Các hình thức sinh sản và phương pháp nhân giống vô tính
Sinh sản vô tính
Vô tính sinh dưỡng
Vô phối
Mô sôma bầu nhụy (2n)
Đại bào tử mẹ
Phôi bất định (2n)
Mắt, đoạn rễ, cành và thân
Tế bào, mô, bộ phận
Thân rễ, bồ, giò, củ, các loại chồi phụ
Phôi vô tính (2n)
chư¬ng 9 Kü thuËt s¶n xuÊt gièng ®èi víi c©y sinh s¶n v« tÝnh
Tách chồi, chia cây
Nuôi cấy in-vitro
Công nghệ hạt nhân tạo
Giâm, chiết cành; ghép
Nhân vô tính nhân tạo
Nhân vô tính tự nhiên
1. Các phương pháp nhân giống vô tính
1.1. Nhân giống bằng phương pháp tách chồi, chia cây
• Khái niệm: Là phương pháp nhân giống vô tính tự nhiên, sử dụng
Vườn ươm
các loại thân hành, thân ngầm, chồi sẵn có đủ thân, lá, rễ bất định
mọc ở thân ngầm.
Tách chồi, cây, phân loại
• Đối tượng áp dụng: Các loại cây ăn quả lớp một lá mầm (dứa,
Vườn vật liệu khởi đầu (Sản xuất, nhân chồi)
Vườn sản xuất
chuối, dâu tây…), hoa, cây cảnh (lan, lay ơn, huệ…), các loại cây
dạng bụi nhiều thân…
• Cơ sở khoa học: Dựa trên đặc tính sinh sản bằng các loại thân địa
Sơ đồ quá trình nhân giống bằng phương pháp tách chồi, chia cây
sinh, khí sinh, chồi ngầm, chồi thân, chồi nách, chồi cuống, chồi
ngọn, chồi thai sinh…
1
Kỹ thuật:
• Chọn cây, chồi:
Ưu điểm
- Chọn cây (đủ rễ, thân lá), chồi đã thành thục (như chồi nách ở dứa,
• Kỹ thuật đơn giản, dễ làm.
chối đuôi chiên ở chuối…), mập, khỏe, không sâu bệnh
• Cây con giữ nguyên đặc điểm di truyền của cây mẹ,
nhanh ra hoa quả hơn gieo từ hạt.
- Phân loại, chồi đủ tiêu chuẩn có thể trồng thẳng ra vườn sản xuất, các loại chồi còn nhỏ, yếu cần đưa vào vườm ươm một thời gian, đủ tiêu chuẩn thì đem trồng.
Nhược điểm
• Chuẩn bị, trồng:
• Hệ số nhân không cao.
- Trước khi trồng, cần phân loại cây, chồi để đạt độ đồng đều cao,
thuận lợi cho chăm sóc, thu hoạch.
• Cây con thường mang theo mầm bệnh từ cây mẹ
• Khó đạt đồng đều.
- Tỉa bớt lá, rễ già để cây phục hồi nhanh.
- Ví dụ phân loại chồi dứa theo khối lượng: loại 1 (300-500g) và loại 2
(200-300g).
1.2. Nhân giống bằng phương pháp chiết cành
• Khái niệm: Là phương pháp kích thích cho cành ra rễ khi còn ở trên
trên cây và sau đó cắt đem trồng.
• Đối tượng áp dụng: Chủ yếu là các cây thân gỗ (như các loại cây ăn
quả: hồng xiêm, cam, quýt, xoài, nhãn…); một số loại cây cảnh: đào,
Chọn cành, xử lý ra rễ nơi chiết (gây vết thương, khoanh vỏ, cạo tượng tầng, bôi chất kích thích, nén đất, bó bầu)
Xuất vườn
mai, hồng,…); các loại tre (tre, măng bát độ…)…
Vườn ươm
• Cơ sở khoa học:
Vườn vật liệu (sản xuất, giống gốc, đầu dòng)
Vườn sản xuất
Cắt, hạ bầu
- Khả năng phân hóa, khôi phục lại tất cả các cơ quan còn thiếu để
trở thành một cây hoàn chỉnh của tế bào.
- Tác động của các chất điều tiết sinh trưởng đến vết chiết, kích
Sơ đồ quá trình nhân giống bằng phương pháp chiết cành
thích tế bào tượng tầng nhân lên tạo thành mô sẹo. Nếu có bóng tối
và đủ ẩm, mô sẹo phân hóa thành tế bào rễ.
Tip Layer
Simple Layer
Compound Layer
Vít nhiều đoạn cành
Vít cành
Phủ đất
Chiết ngọn
Stolons
Stooling
Air Layer
Chiết cành cao
Các bước của phương pháp chiết cành
2
• Khoanh vỏ, bó bầu:
Kỹ thuật
- Vết khoanh dài 3-5cm, độ sâu tới phần phần gỗ, bóc bỏ khoanh vỏ
• Thời vụ: vụ xuân (T2-T4), vụ thu (T7-T8); tránh ngày thời tiết xấu, khắc
cạo hết phần tượng tầng sát gỗ (phần vỏ mềm).
nghiệt như nắng nóng, mưa phùn gió mùa đông bắc…Đối với các loại
- Đối với các loại cây có nhựa mủ (mít, hồng xiêm,…), sau khoanh
cây có nhựa mủ có thể chiết vào tháng 11-12, khi cây ít nhựa.
phải phơi 7-15 ngày, trước khi bó bầu thì cạo lại.
