BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
KHẢO SÁT HỆ ENZYME CELLULASE THU NHẬN TỪ
CỘNG ĐỒNG VI KHUẨN TRONG DẠ CỎ BÒ ĐỂ PHÂN
GIẢI RƠM QUA XỬ LÝ
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn: TS. HOÀNG QUỐC KHÁNH
CN.NGÔ ĐỨC DUY
Sinh viên thực hiện: LƯU THÁI HÒA
MSSV: 1051110075 Lớp: 10DSH02
TP. Hồ Chí Minh, 2014
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đ án tt nghip này là kết qu nghiên cu của riêng tôi dưới s
ng dn ca TS. Hoàng Quốc Khánh CN. Ngô Đc Duy, không sao chép ca
ai. Ni dung luận văn tham khảo s dng các tài liệu, thông tin được đăng tải
trên các tác phm, tp chí các trang web theo danh mc tài liu của đồ án. Nếu
sai tôi xin chu hoàn toàn trách nhim và mi k lut ca khoa và nhà trường đề ra.
Sinh viên thc hin
Lưu Thái Hòa
LI CẢM ƠN
Trong thời gian làm đồ án tt nghip Vin Sinh Hc Nhiệt Đới Th Đc,
đưc s ng dn tn tình ca các Thy Cô, các anh ch các bạn, em đã hoàn
thành tt bài báo cáo này. Em xin cm ơn chân thành đến:
Thy TS. Hoàng Quốc Khánh, trưởng phòng Vi Sinh ng dng, Vin Sinh
Hc Nhiệt Đới, Vin Khoa Hc và Công Ngh Vit Nam, Thy đã tạo điều kin cho
em được làm đồ án tt nghip tại đây, nhiệt tình ng dn h tr để em thc
hin tốt đồ án tt nghip.
Thy Ngô Đức Duy phòng Vi Sinh ng dng, Vin Sinh Hc Nhiệt Đới,
Vin Khoa Hc Công Ngh Việt Nam đã tận tình ch bảo giúp đ em trong
sut thi gian thc hiện đồ án tt nghip này.
Ban giám hiu Trường Đại Hc Công Ngh TP.HCM và toàn th các Thy
khoa Công Ngh Sinh Hc Thc Phm Môi Trường những người đã tận
tình dy d, đã tạo điều kiện để chúng em hc tp tốt, đã tn tình giúp đ, quan tâm
đến vic hc tp ca chúng em trong suốt 4 năm qua.
Các anh ch trong phòng Th Nghim Vi Sinh ca Vin Sinh Hc Nhiệt Đới,
Vin Khoa Hc và Công Ngh Vit Nam đã cung cp cho em nhng s liu mà em
cn, khi em làm v qui trình thc nghim.
Tt c các bn trong lớp 10DSH02 thân yêu đã an ủi động viên tôi hoàn
thành tt bài khóa lun này, cũng như nhng bạn đã quan tâm, giúp đ chia s
mi th vi tôi trong sut thi sinh viên.
Và con xin cám ơn Bố M, ch hai, em gái, những người thân đã luôn động
viên con, giúp con có ngh lực để con có th hoàn thành đồ án tt nghip.
i
MC LC
MC LC ................................................................................................................... i
DANH MC CÁC T VIT TT ......................................................................... iv
DANH MC CÁC BNG ........................................................................................ v
DANH MC BIỂU ĐỒ ............................................................................................. v
DANH MỤC SƠ ĐỒ ................................................................................................ vi
DANH MC HÌNH NH ........................................................................................ vi
LI M ĐẦU ............................................................................................................ 1
1.Tính cp thiết của đề tài ......................................................................................... 1
2.Tình hình nghiên cu ............................................................................................. 1
3.Mc đích nghiên cứu ............................................................................................. 2
4.Nhim v nghiên cu ............................................................................................. 2
5.Phương pháp nghiên cu ....................................................................................... 3
6.Các kết qu đạt được của đ tài ............................................................................. 3
7.Kết cu của đồ án tt nghip .................................................................................. 3
CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN ..................................................................................... 4
1.1. Gii thiu v cộng đồng vi khun trong d c ............................................. 4
1.1.1. H vi sinh vt trong d c ...................................................................... 4
1.1.2.Vi khun phân gii cellulose d c ...................................................... 8
1.1.3. Điều kin vt lý trong d c ................................................................... 9
1.2. Gii thiu v h enzym cellulase ..................................................................... 10
1.2.1. Định nghĩa ................................................................................................ 10
1.2.2. Phân loi ................................................................................................... 10
1.2.3. Cu to ca cellulase ................................................................................ 11
1.2.4. Tính cht .................................................................................................... 11
1.2.5. Các cht c chế ......................................................................................... 12
ii
1.2.6. Cellulosome ............................................................................................... 12
1.3. Phân giải rơm qua xử ................................................................................... 13
1.3.1. Thành phn của rơm ................................................................................. 13
1.3.2. Cu trúc của rơm trong tự nhiên .............................................................. 14
1.3.3. Các phương pháp tiền x lý rơm r .......................................................... 15
1.3.4. Con đường phân giải rơm ......................................................................... 17
1.4. Hin trng s dụng rơm rạ ti Việt Nam và các nước trên thế gii ................ 18
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ...................... 20
2.1. Nguyên vt liu ................................................................................................ 20
2.2. Thiết b, hóa cht.............................................................................................. 21
2.2.1. Thiết b ....................................................................................................... 21
2.2.2. Hóa cht .................................................................................................... 21
2.3. Phương pháp nghiên cu ................................................................................. 24
2.3.1. Quy trình tăng sinh chọn lc. .................................................................... 25
2.3.2. Quy trình tăng sinh khảo sát nhiệt độ phát trin ca h vi sinh vt......... 26
2.3.3. Quy trình tăng sinh khảo sát pH phát trin ca h vi sinh vt ................. 27
2.4. Xác định hàm lượng, hot tính ca enzyme cellulase ..................................... 28
2.4.1. Quy trình phát hin sinh tng hp enzyme endoglucanase trên thch đĩa
CMC ..................................................................................................................... 28
2.4.2. Định ng hm lượng protein tng trong dch nuôi cấy theo phương
pháp Bradford ...................................................................................................... 28
2.4.3. Định lượng hot tính cellulase tng s theo phương pháp Filter Paper . 30
2.5. Kho sát nhiệt độ, pH thích hp ca h enzyme cellulase .............................. 31
2.5.1. Ảnh hưởng ca pH lên hot tính cellulase ................................................ 32