Ph n I : C s lý thuy tầ ơ ở ế
•HPLC là ch vi t t t c a 04 ch cái đ u b ng ti ng Anh c a ữ ế ắ ủ ữ ầ ằ ế ủ
ph ng pháp s c ký l ng hi u năng cao ( High Performance Liquid ươ ắ ỏ ệ
Chromatography) ,tr c kia g i là ph ng pháp s c ký l ng cao áp ướ ọ ươ ắ ỏ
(High Pressure Liquid Chromatography)
•Ph ng pháp này ra đ i t năm 1967-1968 trên c s phát tri n và ươ ờ ừ ơ ở ể
c i ti n t ph ng pháp s c ký c t c đi n . Hi n nay ph ng ả ế ừ ươ ắ ộ ổ ể ệ ươ
pháp HPLC ngày càng phát tri n và hi n đ i hoá cao nh s phát ể ệ ạ ờ ự
tri n nhanh chóng c a ngành ch t o máy phân tích .Hi n nay nó áp ể ủ ế ạ ệ
d ng r t l n trong nhi u nghành ki m nghi m đ c bi t là ng d ng ụ ấ ớ ề ể ệ ặ ệ ứ ụ
cho nghành ki m nghi m Thu c . Và nó hi n là công c đ c l c ể ệ ố ệ ụ ắ ự
trong phân tích các thu c đa thành ph n cho phép đ nh tính và đ nh ố ầ ị ị
l ng .ượ
Ph n I : C s lý thuy tầ ơ ở ế
1 - Khái ni m ệ: S c ký l ng hi u năng cao là m t ph ng pháp chia tách ắ ỏ ệ ộ ươ
trong đó pha đ ng là chât l ng và pha tĩnh ch a trong c t là ch t r n ộ ỏ ứ ộ ấ ắ
đã đ c phân chia d i d ng ti u phân ho c m t ch t l ng ph lên ượ ướ ạ ể ặ ộ ấ ỏ ủ
m t ch t mang r n ,hay m t ch t mang đã đ c bi n đ i b ng liên k t ộ ấ ắ ộ ấ ượ ế ổ ằ ế
hoá h c v i các nhóm ch c h u c .Quá trình s c ký l ng d a trên c ọ ớ ứ ữ ơ ắ ỏ ự ơ
ch h p ph ,phân b ,trao đ i Ion hay phân lo i theo kích c ( Rây ế ấ ụ ố ổ ạ ỡ
phân t ) . ử
2- Nguyên t c c a quá trình s c ký trong c t : ắ ủ ắ ộ
Pha tĩnh là m t y u t quan tr ng quy t đ nh b n ch t c a quá trình ộ ế ố ọ ế ị ả ấ ủ
s c ký và l ai s c ký . ắ ọ ắ
N u pha tĩnh là ch t h p ph thì ta có S c ký h p ph pha thu n ho c ế ấ ấ ụ ắ ấ ụ ậ ặ
pha đ o . ả
N u pha tĩnh là ch t trao đ i Ion thì ta có S c ký trao đ i ion .ế ấ ổ ắ ổ
N u pha tĩnh là ch t L ng thì ta có S c ký phân b hay s c ký chi t . ế ấ ỏ ắ ố ắ ế
Ph n I : C s lý thuy tầ ơ ở ế
N u pha tĩnh là Gel thì ta có S c ký Gel hay Rây phân t .ế ắ ử
•Cùng v i pha tĩnh đ r a r i ch t phân tích ra kh i c t ,chúng ta c n có ớ ể ử ả ấ ỏ ộ ầ
m t pha đ ng . ộ ộ
•Nh v y n u chúng ta n p m u phân tích g m h n h p ch t phân tích ư ậ ế ạ ẫ ồ ỗ ợ ấ
A,B,C .. Vào c t phân tích ,k t qu các ch t A,B,C.. S đ c tách ra ộ ế ả ấ ẽ ượ
kh i nhau sau khi đi qua c t .Quy t đ nh hi u qu c a s tách s c ký ỏ ộ ế ị ệ ả ủ ự ắ ở
đây là t ng h p các t ng tác . ổ ợ ươ
Chất phân tích A +B+C
Pha tĩnh Pha động
F2
F3
F1
Ph n I : C s lý thuy tầ ơ ở ế
•T ng c a 03 t ng tác này s quy t đ nh ch t nào đ c r a ổ ủ ươ ẽ ế ị ấ ượ ử
r i ra kh i c t tr c tiên khi l c l u gi trên c t là nh nh t ả ỏ ộ ướ ự ư ữ ộ ỏ ấ
( F1) .và ng c l i . ượ ạ
•Đ i v i m i ch t ,s l u gi đ c qui đ nh b i 03 l c ố ớ ỗ ấ ự ư ữ ượ ị ở ự
F1,F2,F3 .Trong đó F1 và F2 gi vai trò quy t đ nh .còn F3 là ữ ế ị
y u t nh h ng không l n . ế ố ả ưở ớ
• đây F1 là l c gi ch t phân tích trên c t .F2 là l c kéo c a Ở ự ữ ấ ộ ự ủ
pha đ ng đ i v i ch t phân tích ra kh i c t . ộ ố ớ ấ ỏ ộ
•Nh v y v i các ch t khác nhau thì F1 và F2 là khác nhau ,K t ư ậ ớ ấ ế
qu là các ch t khác nhau s di chuy n trong c t v i t c đ ả ấ ẽ ể ộ ớ ố ộ
khác nhau và tách ra kh i nhau khi ra kh i c t ( nh hình d i ỏ ỏ ộ ư ướ
đây )
Ph n I : C s lý thuy tầ ơ ở ế
Ph n minh ho quá trình tách các ch t A và B trong ầ ạ ấ
c t tách s c kýộ ắ
Thời gian AB
Pha
động