Trưng ñi hc Nông nghip 1 – Giáo trình Bnh cây ñi cương ---------------------------------------------------
86
m«itr−êng.
eV¸chtÕbo:CÊut¹ochñyÕutõnucleoproteit,gåmhaichÊtchÝnh:lipoproteitv
polysaccaritvíichøcn¨ngb¶ovÖh×nhd¹ngcñavikhuÈnvcãtÝnhb¸nthÊmc¸cchÊt
hotanhÊpthôvotrongc¬thÓ,trong®ãmngtÕbochÊtdytõ50–100A
0
(angstron),
cãchøcn¨ng:
+Duytr×¸psuÊtthÈmthÊucñatÕbo.
+B¶o®¶mviÖcchñ®éngtÝchluüchÊtdinhd−ìngtrongtÕbovth¶ic¸cs¶nphÈm
trao®æichÊtrangoitÕbo.
+Ln¬ix¶yraqu¸tr×nhsinhtænghîpmétsèthnhphÇncñatÕbovvánhên.
+Ln¬ichøamétsèenzymcñatÕbovikhuÈn.
TÕbochÊtcãcÊut¹od¹ngh¹t,trongbochÊtcãnh©ntÕbokh«ng®iÓnh×nh,
ng−êitagäi®ãlthÓnh©nkhuÕcht¸n,chñyÕucÊut¹obëiADN.SîiADNcãchiÒudi
gÊp20–50lÇnchiÒuditÕbovikhuÈn.
Ngoira,trongtÕbochÊtcßncãnh÷ngh¹ttÕbochÊt,nh÷ngh¹tnychñyÕuchøa
®ùngc¸chÖthèngmen,®ÆcbiÖtlmenoxyho¸ekhö,ë®ãx¶yraqu¸tr×nhtrao®æichÊt
cñatÕbovikhuÈn.Trongh¹ttÕbocßnch−aARN,ho¹t®énggièngnh−béphËnsinhra
n¨ngl−îngcñatÕbothùcvËt.
§asèc¸cloivikhuÈnh¹ic©ycãl«ngroiph¸tsinhtõtrongtÕbochÊtrangoi,nã
cãthÓcã1,hoÆctõ1–3ëmét®ÇuhaynhiÒul«ngroiëquanhm×nhvcãmétloivi
khuÈnkh«ngcãl«ngroi(Corynebacteriumsepedonicum).
TrongtÕbovikhuÈncòngcãnh÷ngs¾ctèhotanhaykh«nghotan(carotenoide,
fluorescein),nhê®ãkhuÈnl¹ccñavikhuÈncãmuvng,tr¾ng…vm«itr−êngvikhuÈn
ph¸ttriÓncòngcãthÓcãmus¾ckh¸cnhau.
III.§Æc®iÓmsinhncñavikhuÈng©ybÖnhh¹ic©y
VikhuÈnh¹ic©ysinhs¶ntheoph−¬ngthøcv«tÝnh:ph©n®«itÕbo,nªnkiÓusinh
s¶ncñanãrÊt®¬ngi¶n.
Trong nh÷ng n¨m gÇn ®©y, qua kÕt qu¶ nghiªn cøu ng−êi ta thÊy r»ng vi khuÈn
kh«ngnh÷ngcãh×nhthøcsinhs¶nv«tÝnhmnãcßnt¸itæhîp(h×nhthøcsinhs¶nh÷u
tÝnh).KÕtqu¶cñasinhs¶nh÷utÝnhlt¹oranh÷ngdßngvikhuÈnmíi,cãtÝnh®écvtÝnh
g©ybÖnhthay®æilmchokh¶n¨ngbiÕndÞcñavikhuÈnx¶yradÔdngtrongtùnhiªn.
