GV: Nguyễn Thị Ngọc Yến
PL
Quan sát đặc điểm đại thể (khuẩn lạc)
Quan sát đặc điểm vi thể (vi khuẩn)
Khảo sát tính chất sinh hóa
Lactose (-) Glucose (+) MR (+)
Định danh SHPT
Phân lập mẫu VK lên các MT khác nhau để quan sát
hình thái khuẩn lạc:
MT cơ bản: NA, NB
MT phong phú: thạch máu, pepton
MT phân biệt: TCBS, MC
MT chọn lọc: SS, BSA
Nhuộm màu và quan sát đặc điểm vk dưới KHV
• Hình dạng
• Màu sắc
• Cách sắp xếp
Dùng khảo sát đặc tính enzym của vk định danh đến
mức chi hoặc loài
• Sử dụng carbohydrat
• Sử dụng nitơ
• Nguồn dinh dưỡng khác
TT metyl red
Carbohydrat
MR
HH acid
Đỏ
O2 (Hô hấp) CO2 + H2O
O2(Lên men)
Vàng
n o b r a c n ồ u g N
TT xanh bromothymol
VP HH acetoin đỏ • Lactose • Glucose • Mannitol TT phenol red KOH 40% Vòng α-napthol 5%
Citrat Xanh dương NH3
Tryptophan
Tryptophanase TT Kovac’s Nhân indol Lớp đỏ
Urea
Màu hồng tím
NH3+CO2
ơ t i n n ồ u g N
Urease TT phenolphtalein
• Cystein • Methionin
Desulfohydrase TT Fe2+ Tủa đen (FeS) Aa chứa S H2S
Catalase Sủi bọt khí H2O2 H2O+1/2O2 VK có enzym catalase
-20 giọt KOH 40%. Chờ 2ph -15 giọt α-naphtol 5% CHẢY DỌC ỐNG NGHIỆM Đọc KQ sau 5-15ph
15 giọt TT metyl red
PƯ MR
PƯ VP
Môi trường MR-VP thành phần giống nhau chứa 7g peptone và 5g glucose
PƯ VP
PƯ MR
PƯ indol
PƯ ure
PƯ citrat
TH1: Glu,lac (-)
TH2: Glu(+),lac (-)
TH3: Glu,lac (+)
Mẫu phân ko gạo: có Sal/Shitrong mẫu ko?
Mẫu phân có gạo: có V.choleraetrong mẫu?
Mẫu bệnh phẩm
NGÀY 1
Phân lập lên hệ MT
Quan sát đđ đại thể
NGÀY 2
Quan sát đặc điểm vi thể
NGÀY 3
Khảo sát sinh hóa
Mẫu phân ko gạo: có Sal/Shitrong mẫu ko?
Quan sát khuẩn lạc: NA, MC, SS, BSA
Nhuộm gram: quan sát hình thái vk
Đọc PƯ sinh hóa
Kết luận
Mẫu phân có gạo: có V.choleraetrong mẫu?
Quan sát MT TCBS, pepton kiềm
Nhuộm gram: quan sát phẩy khuẩn/ pepton
Kết luận
NA
Không khóm
Có khóm
Nhuộm Gram trên MT nào?
MC
Không vk
Màu đỏ
Không màu
SS
VK ko gây bệnh
Màu hồng, #
Không màu
BSA
Ko Sal+Shi
Màu rêu
Đen ánh kim
Shigella
Salmonella
Nhuộm Gram trên MT nào?
TCBS
Màu rêu, ko khóm
Khóm vàng
Pepton kiềm
Ko Vibrio
Không váng
Váng bề mặt
Ko Vibrio
V.cholerae
