iii
MỤC LỤC
LỜI CAM ĐOAN ...................................................................................................... i
LỜI CẢM ƠN ........................................................................................................... ii
MỤC LỤC ................................................................................................................ iii
DANH MỤC CÁC TỪ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT ..................................................... vi
DANH MỤC HÌNH ................................................................................................ vii
DANH MỤC BẢNG .................................................................................................. x
MỞ ĐẦU .................................................................................................................... 1
CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN ..................................................................................... 4
1.1. Vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa .................................................................. 4
1.1.1. Đặc điểm sinh học của Pseudomonas aeruginosa ........................................ 4
1.1.2. Sinh tổng hợp pyocyanin bởi Pseudomonas aeruginosa .............................. 6
1.1.3. Khả năng ứng dụng Pseudomonas aeruginosa ............................................ 7
1.2. Pyocyanin .......................................................................................................... 12
1.2.1. Cấu trúc của pyocyanin .............................................................................. 13
1.2.2. Hoạt tính sinh học và độc tính của pyocyanin ............................................ 14
1.2.3. Cơ chế kháng khuẩn của pyocyanin ........................................................... 17
1.2.4. Con đường sinh tổng hợp pyocyanin .......................................................... 18
1.2.5. Tách chiết và tinh chế pyocyanin ............................................................... 20
1.2.6. Ứng dụng của pyocyanin ............................................................................ 21
1.3. Chuyển gen mã hóa protein tham gia vào quá trình tăng sinh pyocyanin . 22
1.3.1. Các gen tham gia vào quá trình chuyển hóa phenazine .............................. 22
1.3.2. Tổng hợp pyocyanin từ phenazine-1-carboxylic acid ................................ 23
1.3.3. Vai trò của PhzM và PhzS trong quá trình sinh tổng hợp pyocyanin ........ 24
1.3.4. Tăng cường biểu hiện gen phzM và phzS tham gia vào con đường sinh tổng
hợp pyocyanin ở Pseudomonas aeruginosa ......................................................... 26
1.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự sinh tổng hợp pyocyanin bởi P. aeruginosa 30
CHƯƠNG 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .................................................. 33
2.1. Vật liệu và hóa chất .......................................................................................... 33
2.2. Phương pháp vi sinh vật .................................................................................. 34
2.2.1. Phương pháp phân lập vi khuẩn sinh pyocyanin ........................................ 34
2.2.2. Phương pháp nhuộm Gram và chụp ảnh kính hiển vi điện tử quét ............ 34
2.2.3. Định danh vi khuẩn theo các phương pháp sinh hóa .................................. 35
2.2.4. Xác định gen đặc trưng loài PA 956 của P. aeruginosa ............................. 35
2.2.5. Xây dựng cây phát sinh loài ....................................................................... 35
2.2.6. Xác định hoạt tính enzyme ngoại bào ......................................................... 35
