Vi khuẩn Gram âm mang gen New Delhi-metallo-betalactamase (NDM - 1) kháng Carbapenem phân lập trong môi trường bệnh viện

TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> VI KHUẨN GRAM ÂM MANG GEN NEW DELHI-METALLO-BETA-<br /> LACTAMASE (NDM - 1) KHÁNG CARBAPENEM PHÂN LẬP<br /> TRONG MÔI TRƯỜNG BỆNH VIỆN<br /> Trần Huy Hoàng1, Heiman Wertheim2, Trần Như Dương1, Nguyễn Bình Minh1,<br /> Trần Vân Phương1, Trịnh Hồng Sơn3, Đặng Đức Anh1<br /> 1<br /> Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương, Hà Nội<br /> 2<br /> Đơn vị nghiên cứu lâm sàng Đại học Oxford, Hà Nội, Việt Nam<br /> 3<br /> Bệnh viện Hữu nghị Việt Đức, Hà Nội<br /> <br /> Hiện nay, vi khuẩn gram âm mang gen NDM - 1 kháng carbapenem là v ấn đề quan trọng tác động đến<br /> sức khỏe toàn cầu. Ở Việt Nam, vi khuẩn mang gen NDM - 1 không chỉ phát hiện được trên các bệnh nhân<br /> bị nhiễm khuẩn bệnh viện mà còn được phát hiện trong môi trường. Trong nghiên cứu này, 200 mẫu xét<br /> nghiệm (tay nhân viên điều dưỡng, xe đẩy y tế, sàn nhà, ga trải giường bệnh và nắp toa lét) tại các khoa<br /> Phẫu thuật tiết niệu, Phẫu thuật gan mật và Phẫu thuật tiêu hóa được thu thập để phát hiện vi khuẩn mang<br /> gen NDM - 1 bằng kỹ thuật PCR. Các chủng NDM - 1 dương tính sẽ được định danh bằng thanh API - 20E<br /> và đánh giá mức độ nhạy cảm kháng sinh. Nghiên cứu phát hiện được 5/200 (2,5%) mẫu dương tính với gen<br /> NDM - 1, trong đó 3 mẫu được phát hiện trên ga trải giường bệnh, 1 mẫu ở thùng rác thải y tế và 1 mẫu phát<br /> hiện trên nắp toa lét nhà vệ sinh tại hai khoa phẫu thuật tiết niệu và Gan mật. Tất cả các chủng dương tính<br /> với NDM - 1 đều kháng lại kháng sinh được thử nghiêm ở mức độ cao, nhưng vẫn còn nhạy cảm với colistin.<br /> <br /> Từ khóa: Vi khuẩn gram âm, gen NDM-1, kháng carbappenem, môi trường bệnh viện<br /> <br /> <br /> <br /> I. ĐẶT VẤN ĐỀ<br /> trên các bệnh phẩm lâm sàng mà còn phát<br /> Vi khuẩn Gram âm mang gen New Delhi hiện được trong cả môi trường ngoại cảnh ở<br /> Metallo - Beta - Lactamase 1 (NDM - 1) sinh Ấn Độ nơi có dịch NDM - 1 lưu hành. Đây là<br /> men kháng lại carbapenem (thuộc nhóm lựa một nguy cơ quan trọng tác động đến sức<br /> chọn cuối cùng) hiện đang là một trong những khỏe con người và làm tăng nguy cơ lan<br /> vấn đề mang tính toàn cầu. NDM - 1 lần đầu truyền của vi khuẩn mang gen NDM - 1 ở<br /> tiên được ghi nhận trên chủng K. pneumoniae trong cộng đồng [3]. Sự xuất hiện của các vi<br /> phân lập được trên bệnh nhân người Thụy khuẩn mang gen kháng thuốc này báo hiệu sự<br /> Điển có tiền sử du lịch tại Ấn Độ [1]. Hiện nay mở đầu của một giai đoạn mới về tình trạng vi<br /> đã có rất nhiều báo cáo công bố nhiều loại vi khuẩn kháng lại kháng sinh trên Thế giới.<br /> khuẩn Gram âm mang gen NDM-1 như Kleb- Ở Việt Nam, bệnh truyền nhiễm vẫn chiếm<br /> siella, E. coli, Acinetobacter và Citrobacter ở một tỷ lệ lớn trong mô hình bệnh tật nên việc<br /> nhiều quốc gia trên thế giới [2]. Các vi khuẩn sử dụng kháng sinh một cách hiệu quả đóng<br /> mang gen NDM - 1 không chỉ được phát hiện một vai trò quan trọng trong việc giảm tỷ lệ<br /> mắc và tử vong do các bệnh nhiễm khuẩn.