IV.§ÆctÝnhsinhlývsinhho¸vikhuÈn
VikhuÈng©ybÖnhc©ylnh÷ngb¸nkýsinhcãthÓnu«icÊysinhtr−ëng,ph¸ttriÓn
tèttrªnc¸clo¹im«itr−êngnh©nt¹odïngtrongvikhuÈnhäc.
Trưng ñi hc Nông nghip 1 – Giáo trình Bnh cây ñi cương ---------------------------------------------------
87
Tuyphôthuécvonh÷ngyÕutènhÊt®Þnh,nh−ngnãichungsùsinhtr−ëngvsinh
s¶ncñavikhuÈnbÖnhc©yb¾t®Çuë5–10
0
C,nhiÖt®étèithÝch25–30
0
C,ngõngsinhs¶n
ë33–40
0
C.NhiÖt®ég©ychÕt40–50
0
C(trong10phót).Kh¸cvíic¸clo¹inÊmbÖnh,®Ó
sinhtr−ëngvsinhs¶n,vikhuÈnbÖnhc©y®ßiháim«itr−êngtrungtÝnhekiÒmyÕu,thÝch
hîpëpH7–8.PhÇnlínvikhuÈnbÖnhc©ylh¸okhÝcÇnoxynªnph¸ttriÓnm¹nhtrªnbÒ
mÆtm«itr−êng®ÆchoÆctrongm«itr−ênglánggiÇuoxynhêl¾cliªntôctrªnm¸yl¾c.
Métsèkh¸cllo¹iyÕmkhÝtùdocãthÓdÔdngph¸ttriÓnbªntrongc¬chÊt(m«c©y)
kh«ngcãoxy.
Vi khuÈn g©y bÖnh c©y l nh÷ng sinh vËt dÞ d−ìng ®èi víi c¸c nguån c¸cbon v
nguån ®¹m. Cho nªn®Ó ph¸t triÓn, vi khuÈn cÇn nhËn ®−îcn¨ng l−îng th«ng qua con
®−êng ph©n gi¶i c¸c chÊt h÷u c¬ cã s½n nh− protein v polysaccarit. Ph©n gi¶i nguån
c¸cbon(®−êng, gluxit)t¹oraaxitvkhÝ.Tuútheolo¹ivikhuÈncãc−êng®ého¹ttÝnh
m¹nh, yÕu kh¸c nhau trong qu¸ tr×nh ph©n gi¶i ny m ng−êi ta coi ®©y l mét trong
nh÷ngchØtiªuc¬b¶n®Ógi¸m®ÞnhloivikhuÈn.
Trong c¸c phasinh s¶n cñavi khuÈng©y bÖnh c©ytrong m«i tr−êngláng th× pha
t¨ngtr−ëngl−îng(phalog)b¾t®Çusau3–4giêsaukhicÊytruyÒnvphaæn®Þnhsè
l−îngsau24–28giê.
Trªnm«itr−êng®Æc(agar)vikhuÈnsinhtr−ëngt¹othnhkhuÈnl¹c.KhuÈnl¹c
h×nhd¹ng,kÝchth−íc,mus¾c,®ÆcthïbÒmÆt,®él¸ngbãng,v.v…kh¸cnhau,®Æctr−ng
choc¸cnhãm,c¸cloivikhuÈnkh¸cnhau.
ichung®èiivikhuÈnnhc©y,cãthÓph©nbiÖtbangkhuÈnl¹cchñunh−
sau:
D¹ngS:khuÈnl¹cnh½n,l¸ngbãngbÒmÆt,r×anh½n.
D¹ngR:khuÈnl¹csïs×,bÒmÆttrongmêkh«ngnh½nbãng,r×ar¨nreo.
D¹ngM:khuÈnl¹cnhÇynhít.
Trongqu¸tr×nhsinhtr−ëngph¸ttriÓn,vikhuÈnbÖnhc©ycãkh¶n¨ngt¹othnhc¸c
s¾ctètuútheoloivikhuÈn.
