BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƢỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN LACTOBACILLUS sp.
TỪ THỰC VẬT Ủ CHUA CÓ TIỀM NĂNG
SẢN XUẤT PROBIOTIC
Ngành: Công nghệ SH-TP-MT
Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
Giảng viên hƣớng dẫn : TS. Hoàng Quốc Khánh
Sinh viên thực hiện : Trần Quang Huy
MSSV: 1311101070 Lớp: 13DSH05
TP. Hồ Chí Minh, 2017
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu khoa học của tôi. Các số liệu, kết
quả nêu trong đồ án này đều trung thực và bắt nguồn từ thực tiễn nghiên cứu. Các
tài liệu tham khảo đều có nguồn gốc xác thực.
Ngƣời thực hiện
Trần Quang Huy
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CẢM ƠN
Lời đầu tiên em xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến TS. Hoàng Quốc Khánh,
ngƣời đã tận tình hƣớng dẫn,chia sẻ những khó khăn và chỉnh sửa đồ án cho em
trong thời gian em thực hiện đồ án tại viện sinh học nhiệt đới TP Hồ Chí Minh.
Xin gửi lời cảm ơn đến TS. Nguyễn Hoài Hƣơng, ngƣời đã động viên và giúp em
có thêm động lực để hoàn thành đồ án này.
Xin cảm ơn thầy Ngô Đức Duy, đã nhiệt tình hƣớng dẫn và giúp đỡ em trong quá
trình định danh bằng sinh học phân tử.
Xin cảm ơn các anh, chị và các đồng nghiệp tại viện sinh học nhiệt đới đã giúp đỡ
tôi trong quá trình thực hiện đồ án.
Xin cảm ơn viện sinh học nhiệt đới TP Hồ Chí Minh, đã tạo mọi điều kiện thuận
lợi cho em thực hiện các thí nghiệm để hoàn thành đồ án này.
Xin cảm ơn trƣờng ĐH Công nghệ TP Hồ Chí Minh nói chung và các thầy cô
trong khoa Công Nghệ Sinh Học- Thực Phẩm và Môi Trƣờng nói riêng đã tận tình
dạy dỗ, cung cấp các kiến thức vững vàng cho em trong bốn năm học tập tại trƣờng.
Cuối cùng xin cảm ơn ba mẹ đã sinh ra con và cho con điều kiện để học tập để trở
thành ngƣời nhƣ hôm nay.
Xin chân thành cảm ơn!
Ngƣời thực hiện
Trần Quang Huy
Đồ án tốt nghiệp
I
MỤC LỤC
Phiếu giao đề tài ĐATN.
Lời cam đoan.
Lời cảm ơn.
Mục lục.
Danh mục các từ viết tắt.
Danh mục các bảng.
Danh mục biểu đồ, đồ thị, sơ đồ, hình ảnh.
MỞ ĐẦU ................................................................................................................ 1
CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ..................................................................... 3
1.1 Tổng quan về rau quả lên men .......................................................................... 3
1.2 Tổng quan về probiotic ..................................................................................... 4
1.3 Lịch sử nghiên cứu về probiotic ........................................................................ 7
1.4 Các vi sinh vật probiotic thƣờng gặp ................................................................ 9
1.4.1 Chi Lactibacillus ........................................................................................ 9
1.4.2 Chi Bifidobacterium ................................................................................. 10
1.4.3 Chi Sacharomyces .................................................................................... 10
1.4.4 Chi Bacillus .............................................................................................. 11
1.5 Hƣớng dẫn lựa chọn các chủng probiotic ....................................................... 13
1.5.1 Chi, loài và chủng probiotic ..................................................................... 14
1.5.2 Các thử nghiệm invitro để sàng lọc chủng có tiềm năng probiotic ......... 14
Đồ án tốt nghiệp
II
1.5.3 Nguồn phân lập probiotic ......................................................................... 15
1.5.4 Probiotic an toàn ...................................................................................... 15
1.6 Vi khuẩn lactic ................................................................................................ 17
1.6.1 Tổng quan về vi khuẩn lactic ................................................................... 17
1.6.2 Đặc điểm hình thái, sinh lý, phân loại...................................................... 17
1.6.3 Chi Lactobacillus ..................................................................................... 18
1.6.4 Quá trình lên men lactic ........................................................................... 22
CHƢƠNG 2.VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................. 24
2.1 Vật liệu ............................................................................................................ 24
2.1.1 Nguyên liệu .............................................................................................. 24
2.1.2 Hóa chất ................................................................................................... 24
2.1.3 Thiết bị và dụng cụ ................................................................................... 24
2.1.4 Môi trƣờng nuôi cấy ................................................................................. 25
2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu ................................................................................. 27
2.2.1 Phƣơng pháp phân lập và tuyển chọn ...................................................... 27
2.2.2 Phƣơng pháp quan sát hình thái khuẩn lạc ............................................... 27
2.2.3 Phƣơng pháp xác định khả năng sinh acid lactic ..................................... 27
2.2.4 Phƣơng pháp nhuộm Gram ...................................................................... 27
2.2.5 Phƣơng pháp khảo sát khả năng di động ................................................. 28
2.2.6 Phƣơng pháp xác định kiểu hô hấp .......................................................... 28
2.2.7 Phƣơng pháp thử nghiệm hoạt tính catalase ............................................ 29
2.2.8 Phƣơng pháp xác định hoạt tính protease ................................................ 29