<br /> Địa chỉ liên hệ: Trần Huy Hoàng - Viện Vệ sinh Dịch tễ Tuy nhiên, sự gia tăng tình trạng kháng kháng<br /> Trung ương, số 1 Yersin, Hà Nội<br /> sinh của vi khuẩn sẽ ảnh hưởng nghiêm trọng<br /> Email:<br /> Ngày nhận: 05/8/2013 đến sức khỏe của nhân dân cũng như tổn thất<br /> Ngày được chấp thuận: 30/10/2013 về kinh tế. Imipenem là kháng sinh thuộc<br /> <br /> <br /> TCNCYH 85 (5) - 2013 1<br /> TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> nhóm carbapenem, được đưa vào thị trường 2. Địa điểm nghiên cứu<br /> vào đầu những năm 2000, cũng đã giảm tác Chúng tôi lựa chọn 3 khoa bao gồm khoa<br /> dụng với các vi khuẩn gram âm. Hai căn Phẫu thuật Tiết niệu, Phẫu thuật Gan mật và<br /> nguyên gây nhiễm khuẩn bệnh viện thường Khoa Phẫu thuật Tiêu hóa của bệnh viện Việt<br /> gặp là P. aeruginosa và A. baumannii được Đức để tiến hành thu thập các mẫu xét<br /> đánh giá mức độ kháng carbapenem ở 6 bệnh nghiệm cho nghiên cứu.<br /> viện năm 2008. 20% các chủng P. aeruginosa<br /> 3. Đối tượng và cỡ mẫu nghiên cứu<br /> và gần 50% các chủng A. baumannii kháng<br /> carbapenem [4]. Tổng số 200 mẫu được thu thập bằng tăm<br /> bông vô trùng tại 3 khoa của bệnh viện Việt<br /> Ngay từ tháng 8/2010 nhóm nghiên cứu<br /> Đức. Các loại mẫu được thu thập bao gồm từ<br /> của chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu và đưa<br /> tay nhân viên điều dưỡng (28), xe đẩy y tế<br /> ra bằng chứng về sự có mặt của vi khuẩn<br /> (12), máy hút đờm (20), tủ cá nhân của nhân<br /> mang gen NDM - 1 tại Việt Nam [5; 6]. Thêm<br /> viên y tế và bệnh nhân (18), mặt bàn, bề mặt<br /> vào đó sự có mặt của K. pneumoniae mang<br /> sàn buồng bệnh (29), ga trải giường bệnh<br /> gen NDM - 1 phân lập được trong môi trường<br /> (46), khu nhà vệ sinh, chậu rửa tay tại buồng<br /> ngoại cảnh cũng được báo cáo tại Việt Nam<br /> bệnh (16), rác thải y tế (12) và các vị trí lấy<br /> [7]. Bệnh viện Việt Đức là bệnh viện ngoại<br /> mẫu khác là 19 mẫu (tay cầm điện thoại, bàn<br /> khoa đầu ngành và là trung tâm phẫu thuật<br /> văn phòng...)<br /> lớn nhất Việt Nam với qui mô 500 giường<br /> 4. Tiến hành<br /> bệnh, mỗi năm tiến hành khoảng 28.000 ca<br /> phẫu thuật thuộc nhiều chuyên khoa sâu khác 4.1. Thu thập mẫu<br /> nhau. Do vậy, bệnh viện luôn luôn trong tình<br /> Dùng tăm bông vô trùng quét lên bề mặt<br /> trạng quá tải, công suất sử dụng giường bệnh<br /> của các vị trí cần lấy mẫu trong nghiên cứu,<br /> vượt quá 100%, gây nhiều khó khăn cho công<br /> cho tăm bông vào các ống thu thập mẫu có<br /> tác phòng chống nhiễm khuẩn. Đây là nguy cơ chứa 5 ml canh thang LB chứa imipenem<br /> quan trọng làm lây lan vi khuẩn mang gen 2ml/ml và mang về phòng thí nghiệm.