tên đề tài.txt
Nghiên cứu nhân nhanh chồi lan kim tuyển (Anoectochilus Setaceus) in Vitro phục
vụ công tác chuyển gen tạo rễ tóc
Giảng viên hướng dẫn: TS. Hà Thị Loan
SV: Nguyễn Thị Kim Ngân
Lớp: 13DSH01
MSSV: 1311101018
Page 1
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi và được sự hướng
dẫn khoa học của Tiến sĩ Hà Thị Loan. Các số liệu sử dụng phân tích trong đồ án có
nguồn gốc rõ ràng, đã công bố theo đúng quy định. Các nội dung nghiên cứu, kết quả
trong đề tài này là trung thực và chưa công bố dưới bất kỳ hình thức nào trước đây,
nếu phát hiện có bất kỳ gian lận nào tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm.
TP. Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 6 năm 2017
Sinh viên trường ĐH Công Nghệ TP.HCM
Nguyễn Thị Kim Ngân
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CẢM ƠN
Để hoàn thành bài luận văn này, em luôn nhận được sự giúp đỡ về nhiều mặt
của các cấp Lãnh đạo, các tập thể và cá nhân.
Trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô trường Đại học Công
Nghệ TP. Hồ Chí Minh, quý thầy cô trong khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm –
Môi trường đã dạy dỗ, truyền đạt cho em những kiến thức chuyên môn bổ ích trong
suốt bốn năm học vừa qua.
Em xin bày tỏ lòng biết ơn và sự tri ân sâu sắc đến Ban lãnh đạo Trung tâm
Công nghệ Sinh học TP. Hồ Chí Minh đã tạo điều kiện về kinh phí và trang thiết bị
để em thực hiện đề tài này. Đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến Tiến
sĩ Hà Thị Loan cùng với những Anh (Chị) cán bộ làm việc tại phòng Thực nghiệm
cây trồng đã tạo điều kiện thuận lợi cho em được học hỏi, tiếp cận những kiến thức
thực tế, tích lũy nhiều kinh nghiệm về thao tác trong phòng thí nghiệm. Đồng thời
các Anh (Chị) đã góp ý, bổ sung và chỉnh sửa những kiến thức thiếu sót để em có thể
hoàn thành tốt đề tài này.
Em cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến toàn thể bạn bè, người thân, gia đình
những người đã luôn bên cạnh em, cổ vũ tinh thần và đã ủng hộ em trong suốt thời
gian qua.
Em xin chân thành cảm ơn!
TP. Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 6 năm 2017
Sinh viên trường ĐH Công Nghệ TP.HCM
Nguyễn Thị Kim Ngân
Đồ án tốt nghiệp
i
MỤC LỤC
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .............................................................................. iv
DANH MỤC BẢNG .................................................................................................. v
DANH MỤC BIỂU ĐỒ ........................................................................................... vi
DANH MỤC HÌNH ................................................................................................ vii
LỜI MỞ ĐẦU ............................................................................................................ 1
CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN TÀI LIỆU ................................................................. 4
1.1. Giới thiệu về kĩ thuật nuôi cấy mô và tế bào thực vật ................................... 4
1.1.1. Sơ lược lịch sử nuôi cấy mô thực vật ......................................................... 4
1.1.2. Điều kiện và môi trường nuôi cấy mô tế bào thực vật .............................. 5
1.1.3. Các giai đoạn nuôi cấy mô thực vật ....................................................... 12
1.1.4. Ưu điểm và nhược điểm của phương pháp nuôi cấy mô thực vật ........... 13
1.2. Các phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật ........................................... 14
1.2.1. Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng ....................................................................... 14
1.2.2. Nuôi cấy mô sẹo ....................................................................................... 14
1.2.3. Nuôi cấy tế bào đơn ................................................................................. 15
1.2.4. Nuôi cấy tế bào trần ................................................................................ 15
1.2.5. Nuôi cấy hạt phấn .................................................................................... 16
1.2.6. Nuôi cấy protoplast .................................................................................. 16
1.3. Chuyển gen tạo rễ tóc nhờ vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes ................ 16
1.3.1. Đặc điểm và cơ chế xâm nhiễm của vi khuẩn Agrobacterium vào tế bào
chủ ...................................................................................................................... 16
1.3.2. Vai trò, chức năng của oncogen rol (root inducing locus) ..................... 19
Đồ án tốt nghiệp
ii
1.3.3. Tình hình nghiên cứu rễ tóc trên một số loài dược liệu và cây trồng ..... 21
1.4. Tổng quan về cây lan kim tuyến .................................................................. 22
1.4.1. Nguồn gốc và phân bố ............................................................................. 22
1.4.2. Phân loại. ................................................................................................. 23
1.4.3. Đặc điểm hình thái ................................................................................... 23
1.4.4. Điều kiện sinh sống của lan kim tuyến .................................................... 25
1.4.5. Giá trị dược liệu của lan kim tuyến ......................................................... 25
1.4.6. Nhân giống cây lan kim tuyến ................................................................. 26
1.4.7. Tình hình nghiên cứu cây lan kim tuyến .................................................. 27
CHƯƠNG 2. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ...................... 29
2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu ................................................................ 29
2.2. Vật liệu nghiên cứu ...................................................................................... 29
2.2.1. Đối tượng nghiên cứu .............................................................................. 29
2.2.2. Trang thiết bị, dụng cụ và hóa chất ......................................................... 29
2.2.3. Môi trường nuôi cấy ................................................................................ 31
2.2.4. Điều kiện nuôi cấy ................................................................................... 31
2.3. Phương pháp ................................................................................................... 31
2.3.1. Pha môi trường ..................................................................................... 31
2.3.2. Các thao tác trong phòng cấy ................................................................. 32
2.4. Nội dung nghiên cứu ..................................................................................... 33
2.5. Bố trí thí nghiệm .......................................................................................... 33
2.5.1. Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng của NAA và BA đến vị trí mẫu cấy chồi
lan kim tuyến ...................................................................................................... 33