150
THỰC HÀNH
NUÔI CẤY MÔ
VÀ TẾ BÀO
THỰC VẬT
151
MỤC LỤC
Bài 1 Mở đầu.............................................................. 153
I. Các thiết bị của phòng thí nghiệm nuôi cấy mô và tế bào
thực vật.......................................................................... 153
II. Các nhân tố đảm bảo thành công trong nuôi cấy mô-tế
bào thực vật................................................................... 156
Bài 2 Môi trường dinh dưỡng ..................................... 172
I. Thành phần chính của môi trường.............................. 174
II. Vấn đề lựa chọn môi trường...................................... 182
III. Chuẩn bị các dung dịch làm việc............................. 184
Bài 3 Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng................................. 194
I. Mục đích và yêu cầu................................................... 194
II. Dụng cụ, thiết bị và hóa chất..................................... 195
III. Phương pháp tiến hành ............................................ 197
Bài 4 Nuôi cấy đơn bội in vitro.................................... 204
I. Mục đích và yêu cầu................................................... 204
II. Dụng cụ, thiết bị, hóa chất......................................... 206
III. Phương pháp tiến hành ............................................ 207
152
Bài 5 Nuôi cấy tế bào dịch huyền phù ........................ 213
I. Mục đích và yêu cầu................................................... 213
II. Dụng cụ, thiết bị, hóa chất......................................... 215
III Phương pháp tiến hành ............................................. 217
Bài 6 Nuôi cấy protoplast............................................ 222
I. Mục đích và yêu cầu................................................... 222
II. Dụng cụ, thiết bị, hóa chất......................................... 223
III. Phương pháp tiến hành ............................................ 225
Bài 7 Chuyển gen thông qua Agrobacterium
tumefaciens................................................................... 231
I. Mục đích và yêu cầu................................................... 231
II. Dụng cụ, thiết bị, hóa chất......................................... 232
III. Phương pháp tiến hành ............................................ 234
TÀI LIỆU ĐỌC THÊM .............................................. 242
153
Bài 1 Mở đầu
I. Các thiết bị của phòng thí nghiệm nuôi cấy mô và tế
bào thực vật
(ghi chú: + rất cần, - tùy theo nhu cầu)
1. Phòng rửa và cất nước
+ Máy cất nước 1 lần (8 L/giờ)
+ Máy cất nước 2 lần (4 L/giờ)
- Máy sản xuất nước khử ion
2. Phòng sấy hấp
+ Tủ sấy 60-300oC
+ Nồi khử trùng (autoclave) loại nhỏ (25 L)
- Nồi khử trùng loại lớn (50-100 L)
3. Phòng chuẩn bị môi trường
+ pHmeter
154
+ Máy khuấy từ
+ Cân phân tích 10-4g
+ Cân kỹ thuật 10-2g
+ Bếp điện
- Microwave
+ Tủ lạnh 100-200 L
- Tủ lạnh sâu (-20 -80oC)
4. Phòng cấy vô trùng
+ Tủ cấy vô trùng (Laminar, Clean Bench)
+ Quạt thông gió
+ Đèn tử ngoại treo trần hoặc treo tường (1,2 m)
- Thiết bị lọc không khí
5. Phòng ảnh
- Máy ảnh kỹ thuật số
- Hệ thống đèn chiếu