<br /> NDM - 1 giữa các bệnh nhân cũng như ra<br /> 4.2. Phân lập và định danh vi khuẩn<br /> ngoài môi trường bệnh viện và phát tán ra<br /> ngoài cộng đồng. Do vậy, chúng tôi tiến hành Ủ các ống canh thang chứa tăm bông ở<br /> 0<br /> nghiên cứu nhằm phát hiện sự có mặt của vi 37 C trong 6 - 8 giờ (giai đoạn tăng sinh trong<br /> khuẩn gram âm mang gen NDM-1 kháng car- môi trường kháng sinh) ưu tiên các vi khuẩn<br /> bapenem phân lập tại môi trường bệnh viện kháng carbapenem phát triển. Cấy chuyển từ<br /> năm 2011. Đây sẽ là một bằng chứng quan môi trường canh thang LB sang đĩa thạch Mac<br /> Conkey có nồng độ kháng sinh imipenem<br /> trọng, làm cơ sở cho các cơ quan chức năng<br /> 2ml/ml. Ủ 370C trong 18 - 24 giờ. Chọn 5 - 7<br /> đưa ra các giải pháp phù hợp để phòng chống<br /> khuẩn lạc mọc trên môi trường Mac Conkey<br /> sự lây lan của vi khuẩn này ở trong bệnh viện<br /> có chứa 2 mg/ml imipenem sau khi ủ ấm qua<br /> và cộng đồng.<br /> đêm cấy trên đĩa thạch LB (Luria - Bertani) ở<br /> II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP nhiệt độ 370C qua đêm. Sử dụng vi khuẩn<br /> thuần mọc trên thạch LB để tách triết DNA làm<br /> 1. Thiết kế: mô tả cắt ngang. khuôn mẫu cho phản ứng PCR phát hiện gen<br /> <br /> <br /> 2 TCNCYH 85 (5) - 2013<br />  TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> NDM - 1 (phần 3) và định danh vi khuẩn bằng phương pháp pha loãng kháng sinh trong<br /> thanh định danh API - 20E (Bio-Merieux, Pháp). thạch Mueller - Hinton và kết quả sẽ được tính<br /> 4.3. Kỹ thuật PCR phát hiện gen NDM-1 toán dựa theo tiêu chuẩn của CLSI 2010 [9].<br /> và các gen kháng kháng sinh khác 4.5. Phân tích và xử lý số liệu: Các gen<br /> Lấy 3 - 4 khuẩn lạc trên đĩa thạch LB hòa chứng dương NDM - 1, được sử dụng để đánh<br /> vào 200µl nước cất vô trùng, đun cách thủy giá kết quả PCR của mẫu thử nghiệm, số liệu<br /> trong vòng 3 phút và ly tâm lấy nước nổi để được quản lý bằng phần mềm exel. Kết quả<br /> làm khuôn mẫu DNA. được trình bày dưới dạng hình và bảng biểu.<br /> Các đoạn mồi đặc hiệu: NDM1 - F (5’ -<br /> III. KẾT QUẢ<br /> atgcacccggtcgcgaagctgag - 3’) và NDM1 - R<br /> (5’-ttcgacccagccattggcggcga - 3’) được thiết Trong tổng số 200 mẫu xét nghiệm thu<br /> kế dựa trên trình tự gen chuẩn trong ngân thập tại các vị trí khác nhau tại bệnh viện Việt<br /> hàng gen (Mã số: FN396876.1) được sử dụng Đức chúng tôi phát hiện được 5 mẫu xét<br /> cho kỹ thuật PCR để phát hiện gen NDM - 1 nghiệm có vi khuẩn gram âm mang gen NDM<br /> của các chủng vi khuẩn phân lập được trong - 1 chiếm tỷ lệ 2,5%.<br /> nghiên cứu [1; 5; 6]. Chứng dương là ADN Các chủng có kết quả PCR dương tính với<br /> khuôn mẫu tách chiết từ chủng E. coli mang gen NDM - 1 được tiến hành định danh bằng<br /> gen NDM - 1 phân lập tại Nhật Bản do TS. thanh định danh API - 20E kết quả cho thấy có<br /> Shibayama, viện Quốc gia các bệnh Truyền 3 loại vi khuẩn mang gen NDM - 1 được phát<br /> nhiễm Nhật Bản cung cấp [8]. Thành phần hiện bao gồm 1 chủng A. baumannii, 2 chủng<br /> tham gia phản ứng PCR bao gồm: 25 µl Go E. aerogenes và 2 chủng Acinetobacter spp<br /> Taq Master Mix (Promega); 1µl hỗn hợp mồi; (bảng 1).<br /> 5µl khuôn mẫu DNA và 19µl nước cất. Chu<br /> Có ba loại mẫu được phát hiện có vi<br /> trình nhiệt: 940C trong 5 phút; 30 chu kỳ bao<br /> khuẩn mang gen NDM - 1 bao gồm ga trải<br /> gồm: 940C trong 36 giây, 600C trong 36 giây,<br /> giường bệnh nhân (3), nắp thùng rác y tế (1)<br /> 720C trong 1 phút; và 720C trong 5 phút. Sản<br /> và nắp toa lét nhà vệ sinh (1). Các vị trí xét<br /> phẩm PCR sẽ được điện di trên thạch 1,5%<br /> nghiệm khác như sàn giường bệnh, tủ cá<br /> trong dung dịch đệm TAE 1X, nhuộm thạch và<br /> nhân, xe đẩy y tế và tay nhân viên… đều cho<br /> chụp ảnh gel dưới ánh sáng tia UV [5; 6].