I. Kh¸i niÖm
c«ng nghÖ cÊy truyÒn ph«i
1
2
C«ng nghÖ cÊy truyÒn ph«i lµ mét qu¸ tr×nh ®a ph«i ®ưîc t¹o ra tõ c¸ thÓ bß mÑ nµy (bß cho ph«i) vµo c¸ thÓ bß mÑ kh¸c (bß nhËn ph«i). Ph«i vÉn sèng, ph¸t triÓn b×nh thưêng trªn c¬ së tr¹ng th¸i sinh lý sinh dôc cña bß nhËn ph«i phï hîp víi tr¹ng th¸i sinh lý, sinh dôc cña bß nhËn ph«i ho¹c phï hîp víi tuæi ph«i (sù phï hîp nµy gäi lµ sù ®ång pha).
ý nghÜa C¤NG NGHÖ CÊY TRUYÒN PH¤I Bß
II. ý nghÜa C¤NG NGHÖ CÊY TRUYÒN PH¤I Bß
4. H¹n chÕ møc tèi thiÓu sè lưîng gia sóc lµm gièng, tõ ®ã gi¶m c¸c
1. CÊy truyÒn ph«i phæ biÕn vµ nh©n nhanh gièng tèt, nh÷ng ®Æc tÝnh quý
chi phÝ kh¸c ®i kÌm như: chuång tr¹i, thức ăn, nh©n lùc…
5. Gióp cho con ngêi dÔ dµng thuËn lîi trong viÖc xuÊt khÈu, vËn
hiÕm ra thùc tÕ s¶n xuÊt trªn c¬ së khai th¸c triÖt ®Ó tiÒm n¨ng di truyÒn cña nh÷ng c¸ thÓ c¸i cao s¶n th«ng qua viÖc lÊy - b¶o qu¶n ph«i vµ cÊy truyÒn nh÷ng ph«i cña chóng.
chuyÓn, trao ®æi con gièng gi÷a c¸c nưíc, c¸c vïng, c¸c ®Þa phư¬ng.
2. N©ng cao cuêng ®é chän läc, ®Èy m¹nh c«ng t¸c gièng trªn c¬ së t¨ng
6. Mét phư¬ng ph¸p b¶o tån, gi÷ g×n con gièng dưíi d¹ng trøng, ph«i,
nhanh tiÕn bé di truyÒn hµng n¨m, th«ng qua:
tinh trïng - phư¬ng ph¸p gi÷ g×n vËt liÖu di truyÒn
R= h2.S; g= R/L = (h2.S)/L
7. H¹n chÕ mét sè dÞch bÖnh vµ n©ng cao kh¶ n¨ng chèng chÞu bÖnh,
+ R: hiÖu qña chän läc
+ h2: HÖ sè di truyÒn cña tÝnh tr¹ng
kh¶ n¨ng thÝch nghi cho con vËt ë m«i trưêng míi: kh«ng l©y truyÒn bÖnh, t¨ng søc ®Ò kh¸ng...
+ L: Kho¶ng c¸ch c¸c thÕ hÖ
+ S: Ly sai chän läc.
8. Lµm cë së thóc ®Èy m¹nh sù nghiªn cøu vµ ph¸t triÓn mét sè ngµnh
3. N©ng cao kh¶ n¨ng sinh s¶n, c¸c s¶n phÈm thÞt, s÷a trong ch¨n nu«i bß.
khoa häc cã liªn quan: sinh lý, di truyÒn, thó y...
