BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢƠ
NG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN
RƢ
NG Dendrobium THU THÂP TẠI THA
NH PHÔ
HỒ CHÍ MINH VÀ RƢ
NG NAM CÁT TIÊN
BẰNG K THUÂT RAPD
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên khóa: 2003 – 2007
Sinh viên thực hiện: TRƢƠNG MINH DŨNG
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2007
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢƠ
NG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HỒ CHÍ MINH
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP
ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA GIỐNG LAN
RƢ
NG Dendrobium THU THÂP TẠI THA
NH PHÔ
HỒ CHÍ MINH VÀ RƢ
NG NAM CÁT TIÊN
BẰNG K THUẬT RAPD
Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Niên khóa: 2003 – 2007
Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện:
TS. TRẦN THỊ DUNG TRƢƠNG MINH DŨNG
TS. VÕ THÁI DÂN
CN. LƢU PHU
C LƠI
Thành phố Hồ Chí Minh
Tháng 9/2007
iii
LƠ
I CA
M TA
Tôi xin chân thanh cam ơn:
- Ban Giám Hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh.
- Ban Giam Đôc Viê
n Công Nghê
Sinh Ho
c va Môi Trƣơng – Đa
i ho
c Nông
Lâm TP. HCM.
- Các thầy cô trong Bộ môn Công Nghệ Sinh Học cùng các thầy cô đã trực tiếp
giảng dạy trong suốt bốn năm qua.
Đã hỗ trợ và tạo điều kiện tốt trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài.
Tôi xin trân tro
ng gƣ
i lơi biêt ơn đên cac thây cô:
- TS. Trần Thị Dung
- TS. V Thái Dân
- CN. Lƣu Phúc Lợi
Đa tâ
n tinh hƣơng dân, ch bảo và truyền đạt nhng kinh nghiệm qu báu cng
nhƣ ta
o điêu kiê
n tôt nhât cho viê
c thƣc hiê
n va hoan tâ t đê tai tôt nghiê
p nay.
CN. Huỳnh Kim Hƣng và toàn th các anh chị thuộc Viện Công Nghệ Sinh Học
và Môi Trƣờng – Đa
i ho
c Nông Lâm TP. HCM đã quan tâm giúp đỡ trong suốt thời
gian ở phòng thí nghiệm.
K sƣ Huỳnh Tuân Anh – trƣơng Tra m khuyên nông huyê
n Tân Phu, tnh Đồng
Nai đã tận tình hƣớng dẫn trong suốt thời gian thu mẫu tại rƣ
ng Nam Cat Tiên.
Cô Nguyên Thị Cách và các anh Trƣờng , Tùng, chị Vân đã tận tình hƣớng dẫn
trong suôt thơi gian thu mâu ta
i Thành phô Hô Chi Minh.
Toàn th lớp CNSH29 thân yêu đã hỗ trợ, giúp đỡ và động viên tôi trong suốt
thời gian làm đề tài.
Thành kính ghi ơn ba mẹ cùng nhng ngƣời thân trong gia đình luôn tạo điều
kiện và động viên con trong suốt quá trình học tập tại trƣờng.
TP. HCM, tháng 09 năm 2007
Trƣơng Minh Dung
iv
TÓM TẮT KHÓA LUẬN
TRƢƠNG MINH DUNG, Đa
i ho
c Nông Lâm Tp . Hô Chi Minh, 9/2007. “Đanh
giá đa dạng di truyền ca giống lan rng Dendrobium thu thâ
p ta
i Thanh phô Hô
Chí Minh và rƣ
ng Nam Cat Tiên băng ky thuâ
t RAPD.”
Hô
i đông hƣơng dân: TS. Trân Thi
Dung, TS. V Thái Dân, CN. Lƣu Phuc Lơi.
Đi
a điêm nghiên cƣ
u: Viê
n Công Nghê
Sinh Ho
c va Môi Trƣơng , Đa
i ho
c Nông
Lâm Thanh phô Hô Chi Minh.
Viê
t Nam sơ hƣu nhiêu nguôn gen quy hiêm, đô
c đao, mơi la
cua giông lan rƣ
ng
Dendrobium. Các giống Dendrobium không nhƣng đe
p, giá trị kinh tế cao , mà còn
c giá trị y học . Vì vậy, trƣơc hêt chung ta cân phai khao sat sƣ đa da
ng di truyên
ca các giống lan rng Dendrobium, tạo nền tảng cho công tác bảo tồn và tạo các
giông mơi, trên cơ sơ đo, xây dƣng thƣơng hiê
u cho cây lan Viê
t Nam.
Thiêt lâ
p quy trinh li trich DNA tông sô tƣ
mâu la co đô
tinh sa
ch va ôn đi
nh
cao. Bên ca
nh đo, xây dƣng phan ƣ
ng PCR vơi primer RAPD cho tinh đa hinh cao .
Tƣ
đo, phân tich tinh đa da
ng di truyên cua 10 giông lan rƣ
ng Dendrobium thu thâ
p
tại Thành phố Hồ Chí Minh và Nam Cát Tiên dựa trên phần mềm NTSYSp c
Version 2.1 và Winboot.
Quy trinh li trich DNA tƣ
mâu la co đô
tinh sa
ch va ôn đi
nh cao đa đƣơc tôi ƣu
thành công . 6 primer ngâu nhiên : OPAC10, OPAH13, 0PB01, OPB08, S1384,
U693 đƣơc dung trong phân tich đa da
ng di truyên cua cac giông lan khao sat băng
k thuật RAPD . Trên cơ sơ đo, xây dƣng sơ đô phân nhom di truyên cua 10 giông
lan rƣ
ng Dendrobium.
Sơ đô phân nhom di truyên cho thây cac giông lan khao sat co sƣ đa da
ng cao vê
mă
t di truyên, phân thanh 5 nhm với mc tƣơng đồng gen t 0.39 – 0.79.
v
SUMMARY
Genetic diversity analysis of wild Dendrobium stem at Ho Chi Minh city
and Nam Cat Tien forest by RAPD
Supervisor: Tran Thi Dung1, PhD; Vo Thai Dan2, PhD; Luu Phuc Loi1, BSc
Student: Truong Minh Dung1
1Department of Biotechnology, Nong Lam university, Ho Chi Minh city
2Faculty of Agriculture, Nong Lam university, Ho Chi Minh city
To analysis the genetic diversity of wild Dendrobium orchid, six decamers were
used for 10 wild Dendrobium species, collected from Ho Chi Minh city and Nam
Cat Tien forest (Dong Nai province). Collecting 10 species from Ho Chi Minh city
and Nam Cat Tien forest (Dong Nai province), optimizing of protocols for DNA
extraction and purification, constructing of protocol for RAPD, analyzing the
genetic of 10 wild Dendrobium species by RAPD and constructing the dendrogram
by NTSYSpc 2.1 software, Winboot program are the objective of the study.
Methods
- To identify 10 wild Dendrobium species with genotype.
- Extraction of total DNA from fresh tissue of 10 wild Dendrobium species.
- Six random primer: OPAC10, OPAH13, OPB01, OPB08, S1384, U693 were
used to analysis of genetic diversity.
- Following RAPD reactions, dendrogram were constructed by NTSYSpc 2.1
and Winboot program.
Conclusion
Six decamers are enough to compare the identity of all samples. We could use
those primers to establish the methodology to perform genetic comparisons in
Vietnam. Besides, the genetic diversity among 10 wild Dendrobium species were
established to support the breeder overcome difficulties in plant salection.