intTypePromotion=1
zunia.vn Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z zunia.vn zunia.vn
ADSENSE

Bài giảng Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật

Chia sẻ: Lavie Lavie | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:35

122
lượt xem
12
download
 
  Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài giảng Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật tập trung tìm hiểu về các phương pháp chuyển gen không sử dụng virus; các phương pháp chuyển gen sử dụng virus; ứng dụng của phương pháp chuyển gen vào tế bào động vật. Với các bạn chuyên ngành sinh học thì đây là tài liệu hữu ích.

Chủ đề:
Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật

  1. Các kỹ thuật chuyển gen vào tế bào động vật 1
  2. Nội dung bài học  Mở đầu  Các phương pháp chuyển gen không sử dụng virus  Các phương pháp chuyển gen sử dụng virus  Ứng dụng  Kết luận 2
  3. Mở đầu  Dự án giải mã bộ gen Người (Human Genome Project, 1990 – 2003)  Hiểu biết rõ ràng hơn về bộ gen Người  Cải tiến về các phương pháp chuẩn đoán, điều trị trên từng cá thể  Liệu pháp gen 3
  4. Mở đầu  Liệu pháp gen là việc áp dụng các nguyên lí di truyền trong điều trị bệnh lí trên người  Liệu pháp gen = chuyển vật liệu di truyền vào tế bào với các mục tiêu  Thay thế cho các gen mất chức năng  Ức chế sự biểu hiện của gen bệnh  Tiêu diệt tế bào bệnh bằng gen tự sát  … 4
  5. Mở đầu Mô hình liệu pháp gen 5
  6. Mở đầu  Chiến lược chuyển gen  In vivo  Ex vivo 6
  7. Mở đầu  Các phương pháp chuyển gen  Phương pháp chuyển gen sử dụng virus  Phương pháp chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp hóa học  Phương pháp vật lí 7
  8. Phương pháp  Chuyển gen bằng virus  Khả năng xâm nhiễm đa dạng và chuyên biệt  Gắn chèn gen mục tiêu vào bộ gen của tế bào chủ  biểu hiện ổn định protein mục tiêu  Retrovirus, Herpesvirus, Adenovirus, Lentivirus, … 8
  9. Phương pháp  Quá trình sao chép của virus 9
  10. Chuyển gen sử dụng virus  Chiến lược sử dụng vector virus  Giai đoạn 1: tạo vector virus Tín hiệu đóng gói Gen mục tiêu Vector DNA Helper DNA Virus hoang dại Gen cần thiết của virus Protein virus Tế bào đóng gói Protein virus Vector retrovirus 10
  11. Chuyển gen sử dụng virus  Giai đoạn 2: quá trình xâm nhiễm Vector trần vector Vector tồn Vector gắn tại trong chèn vào nhân NST Tế bào mục tiêu mRNA và Protein trị liệu 11
  12. Chuyển gen sử dụng virus  Retrovirus  Cấu tạo  Vỏ  Thụ thể Glycoprotein  Lõi  Protein lõi  Vật liệu di truyền  Các enzym 12
  13. Chuyển gen sử dụng virus  Retrovirus 13
  14. Chuyển gen sử dụng virus  Retrovirus  Ưu điểm  Gắn chèn gen mục tiêu vào NST của tế bào quan tâm  biểu hiện gen mục tiêu ổn định  Ít nhạy cảm với hệ miễn dịch  Sử dụng đối với các dòng tế bào phân chia mạnh  Khuyết điểm  Gắn chèn gen mục tiêu một cách ngẫu nhiên  Không có khả năng chuyển nhiễm lên các dòng tế bào không phân chia  Sự biểu hiện bắt đầu giảm đi sau một thời gian biểu hiện ổn định 14
  15. Chuyển gen sử dụng virus 15
  16. Chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp hóa học  Calcium Phosphate  DEAE dextran  Liposome  Phương pháp vật lí  Điện biến nạp  Súng bắn gen 16
  17. Chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp hóa học  Sử dụng lần đầu tiên vào năm 1965 (DEAE- dextran)  Giúp cho DNA dễ dàng bám và di chuyển qua màng tế bào, màng nhân.  Hiệu quả thấp hơn so với các phương pháp chuyển gen sử dụng virus  Yêu cầu nghiêm ngặt về hóa chất sử dụng  Không liên quan đến các vấn đề về an toàn sinh học 17
  18. Chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp Calcium Phosphate  Tạo tủa từ phức hợp DNA/CaCl2 và đệm HBS 2X (Hepes buffer saline)  Tủa có chứa DNA sẽ được gắn lên bề mặt tế bào quan tâm  DNA sẽ di chuyển vào bên trong tế bào thông qua cơ chế thực bào (endocytosis)  Tủa CaPO4: ngăn chặn sự ảnh hưởng của nuclease 18
  19. Chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp Calcium Phosphate 19
  20. Chuyển gen không sử dụng virus  Phương pháp DEAE-dextran  Phức hợp DNA/DEAE-dextran được tạo ra dưới tác dụng của lực tĩnh điện  DEAE-dextran có điện tích +, gắn kết DNA (-) và màng tế bào (-)  Hiệu quả cao hơn Calcium phosphate, nhưng DEAE-dextran độc với tế bào, dễ làm chết tế bào sau biến nạp  Thực hiện biến nạp không sử dụng huyết thanh 20
ADSENSE

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

 

Đồng bộ tài khoản
8=>2