3
4
1
1982: Vi phÉu thuËt ph«i bß ®· thµnh c«ng trong phßng thÝ
1890 thÝ nghiÖm ®Çu tiªn vÒ CTP thµnh c«ng trªn thá bëi Walter Heap. ¤ng lµ ngêi s¸ng lËp ra c«ng nghÖ CTP
nghiÖm (theo Vlahov, 1987)
1932: CTP thµnh c«ng trªn dª - Warwick vµ Berry
1984: CÊy ph«i sau khi chia 2 thµnh c«ng trªn bß-William vµ cs
1933: CTP thµnh c«ng trªn chuét cèng - Nicholas
1987: Cã bª sinh ra do cÊy ghÐp gene t¨ng trëng nhanh (theo
1934: CTP thµnh c«ng trªn cõu - Warwick vµ Berry
Vlahov, 1987)
1951: Bª ®Çu tiªn trªn thÕ giíi ra ®êi b»ng CTP-Willet vµ cs
1992: B»ng kü thuËt Cloning tõ mét ph«i bß ®· cho ra 5 ph«i
1970: Thµnh c«ng trong viÖc b¶o qu¶n ph«i ®«ng l¹nh
(ViÖn INRA Ph¸p, 1992)
1972: CTP ph«i ®«ng l¹nh thµnh c«ng trªn bß-Bilton vµ More;
Mét con cõu ra ®êi vµ trëng thµnh tõ nh©n tÕ bµo tuyÕn vó cña
Wilmut vµ Rowson
mét cõu c¸i 6 n¨m tuæi t¹i Scotland-Ian Wilmut cµ cs
1978: Em bÐ ®Çu tiªn ra ®êi tõ TTON vµ CTP-Steptoe vµ
Edward
5
6
lÞch sö C¤NG NGHÖ CÊY TRUYÒN PH¤I Bß
C¸c tæ chøc ho¹t ®éng vÒ CTP trªn thÕ giíi
TT
D¹ng ho¹t ®éng
Sè lîng tæ chøc
1 Déi röa, thu ho¹ch ph«i vµ cÊy ph«i ngay ë c¬ quan
175
2 Déi röa thu ho¹ch ph«i ë tr¹i
338
3 CÊy ph«i ë c¸c tr¹i
241
4 CÊy ph«i theo ph¬ng ph¸p phÉu thuËt
157
5 CÊy ph«i theo ph¬ng ph¸p kh«ng phÉu thuËt
239
6 §«ng l¹nh ph«i
140
X¸c ®Þnh giíi tÝnh cña ph«i
7
11
8
Tæ chøc b¸n trang thiÕt bÞ vÒ ®«ng l¹nh ph«i
94
9
Tæ chøc b¸n ho¸ chÊt, hormon dïng g©y rông trøng
4
nhiÒu, g©y ®éng dôc ®ång pha
7
8
Sè liÖu cña Héi CTP thÕ giíi 12-1982 - Héi kü thuËt ch¨n nu«i NhËt B¶n - 1995
2
lÞch sö C¤NG NGHÖ CTP bß ë ViÖt Nam
Bª sinh ra tõ c«ng nghÖ cÊy truyÒn ph«i
1978: TT Khoa häc tù nhiªn vµ c«ng nghÖ quèc gia ®· cã
mét bé phËn b¾t ®Çu nghiªn cøu CTP thá
1980: nghiªn cøu CTP bß
1986: con bª ®Çu tiªn ë níc ta ra ®êi tõ CTP
1989: cÊy 50 ph«i ®«ng l¹nh (gióp ®ì cña 2 chuyªn gia
Cuba)
1994: bß sinh ®«i trong ®ã 1 bª do trøng rông tù nhiªn vµ 1
bª do CTP
1996,1997: 150 ph«i ®«ng l¹nh cÊy trªn bß miÒn Nam vµ Hµ Néi: nh÷ng bª sinh ra sinh trëng, ph¸t triÓn, sinh s¶n b×nh thêng, cho s÷a vưît toµn ®µn 20-30% 9
10
11
12
Bª sinh ®«i ra tõ mét ph«i c¾t ®«i Bª sinh ra tõ thô tinh trong èng nghiÖm (IVF)
3
IV. c¬ së cña c«ng nghÖ CTP
III. Nguyªn t¾c cña c«ng nghÖ CTP
4.1 Chu kú ®éng dôc