• Chọn cành chiết: chọn trên các cây đã ra quả nhiều năm, ổn định về
- Đối với các loại cây khác, khoanh xong có thể bó bầu ngay.
năng suất, sinh trưởng khỏe, sạch sâu bệnh. Chọn cành bánh tẻ, tán
- Có thể bôi chất kích thích ra rễ vào phần vỏ trên vết cắt để kích thích
đẹp, vị trí ngang tán cây nơi có nhiều ánh sáng, không bị sâu bệnh,
nhanh ra rễ; sau đó, bó bầu, bọc nilon và cố định bằng dây buộc.
đường kính 0,8-1,5cm.
• Chăm sóc bầu chiết: Thường xuyên theo dõi tình hình ra rễ, sâu
bệnh, tưới bổ sung kịp thời nếu hỗn hợp bó bầu bị khô.
• Chuẩn bị chất độn bó bầu: đảm bảo yêu cầu về kết cấu, độ xốp, dinh
• Hạ và giâm cành chiết: Sau chiết 2-4 tháng, rễ đã phân bố đều quanh
dưỡng và chất kích thích ra rễ (thường sử dụng các chế phẩm của
bầu, nhiều rễ cấp 2-3 và chuyển từ trắng sang vàng thì hạ bầu; trồng
auxin với các nồng độ và liều lượng khác nhau tùy loại cây).
vào luống hoặc bầu nilon trong vườn ươm hoặc nơi râm mát để bàu
ra rễ mới, lộc mới và khi thời tiết thuận lợi thì đem trồng.
1.3. Nhân giống bằng phương pháp giâm cành
Ưu điểm
• Khái niệm: là phương pháp tái sinh nhân tạo các bộ phận rễ, chồi,
• Cây con giữ nguyên đặc điểm di truyền, năng suất, chất lượng của
lá… của một đoạn cành hoặc rễ khi cắt rời khỏi cây mẹ, cắm vào giá
cây mẹ.
thể trong môi trường thích hợp để tạo thành cây con hoàn chỉnh.
• Nhanh ra hoa quả, rút ngắn thời gian sinh trưởng; rút ngắn thời kỳ
• Đối tượng áp dụng: cho các cây dễ ra rễ (cây ăn quả có múi: các
xây dựng cơ bản, nhanh thu hoạch.
loại chanh, hồng xiêm, ổi, na; đa số cây cảnh, xương rồng; cây
• Cây con có bộ rễ ăn nông, phù hợp nơi mực nước ngầm cao; chiều
công nghiệp: hồ tiêu..).
cao thấp, tán gọn, dễ chăm sóc, thu hoạch và phòng trừ sâu bệnh.
• Cơ sơ khoa học:
Nhược điểm
- Khả năng phân hóa, khôi phục lại tất cả các cơ quan còn thiếu để
• Ảnh hưởng không tốt đến cây mẹ do bị căt mất cành lá.
trở thành một cây hoàn chỉnh của tế bào.
• Cây chiết thường mang theo mầm bệnh từ cây mẹ
- Tác động của các chất điều tiết sinh trưởng đến vết chiết, kích
• Có sức sống kém hơn và chóng già cỗi hơn cây trồng từ hạt.
thích tế bào tượng tầng nhân lên tạo thành mô sẹo. Nếu có bóng tối
và đủ ẩm, mô sẹo phân hóa thành tế bào rễ.
Cắt đoạn cành
IAA
IAA
1. IAA dự trữ
IAA
IAA
Bẹ lá
7. Thân hình thành
Cuống lá
3. Mô sẹo hình thành
4. Rễ hình thành
3
Ra ngôi
Xuất vườn
Chọn, cắt, bảo quản hom, xử lý ra rễ
Nhà giâm cành
Vườn sản xuất
Vườn ươm
Vườn vật liệu (Sản xuất, giống gốc, đầu dòng)
Sơ đồ quá trình nhân giống bằng phương pháp giâm cành
IAA
Giâm bằng cắt lá
Chồi ngọn
Cắt 1 lá
Chồi mới
Chồi nách
Thân
Lá
Cắt mẩu lá
4
Giâm bằng cắt cành
Chồi ngọn
Chồi nách
Cành
Lá
Rễ bất định
Giâm bằng chồi
Giâm bằng hom
Kỹ thuật
Cắt phần cuối nhánh
Tượng tầng
• Thời vụ giâm - Vụ xuân từ 10/2-10/4 - Vụ thu từ 20/9-20/10 • Chọn hom - Chọn trên các cây ổn định về năng suất, khỏe, sạch bệnh, ở thời kỳ ngừng sinh trưởng. - Tốt nhất, sử dụng hom bánh tẻ, không non hoặc già quá, tuổi hom từ 12-18 tháng. • Cắt hom - Hom cành: dài 8-10cm, đường kính 0,3-0,8cm, có 3-4 mắt, để lại ½ - 1 lá trên cùng. - Hom rễ: dài 8-10cm, đường kính 0,5-1,2cm, chú ý đánh dấu đầu nảy mầm (gần gốc).
