BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC
VÀ ĐÀO TẠO CÔNG NGHỆ VIỆT NAM
HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
-----------------------------
Hồ Trường Giang
NGHIÊN CỨU TẠO BA KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG (AFP,
DCP, TXN) VÀ BƯỚC ĐẦU ỨNG DỤNG TRONG
PHÁT HIỆN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN
LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG
Hà Nội – 2025
BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC
VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM
HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
-----------------------------
Hồ Trường Giang
NGHIÊN CỨU TẠO BA KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG (AFP,
DCP, TXN) VÀ BƯỚC ĐẦU ỨNG DỤNG TRONG
PHÁT HIỆN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN
LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC ỨNG DỤNG
Ngành: Công nghệ sinh học
Mã số: 9 42 02 01
Xác nhận của
Học viện Khoa học và
Công nghệ
Người hướng dẫn 1
GS. TS. Nghiêm Ngọc Minh
Người hướng dẫn 2
PGS. TS. Võ Thị Bích Thủy
Hà Nội – 2025
i
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan rằng luận án "Nghiên cứu tạo ba kháng thể đơn dòng (AFP,
DCP, TXN) bước đầu ứng dụng trong phát hiện ung thư biểu tế bào gan" là
kết quả nghiên cứu của riêng tôi, được thực hiện dưới sự hướng dẫn khoa học của
GS.TS. Nghiêm Ngọc Minh PGS.TS. Thị Bích Thủy - Viện Sinh học, Viện
Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam.
Luận án sử dụng một phần sliệu từ Nhiệm vụ Khoa học Công nghệ theo
Nghị định thư “Hợp tác nghiên cứu chế tạo bộ kít kháng thể đơn dòng nano DNA
huỳnh quang đặc hiệu phục vụ chẩn đoán sớm ung thư gan”, số:
NĐT.102.GER/21.
Các kết quả nghiên cứu của tôi được công bố chung với các tác giả khác đã
được sự nht trí của đồng tác giả khi đưa vào luận án. Các số liệu, kết quả được trình
bày trong luận án hoàn toàn trung thực chưa từng được công bố trong bất kỳ
một công trình nào khác ngoài các công trình công bố của tác giả. Luận án sử dụng
thông tin trích dẫn từ nhiều nguồn tham khảo khác nhau các thông tin trích dẫn
được ghi rõ nguồn gốc.
Luận án được hoàn thành trong thời gian tôi làm nghiên cứu sinh tại Học viện
Khoa học và Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam.
Hà Nội, ngày tháng năm 2025
Tác giả
Hồ Trường Giang
ii
LỜI CẢM ƠN
Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến GS.TS. Nghiêm Ngọc Minh
PGS.TS. Võ Thị Bích Thủy, là người thầy, người cô với sự am hiểu sâu sắc và tầm
nhìn rộng mở đã đưa ra những gợi ý thực tiễn, giúp tôi tiếp cận vấn đề một cách sáng
tạo và hiệu quả hơn, luôn khuyến khích và hỗ trợ tôi trong việc xây dựng nền tảng lý
thuyết vững chắc, giúp tôi định hình rõ ràng hướng đi của nghiên cứu và luôn tận tình
hướng dẫn, hỗ trợ, cung cấp những lời khuyên quý báu trong suốt quá trình thực hiện
luận án này. Những đóng góp chuyên môn skiên nhẫn của thầy, đã giúp tôi
hoàn thiện nghiên cứu với sự vững vàng và tự tin.
Nghiên cứu sinh cũng xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc, tập thể cán bộ,
giảng viên Học viện Khoa học Công nghệ Việt Nam đã tạo điều kiện thuận lợi
nhất cho nghiên cứu sinh trong quá trình học tập và nghiên cứu.
Xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo, các cán bộ quản lý, các đồng nghiệp, tại
Viện Sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, những người đã
đồng hành, chia sẻ kiến thức, kinh nghiệm khích lệ tôi trong suốt thời gian thực
hiện luận án.
Cảm ơn đặc biệt tới Nhiệm vụ khoa học công nghệ theo Nghđịnh thư “Hợp
tác nghiên cứu chế tạo bộ kít kháng thể đơn ng nano DNA huỳnh quang đặc hiệu
phục vụ chẩn đoán sớm ung tgan”, số: NĐT.102.GER/21, đã tạo điều kiện
thuận lợi cho tôi thực hiện nghiên cứu này. Sự hỗ trợ của Nghị định thư đã góp phần
quan trọng vào quá trình phát triển đề tài nghiên cứu và hoàn thành luận án.
Cuối cùng, tôi xin dành lời cảm ơn sâu sắc nhất đến gia đình tôi, những người
đã luôn bên cạnh động viên, hỗ trợ cả về tinh thần lẫn vật chất, là nguồn động lực lớn
lao giúp tôi vượt qua mọi khó khăn và hoàn thành luận án này.
Hà Nội, ngày tháng năm 2025
Tác giả
Hồ Trường Giang
iii
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU ................................................................................................................ 1
Chương 1. TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU ............................................................ 4
1.1. TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN ............................ 4
1.1.1. Dịch tễ học của bệnh ung thư biểu mô tế bào gan ................................... 4
1.1.2. Các yếu tố liên quan đến cơ chế bệnh sinh của HCC .............................. 7
1.2. CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐANG ĐƯỢC SỬ DỤNG NHU CẦU PHÁT
TRIỂN PHƯƠNG PHÁP MỚI TRONG CHẨN ĐOÁN UNG THƯ BIỂU MÔ TẾ
BÀO GAN ......................................................................................................... 11
1.2.1. Các phương pháp chẩn đoán hình ảnh .................................................. 11
1.2.2. Phương pháp chẩn đoán mô bệnh học, tế bào học và sinh thiết lỏng ..... 12
1.2.3. Xét nghiệm các chỉ thị sinh học đặc hiệu ung thư biểu mô tế bào gan .. 13
1.3. KHÁNG THỂ ĐƠN DÒNG VÀ ỨNG DỤNG TRONG CHẨN ĐOÁN UNG
THƯ .................................................................................................................. 27
1.3.1. Khái niệm và mt số nghiên cứu kháng thể đơn dòng trong chẩn đoán ung
thư ................................................................................................................. 27
1.3.2. Các phương pháp tạo kháng thể đơn dòng ............................................ 30
Chương 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ...................... 34
2.1. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU ..................................................................... 34
2.1.1. Đối tượng nghiên cứu của mục tiêu tạo kháng nguyên tái tổ hợp ba chỉ thị
sinh học AFP, DCP, và TXN ......................................................................... 34
2.1.2. Đối tượng nghiên cứu của mục tiêu tạo kháng thể đơn dòng từ các kháng
nguyên tái tổ hợp đã được tạo thành............................................................... 34
2.1.3. Đối tượng nghiên cứu cho mục tiêu bước đầu ứng dụng các kháng thể đơn
dòng tạo thành để phát hiện ung thư biểu mô tế bào gan ................................ 34
2.2. HÓA CHẤT VÀ TRANG THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU................................. 34
2.2.1. Hóa chất và sinh phẩm nghiên cứu ....................................................... 34
2.2.2. Trang thiết bị sử dụng trong nghiên cứu ............................................... 35
2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................................................... 36
2.3.1. Nghiên cứu in silico nhằm tìm kiếm các đoạn gen giàu eptiope ............ 36
2.3.2. Phương pháp tạo kháng nguyên tái tổ hợp ............................................ 37
2.3.3. Phương pháp tạo kháng thể đơn dòng ................................................... 44