<br /> kết quả âm tính.<br /> 4.4. Kỹ thuật ức chế nồng độ kháng<br /> Các mẫu dương tính đều được phát hiện ở<br /> sinh tối thiểu (MIC)<br /> hai khoa là phẫu thuật Tiết niệu và Gan mật là<br /> Năm loại kháng sinh bao gồm imipenem khoa đã được phát hiện có các bệnh nhân<br /> (IMP), meropenem (MEM), ceftazidime (CAZ), nhiễm khuẩn với các vi khuẩn mang gen NDM<br /> ciprofloxacin (CIP) và colistin (CS) (SIGMA) - 1 trước đó trong nghiên cứu của chúng tôi [5;<br /> được sử dụng để xác định nồng độ kháng 6]. Đặc biệt là tất cả các mẫu tại khoa phẫu<br /> sinh tối thiểu có khả năng ức chế vi khuẩn của thuật Tiêu hóa (không có bệnh nhân nhiễm vi<br /> các chủng vi khuẩn mang gen NDM - 1 bằng khuẩn NDM - 1) đều cho kết quả âm tính.<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> TCNCYH 85 (5) - 2013 3<br /> TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> Hình 1. Kết quả đại diện phát hiện gen NDM - 1 kháng carbapenem của<br /> các chủng vi khuẩn gram âm mang gen NDM - 1 phân lập tại môi trường bệnh viện<br /> Việt Đức năm 2011<br /> Giếng 1 - 6: Tay nhân viên điều dưỡng; 7 - 11: Ga giường bệnh nhân; 12 - 16: Nắp bệ xí; 17 -<br /> 21: Tủ đầu giường bệnh nhân; M: Thang chuẩn AND 100bp N: chứng âm và P: chứng dương.<br /> <br /> Bảng 1. Một số đặc điểm của 5 mẫu bệnh phẩm phát hiện có vi khuẩn<br /> mang gen NDM - 1 kháng carbapenem<br /> <br /> Có bệnh nhân<br /> Vị trí lấy mẫu<br /> Vi khuẩn Loại bệnh phẩm dương tính với<br /> (Khoa phòng)<br /> NDM - 1<br /> A. baumannii Ga giường bệnh Phẫu thuật gan mật Có<br /> E.aerogenes Nắp thùng rác y tế Phẫu thuật gan mật Có<br /> Acinetobacter spp Ga giường bệnh Phẫu thuật tiết niệu Có<br /> E.aerogenes Nắp toa lét Phẫu thuật tiết niệu Có<br /> Acinetobacter spp Ga giường bệnh Phẫu thuật tiết niệu Có<br /> <br /> <br /> Bảng 2. Kết quả kháng sinh đồ của các chủng vi khuẩn mang gen NDM - 1<br /> <br /> <br /> Đặc tính kháng MIC (mg/L) Gen<br /> Vi khuẩn<br /> IMP MEM CIP CAZ CS NDM - 1<br /> <br /> A. baumannii 256 (R) 128(R) 0.06(S) > 512 (R) 0,5 (S) +<br /> E.aerogenes 4 (R) 2 (I) 2 (I) > 512 (R) 0,5 (S) +<br /> Acinetobacter spp 128 (R) 64 (R) 2 (I) > 512 (R) 0,5 (S) +<br /> E.aerogenes 8 (R) 8 (R) 256 (R) > 512 (R) 0,5 (S) +<br /> Acinetobacter spp 128 (R) 64 (R) 2 (I) > 512 (R) 0,5 (S) +<br /> <br /> <br /> 4 TCNCYH 85 (5) - 2013<br />  TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> Ghi chú: S: Nhạy cảm; I: đề kháng trung gian; R: kháng.