5
• Chăm sóc hom giâm
• Bảo quản, xử lý hom
- Vườn giâm được điều chỉnh nhiệt độ, ánh sàng phù hợp,
- Hom sau cắt phải được giữ để không bị mất nước (phun giữ ẩm, hoặc bôi hai đầu bằng parafin nếu mang đi xa, để lâu). - Xử lý chất kích thích ra rễ: có thể sử dụng một số loại auxin
sau nảy mầm có thể phun bổ sung dinh dưỡng bằng
với nồng độ và thời gian xử lý thích hợp.
phân qua lá hoặc tưới vào đất.
- Khi chồi mọc 6-8 lá, rễ đủ dài phải ra ngôi vườn ươm kịp
- Hiện có 2 phương pháp xử lý auxin cho hom: + Xử lý nồng độ loãng hay xử lý chậm
thời trên luống hoặc bầu nilon, kết hợp tỉa bớt cành, lá,
+ Xử lý nồng độ đặc hay xử lý nhanh.
tạo tán…
• Tiêu chuẩn cây xuất vườn: cao 40-60cm, đường kính gốc
• Cắm hom - Sau xử lý, hom được cắm lên luống hoặc vào bầu nilon với giá thể thích hợp.
cành 0,5-0,6cm, được tạo tán, không bị sâu bệnh.
- Độ sâu cắm bằng 2/3 chiều dài hom. - Tiếp tục phun mù trong 7-10 ngày đầu để tránh mất nước.
Ưu điểm
1.4. Nhân giống bằng phương pháp ghép cành
• Hệ số nhân cao, nhanh, chi phí thấp.
• Khái niệm: Ghép là phương pháp nhân giống vô tính nhân tạo sử dụng một đoạn thân, cành, mắt ngủ… của cây này
• Cây giâm giữ nguyên đặc điểm di truyền cây mẹ; chin sớm, rút ngắn thời gian kiến thiết cơ bản, nhanh thu hoạch; bộ rễ nông thích hợp nơi đất có mực nước ngầm cao.
ghép lên một cây khác để hình thành nên một tổ hợp cây mới. Cây ghép có hai phần: cành ghép và gốc ghép
• Lợi dụng giâm cành để rút ngắn thời gian nhân nhanh gốc ghép (ví dụ: cây có múi sau giâm 8 tháng có thể ghép so với 12 tháng nếu gieo từ hạt).
• Đối tượng áp dụng: nhiều loại cây, chủ yếu là các cây thân
Nhược điểm
• Không áp dụng rộng rãi được cho nhiều loại cây do hạn chế khả
gỗ, nhiều nhất là các cây ăn quả, cây công nghiệp, cây cảnh.
năng ra rễ.
• Thường mang theo mầm bệnh từ cây mẹ; có sức sống kém hơn và
• Cơ sở khoa học: Sự gắn liền, sinh trưởng và con đường vận
chóng già cỗi hơn cây trồng từ hạt;
• Có thể mang đột biến mầm, chồi làm thay đổi đặc điểm di truyền so
chuyển bình thường nơi ghép giữa 2 bộ phận gốc và cành ghép nhờ khả năng tái sinh của tượng tầng.
với cây mẹ.
Chọn mắt, chồi, cành ghép
Vườn vật liệu (Sản xuất, giống gốc, đầu dòng)
Ghé p
Vườn ươm
Tổ hợp gốc/cành ghép
Vườn sản xuất
Chọn gốc ghép
Vườn nhân gốc ghép
Sơ đồ quá trình nhân giống bằng phương pháp ghép cành
6
Kỹ thuật • Thời vụ ghép:
- Vụ xuân (tháng 3-4)
- Vụ thu (tháng 8-9)
- Lưu ý chọn thời vụ thích hợp nhất đối với từng loại cây ở từng điều
kiện sinh thái cụ thể.
• Yêu cầu về lựa chọn tổ hợp cành/gốc ghép:
- Phải có quan hệ huyết thống gần nhau (cùng họ), phải có sức sinh
trưởng tương đương (tránh hiện tượng bất tương hợp).
- Mắt/cành ghép: chọn trên cây mẹ có năng suất cao, phẩm chất tốt, sản lượng ổn định 3 vụ trở lên; lấy từ cành giữa tán, nơi có nhiều ánh sáng, tuổi từ 4-6 tháng, đường kính gốc cành 4-10mm.
- Gốc ghép: Có bộ rễ phát triển, cây sinh trưởng khỏe, dễ nhân giống (bằng hạt hoặc nhân giống vô tính bằng chồi, giâm cành…), tiếp hợp được với cành ghép cho tổ hợp sinh trưởng bình thường, lâu dài.
• Thao tác ghép: phải nhanh, chính xác, hai bộ phận ghép phải gắn khít,
Các phương pháp ghép
dụng cụ ghép phải tốt.
• Chăm sóc sau ghép
- Xới xáo, bón phân, tưới nước: sau ghép 27-30 ngày, cắt dây buộc,
Ghép mắt
tiến hành làm cỏ, tưới nước, bón phân như đối với cây gốc ghép.
- Tỉa cành: đối với cành dại cần phải cắt bỏ triệt để, sớm và thường
xuyên.
