Ạ Ọ

Ọ Ự

Ố Ồ

Ọ

Ọ

Ệ

Đ I H C KHOA H C T  NHIÊN THÀNH PH  H  CHÍ  MINH KHOA SINH H C – CÔNG NGH  SINH H C

ổ ợ

ừ

h p PLLA/Bmattacin2 t

ẩ ủ ằ

ứ

ụ

ọ

peptide kháng  Màng tái t khu n c a t m và Poly L­ lactic acid (PLLA) cho  ng  d ng y sinh h c.

ầ

ả

GVHD: PGS.TS Tr n Lê B o Hà.

• Thành viên:

ị

• Mai Th  Thùy Duyên      1318051

Nhóm   10

ỹ

• Văn M  Lan                  1318177

•

ầ

ọ

ị

Tr n Th  Ng c              1318251

Ộ

N I DUNG

I

Ặ

Ấ

Ề

Đ T V N Đ

II

MÀNG PLLA

III

BMATTACIN2

IV

MÀNG PLLA/BMATTACIN2

V

Ậ

Ế

K T LU N

Ặ

Ấ

Ề

I. Đ T V N Đ

ế ế

ố

t k  các v t li u có ch c năng ch ng oxy hóa, ch ng

ố

ổ

ứ Thi viêm, kháng khu n và ch ng ung th  b ng cách b  sung: ồ

ẩ

ho t tính kháng khu n

ạ ư

ạ

ả

ậ ệ ẩ  → H t nano b c: tăng n ng đ   ộ ạ gây đ c t

ố ư ằ → ạ ộ ế  bào

i tăng kh  năng

tăng nh ng l + Mohiti­Asli, M. et al + Jin, G. et al

ố

→ M t s  lo i thu c nh  5­fluorouracil (5­FU): đi u tr   ị

ư ư

ế

ườ

ộ ố ạ i

ư ạ ế ạ gây h i đ n các t

ung th  nh ng l

bào bình th

ề ng.

ế ế ậ ệ

ư

ẩ

ố

t k  v t li u kháng khu n, ch ng ung th  cao, gây

ơ

Thi ấ ộ đ c th p h n.

Màng PLLA/Bmattacin2

T

Ấ

U

X

Ề

Đ

II. MÀNG PLLA

Poly L ­ lactic  acid

Polymer  ệ ẻ nhi t d o,  bán tinh th , ể giòn và r n.ắ

ả Có kh  năng  ủ phân h y sinh  h cọ

ẩ

ụ Ứ ng d ng  trong màng  bao th c ự ẫ ph m, d n  ố ề truy n thu c,  ậ ệ v t li u y  sinh…

T

ng thích

ươ sinh h c ọ

III. BMATTACIN2

- Là peptide kháng khu n đ

ẩ ượ ạ ừ c t o dòng t 2 gen attacin2 và

ở ằ cecropinB1 t m.

ẩ

ữ ậ ủ ệ ố ả ẩ ễ ị

ế

ệ

ỵ ướ ạ ư ướ ưỡ + Peptide kháng khu n (AMP) là nhóm các peptide có kh  năng tiêu  ở ậ ệ di   t nh ng vi sinh v t xâm nh p c a h  th ng mi n d ch b m sinh  ầ h u h t các sinh v t. ề ặ + AMPs mang đ c đi m chung là có đi n tích cation b  m t và có  ự ng c c (phân ậ ể ặ c và vùng k  n c t o thành màng l

các vùng  a n c c).ự

ệ ổ ộ ng có s   n đ nh nhi t và kháng sinh ph  r ng.

ườ ắ ụ ế ị ư  bào ung th

+ AMPs th ả ả ẩ ự ổ - Kh  năng nh m m c tiêu t - Kh  năng kháng khu n.

III. BMATTACIN2

1. Đ C TÍNH:

Ặ

ụ ủ ắ ả ế a. Kh  năng c a Bmattacin2 nh m m c tiêu ư. t bào ung th

•. Đ i t

ố ượ ng:

ế ư ế ế ư ạ ác tính A375 và t bào ung th  đ i

T  bào ung th  (t ự tr c tràng HCT116 bào h c t ở ườ  ng ắ ố i)

ầ ợ ng (nguyên bào s i da bao quy đ u

ố ứ ế T  bào đ i  ng bình th ườ ế ườ ộ ế ủ i HFF­1 và t ng bào ru t k t c a thai nhi FHC).

a. Khả năng của Bmattacin2 nhắm mục tiêu tế bào ung thư

ả:  2 mM Bmattacin2 sau 24 gi

ờ ủ

K t quế

ậ ế • K t lu n

Bmattacin2 có thể giết chọn lọc tế bào ung thư A375 và HCT116

mà vẫn duy trì các tế bào đối ứng bình thường của nó

III. BMATTACIN2

• Đ i t

Ặ 1. Đ C TÍNH: ả b. Kh  năng ủ kháng khu n ẩ c a Bmattacin2.

ng:

ườ ẩ ạ ng

ằ ấ c tìm th y trong t m nhi m). đ

α ố ượ S. maicesceis và B. Bombysepticus ( 2 lo i vi khu n th ễ ượ E. coli ATCC25922, E. coli DH5  và S. aureus ATCC25923

ổ ế ủ ệ ẩ (ba ch ng vi khu n ph  bi n trong phòng thí nghi m)

b. Tác dụng kháng khuẩn của Bmattacin2

ả:

K t quế

ẩ ộ ượ Ế Ậ Bmattacin2 có ph  kháng khu n r ng, v i t ng l ng khác

ẩ ệ ể ứ ổ ế ớ ừ t các vi khu n gram âm và gram

K T LU N:  nhau Bmattacin2 có th   c ch  tiêu di ngươ d

ệ

ủ

ộ

Thí nghi m so sánh tác đ ng c a  Bmattacin2

v i Bmattacin2

ng:

Ủ ớ trong 30’ ố ượ Đ i t +E. Coli + S. aureus +HCT116 +FHC +A375 +HFF-1

Ơ Ế 2. C  CH  BMATTACIN2:

ẩ

ế  bào vi khu n  Bám lên màng t ế ậ  bào,  Khi xâm nh p vào t ớ ẩ Peptide kháng khu n chèn vào l p màng lipid  ầ ớ ế ợ k t h p v i các thành ph n  ẫ ể ự ậ  do d n  kép, hình thành các kênh v n chuy n t ẩ ế ả ế đ n làm dung gi  bào vi khu n. i màng t ủ ế ọ quan tr ng c a t  bào, kích  ự ả ạ ho t gi   i phóng enzyme t ợ ế ổ ả ứ i,  c ch  t ng h p  phân gi DNA, RNA,....

ộ

ự

ọ ọ ủ ẩ

S  tác đ ng ch n l c c a peptide  kháng khu n Bmattacin2 ế

liên  quan  đ n  tác

• Các  y u  t

ố ọ ọ

ộ

ế đ ng ch n l c :

ệ

+ Đi n tích màng.

ả

ạ

ủ

+  Cholesterol  làm  gi m  ho t  ộ đ ng  c a  các  peptide  kháng  khu n. ẩ

ế

ễ ị

ố

ẩ + T  bào vi khu n d  b  nhân t ạ  xuyên màng.

l

=>  Các  peptide  kháng  khu n ẩ

ư

ươ

ớ

luôn

u  tiên  t

ng  tác  v i  vi

ớ ế

ẩ

ơ

ậ

ộ

khu n  h n  v i  t

bào  đ ng  v t,

ờ

ệ

nh  đó chúng tiêu di

t các vi sinh

ể

ậ

ộ

v t  mà  không  gây  đ c  đáng  k

ế ế

ủ

đ n t

bào ch .

IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN2

Ặ

1. Đ C TÍNH

ƯƠ NG  2. PH PHÁP T O Ạ MÀNG

Ặ

1. Đ C TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2

ố

ủ

ạ ộ a. Ho t đ ng

ư c a màng PLLA/Bmattacin2

ch ng ung th

ả

ộ

ứ ợ

• Kh  năng di  ủ đ ng c a  HCT116 sau khi  ạ gieo h t trên  màng ph c h p  ế ạ ch  t o trong 4  ờ , 1 ngày và 3  gi ngày.

1. Đ C TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 ủ

ố

ư c a màng PLLA/Bmattacin2

Ặ ạ ộ a. Ho t đ ng  ch ng ung th

ế

­ T  bào quan sát: HCT116

ấ

ứ

ề ặ -C y trên b  m t màng ph c  ợ

ế ạ

h p ch  t o

ờ

-Th i gian: 3 ngày.

ế

ả -K t qu :

ộ

ế

ế

ố

+(b1­b4) nhu m t

bào s ng/ch t.

ủ

ỳ

+ (b5­b8) nhu m hu nh quang c a

ế

ở

ộ  bào b i DAPI/FITC.

các t

+(b9­b16) SEM quan sát

Ặ

1. Đ C TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2.

b. Hi u l c

ệ ự kháng khu n ẩ c a màng PLLA/Bmattacin2

ủ

ả ẩ ủ

ng: E. coli

ứ

Tính kháng khu nẩ : ặ Kh o sát đ c tính khác  khu n c a màng  PLLA/Bmattacin2  ố ượ + Đ i t and S. aureus  ố + Đ i ch ng âm: màng  PLLA

Ặ

1. Đ C TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 ệ ự

ẩ ủ b. Hi u l c kháng khu n c a màng PLLA/Bmattacin2

ộ

ằ

ẩ

Nhu m vi khu n b ng  SYTO 9 và propidium  iodide  ẩ ố + vi khu n s ng (xanh) ế ẩ +vi khu n ch t (màu  ụ ỏ đ ) => tác d ng kháng  ẩ ủ khu n c a  PLLA/Bmattacin2.

Ặ

ươ

1. Đ C TÍNH MÀNG PLLA/BMATTACIN2 ả c. Kh  năng t

ng thích c a màng PLLA/Bmattacin2

ủ

IV. MÀNG PLLA/BMATTACIN2

NG PHÁP

ƯƠ 2. PH Ạ T O MÀNG: cướ  3 b ạ - T o dòng. ị ị ẩ - Chu n b  dung d ch  PLLA/Bmattcin2.

ng pháp quay

ươ - Ph ệ đi n hóa  (electrospinning) đ  ể ạ t o màng  PLLA/Bmattacin2

Ậ

Ế

V. K T LU N

ươ

- Màng PLLA / Bmattacin2 là m t v t li u có tính t

ng thích sinh

ả

ư  bào ung th  mà không

ưở

ế

ộ ậ ệ ố ườ

ế ọ h c cao, có kh  năng kháng khu n, ch ng t ả gây  nh h ng.

ế ng đ n các t ể ặ

ạ

ụ

ớ

ộ ề ề

ứ ữ

ư

ế

ệ

ạ

ẩ  bào bình th ữ ớ - V i nh ng đ c đi m này, màng nano PLLA / Bmattacin2  là lo i  ậ ệ ứ ẹ v t li u h a h n, có m t ti m năng l n cho các  ng d ng y sinh  ươ ị ọ h c trong vi c tái t o da, đi u tr  ung th , và ch a lành v t th

ng.