ThÓ vµng ho¹t ®éng 10-12 ngµy)
ThÓ vµng
ThÓ vµng
ph¸t triÓn
tho¸i ho¸
(4-5 ngµy)
(4-5 ngµy)
§éng ®ùc
(1 ngµy)
14
13
Chu kú ®éng dôc b×nh thưêng cña bß c¸i
4.3 Sóng nang và tính trội của nang:
4.2 Chu kú ®éng dôc - sÓng nang
Rụng trứng
Sóng nang 1
Rụng trứng
E2
Sóng nang 2
Trứng rụng từ chu kỳ trước
PGF2a FSH
LH
)
Rụng trứng
Dominance
m m
Atresia
í
Deviation
CL Progesterone
( g n a n a ủ c h n k g n ờ ư Đ
Recruitment
Endometrium
e n o m r o H ộ đ g n ồ N
PGF2a
Động dục
Ngày của chu kỳ
Động dục
16
15 Estrus
5
10
Estrus
15
4
2. Chän bß nhËn ph«i
1. Chän bß cho ph«i
3. G©y ®éng dôc hµng lo¹t
4. G©y rông trøng nhiÒu ë bß cho ph«i
5. Bß nhËn ph«i ®éng dôc
8. CÊy ph«i cho bß nhËn
6. Phèi gièng víi ®ùc gièng tèt
10. Bß nhËn ph«i cã chöa
7. Thu ho¹ch ph«i
17
9. Bß cho ph«i trë l¹i b×nh thưêng 18 chê chu kú sinh s¶n tiÕp theo
11. §µn con mang tiÒm n¨ng di truyÒn tèt cña bß cho ph«i
v. quy tr×nh cÊy truyÒn ph«i
5.1 chän bß cho ph«i
5.1 chän bß cho ph«i
Yªu cÇu cña bß cho ph«i:
+ N¨ng suÊt vÒ tÝnh tr¹ng mong muèn ®Æc biÖt cao, di truyÒn cho thÕ hÖ sau. u tiªn nh÷ng tÝnh tr¹ng cã hÖ sè di truyÒn cao vµ gi¸ trÞ thư¬ng phÈm lín.
+ Kh«ng m¾c bÊt cø mét khuyÕt tËt hoÆc bÖnh di truyÒn nµo.
+ Kh¶ n¨ng sinh s¶n tèt, qu¸ tr×nh sinh s¶n b×nh thưêng. Cæ tö cung dÔ dµng khi ®a dÉn tinh qu¶n, sóng cÊy ph«i vµ ®Æc biÖt lµ dông cô géi röa ph«i
20
- Bß c¸i n¨ng suÊt cao vÒ mét hoÆc vµi tÝnh tr¹ng mong muèn vµ c¸c tÝnh tr¹ng ®ã ph¶i ®îc di truyÒn cho thÕ hÖ sau 19
5
5.2 chän bß nhËn ph«i
5.1 chän bß cho ph«i
+ ThÓ tr¹ng, søc khoÎ tèt, vËt nhanh nhÑ, kh«ng hung d÷ vµ ®îc tiªm phßng tÊt c¶ c¸c bÖnh
+ Kh«ng qu¸ giµ (kh«ng nªn qu¸ 10 tuæi)
+ Chu kú ®éng dôc b×nh thêng, biÓu biÖn chu kú râ rµng.
22
21
+ Buång trøng ho¹t ®éng tèt.
- Bß c¸i nhËn ph«i kh«ng ®ãng gãp vÒ kiÓu di truyền cña con nhưng cã t¸c ®éng ®Õn kiÓu h×nh cña con non trong thêi gian mang thai vµ nu«i con
5.2 chän bß nhËn ph«i
5.2 chän bß nhËn ph«i
Yªu cÇu cña bß nhËn ph«i: Yªu cÇu vÒ ch¨m sãc, nu«i dìng bß nhËn ph«i
+ Ch¨m sãc, nu«i dưìng tèt. + Sinh trưëng vµ ph¸t triÓn b×nh thưêng, kh«ng khuyÕt tËt, thÓ tr¹ng tốt, kh«ng qu¸ gÇy vµ kh«ng qu¸ bÐo
+ Chñ ®éng theo dâi qu¸ tr×nh mang thai, can thiÖp nÕu cã sù cè x¶y ra nh s¶y thai, ®Î non, ®Î khã...
