zunia.vn

Tuyển sinh 2024 dành cho Gen-Z

zunia.vn

» Khoa Học Tự Nhiên

Bài giảng Vi sinh vật học đại cương: Chương 6 - ThS. Trịnh Ngọc Nam

Chia sẻ: Năm Tháng Tĩnh Lặng | Ngày: | Loại File: PPT | Số trang:25

Báo xấu

154
lượt xem 28
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Chương 6 đề cập đến những vấn đề kỹ thuật và phương pháp tạo giống vi sinh vật. Thông qua chương này người học sẽ biết được các yêu cầu về chất lượng giống; biết được phương pháp tạo giống – phương pháp phân lập, phương pháp tạo giống – đột biến và biết được phương pháp giữ giống vi sinh vật.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Bài giảng Vi sinh vật học đại cương: Chương 6 - ThS. Trịnh Ngọc Nam

Chương VI: NHỮNG VẤN ĐỀ KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG VI SINH VẬT
I. YÊU CẦU CHẤT LƯỢNG GIỐNG Sản lượng cao, thuần khiết, dễ tách Sử dụng nguyên liệu rẻ tiền, dễ tìm Thuần chủng Khỏe, phát triển nhanh Có khả năng chống tạp nhiễm Dễ bảo quản, ổn định Có khả năng cải tạo
I. YÊU CẦU CHẤT LƯỢNG GIỐNG Các trung tâm giữ giống vi sinh vật • ABBOTT: Abbott Laboratories, North Chicago, III.60064, USA. • ATCC: American Type Cultur Collection, 12301, Parklawn Drive Rockvill Md 20852, USA. • CANAD – 212: Division Obioscience, National Research Council, Ottawa, Canada. • CC: CRISO Division of Plant Industry, Canberra City, A.C.T. Australia. • FERM: Fermentation Reseach institute, Agency of IndustrialScience and Technology, Ministry of Industrial Trade and industry, Chiba, Japan. • HIR: Food and Fermentation Division, Hokkaido Profectural Industrial Research Institute, Sapporo, Japan. • IMASP: Museum of Culture, Institute of Microbiology, Academy of Science of Republic of China Peking, China.
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG  Phân lập  Đột biến nhân tạo  Lai tạo gen
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP Tính lượng VSV sau khi pha lõang 1. Chọn hộp petri chứa: 45 colonies (thuộc ống nghiệm th ứ 2). 2. Tổng độ pha lõang của ồng nghiệm thứ 2 là 1/102 (99+1) (ống nghiệm 1)x 1/10 (= 10/(10+90) ( ống nghi ệm 2) = 1/10 3 3. Lượng mẫu dùng để đổ đĩa là = 0.1ml = 1/10. 45colonies Vậy lượng VSV có trong mẫu là: 1 1 45 103 4.5 105 450000 / ml 103 10
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP Bài tập
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP Đổ đĩa
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – PHƯƠNG PHÁP PHÂN LẬP Cấy ria
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – ÐỘT BIẾN Loại đột biến Bản chất các thay đổi Dấu hiệu phát hiện đột biến Mất tiên mao, hoặc tiên mao Các khuẩn lạc mọc dính vào Không di động không hoạt động nhau. Không tạo nha Mất hoặc thay đổi bề mặt Khuẩn lạc bé, xù xì thay vì lớn, bào màng nhầy tròn, bóng. Mất hoặc thay đổi lớp bên Khuẩn lạc nhiều hạt nhỏ, Khuẩn lạc xù xì ngoài lipopolysaccharide không đều Mất một hoặc nhiều enzym Không mọc trên môi trường Dinh dưỡng trên con đường sinh tỏng tổng hợp tối thiểu hợp Không tạo ra sự biến đổi màu Mất enzym phân giải các Lên men đường trên môi trường đặc trưng với loại đường chỉ thị màu đặc trưng.
II. PHƯƠNG PHÁP TẠO GIỐNG – ÐỘT BIẾN Loại đột biến Bản chất các thay đổi Dấu hiệu phát hiện đột biến Thay đổi khả năng thẩm thầu, Mọc trên môi trường có thuốc ở ngăn cản sự xâm nhập vào tế bào nồng độ mà bình thường có thể Kháng thuốc của các loại thuốc, hoặc phá hủy gây ức chế phát triển của vi sinh các thuốc. vật. Phát triển trên môi trường nuôi Kháng virút Mất điểm tiếp nhân virút cấy khi có mặt virút ở nồng độ cao. Nhạy cảm với Có khả năng phát triển ở nhiệt độ Thay đổi một protein thiết yếu làm nhiệt độ bình thấp. Nhưng ở nhiệt độ bình tăng sự nhạy cảm với nhiệt độ thường thường không phát triển. Mất các enzym có khả năng tham Khuẩn lạc có màu khác hoặc mất Mất sắc tố gia tổng hợp sắc tố màu
