Bài 7. Chi t rút s c t t lá và xác đ nh tính c m quang c aế
clorophin
I. M C TIÊU
1. Quan sát đ c h n h p s c t rút ra t lá:ượ
Nhóm chlorophin màu xanh l c, nhóm carotenoit màu vàng.
Trong h n h p s c t , màu l c c a chlorophin l n át màu vàng c a
carotenoit, chlorophin chi m t l cao v hàm l ng. Do đó h n h pế ượ
s c t này có màu xanh l c.
2. C ng c ki n th c đã h c v s c t quang h p các bài ế
thuy tế
3. Rèn năng thao tác v i các d ng c hoá ch t trong phòng t
nghi m, đ c bi tkĩ năng tách chi t h n h p dung d ch màukĩ năng ế
ti n hành các ph n ng hóa h c, cũng nh kĩ năng quan sát, nh n xét k tế ư ế
qu thí nghi m trong ng nghi m.
II. C S KHOA H CƠ
1. Do nhân Mg trong vòng pyron mang tính tan trong n c k tướ ế
h p v i protein màng, trong khi đó đuôi dài cacbon c a g c r u phytol ượ
l i mang tính k n c h ng t i c u trúc lipit c a màng tilacoit, nên ướ ướ
phân t clorophin ch y u hoà tan trong dung môi h u c . Tuy nhiên đ ế ơ
tách t t clorophin ra kh i lá, ng i ta không dùng ête petrol hay benzen, ườ
dùng c n hay axeton pha v i m t ít n c đ tách đ c h t phân t ướ ượ ế
clorophin t lá. Các s c t c a nhóm carotenoit cũng đ c tách chi t ượ ế
theo ph ng pháp này.ươ
2. Clorophin tách r i kh i ph c h s c t v n kh năng ho t
đ ng quang hoá, t c v n kh năng b kích thích b i ánh sáng khi
đó th làm đ c vai trò chuy n H+ e trung gian. Hi n t ng này ượ ượ
g i nh ch t c m quang c a clorophin. Trong bài th c hành này, d ch
s c t rút t lá đ c dùng làm ch t truy n đi n t trung gian trong ph n ượ
ng oxi hoá kh . D i tác d ng c a ánh sáng các phân t clorophin s ướ
chuy n proton đi n t t ch t kh m nh (axit ascorbic) đ n ch t oxi ế
hoá m nh methyl) làm đ methyl m t màu (đ methyl tr ng thái
oxi h màu đ , khi tr ng thái b kh thì m t màu). Ph n ng oxi
hóa kh đã x y ra. Trong khi đó, vì cách xa nhau v th oxi hóa kh , axit ế
ascorbic không th chuy n e - tr c ti p cho methyl đ ph n ng oxi ế
hóa kh không x y ra.
III. THI T B – HÓA CH T- M U V T
-Lá (lá khoai lang ho c lá dâu, lá s n dây, ...) t i ươ
-Đũa thu tinh
-C n etilic ho c axeton 80%
-Giá ng nghi m và các ng nghi m
-Ph u l c
-Pipet lo i thông th ng, c 10ml ườ
-Kéo
-Gi y l c
-C i chày s
-D ch chi t s c t ế
-Các ng nghi m
-Axit ascorbic d ng tinh th (n u không mua đ c thì thay b ng ế ượ
vitamin C nghi n nh )
-Dung d ch đ methyl 0,04 % trong c n
-Đèn chi u sángế
-Gi y đen đ b c ng nghi m (gi y nhôm)
IV. TI N HÀNH THÍ NGHI M
A. B c 1. Chi t rút s c t t ướ ế
t i (kho ng 2-3 gam) c t nh cho vào c i s (v t b ph nươ
gân lá). Nghi n các m u cùng v i m t ít dung môi (c n ho c axeton
80% đã chu n b ) đ n nhuy n (thành m t th đ ng nh t). Thêm dung ế
môi, r a chày s , dùng đũa thu tinh đ dung d ch vào ng nghi m qua
ph u l c.
Dung d ch s c t thu đ c s đ c dùng đ xác đ nh tính c m ượ ượ
quang c a clorophin.