+ Chän bß t¬ hoÆc bß sinh s¶n kh«ng qu¸ giµ vµ hung d÷ truyÒn vµ bÖnh truyÒn nhiÔm + Kh«ng m¾c bÖnh di (Brucellois, Trichomoniasis..., ph¶i ®ưîc tiªm chñng ®Þnh kú c¸c bÖnh ®Çy ®ñ
Khi tiªm PGF2 (Prostaglandin F2), tØ lÖ ®éng dôc 80%, tØ lÖ ®éng dôc cã rông trøng 90%, tØ lÖ ®éng dôc ®ång pha (1ngµy) 70%
23
24
Sè bß cã kh¶ n¨ng cÊy: 20 x 0,8 x 0,9 x 0,7 = 10.08 (bß)
+ Tr¹ng th¸i sinh lý sinh s¶n b×nh thưêng + Sè lưîng bß nhËn ph«i gÊp ®«i sè ph«i cÇn cÊy(10 ph«i cÇn 20 bß nhËn ph«i)
6
GÂY SIÊU BÀI NOÃN
5.3 G©y ®éng dôc ®ång pha
G©y siªu bµi no·n lµ qu¸ tr×nh t¸c ®éng ®Ó mét lÇn ®éng dôc, buång trøng bß cã nhiÒu trøng ph¸t triÓn, chÝn vµ rông ®ång thêi. G©y ®éng dôc ®ång pha lµ qu¸ tr×nh kÝch thÝch cho c¸i nhËn ph«i ®éng dôc ®óng vµo thêi ®iÓm ®éng dôc cña c¸i cho ph«i
Môc ®Ých: thu ®ưîc nhiÒu ph«i
ph«i chÊt lưîng cao §ång pha gi÷a c¸i nhËn ph«i vµ c¸i cho ph«i cßn cã nghÜa tr¹ng th¸i sinh lý sinh dôc cña c¸i nhËn ph«i phï hîp víi tuæi ph«i
Hormone: PMSG (Pregnant Mare’s Serum Gonadotropin)
25
26
FSH (Follicle Stimulating Hormone) Môc ®Ých cña g©y ®éng dôc ®ång pha lµ t¹o ®ưîc nhiÒu bß nhËn cã thêi gian ®éng dôc ®ång thêi víi bß cho ph«i hoÆc phï hîp víi tuæi ph«i HMG (Human Menopausal Gonadotropin)
5.6 Phèi gièng cho bß cho ph«i
5.7 giéi röa thu ho¹ch ph«i bß
Thêi gian phèi gièng: Sau khi tiªm PGF2 42-48h (th- êng phèi 2 lÇn vµo chiÒu ngµy thø 5 vµ s¸ng ngµy thø 6 cña chu kú)
Gièng ®ùc ®ưîc phèi ph¶i cã nhiÒu ®Æc ®iÓm tèt, ®Æc trng cho gièng
27
28
Thu ho¹ch ph«i sau khi phèi gièng 6-9 ngµy, tèt nhÊt vµo ngµy thø 7-8.
7
dông cô lÊy ph«i (giéi röa ph«i)
Ph¬ng ph¸p giéi röa ph«i
Dông cô lÊy ph«i 2; 3 ®êng.
Lâi thÐp cho vµo catherter
1. PhÉu thuËt
Dung dÞch PBS
Thuèc g©y tª
C¸c lo¹i hormone
.........
29
30
2. Kh«ng phÉu thuËt
Ph¬ng ph¸p giéi röa ph«i
soi t×m ph«i
Thanh läc liªn tôc
1. PhÉu thuËt
Phư¬ng ph¸p l¾ng ®äng
Soi t×m ph«i
31
32
2. Kh«ng phÉu thuËt
8
33
34
CÊu taä ph«i C¸c giai ®o¹n ph¸t triÓn cña ph«i bß
C¸c giai ®o¹n ph¸t triÓn cña ph«i bß
35
36
C¸c giai ®o¹n ph¸t triÓn cña ph«i bß
9
Ph«i d©u [5-6ngµy]
Ph«i d©u - Ph«i nang
37
38
Ph«i nang tho¸t mµng
39
40
5.8 cÊy truyÒn ph«i cho bß nhËn
10
b¶o qu¶n ph«i - kü thuËt ®«ng l¹nh vµ gi¶i ®«ng ph«i
41
42
CÂU HỎI ÔN TẬP Vẽ sơ đồ và trình bày tóm tắt công nghệ cấy truyền phôi ở bò?
43