- Phòng trừ sâu bệnh: không để sâu bệnh gây hại, làm mất hoặc ảnh
hưởng đến bộ phận ghép; đặc biệt chú trọng các loại bệnh nơi mắt
ghép, các loại sâu chích hút (nhện nhỏ, bọ trĩ…).
- Xuất vườn: lưu ý đúng tuổi, tùy theo loại cây trồng.
Ghép nêm (Cleft Graft)
Ghép mắt nhỏ có gỗ
7
Ghép vỏ hay ghép luồn vỏ (Bark Graft)
Ghép bên hay ghép áp (Side-Veneer Graft)
Ghép lưỡi (Whip and Tongue Graft)
• Ghép nối bên (Splice Graft)
Ghép bắc cầu (Bridge Graft)
Ghép yên ngựa (Saddle Graft)
8
Vi ghép
Ưu điểm
• Hệ số nhân giống cao, đặc biệt là ghép mắt.
• Giữ nguyên đặc điểm di truyền, đặc tính tốt của giống ghép (giống cần nhân), kết hợp được đặc tính tốt của cả hai, thường là năng suất, chất lượng cao của giống ghép với bộ rễ khỏe (chịu stress, sâu bệnh) của gốc ghép.
• Rút ngắn thời gian sinh trưởng, thời gian kiến thiết cơ bản, nhanh thu hoạch; tạo gốc ghép lùn, cây lùn nhằm tăng mật độ, dễ chăm sóc, thu hoạch; khả năng sinh trưởng tốt, tuổi thọ cao.
• Lợi dụng kỹ thuật này để cải tạo vườn cũ; phục hồi lại các vườn cây già cỗi, phẩm chất kém, phục hồi bị suy yếu, hỏng phần gốc rễ; bổ khuyết cành để khôi phục dạng hình chuẩn của các loại cây cảnh.
• Nhược điểm
• Cây ghép dễ nhiễm bệnh nếu không chú ý chọn gốc, cành ghép sạch
bệnh.
• Đồi hỏi người làm phải có trình độ, tay nghề thành thạo.
1.5.1.Vi nhân giống bằng phương pháp tạo đa chồi
1.5. Vi nhân giống (nhân giống in-vitro)
• Khái niệm
Mẫu nuôi cấy (đỉnh phân sinh, phôi hạt, trụ dưới lá mầm, mầm lá non…)
Vi nhân giống hay nhân giống in-vitro là quá trình tách mô tế
Khử trùng
bào cây từ một cơ quan vô tính của cây mẹ nuôi trong môi trường nhân tạo đặc thù về dinh dưỡng, hormones, và ánh
Cảm ứng tạo đa chồi
Cảm ứng tạo protocorm
Protocorm
sáng trong điều kiện vô trùng, tạo ra số lượng lớn cây lớn cây trong thời gian ngắn.
Nhân, kéo dài chồi
Tạo, nhân và kéo dài chồi
• Cơ sở khoa học
Tạo rễ, cây hoàn chỉnh
Trực tiếp
Gián tiếp
- Sự phân bào nguyên nhiễm.
Vườn huấn luyện
- Tính toàn năng của tế bào.
Vườn sản xuất
- Nhu cầu về các điều kiện sinh trưởng, phát triển của cây (nhiệt độ, ánh sáng, dinh dưỡng).
Sơ đồ quá trình vi nhân giống bằng phương pháp tạo đa chồi
9
A
B
Tạo đa chồi ở khoai tây (A-mầm, B-kéo dài mầm và phát sinh chồi nách)
A
B
1. Phôi cảm ứng trên môi trường; 2. Cụm chồi trên các môi trường; 3. Cụm chồi được kéo dài; 1. Phôi cảm ứng trên môi trường; 2. Cụm chồi trên các môi trường; 3. Cụm chồi được kéo dài; 4. Phát triển chồi đơn; 5. Cây tái sinh trồng trong nhà kính; và 6. Cây tái sinh trồng trong nhà lưới. 4. Phát triển chồi đơn; 5. Cây tái sinh trồng trong nhà kính; và 6. Cây tái sinh trồng trong nhà lưới.
Tạo protocorm ở lan (A-đỉnh sinh trưởng, B- protocorm)
1.5.2.Vi nhân giống bằng phương pháp tạo chồi bất định
Mẫu nuôi cấy (các đoạn, lát căt từ các bộ phân thân, lá, cuống lá, hoa, mầm…)
Sơ đồ quá trình vi nhân giống bằng tạo chồi bất định
Khử trùng
Cảm ứng
Tạo đa chồi
Tạo mô sẹo cơ sở trên bề mặt lát cắt
Tạo chồi từ ngoại vi mô sẹo, không liên quan đến mô có mạch dẫn
Nhân, kéo dài chồi
Nhân và kéo dài chồi
Tạo chồi bất định và hình thành cây hoàn chỉnh (A-chồi bất định, B- cây hoàn chỉnh)
Cảm ứng, tạo rễ
Hình thành chồi trực tiếp
Hình thành chồi gián tiếp qua mô sẹo
Vườn huấn luyện
Vườn sản xuất
1.5.3.Vi nhân giống bằng phương pháp tạo mô sẹo
Mẫu nuôi cấy
Khử trùng
Cảm ứng tạo mô sẹo
Nhân mô sẹo
Cảm ứng, tạo phôi
A
Vườn sản xuất
Vườn huấn luyện
Tạo rễ, cây hoàn chỉnh
Phôi nảy mầm
B
Mô sẹo (A) và tạo chồi từ mô sẹo (B) ở Lan
Sơ đồ quá trình vi nhân giống bằng tạo mô sẹo
10
1.6. Nhân giống phôi vô tính – Công nghệ hạt nhân tạo
• Hạt nhân tạo (artificial seed): là phôi vô tính bọc trong một lớp vỏ
polymer như agar, agarose, alginate… Trong cấu trúc lưới của các
lớp vỏ đó, nước, chất dinh dưỡng và chất sinh trưởng được cung
cấp thay cho nội nhũ, giúp cho phôi vô tính có thể nảy mầm trở
thành cây hoàn chỉnh.