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp cấy truyền định kỳ trên môi trường mới:  Sử dụng thạch nghiêng.  Nấm mốc: cấy truyền sau 3 – 6 tháng  Nấm men, vi khuẩn: cấy truyền sau 1 – 2 tháng  Ưu điểm: đơn giản, dễ làm.  Nhược điểm: tốn công sức, môi trường, thời gian. Không ổn định Coccidioides immitis
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp cấy truyền định kỳ trên môi trường mới:  Phương pháp làm:  Thuần khiết lại chủng vi sinh vật trên thạch đĩa.  Cấy vi sinh vật điển hình lên thạch nghiêng. Actinomycetes  Nuôi trong tủ ấm.  Lấy ống giống ra và cho vào tủ lạnh bảo quản ở 40C.  Định kỳ cấy truyền lại.  Có thể cho thêm 1% dầu thực vật vào để tránh mất nước
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên môi trường thạch có lớp dầu  Sử dụng dầu khoáng như vaselin, parafin.. khoáng:  Ưu điểm:  Đơn giản, hiệu quả cao.  Môi trường không bị mất nước. Campylobacter jejuni  Vi sinh vật sẽ được bảo quản lâu hơn so với phương pháp 01.
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên môi trường thạch có lớp dầu khoáng:  Cách bảo quản:  Khử trùng dầu khoáng (1210C, 2h).  Sấy khô (1700C, 1 – 2h) Serratia  Để nguội.  Đổ lên môi trường thạch nghiêng có VSV phát triển tốt khỏang 1cm. Đậy nút bông lại.  Trét parafin đặc lên miệng  Giữ ở điều kiện lạnh ho ặc điều kiện thường.
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên đất, cát:  Bảo quản các vi sinh vật tạo bào tử.  Thời gian bảo quản từ 1 nhiều năm.  Trước khi dùng phải:  Cấy ria lên môi trường agar  Chọn các khuẩn lạc điển hình... Aspergillus
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên đất, cát: Cách làm:  Đất hoặc cát đem rây kỹ, lấy hạt cùng cỡ.  Ngâm trong HCl hoặc H2SO4 đậm đặc 8 – 12h  Với đất chua thì trung hòa bằng CaCO3 1 – 2%. Clostridium  Rửa đến pH trung tính.  Sấy khô, thanh trùng và giữ vô trùng.  Đổ cát vào ống nghiệm chứa VSV trên thạch (nhiều bào tử), lắc đều.  Rót cát lẫn vi sinh vật và bào tử sang ống nghiệm vô trùng khác.  Đậy nút bông giữ ở 400C trong 2 – 3 ngày.  Hàn kín ống nghiệm bằng paraffin.
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên hạt  Bảo quản các vi sinh vật có dạng hình sợi sinh bào tử hoặc không.  Thời gian bảo quản có thể lên tới 1 năm..
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Phương pháp giữ giống trên hạt  Phương pháp làm:  Hạt ngũ cốc được rửa sạch bằng nước nóng.  Cho vào các ống nghiệm.  Phủ trên các hạt này một lớp bông thấm nước  Nấu hạt ngũ cốc.  Thanh trùng hạt ở 1210C trong 40 phút.  Thanh trùng 3 lần, mỗi lần cách nhau 24h.  Cấy giống vi sinh vật trên lớp bông cho mọc thật dầy.  Hằng ngày lắc nhẹ.  Sau 8 – 10 ngày kiểm tra lại.  Gắn paraffin.  Giữ ở nhiệt độ 15 – 200C.
II. PHƯƠNG PHÁP GIỮ GIỐNG VI SINH VẬT Giữ giống trên giấy lọc:  Bảo quản các vi sinh vật có bào tử. Thời gian bảo quản nhiều năm. Cách làm Clostridium  Giấy lọc cắt miếng 13 cm. Cho vào ống nghiệm.  Đậy nút bông, thanh trùng ở 1210C, 1 giờ.  Sấy ở 1000C, 3 giờ.  Vi sinh vật nuôi trong 3 – 5 ngày để có bào tử.  Cho vào mỗi miếng giấy lọc 1 giọt vi khuẩn. Nuôi thêm 2 – 3 ngày.  Phủ paraffin đặc đun chảy lên nút bông.  Để tủ lạnh hoặc nơi mát.

CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

THÔNG TIN

TRỢ GIÚP

HỖ TRỢ KHÁCH HÀNG

Theo dõi chúng tôi

Chịu trách nhiệm nội dung:

Nguyễn Công Hà - Giám đốc Công ty TNHH TÀI LIỆU TRỰC TUYẾN VI NA

LIÊN HỆ

Địa chỉ: P402, 54A Nơ Trang Long, Phường 14, Q.Bình Thạnh, TP.HCM

Hotline: 093 303 0098

Email: support@tailieu.vn

Giấy phép Mạng Xã Hội số: 670/GP-BTTTT cấp ngày 30/11/2015 Copyright © 2022-2032 TaiLieu.VN. All rights reserved.