BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
THIẾT LẬP MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG VÀ ĐIỀU
KIỆN NUÔI CẤY SẢN XUẤT SINH KHỐI VI KHUẨN
SERRATIA MARCESCENS SH1
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : Ts. Nguyễn Hoài Hương
Sinh viên thực hiện : Nguyễn Thị Tâm
MSSV: 1051110142 Lớp: 10DSH01
TP. Hồ Chí Minh, 2014
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Em xin cam đoan cuốn đồ án này là kết quả nghiên cứu của em, được tiến hành tại
phòng thí nghiệm Công Nghệ Sinh Học thuộc khoa Công nghệ Sinh học - Thực
phẩm - Môi trường, Đại học Công Nghệ Thành phố Hồ Chí Minh. Các kết quả, số
liệu trong đồ án là hoàn toàn trung thực, chưa từng có ai công bố.
Tp. Hồ Chí Minh, tháng 7 năm 2014
Sinh viên thực hiện
Nguyễn Thị Tâm
Đồ án tốt nghiệp
Để có thể hoàn thành luận văn tốt nghiệp này em xin gửi lời cảm ơn chân thành
đến các quý Thầy cô Trường Đại Học Công Nghệ TpHCM, đặc biệt là các Thầy cô
trong Khoa Môi trường và Công nghệ sinh học đã tận tình dạy bảo cho em bao
năm qua, trang bị cho em những kiến thức quý giá và tạo dựng cho em nhiều kinh
nghiệm trong suốt quá trình học tập.
Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Nguyễn Hoài Hương, Cô đã luôn bên cạnh
giúp đỡ chỉ bảo, hướng dẫn cho em trong suốt quá trình triển khai nghiên cứu và
hoàn thành đề tài tốt nghiệp này.
Em xin gửi lời cảm ơn đến các Thầy trong phòng thí nghiệm đã tạo điều kiện và
cung cấp hóa chất để em có thể thực hiện được các thí nghiệm.
Và cuối cùng em muốn gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè và những người thân
đã luôn ở bên em động viên, ủng hộ em trong suốt thời gian học tập nghiên cứu
vừa qua.
Kiến thức còn nhiều hạn chế, chắc chắn sẽ không tránh khỏi những sai sót, em rất
mong được sự thông cảm và góp ý chân thành của thầy cô và các bạn.
Xin chân thành cảm ơn!
Tp. Hồ Chí Minh, tháng 7 năm 2014
Sinh viên thực hiện
Nguyễn Thị Tâm
Đồ án tốt nghiệp
i
MỤC LỤC
DANH MỤC CÁC BẢNG ............................................................................................ v
DANH MỤC CÁC HÌNH ............................................................................................. vi
CHƢƠNG 1: MỞ ĐẦU
1.1. Đặt vấn đề .................................................................................................... 1
1.2. Mục đích của để tài ...................................................................................... 3
1.3. Mục tiêu, nhiệm vụ của đề tài ...................................................................... 3
1.4. Nội dung của đề tài ....................................................................................... 3
1.5. Phƣơng pháp xử lí số liệu ............................................................................. 3
1.6. Các kết quả đạt đƣợc của đề tài .................................................................... 3
CHƢƠNG 2: TỔNG QUAN
2.1. Giới thiệu về thuốc bảo vệ thực vật sinh học ............................................... 5
2.1.1. Khái niệm và phân loại ....................................................................... 5
2.1.2. Ứng dụng của tuyến trùng trong diệt sâu............................................ 6
2.1.3. Ứng dụng của vi khuẩn trong diệt sâu ................................................ 7
2.2. Mối quan hệ giữa vi khuẩn và tuyến trùng EPN .......................................... 9
2.2.1. Vai trò của vi khuẩn cộng sinh trong tổ hợp tuyến trùng và vi khuẩn
............................................................................................................. 10
2.2.2. Vi khuẩn cộng sinh tạo ra các độc tố diệt côn trùng ........................... 11
2.3. Giới thiệu về Serratia marcescens ............................................................... 12
2.3.1. Lịch sử phát hiện Serratia marcescens ............................................... 12
2.3.2. Phân loại Serratia marcescens ............................................................ 13
2.3.3. Đặc điểm sinh lí .................................................................................. 13
2.3.4. Đặc điểm sinh hóa............................................................................... 14
2.3.5. Đặc điểm phân bố ............................................................................... 17
2.3.6. Tình hình nghiên cứu Serratia marcescens ........................................ 19
2.4. Một số hợp chất đƣợc tổng hợp bởi Serratia marcescens ............................ 20
2.4.1. Sắc tố .................................................................................................... 20
2.4.2. Enzyme ................................................................................................ 21
2.4.3. Biosurfactants ...................................................................................... 22
2.5. Khả năng diệt sâu của Serratia marcescens ................................................ 23
2.6. Các yếu tố ảnh hƣởng đến quá trình lên men thu sinh khối ......................... 25
2.6.1. Quá trình lên men .............................................................................. 25
2.6.2. Ảnh hƣởng của môi trƣờng và điều kiện lên men ............................ 27
Đồ án tốt nghiệp
ii
2.6.2.1. Ảnh hƣởng của môi trƣờng dinh dƣỡng .................................. 29
2.6.2.2. Ảnh hƣởng của điều kiện lên men ........................................... 30
CHƢƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHÊN CỨU
3.1. Địa điểm và thời gian nghiên cứu ................................................................ 32
3.2. Vật liệu – môi trƣờng – thiết bị sử dụng nghiên cứu ................................... 32
3.2.1. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................. 32
3.2.2. Môi trƣờng ........................................................................................... 32
3.2.3. Hóa chất................................................................................................ 32
3.2.4. Dụng cụ ................................................................................................ 33
3.2.5. Thiết bị ................................................................................................. 33
3.3. Phƣơng pháp luận ......................................................................................... 34
3.4. Bố trí thí nghiệm ........................................................................................... 34
3.5. Phƣơng pháp khảo sát các đặc điểm sinh lý, sinh hóa định danh chủng
SH1 ............................................................................................................... 38
3.5.1. Phƣơng pháp quan sát hình thái sinh lý .............................................. 38
3.5.2. Thử nghiệm sinh hóa và định danh chủng SH1 bằng bộ Kit API 20E
.............................................................................................................. 39
3.5.3. Thử nghiệm hoạt tính enzyme .............................................................. 42
3.6. Phƣơng pháp khảo sát môi trƣờng nuôi cấy chủng Serratia marcescens
SH1 ............................................................................................................... 42
3.6.1. Xây dựng đƣờng cong tăng trƣởng trên môi trƣờng cơ bản Nutrient
broth ..................................................................................................... 43
3.6.2. Xác định nguồn Nitơ tốt nhất cho sự phát triển của Serratia
marcescen SH1
.............................................................................................................. 44
3.6.3. Xác định nguồn Cacbon tốt nhất sự phát triển của Serratia
marcescens SH1
............................................................................................................... 45
3.7. Phƣơng pháp khảo sát điều kiện nuôi cấy S. marcescens SH1 ................... 46
3.7.1. Khảo sát ảnh hƣởng của pH lên sự phát triển của S. marcescensSH1
....................................................................................................... 47
3.7.2. Khảo sát ảnh hƣởng của điều kiện oxy lên sự phát triển của S.
marcescens SH1 .................................................................................. 47
3.7.3. Khảo sát ảnh hƣởng của mật độ cấy giống lên sự phát triển của S.
marcescens SH1 .................................................................................. 47