• Hạt nhân tạo gồm có ba phần:
- Phôi vô tính
- Vỏ bọc polymer (alginate)
- Màng ngoài (calcium alginate)
• Sơ đồ nhân:
Nuôi cấy dịch lỏng trong nồi phản ứng sinh học (bioreactor)
Nảy mầm, tạo cây hoàn chỉnh
Tách, tạo phôi vô tính
Quá trình tái sinh cây bông (Gossypium malvacearum L.) bằng tạo mô sẹo
2. S¶n xuÊt gièng khoai t©y
• Khoai t©y lµ c©y sinh s¶n v« tÝnh b¶n chÊt di truyÒn cña c©y mÑ ®ưîc truyÒn ®¹t hoµn toµn cho thÕ hÖ sau. • Sù tho¸i ho¸ cña gièng khoai t©y chñ yÕu do nhiÔm bÖnh vµ giµ sinh lý. • Kü thuËt s¶n xuÊt vµ phôc tr¸ng gièng khoai t©y chñ yÕu ®Ó kh¾c phôc hai nguyªn nh©n trªn. • C¸c bưíc s¶n xuÊt gièng khoai t©y: + Giai ®o¹n 1: S¶n xuÊt cñ siªu nguyªn chñng. + Giai ®o¹n 2: S¶n xuÊt cñ nguyªn chñng + Giai ®o¹n 3: S¶n xuÊt cñ thư¬ng phÈm.
Hạt nhân tạo của giống táo M26
2.1. S¶n xuÊt gièng khoai t©y SNC vµ NC
Vưên vËt liÖu (SNC) trång vµ chän ®Ó thu mét cñ/khãm
Hai phư¬ng thøc s¶n xuÊt ®ưîc ¸p dông:
a. NhËp gièng khoai t©y s¹ch bÖnh vµ trÎ sinh lý tõ nưíc
ngoµi vµo ViÖt Nam.
• L« cñ nµy ®ưîc s¶n xuÊt trong khu vùc ®ưîc qu¶n lý
§¸nh gi¸ chän dßng tèt, ®óng gièng, hçn cñ t¹o l« cña SNC
tèt vµ phßng trõ s©u bÖnh t¹o ra cñ SNC.
• Tõ cñ SNC nh©n tiÕp trong ®iÒu qu¶n lý tèt kh«ng ®Ó nhiÔm bÖnh t¹o ra l« cñ nguyªn chñng cung cÊp cho s¶n xuÊt.
Nh©n c¸ch ly, lo¹i bá c©y kh¸c d¹ng, t¹o lËp l« cñ NC
• Phư¬ng thøc nµy chÊt lưîng cñ gièng cao vµ cho n¨ng suÊt vưît h¼n ®èi víi gièng ®· trång nhiÒu n¨m trong ®iÒu kiÖn nưíc ta.
11
Chọn lọc trên mặt đất và dưới mặt đất
b. Chän läc t¹i c¸c trung t©m nghiªn cøu
• Cñ gièng thu ®ưîc ®em nh©n ë nh÷ng n¬i qu¶n lý tèt
t¹o ra l« cñ SNC.
• Chän läc c©y khoÎ, s¹ch bÖnh thu cñ gièng vô ®«ng
xong ph¸ ngñ ®Ó trång vô xu©n t¹o ra l« cñ gièng
nguyªn chñng võa s¹ch bÖnh võa trÎ sinh lý.
• Víi phư¬ng ph¸p nµy thêi gian b¶o qu¶n cñ gièng
còng ®ưîc rót ng¾n kho¶ng 2 th¸ng.
2.2. Phư¬ng ph¸p s¶n xuÊt gièng khoai t©y b»ng øng
dông c«ng nghÖ sinh häc
• BiÖn ph¸p nµy gåm c¸c bưíc như sau: + Nu«i cÊy ®Ønh sinh trưëng + Nh©n nhanh trong èng nghiÖm + Nh©n trong vưên ¬m cã c¸ch ly t¹o cñ nhá s¹ch bÖnh vµi thÕ hÖ ®Ó t¹o ra l« cñ SNC + Nh©n l« cñ SNC t¹o l« h¹t nguyªn chñng • Phư¬ng ph¸p nµy t¹o ra cñ gièng s¹ch bÖnh vµ trÎ sinh lý. • B¶o tån nguån gen s¹ch bÖnh, Ýt tèn kÐm • HÖ sè nh©n gièng nhanh, kh«ng bÞ t¸i nhiÔm bÖnh.