S¾ctècñavikhuÈnlnh÷nghîpchÊtcã®¹m(nit¬)t¹oratrongc¸cc¬quanmu
chromophorehoÆcëtrongv¸chtÕbo.CãnhiÒulo¹is¾ctècãmukh¸cnhau:muxanh
lôc(fluorescein),muxanhl¬(pyocyanin),mu®á(prodigiosin),muvng(carotenoit),
mu®en(melanin,tyrosin).Trongsèny,cãlo¹is¾ctèthÈmthÊukhuÕcht¸nvom«i
tr−ênglmbiÕnmum«itr−êngnh©nt¹okhinu«icÊyvikhuÈnnh−s¾ctèflouresceincña
loiPseudomonassyringae.Còngcãlo¹is¾ctèkh«ngthÈmthÊu,kh«ngkhuÕcht¸nvo
trong m«i tr−êng m ë trong tÕ bo chÊt lm khuÈn l¹c cã mu khi nu«i cÊy trªn m«i
tr−êng®Æcnh−s¾ctèvngcarotenoitcñaloiXanthomonas.
§Ót¹othnhs¾ctè,vikhuÈncÇnc¸cchÊtdinhd−ìngtrongm«itr−êngkh¸cnhau,
cÇnnguån®¹mnit¬,métsèchÊtkho¸ngkimlo¹iFe,Cu,v.v…vcÇn®épHæn®Þnh.
Trưng ñi hc Nông nghip 1 – Giáo trình Bnh cây ñi cương ---------------------------------------------------
88
S¾ctècãvaitrßtrongh«hÊp,trongqu¸tr×nhoxyho¸khö,trongtrao®æichÊtcñavi
khuÈn.S¾ctècßncãvaitrßb¶ovÖ,chèngt¸c®éngcãh¹icña¸nhs¸ngtiatÝmhoÆccãvai
trßnh−métchÊtcãho¹ttÝnhkh¸ngsinh,®èikh¸ng,v.v…Méttrongnh÷ng®Æc®iÓmc¬
b¶nvÒsinhlývtÝnhg©ybÖnhcñavikhuÈnlkh¶n¨ngs¶nsinhvho¹t®éngcñac¸chÖ
thèngenzymevc¸c®éctè.Qu¸tr×nhtrao®æichÊtphøct¹ptrongtÕbovikhuÈn(s¬®å)
®iÒu khiÓn bëi nh÷ng enzyme (men) nh− photphorilaza, transferaza, decacboxylaza,
oxydaza, dehydrogenaza, hydraza,v.v… chøa ë trong ribos«m, trong mng tÕ bo chÊt,
v¸chtÕbo,v.v…NhiÒulo¹ienzymelnh÷ngngo¹imendovikhuÈnt¹ora,tiÕtrangoi
votrongm«itr−êngsèng®−îccoinh−lvòkhÝquanträngcñakÝsinht,nhê®ãm
x©mnhiÔmvoc©y®Óv−îtqua®−îcc¸cch−íngng¹ivËttùnhiªncñac©y(biÓub×,cutin,
v¸chtÕbothùcvËt),®ÓchuyÓnho¸c¸chîpchÊth÷uc¬phøct¹pthnhd¹ng®¬ngi¶ndÔ
hÊpthôsödôngchovikhuÈnv®ÓtrunghohoÆcv«h¹iho¸c¸cchÊt®Òkh¸ngcñac©y
chèngl¹ikÝsinhvËt.
S¬®åchuyÓnho¸c¸cchÊtdinhd−ìngcñavikhuÈn
C¸c men ph©n gi¶i pectin m¶nh gian bo cña c©y nh− pectinaza, protopectinaza,
polygalacturonaza,cãëhÇuhÕtc¸cvikhuÈnh¹ic©y,ho¹ttÝnhm¹nhnhÊtbiÓuhiÖnëc¸c
loivikhuÈng©yc¸cbÖnhthèir÷a.
