ViÖn Dinh D−ìng
Trung t©m kiÓm nghiÖm vsATTP
*****************
B¸o c¸o kÕt qu¶ nghiªn cøu
ChuÈn hãa ph−¬ng ph¸p x¸c ®Þnh hµm
l−îng vitamin D (D2 vµ D3) trong thùc
phÈm b»ng ph−¬ng ph¸p s¾c ký láng
hiÖu n¨ng cao (HPLC)
Chñ nhiÖm ®Ò tµi : Ks. §oµn ThÞ H−êng
6544
20/9/2007
Hµ néi, 2007
ViÖn Dinh D−ìng
Trung t©m kiÓm nghiÖm vsATTP
*****************
B¸o c¸o kÕt qu¶ nghiªn cøu
ChuÈn hãa ph−¬ng ph¸p x¸c ®Þnh hµm
l−îng vitamin D (D2 vµ D3) trong thùc
phÈm b»ng ph−¬ng ph¸p s¾c ký láng
hiÖu n¨ng cao (HPLC)
Chñ nhiÖm ®Ò tµi: Ks. §oµn ThÞ H−êng
C¸c c¸n bé tham gia: C n. NguyÔn Thu H»ng
C¬ quan chñ tr×: Trung t©m kiÓm nghiÖm VSATTP
C¬ quan chñ qu¶n: ViÖn dinh d−ìng
Kinh phÝ: 20 triÖu ®ång (Nguån NNS)
Hµ n«i, 2007
Môc lôc
TT Néi dung Trang
1 Danh môc c¸c ch÷ viÕt t¾t
2 Danh môc c¸c b¶ng
3 Danh môc c¸c h×nh
4 PhÇn 1: Më ®Çu 1
5 PhÇn 2: Tæng quan 3
6 PhÇn 3: Môc tiªu, ®èi t−îng vµ ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu 8
1. Môc tiªu 8
2. §èi t−îng 8
3. Néi dung vµ ph−¬ng ph¸p nghiªn cøu 8
4. Kü thuËt ph©n tÝch s¾c ký láng hiÖu n¨ng cao ¸p 9
5. C¸c ph−¬ng ph¸p ®Þnh l−îng b»ng HPLC 11
6. Quy tr×nh ph©n tÝch thö nghiÖm 13
7 PhÇn 4: KÕt qu¶ nghiªn cøu 17
1. Kh¶o s¸t ®iÒu kiÖn ch¹y s¾c ký 17
2. X¸c ®Þnh LOD 28
3. X¸c ®Þnh LOQ 28
4. X¸c ®Þnh kho¶ng tuyÕn tÝnh 29
5. X¸c ®Þnh ®é lÖch chuÈn vµ hÖ sè biÕn thiªn 32
6. X¸c ®Þnh ®é thu håi 35
7. Mét sè s¾c ®å ch¹y s¾c ký cña mÉu ph©n tÝch 37
8 PhÇn 5: NhËn xÐt vµ bµn luËn kÕt qu¶ 39
9 PhÇn 6: Quy tr×nh ph©n tÝch x¸c ®Þnh hµm l−îng vitamin D
trong thùc phÈm b»ng ph−¬ng ph¸p HPLC
41
10 PhÇn 7: Tµi liÖu tham kh¶o 45
11 PhÇn phô lôc: C¸c s¾c ®å cña dung dÞch chuÈn vitamin D2
vµ D3 x©y dùng kho¶ng tuyÕn tÝnh
c¸c ch÷ viÕt t¾t
TT C¸c ch÷ viÕt t¾t
NghÜa tiÕng ViÖt
1 HPLC S¾c ký láng hiÖu n¨ng cao
2 DAD Detector m¶ng di«t
3 UV-VIS Quang phæ tö ngo¹i - kh¶ kiÕn
4 RDA Nhu cÇu ¨n khuyÕn c¸o
5 TCVN Tiªu chuÈn ViÖt nam
6 AOAC HiÖp héi ph©n tÝch ho¸ häc
7 LOD Giíi h¹n ph¸t hiÖn
8 LOQ Giíi h¹n ®Þnh l−îng
9 SD §é lÖch chuÈn
10 Cv HÖ sè biÕn thiªn
11 MeOH Methanol
12 THF Tetra hydrofuran
13 ACN Acetonitril
14 SPE Cét chiÕt pha r¾n
15 TBHQ Tert butyl hydroquinol
Danh môc c¸c b¶ng
TT Néi dung b¶ng
B¶ng 1 Thêi gian l−u cña vitamin D2 vµ D3 ®èi víi ®iÒu kiÖn ch¹y cét
Waters RP- 18, detector DAD, b−íc sãng 265nm, pha ®éng
MeOH: H2O = 98: 2, tèc ®é dßng 1ml/phót
B¶ng 2 Thêi gian l−u cña vitamin D2 ch¹y cét Inertsil ODS 3 vµ cét
Waters RP18, detector DAD b−íc sãng 265nm, pha ®éng ACN :
MeOH =75:25, tèc ®é dßng 1ml/phót.
B¶ng 3 NhËn xÐt c¸c s¾c ®å cña hai chÊt chuÈn ®èi víi cét Inertsil ODS 3
detector DAD b−íc sãng 265nm, Pha ®éng ACN : H2O =75:25,
tèc ®é dßng 1ml/phót
B¶ng 4 NhËn xÐt kÕt qu¶ ch¹y s¾c ký hai chuÈn trªn cét Inertsil ODS 3
pha ®éng ACN : MeOH = 50: 50, detector DAD b−íc sãng
265nm, tèc ®é dßng 1ml/phót.
B¶ng 5 Thêi gian l−u cña hai chÊt chuÈn t−¬ng øng víi pha ®éng kh¸c
nhau tèc ®é 1ml/ phót, cét Inertsil ODS 3, detector DAD 265nm
B¶ng 6 Thêi gian l−u cña hai chÊt øng víi tèc ®é dßng kh¸c nhau trªn hÖ
pha ®éng MeOH: THF: H2O = 93:2:5, detector DAD 265nm,
cét Inertsil ODS 3
B¶ng 7 Tæng kÕt ®iÒu kiÖn ch¹y HPLC ph©n tÝch vitamin D
B¶ng 8 T−¬ng quan gi÷a diÖn tÝch pic vµ nång ®é chuÈn cña vitamin D2
B¶ng 9 T−¬ng quan gi÷a diÖn tÝch vµ nång ®é chuÈn vitamin D3
B¶ng 10 X¸c ®Þnh hµm l−îng vitamin D2 mÉu s÷a bét XO
B¶ng 11 X¸c ®Þnh hµm l−îng vitamin D3 trong s÷a Sunny grow baby
B¶ng 12 X¸c ®Þnh hµm l−îng vitamin D trong s÷a chua nestlÐ cã ®−êng