3. Nh©n gièng v« tÝnh ë mét sè c©y ¨n qu¶
3.1. C©y mÑ ®Çu dßng (c©y mÑ u tó)
• Gièng c©y ¨n qu¶ hÇu hÕt ®ưîc nh©n v« tÝnh tõ mét
c©y mÑ.
• LÊy bé phËn dinh dưìng cña c©y mÑ ®Ó nh©n gièng.
• C©y mÑ cã thÓ lµ mét gièng míi hoÆc gièng ®· cã
trong s¶n xuÊt.
• C©y mÑ kh«ng tèt sÏ cho c¸c c©y con kÐm chÊt lưîng
¶nh hưëng ®Õn s¶n xuÊt vµ thu nhËp cña ngưêi trång
c©y ¨n qu¶.
12
Tiªu chuÈn cña mét c©y ®Çu dßng
Tiªu chuÈn sinh trưëng ph¸t triÓn
• N¨ng suÊt cao
• C©y mÑ ®Çu dßng ph¶i lµ nh÷ng c©y ®· cho thu
ho¹ch.
• ChÊt lưîng tèt
• Trong thêi kú thu ho¹ch sung søc nhÊt.
• Chèng s©u bÖnh, h¹n, óng
• Th«ng thưêng c©y thu ho¹ch vµo n¨m thø 3 thø 4.
• Kh¶ n¨ng thÝch nghi víi ®iÒu kiÖn ngo¹i c¶nh tèt
• C©y mÑ ®ang cho qu¶ ë vµo tuæi ®ang sung søc.
Tiªu chuÈn chèng chÞu
• ChÞu vËn chuyÓn, b¶o qu¶n ®ưîc l©u
• Chèng chÞu bÖnh virus, vi khuÈn vµ nÊm
• DÔ thu ho¹ch, dÔ ch¨m sãc b»ng m¸y.
• Chèng chÞu h¹n, óng, l¹nh, nãng
Tiªu chuÈn n¨ng suÊt
Tiªu chuÈn chÊt lưîng
• KÝch thưíc qu¶
C¨n cø vµo c¸c chØ tiªu sau ®Ó ®¸nh gi¸:
• Mµu s¾c vá qu¶
• Sè cµnh qu¶ trªn c©y
• Mµu s¾c thÞt qu¶
• Sè qu¶ trªn cµnh
• §é ch¾c thÞt qu¶
• KÝch thưíc qu¶
• Mïi th¬m
• ChÊt lưîng thö nÕm
• Khèi lưîng qu¶
• ChÊt lưîng dinh dìng
• §é ®ång ®Òu cña qu¶
• Kh¶ n¨ng b¶o qu¶n
• N¨ng suÊt thùc thu
• Kh¶ n¨ng vËn chuyÓn
• N¨ng suÊt diÔn biÕn qua c¸c n¨m gÇn nhÊt.
• Kh¶ n¨ng chÕ biÕn
3.3. Nh©n gièng c©y ¨n qu¶ b»ng phư¬ng ph¸p ghÐp
• Ghép là một nghệ thuật chắp nối giữa 2 khối mô sống
3.2. Phư¬ng ph¸p ®¸nh gi¸ tuyÓn chän c©y mÑ ®Çu dßng
của cây trồng với nhau thành thể thống nhất và tiếp tục
quá trình sinh trưởng phát triển như một cây bình
• Tæ chøc ®¸nh gi¸ b»ng thÝ nghiÖm hµng n¨m
thường.
• Nghiªn cøu biÖn ph¸p kü thuËt canh t¸c
• Bất kỳ kỹ thuật nào hoàn thiện được quá trình này đều
được xem là phương pháp ghép.
• Tæ chøc héi thi tuyÓn chän
• Trên thế giới có hai thuật ngữ khác nhau là ghép mắt
(budding) và ghép (grafting).
13
• Gốc ghép (rootstock)
• Ghép mắt (budding) tương tự như ghép chỉ khác
+ Là phần thấp hơn của mắt ghép và cành ghép, phát triển hệ thống rễ của cây ghép khi tiếp hợp thành công. Nó có thể là cây con, đoạn thân, rễ hoặc cành chiết. + Đôi khi ghép thực hiện ngay trên cây lớn ở những cành hoặc
là sử dụng một mắt ngủ có ưu thế.
• Gốc ghép trung gian (Interstock)
• Ghép sử dụng đoạn cành, đoạn chồi có một số
chồi ngọn gọi là ghép ngọn (Topworking)
+ Là một đoạn thân làm cầu nối cho sự tiếp hợp giữa đoạn cành
mắt và đoạn này phát triển thành cây hoặc cành
ghép và gốc ghép.
khi tiếp hợp thành công với gốc ghép.
+ Nó được sử dụng khi mắt ghép và gốc ghép không tương hợp + Tạo ra thân chắc hoặc điều khiển một số đặc điểm sinh trưởng.