§èi víi loi vi khuÈn y bÖnh hÐo (Ralstonia solanacearum), men
pectinmethylesterazaph©ngi¶ipectincãthÓsinhraaxitpectinicëtrongm¹chdÉnkÕthîp
víiCat¹othnhpectatcanxivÝtt¾csùl−uth«ngcñabãm¹ch,gãpphÇnt¹oratriÖuchøng
hÐo®étngétcñac©ybÖnh.
C¸cchÊtdinh
d−ìnghÊpthô
TÕbo
vikhuÈn
ChÊtdùtr÷
S¶nphÈmTrunggian
cñadÞho¸
T
rao®æin¨ngl−îng
S¶nphÈmtrunggian
AxÝt
h÷uc¬
v.v…
CO
2
Indol
H
2
S
v.v…
Enzym
e
Axitamin
§éctè
Trưng ñi hc Nông nghip 1 – Giáo trình Bnh cây ñi cương ---------------------------------------------------
89
NhiÒulo¹ienzymecutinaza(ph©ngi¶icutin),hemixenlulaza, xenlulaza(ph©n gi¶i
xenlulo)rÊtphæbiÕnëvikhuÈn,®ÆcbiÖtlvikhuÈnXanthomonascampestris(bÖnhthèi
bãm¹ch c¶ib¾p), Corynebacterium sepedonicum (bÖnhthèivßng khoait©y). NhiÒu
lo¹ienzyme(men)thuûph©nchuyÓnho¸c¸chîpchÊtphøct¹patÕboc©ythnhc¸c
hîpchÊt®¬ngi¶ndÔsödôngchovikhuÈnnh−amilaza,invertaza,β.Glucosidaza,lactaza
v c¸cenzyme ph©n gi¶iprotein vpeptitnh− proteaza,peptidaza, amidaza,men ph©n
gi¶ichÊtbÐonh−lipaza,v.v…
Thnh phÇn v ho¹t tÝnh cña c¸c lo¹i enzyme nãi trªn kh¸c nhau tuú theo loi vi
khuÈn.ChonªnhÖ thèngenzymevs¶n phÈm ph©ngi¶it¹oradosù t¸c®éngcña c¸c
enzymevikhuÈncãkh¸cbiÖtnhau®?®−îcsödôngnh−métchØtiªusinhho¸quan
träng®Óph©n®ÞnhloivikhuÈn.CãloivikhuÈnnhêenzymeriªngbiÖtcãthÓph©ngi¶i
gelatin,khönitrat(NO
3
)t¹othnhnitrit(NO
2
).CãloivikhuÈncãthÓph©ngi¶iprotein
haypeptonet¹orac¸cs¶nphÈmph©ngi¶ilindolhayammoniac(NH
3
)hoÆckhÝsulfua
hydro (H
2
S), cã loi vi khuÈn cã thÓ ph©n gi¶i hîp chÊt cacbon nh− c¸c lo¹i ®−êng
(glucoza,saccaroza,lactoza,maltoza,v.v…)t¹orac¸cs¶nphÈmaxithaykhÝhoÆckh«ng
cãkh¶n¨ng®ã.
Tãml¹i,vikhuÈnnhêcãméthÖthèngenzymephongphókh«ngnh÷ng®¶mo
®−îcnh÷ngchÊtdinhd−ìngcÇnthiÕtvqu¸tr×nhtrao®æichÊttrongtÕbovikhuÈnm
cßncãt¸cdôngph¸huûcÊutrócm«vtrao®æichÊtb×nhth−êngcñatÕboc©ycòngnh−
c¸cho¹t®éngcñahÖthèngenzymec©ykýchñ.
