâu caàu tìm M. tub erculosis, caáy DNT vaøo mi
tröôøng Lowenstein- Jensen ( neân caáy 3ng ), ôû nhieät ñ
35- 37 o C. Theo doõi lieân tuïc trong 2 thaùng.
6. TÌM KHAÙNG NGUYEÂN HO TAN CAÙC VI KHUAÅN
GAÂY BEÄNH THÖÔØNG GAËP TRONG DNT BAÈNG CAÙC
PHÖÔNG PHAÙP HOAÙ MIEÃN DÒCH.
Coù theå phaùt hieän khaùng nguyeân hoaø tan caùc vi khuaån
gaây beänh coù trong DNT bng mt trong caùc phaûn öùng ho
mieãn dòch n:
- Tuï Latex vôùi boä thuoác thöû MENINGITEX , PASTOREX,…
-ELISA,….
Trong caùc phöông phaùp treân thì pông phaùp tuï vôùi Latex
cho keát quaû nhanh, ñôn giaûn, vraát nhaïy caûm.
7.CAÙC TAÙC NHAÂN GAÂY VIEÂM MAØNG NAÕO.
-Ñoái vôùi treû sô sinh: Lieân caàu nhm B, Escherichia coli ,
Listeria monocy tog e n e s , Enterobac t eriae ca e .
- Ñoái vôùi treû töø 6 thaùng ñeán 5 tuoåi: Haemo p hilus
influen zae , Streptococcus pneu m o nia e vaø Neisseria m eningitidis .
- Ñoái vôùi ngöôøi lôùn: S. pneu m o nia e, N. meningitidis, E. coli, S.
aureus vaø M. tuberculosis. Cryptococcus neoform a ns,