Gốc ghép được chia làm 2 nhóm là:
Gốc ghép dòng vô tính
Gốc ghép là cây con
Sự tiếp hợp của ghép nhân giống
Mục đích và lý do sử dụng phương pháp ghép
• Gốc ghép vô tính là gốc ghép được tạo ra bằng chiết, giâm, • Gốc ghép cây con hình thành và phát triển từ hạt nảy mầm tách chồi… • Sản xuất cây gốc ghép đơn giản, kinh tế và phù hợp với nhiều • Nhóm gốc ghép này rất đồng nhất về di truyền, nó còn có thể phương pháp ghép. tạo sạch bệnh, thay đổi tập tính ra hoa của cây ghép. • Tính di truyền chưa bảo thủ nên khả năng tiếp hợp dễ hơn • Sử phối hợp giữa gốc ghép vô tính với mắt ghép của các với mắt ghép, bộ rễ cây gốc ghép tốt hơn ăn sâu hơn. giống khác nhau cần được ghép kiểm tra trước. • Biến dị di truyền lớn có thể ảnh hưởng xấu đến cây ghép. • Cần phải sản xuất gốc ghép với kỹ thuật tốt để có gốc ghép • Cây con sinh trưởng phát triển thường chậm dẫn đến thời sạch bệnh. gian nhân giống dài.
• Cắt mắt ghép có hoạt động của mô phân sinh, đưa vào phần cắt của gốc ghép trùng khít phần tượng tầng của mắt ghép và • Khai thác ưu điểm của gốc ghép gốc ghép. • Thay đổi cấu trúc cây • Lớp ngoài của các tế bào trong vùng của tượng tầng của cả mắt ghép và gốc ghép phải tạo ra các tế bào nhu mô sớm trộn • Ra quả sớm của cây con trong chương trình lai tạo giống lẫn và đan xen vào nhau tạo ra một khối gọi là mô sẹo • Khai thác đặc điểm sinh trưởng ưu thế của gốc ghép • Các tế bào mới của khối callus hình thành theo lớp tượng tầng của mắt và gốc ghép bên trong các tế bào tượng tầng • Sửa lại những phân hư hỏng của cây mới. • Nghiên cứu chống bệnh bệnh virus • Các tế bào tượng tầng tạo ra mô mạch dẫn mới, xylem hướng vào bên trong và libe hướng ra ngoài.
14
Ảnh hưởng của điều kiện môi trường đến ghép nhân giống
• Nhiệt độ phù hợp cho sinh trưởng của tế bào nhanh từ 12,8 đến 32oC. Do vậy khi ghép nên thực hiện vào mùa xuân hàng năm.
• Độ ẩm không khí cao xung quanh vị trí ghép để khối mô này tạo ra các tế bào nhu mô.
• Môi trường xung quan vị trí ghép cần sạch bệnh vi khuẩn, virus, nấm..
• Có thể sử dụng sáp để bảo vệ vết ghép.
4. Ph¬ng ph¸p nh©n v« tÝnh gièng hoa hång
Ảnh hưởng của gốc ghép đến mắt ghép
Nh©n gièng v« tÝnh b»ng c¸ch chiÕt cµnh
• Kích thước và tập tính sinh trưởng của mắt ghép.
• Lµ phư¬ng ph¸p chiÕt cµnh c©y mÑ ra trång.
• ¦u ®iÓm: DÔ lµm, c©y con gi÷ ®ưîc tÝnh di truyÒn cña
• Thay đổi sức khỏe của giống cây mắt ghép.
c©y mÑ.
• Chiều cao cây: cây bình thường khi ghép lên gốc ghép tạo ra
• Nhưîc ®iÓm: HÖ sè nh©n gièng thÊp, c©y sím giµ cæi
thấp cây hơn, có ưu thế lan rộng hơn thẳng đứng.
vµ tho¸i ho¸.
Nh©n gièng v« tÝnh b»ng gi©m cµnh
Nh©n gièng v« tÝnh b»ng ghÐp m¾t
• Lµ phư¬ng ph¸p c¾t cµnh cña c©y mÑ gi©m thµnh c©y
• Ra hoa, đậu quả và năng suất
con.
• Lµ phư¬ng ph¸p ghÐp m¾t cña c©y mÑ lªn gèc tÇm
• ¦u ®iÓm: hÖ sè nh©n gièng cao, c©y con gi÷ ®ưîc ®Æc
xu©n hay mét gièng hång kh¸c.
tÝnh di truyÒn cña c©y mÑ, c©y sinh trưëng ph¸t triÓn tèt,
• ¦u ®iÓm: HÖ sè nh©n gièng cao. C©y con gi÷ ®ưîc tÝnh
ph©n nhiÒu cµnh.
di truyÒn cña c©y mÑ.
• Nhîc ®iÓm: yªu cÇu kü thuËt nh©n gièng kh¾t khe h¬n.
• Nhưîc ®iÓm: Thêi gian nh©n gièng dµi (3 - 4 th¸ng),
Nh©n In vitro: Thưêng phư¬ng ph¸p In vitro ®Ó lưu gi÷
mÊt nhiÒu c«ng ®o¹n trong nh©n gièng.
gièng
15
b. ChuÈn bÞ gi¸ thÓ gi©m
Kü thuËt nh©n gièng Hång b»ng gi©m cµnh
• Gi¸ thÓ gi©m b»ng vËt liÖu ®¶m b¶o sù t¬i xèp, tho¸t nưíc tèt vµ gi÷ Èm cao.