<br /> <br /> Chúng tôi tiến hành thử nghiệm mức độ thuật Tiết niệu và Gan Mật trước đó đã phát<br /> nhạy cảm của các vi khuẩn mang gen NDM - hiện có bệnh nhân dương tính với vi khuẩn<br /> 1 phân lập được trong nghiên cứu với 5 loại mang gen NDM - 1 (khoa nguy cơ cao) và<br /> kháng sinh bao gồm imipenem và mero- khoa phẫu thuật Tiêu hóa chưa phát hiện có<br /> penem, đại diện cho nhóm carbapenem; bệnh nhân dương tính với vi khuẩn mang gen<br /> ceftazidime cho nhóm kháng sinh cepha- NDM - 1 (nguy cơ thấp hơn) để lấy mẫu xét<br /> losporin; ciprofloxacin cho nhóm fluoroqui- nghiệm. Các vị trí lấy mẫu cũng được lựa<br /> nolone là các thuốc đầu tay điều trị tại bệnh chọn các vị trí là có khả năng có vi khuẩn<br /> viện hiện nay và colistin là kháng sinh được mang gen NDM - 1 như ga trải giường bệnh,<br /> khuyến cáo trong trường hợp vi khuẩn mang nắp toa lét, sàn nhà, tay điều dưỡng viện hay<br /> gen NDM - 1 kháng lại với tất cả các loại các dụng cụ y tế…<br /> kháng sinh. Kết quả cho thấy, cả năm chủng Kết quả đã được chứng minh ở nghiên<br /> đều kháng lại với imipenem (từ 4 - 256mg/L); cứu này với 2,5% số mẫu xét nghiệm dương<br /> 4 chủng kháng với meropenem (8 - 128mg/L), tính với vi khuẩn mang gen NDM - 1. Đây là<br /> 1 chủng E.aerogenes kháng meropenem ở một kết quả cao đáng báo động. Các mẫu<br /> mức độ trung gian (2mg/L). Một chủng dương tính đều được phát hiện tại hai khoa<br /> E.aerogenes kháng ciprofloxacine ở nồng độ đã có bệnh nhân dương tính với loại vi khuẩn<br /> 256mg/L; ba chủng bao gồm E. aerogenes này. Các mẫu xét nghiệm dương tính đều là<br /> (1), Acinetobacter spp (2) kháng ciproflox- các mẫu có nguy cơ cao như ga trải giường<br /> acine ở mức độ trung gian 2mg/L và chủng A. bệnh nhân, nắp toa lét nhà vệ sinh (các dịch<br /> baumannii vẫn còn nhạy cảm với ciproflox- như nước tiểu, vết mổ… của bệnh nhân bị<br /> acin. Tất các các chủng vi khuẩn mang gen nhiễm với vi khuẩn mang gen NDM - 1 có thể<br /> NDM - 1 đều kháng với ceftazidim (512mg/L) dính vào) hay nắp thùng rác y tế có chứa các<br /> và vẫn còn nhạy cảm với colistin (bảng 2). bông băng hay dịch từ các bệnh nhân dương<br /> tính. Một số mẫu xét nghiệm khác cũng có<br /> IV. BÀN LUẬN<br /> nguy cơ cao như tay nhân viên điều dưỡng<br /> Bệnh viện Việt Đức là bệnh viện đầu tiên ở (tiếp xúc trực tiếp và thường xuyên hơn với<br /> Việt Nam công bố sự có mặt của vi khuẩn bệnh nhân), sàn buồng bệnh (dịch nhiễm<br /> gram âm mang gen NDM - 1 kháng carbap- khuẩn chảy ra)… đều cho kết quả âm tính.<br /> enem phân lập trên các bệnh nhân nhiễm Điều này có thể giải thích như sau. Các nhân<br /> khuẩn bệnh viện [5;6]. Như đã trình bày ở viên điều dưỡng sau khi chăm sóc bệnh nhân<br /> trên, đây là bệnh viện ngoại khoa đầu ngành, đều đeo găng tay, sàn buồng bệnh đều được<br /> hàng năm thực hiện nhiều ca phẫu thuật và lau 2 lần/ ngày với các dung dịch khử khuẩn<br /> luôn trong tình trạng quá tải, do vậy giả thuyết và các vị trí xét nghiệm khác như bàn và tủ<br /> nghiên cứu của chúng tôi là khi đã có các ca cá nhân không tiếp xúc thường xuyên so với<br /> bệnh nhiễm khuẩn mang gen NDM - 1 thì khả các mẫu xét nghiệm dương tính nên chúng<br /> năng có mặt của vi khuẩn mang gen NDM - 1 tôi không phát hiện được. Các chủng vi khuẩn<br /> trong môi trường bệnh viện là rất cao. Nghiên mang gen NDM - 1 trong nghiên cứu đã kháng<br /> cứu này chúng tôi lựa chọn hai khoa phẫu lại kháng sinh được thử nghiệm như<br /> <br /> <br /> TCNCYH 85 (5) - 2013 5<br /> TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> imipenem, meropenem và ceftazidime, tuy enem trong môi trường bệnh viện Việt Đức -<br /> nhiên một chủng A. baumannii vẫn còn nhạy Hà Nội với tỷ lệ 2,5% (5/200 mẫu xét nghiệm),<br /> cảm hoàn toàn với ciprofloxacin. Cả năm đây là bệnh viện đã xác định được có các<br /> chủng đều nhạy cảm với colistin. Điều này cho bệnh nhân nhiễm khuẩn bệnh viện do các vi<br /> thấy cần phải thử nghiệm tính nhạy cảm khuẩn mang gen NDM - 1.<br /> kháng sinh để lựa chọn kháng sinh phù hợp<br /> Lời cám ơn<br /> để điều trị cũng như theo dõi sự thay đổi<br /> tính nhạy cảm với kháng sinh của các vi Nghiên cứu này sử dụng kinh phí của Well-<br /> khuẩn mang gen NDM - 1 trong bệnh viện và come Trust, UK và the Global Antibiotic Resis-<br /> cộng đồng. tance Partnership, USA, chủ nhiệm đề tài: TS.<br /> Ở trong môi trường bệnh viện có rất nhiều Trần Như Dương.<br /> loại vi khuẩn khác nhau bao gồm cả các vi<br /> TÀI LIỆU THAM KHẢO<br /> khuẩn kháng carbapenem, do vậy để nâng<br /> cao khả năng phát hiện, chúng tôi sử dụng 1. Yong D, Toleman MA, Walsh TR<br /> các môi trường tăng sinh và chọn lọc có chứa (2009). Characterization of a new metallo-<br /> impenem để ức chế và ưu tiên cho các vi beta-lactamase gene, bla (NDM-1), and a<br /> khuẩn kháng carbapenem phát triển và lựa novel erythromycin esterase gene carried on a<br /> chọn nhiều khuẩn lạc khác nhau trong một unique genetic structure in Klebsiella pneumo-<br /> mẫu xét nghiệm sẽ tăng khả năng phát hiện, niae sequence type 14 from India, Antimicrob<br /> đây là một phương pháp tốt cần được áp Agents Chemother, 53(12), 5046 - 5054.<br /> dụng để giám sát và phát hiện vi khuẩn mang 2. Kumarasamy KK, Toleman MA, Walsh<br /> gen NDM - 1 trong môi trường. TR (2010). Emergence of a new antibiotic<br /> Việc phát hiện ra các chủng vi khuẩn mang resistance mechanism in India, Pakistan,<br /> gen NDM - 1 trong môi trường bệnh viện Việt and the UK: a molecular, biological, and epi-<br /> Đức của nghiên cứu này là một vấn đề quan demiological study, Lancet Infect Dis. 10(9),<br /> trọng, nó cho thấy nguy cơ lây nhiễm các vi 597 - 602.<br /> khuẩn này không chỉ trong phạm vi bệnh viện 3. Walsh TR, Weeks J, Toleman MA<br /> mà có khả năng phát tán ra ngoài cộng đồng, (2011). Dissemination of NDM - 1 positive<br /> điều này đã được chứng minh bằng nghiên bacteria in the New Delhi environment and its<br /> cứu của Isozumi và cộng sự về sự có mặt của implications for human health: an environ-<br /> vi khuẩn mang gen NDM - 1 trong môi trường mental point prevalence study. Lancet Infect<br /> ngoại cảnh tại Hà Nội [7]. Do vậy, cần phải Dis, 11, 355 - 362.<br /> nâng cao công tác phòng chống nhiễm khuẩn 4. Global Antibiotic Resistance Partner-<br /> bệnh viện, và giám sát chặt chẽ vi khuẩn ship (GARP) Working Group Vietnam<br /> mang gen NDM - 1 trên các bệnh nhân nhiễm (2010). Situation Analysis on Antibiotic Use<br /> khuẩn bệnh viện trong môi trường và ở ngoài and Resistance in Vietnam. GARP report<br /> cộng đồng. Vietnam.