B. B c 2. Xác đ nh tính c m quang c a clorophinướ
Cho vào ng nghi m 1 2 m t l ng d ch s c t nh nhau (2 ượ ư
ml). Thêm vào m i ng nghi m m t ít tinh th axit ascorbic cho t i bão
hoà (khi th y còn m t ít tinh th không tan đ c n a, l ng xu ng đáy ượ
ng nghi m). Ti p t c thêm vào m i ng nghi m 1 ml dung d ch đ ế
methyl. L c m nh h n h p đ t m t ng nghi m ra ánh sáng, m t
ng nghi m trong t i ( ho c b c ng nghi m b ng gi y đen ). Còn ng
nghi m th 3, 4 ( ng đ i ch ng) ta cho 2 ml c n thay cho d ch s c t ,
sau đó cũng cho axit ascorbic đ methyl nh 2 ng nghi m 1 2, đ t ư
ng nghi m 3 ngoài sáng, ng nghi m 4 trong t i. Sau m t th i gian
kho ng 30 phút, quan sát s thay đ i màu 4 ng nghi m, ghi l i k t ế
qu theo th t sau:
ng nghi m Thành ph n h n h p Đi u
ki n
1 2ml clorophin + axit ascorbic +
1 ml đ methyl
sáng
2 2ml clorophin + axit ascorbic +
1 ml đ methyl
t i
3 2 ml c n + axit ascorbic + 1
ml đ methyl
sáng
4 2 ml c n + axit ascorbic + 1
ml đ methyl
t i
V. PHÂN TÍCH K T QU THÍ NGHI M VÀ VI T BÁO CÁO
GV giúp HS phân tích k t qu thí nghi m theo các h ng sau : ế ướ
- Khi chi t rút s c t t lá cây b ng dung i h u c , ta ch thuế ơ
đ c 2 nhóm s c t : Clorophin màu l c Carotenoit màu vàng.ượ
Nh ng ta ch nhìn th y d ch chi t màu l c, vì Clorophin hàmư ế
l ng l n h n Carotenoit hàng ch c l n, nên màu c a nó l n át màu c aượ ơ
Carotenoit.
Sau khi quan sát màu s c các ng nghi m, s th y:
- B t đ u thí nghi m c 4 ng nghi m đ u có màu đ c a Methyl
tr ng thái oxi hóa. Nh ng sau thí nghi m, kho ng 30 phút, th y ng ư
nghi m 1 màu đ chuy n sang màu l c, còn các ng nghi m 2,3,4 v n
gi màu đ .
- HS ph i gi i thích đ c s chuy n màu c a ng nghi m 1 do ượ
Clorophin khi đ c chi u sáng đã b kích thích, đi n t b t ra khượ ế
Methyl đ . Methyl đ b kh đã m t màu đ màu l c c a Clorophin
xu t hi n. L tr ng đi n t c a Clorophin đ c l p đ y b i đi n t ượ
c a axit Ascorbic.
G i ý t ch c th c hi n
* N i dung:
H c sinh c n n m v ng ph ng pháp chi t rút s c t trên c s ươ ế ơ
hi u bi t v kh năng hoà tan trong dung môi h u c khác nhau c a các ế ơ
s c t khác nhau.
* Ph ng pháp và hình th c t ch c d y h c:ươ
Sau khi gi ng xong ph n thuy t, tuỳ theo trang thi t b c a ế ế
tr ng chia h c sinh thành các nhóm nh đ ti n hành thí nghi m.ườ ế
Giáo viên theo dõi các nhóm. H c sinh làm thí nghi m ghi chép k t ế
qu vào v th c t p riêng.
VI. CÂU H I ĐÁNH GIÁ VÀ M R NG V N Đ
1. Vì sao ph i tách chi t h n h p s c t b ng dung môi h u c ? ế ơ
2. D a vào c s khoa h c nào đ ch ng minh tính c m quang c a ơ
Clorophin ? M c đích và ý nghĩa c a thí nghi m ?
3. V h s c t quang h p c a th c v t :
a. Gi i thích t i sao lá cây màu xanh l c ?
b. Trong các ch t sau đây, ch t nào màu s c không liên quan tr c
ti p đ n ch c năng c a : clorophin, h ng c u, cytocrom,ế ế
phytocrom?
c. Rút s c t ra kh i b ng m t dung môi h u c . Sau đó đ a ơ ư
d ch s c t lên gi y s c c t s c . Các s c t thành ph n s
đ c tách ra thành 4 v ch. Cho bi t tên các s c t thành ph n và gi iượ ế
thích?
4. M t h c sinh đã th c hi n m t thí nghi m nh sau : ư
Chu n b 3 bình thu tinh nút kín A, B, C . Bình B C treo hai
cành cây di n tích 50 cm2. Bình B chi u sáng, còn bình C che t iế
trong 20 phút. Sau đó l y cành ra r i cho vào các bình A, B, C, m i
bình m t l ng Ba(OH) ượ 2 nh nhau, l c đ u, sao cho COư 2 trong bình
đ c h p th h t. Ti p theo, trung hoà Ba(OH)ượ ế ế 2 còn th a b ng HCl. Các
s li u thu đ c là : 21, 16, 15,5 ml HCl cho m i bình. ượ
A. Hãy ch n ph ng án đúng khi s p x p các bình t ng ng v i ươ ế ươ
các s li u thu đ c: ượ
a. A > B > C
b. B > A > C
c. C > A > B
d. B > C > A
e. A > C > B
B. Khi bi t 1ml HCl t ng ng v i 0,6 mg COế ươ 2, m t h c sinh đã
tính c ng đ quang h p (mg CO2 h p th /dmườ 2 lá. gi ) c ng đ ườ
h p (mg CO2 th i ra/dm2 lá. gi ). Hãy ch n k t qu đúng trong các k t ế ế
qu sau:
1. Quang h p :
a. 12
b. 15
c. 18
d. 25
e. 30
2. Hô h p :
a. 1,2
b. 1,5
c. 2,0
d. 1,8
e. 3,0
C. Căn c vào k t qu thu đ c, hãy cho bi t h c sinh đã s d ng ế ượ ế
cây gì đ làm thí nghi m trên:
a. cây C3