TS. BS. Đ Th Thanh Th yỗ ị ủ
Realtime PCR
Nguyên t c và ng d ngắ ứ ụ
PCR
PCR VÀ GI I H N C A PCRỚ Ạ Ủ
PCR và phát hi n s n ph m b ng ệ ả ẩ ằ
đi n di trên gel agaroseệ
1. Phát hi n đi m cu i ệ ể ố
(End-Point Detection)
2. Đ đ c hi u kémộ ặ ệ
3. Đ nh y th p ộ ạ ấ
4. Đ phân gi i kémộ ả
4. Ch phân bi t d a trên kích th c s n ph m PCRỉ ệ ự ướ ả ẩ
5. Ph i x lý sau PCR, d ngo i nhi mả ử ễ ạ ễ
6. Ch y gel nh Ethidium bromide (ch t gây ung th )ạ ờ ấ ư
REALTIME PCR
→ Real-time PCR là ph n ng PCR mà quá trình ả ứ
nhân b n DNA đ c theo dõi tr c ti p trên máy ả ượ ự ế
luân nhi t theo t ng chu kỳ nhi t.ệ ừ ệ
Ki m soát tín hi u huỳnh quang phát ra trong m i ể ệ ỗ
chu kỳ ph n ng ả ứ (t l v i l ng s n ph m PCR ỉ ệ ớ ượ ả ẩ
t o thành trong t ng chu kỳ nhi t - Real time).ạ ừ ệ
Phát hi n và đ nh l ng n ng đ s n ph m sau ệ ị ượ ồ ộ ả ẩ
m i chu kỳ nhi t d a trên c ng đ phát huỳnh ỗ ệ ự ườ ộ
quang.
REALTIME PCR