<br /> 5. Trần Huy Hoàng, Nguyễn Hoài Thu,<br /> V. KẾT LUẬN Nguyễn Bình Minh và cộng sự (2012). Citro-<br /> Đã phát hiện được sự có mặt của vi khuẩn bacter freundii mang gen New Delhi-Metallo-<br /> gram âm mang gen NDM - 1 kháng carbap- Beta-Lactamase (NDM - 1) kháng carbap-<br /> <br /> <br /> 6 TCNCYH 85 (5) - 2013<br />  TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC<br /> <br /> enem phân lập tại bệnh viện năm 2010 - 2011, Emerging Infectious Diseases lett, 18 (8),<br /> Tạp chí Y học Dự phòng, 6(133), 23 - 30. 1383 - 1385.<br /> <br /> 6. Tran Huy Hoang, Heiman Wertheim, 8. Shingo Chihara, Katsuko Okuzumi,<br /> Nguyen Binh Minh et al (2013). Carbap- and Akira Hishinuma (2011). First Case of<br /> enem-Resistant Escherichia coli and Kleb- New Delhi Metallo-b-Lactamase 1 Producing<br /> siella pneumoniae Strains Containing New Escherichia coli Infection in Japan. Clinical<br /> Delhi Metallo-Beta-Lactamase Isolated from Infectious Diseases, 52,153 - 154.<br /> Two Patients in Vietnam. J. Clin. Microbiol. 51 9. Clinical and Laboratory Standards<br /> (1), 373 - 374. Institute (2010). Performance standards for<br /> 7. Isozumi R, Yoshimatsu K, Yamashiro antimicrobial susceptibility testing; Twentieth<br /> T et al (2012). blaNDM-1 – positive Klebsiella informational supplement. Clinical and Labora-<br /> pneumoniae from Environment, Vietnam. tory Standards Institure, 30. Wayne, PA.<br /> <br /> Summary<br /> GRAM NEGATIVE BACTERIA CARRYING NEW<br /> DELHI - METALLO - BETA - LACTAMASE (NDM - 1)<br /> GENE ISOLATED IN THE HOSPITAL ENVIRONMENT<br /> <br /> Gram-negative bacteria resistance to carbapenems due to the expression of the New Delhi<br /> metallo-beta-lactamase 1 (NDM - 1) gene are one of the major global health problems. Previ-<br /> ously, NDM-1 positive bacteria have been reported in bacteria isolated from both clinical and<br /> environmental samples in Vietnam. To investigate whether NDM - 1 positive bacteria contamina-<br /> tion exits in the Viet Duc Hospital, we collected 200 samples from 8 major sites often directly in<br /> contact with patients such as the nurse hands, medical trolleys, floor surfaces, patient bed sheets,<br /> toilet covers, and medical equipment, plus other minor sites such office table tops and telephone<br /> in three surgical departments (urology, gastro-enterology and hepato-biliary surgery). Samples<br /> were transported to the microbiology laboratory and tested for carabapenem resistance and the<br /> presence of the NDM - 1 gene by PCR. NDM - 1 positive bacteria were further identified by<br /> biochemical testing (API-20E strip, Biomerieux) and susceptibility testing. The results shown:<br /> 5/200 (2.5%) samples positive with the NDM - 1 gene, three samples were patient bed sheet, one<br /> was from cover of medical bin-wash disposal, and one in toilet cover in Urology and Hepato-<br /> biliary Surgery departments. All of positive NDM - 1 were extensively drug resistant, but remained<br /> susceptible to colistin.<br /> <br /> Keywords: Gram-negative bacteria, NDM-1 gene, carbapenem resistant, hospital<br /> environment<br /> <br /> <br /> <br /> <br /> TCNCYH 85 (5) - 2013 7<br />