VikhuÈnbÖnhc©ycãthÓs¶nsinhc¸c®éctè.§éctècñavikhuÈncãt¸c®éngph¸
huûhÖthèngenzymecñatÕboc©ykýchñvg©yranh÷ngt¸ch¹ilín®Õnc¸cchøcn¨ng
sinhlývtrao®æicñam«thùcvËt.CãthÓph©nchiac¸clo¹i®éctèvikhuÈnthnhhai
nhãm:nhãmpathotoxinvnhãmvivotoxin.
C¸clo¹i®éctèpathotoxincãtÝnh®ÆchiÖutheoloic©ykýchñvcãvaitrßlín
trong viÖc t¹o ra triÖu chøng bÖnh. §ã l c¸c lo¹i ®éc tè tabtoxin, phaseolotoxin,
syringomycin®Òu lc¸cchÊtpeptit,dipeptit,tripeptit,t¸c®éngøcchÕenzymetæng
hîpglutamine,lm®×nhtrÖsùtænghîpdiÖplôc,ph¸vìc¸cph¶nøngtùvÖcñac©ynh−
ph¶nøngsiªunhËychèngl¹ivikhuÈng©ybÖnh(Pseudomonassyringaepv.tabaci,v.v…)
C¸c lo¹i ®éc tè thuéc nhãm vivotoxin l nh÷ng polysaccarit (Pseudomonas
solanacearum,Xanhthomonassp.)amylovorin(Erwiniaamylovora)hoÆcc¸cglucopeptit
(Corynebacteriumsp.).§©ylnh÷ng®éctèg©yhÐoc©y,t¸c®éngph¸huûmngtÕbo,
m¹chdÉncñac©ytrång.
§ÓnghiªncøuvÒsinhlý,sinhho¸v®Æc®iÓmsinhtr−ëngcñavikhuÈnng−êita
cÇnph©nlËpthuÇnkhiÕtc¸cloivikhuÈnriªngbiÖttrªnm«itr−êngdinhd−ìngnh©nt¹o,
nu«icÊychóngtrªnc¸cm«itr−êng®ÆchoÆcláng.
Trưng ñi hc Nông nghip 1 – Giáo trình Bnh cây ñi cương ---------------------------------------------------
90
M«itr−êngph©nlynu«icÊyvikhuÈn
§Óph©nlËp,nu«icÊyvikhuÈntõm«thùcvËtbÞnhtrongviÖcnghiªncøuchÈn
®o¸n,gi¸m®ÞnhvikhuÈnvc¸c®Æc®iÓmsinhlý,sinhho¸cñachóng,ng−êitath−êng
dïngnhiÒulo¹im«itr−êngdinhd−ìngnh©nt¹okh¸cnhautuútheolo¹ivikhuÈnvmôc
tiªunghiªncøu.PhæbiÕnlm«itr−êngb¸ntænghîpvm«itr−êngtænghîp(ho¸chÊt).
C¸clo¹im«itr−êng®iÒuchÕ®−îckhötrïngtriÖt®Ób»ngc¸chhÊptrïngtrong
nåihÊpënhiÖt®é121
0
C,1–1,5atmtrong15–30phót.
M«itr−êngPSA(Peptonesaccaroeagar)
Pepton 10g
Saccarose 10g
Glutamatnatri 1g
Agar 17e20g
N−íccÊt 1000ml
M«itr−êngPPSA(Potatoepeptonesaccaroeagar)
Khoait©ygätvá 200g
Pepton 10g
Saccarose 10g
Agar 20g
N−íccÊt 1000ml
M«itr−êngPGA(Potatoeglucoseeagar)
Khoait©y 200g
Glucose(dextrose) 20g
Agar 20g
N−íccÊt 1000ml
M«itr−êngAyers(thöph¶nøngt¹oaxittõc¸clo¹i®−êngcÇnthiÕtchothªmvo)
KCl 0,2g
MgSO
4
.7H
2
O 0,2g
NH
4
H
2
PO
4
 1g
Agar 12g
N−íccÊt 1000ml
Bromothymolxanh 1ml(dungdÞchtrongcån1,6%)