a. Thêi vô nh©n gièng
• Cã thÓ sö dông c¸c lo¹i gi¸ thÓ như c¸t vµng, trÊu hun • Nh©n gièng hång b»ng c¸ch gi©m cµnh cã thÓ ¸p dông ë • Lo¹i gi¸ thÓ tèt nhÊt cho nh©n gièng hång: 2/3 trÊu hun + 1/3 mäi thêi vô trong n¨m (víi ®iÒu kiÖn ®¶m b¶o ®óng qui tr×nh ®Êt ®åi hoÆc cã thÓ sö dông 2/3 trÊu hun + 1/3 c¸t vµng nh©n gièng). • Gi¸ thÓ ®ưîc sµng läc lo¹i bá t¹p chÊt, ph¬i kh« vµ khö • Tèt nhÊt lµ ë vô xu©n (th¸ng 2- 4 ) vµ vô thu (th¸ng 8-10) trïng b»ng Viben, nång ®é 10%. • ë 2 thêi vô nµy c©y gièng nhanh ra rÔ vµ cho tû lÖ sèng cao • Gi¸ thÓ sau xö lý ®ùng vµo khay nhùa hoÆc bÇu ni l«ng, c©y nhÊt ®em trång ®¶m b¶o cã ®é sèng cao.
c. Kü thuËt chän c¾t cµnh gi©m
• Kü thuËt c¾t cµnh: trªn 1 cµnh ®· chän ®Ó gi©m chØ nªn lÊy • Vưên hång dïng ®Ó c¾t cµnh cÇn cã chÕ ®é ch¨m sãc ®o¹n gi÷a cña cµnh kh«ng nªn lÊy ®o¹n ngän vµ gèc. riªng trong ®ã bãn t¨ng liÒu lưîng N vµ P. • Cµnh c¾t ®Ó gi©m cã chiÒu dµi tõ 8-10 cm trªn ®o¹n cµnh • Cµnh hång dïng ®Ó nh©n gièng lµ cµnh b¸nh tÎ kh«ng qu¸ cã tõ 1-3 m¾t nhưng cã 2 m¾t lµ tèt nhÊt. giµ hoÆc qu¸ non, tèt nhÊt lµ lo¹i cµnh mang hoa ®ang ë • Khi c¾t cµnh nªn c¾t v¸t kho¶ng 30o, ph¶i dïng kÐo c¾t giai ®o¹n sö dông. s¾c ngät, kh«ng ®Ó vÕt c¾t bÞ dËp n¸t. • Chän m¾t gi©m ph¶i chän lo¹i m¾t ngñ b¾t ®Çu nh« lªn • Trªn ®o¹n cµnh c¾t nªn gi÷ l¹i tõ 2-3 l¸ chÐt ë cuèng l¸ m¾t b»ng h¹t tÊm, như vËy trong thêi gian gi©m cµnh cã thÓ bËt trªn. léc ngay, ®Õn khi trång c©y cã søc sinh trưëng ph¸t triÓn tèt.
e. Kü thuËt gi©m cµnh
d. Kü thuËt pha vµ nhóng thuèc
• Cµnh gi©m sau khi ®ưîc c¾t ta nhóng ngay vµo thuèc vµ • Hång lµ lo¹i c©y th©n gç tư¬ng ®èi khã ra rÔ khi gi©m, v× ®em gi©m ra gi¸ thÓ ®· ®îc ®ãng s½n trong bÇu ni l«ng vËy muèn kÝch thÝch cµnh gi©m ra rÔ nhanh ta dïng 1 hoÆc khay nhùa. trong 2 lo¹i thuèc ®iÒu tiÕt sinh trưëng lµ IAA vµ NAA nång ®é tõ 1000-2500ppm. • Chó ý c¾m cµnh ®øng th¼ng, c¾m s©u tõ 1-1,5 cm, c¾m ngay ng¾n kh«ng ®ưîc ®æ nghiªng ng¶. • Sau khi cµnh c¾t xong ®em nhóng nhanh vµo dung dÞch ®· • Kho¶ng c¸ch gi©m tõ 4-5 cm kÓ c¶ trong khay ®ãng bÇu ni pha s½n trong kho¶ng thêi gian tõ 3-5 gi©y råi c¾m vµo gi¸ l«ng (như vËy nÕu lµm bÇu ni l«ng gi©m hång nªn lµm lo¹i thÓ. cã ®ưêng kÝnh tõ 4- 5 cm). • Nªn pha dung dÞch b»ng dung m«i lµ cån 70o v× cån võa cã • Kh«ng nªn gi©m dµy qu¸ sÏ lµm kh¶ n¨ng quang hîp cña t¸c dông hoµ tan thuèc, võa cã t¸c dông diÖt khuÈn vÕt cµnh kÐm nhưng gi©m thưa qu¸ sÏ tèn diÖn tÝch. c¾t trưíc khi gi©m.
16
g. Kü thuËt ch¨m sãc cµnh gi©m
f. Kü thuËt phun tíi nưíc
• Sau khi gi©m 5-10 ngµy phun lªn cµnh gi©m 1 sè lo¹i thuèc • Cµnh gi©m lu«n lu«n ph¶i ®¶m b¶o ®é Èm kh«ng khÝ vµ ®é kÝch thÝch sinh trưëng vµ ph©n bãn qua l¸, 10 ngµy sau phun Èm gi¸ thÓ trong 3 ngµy sau gi©m ®¹t ë møc 100% lµ tèt l¹i 1 lÇn (mçi løa gi©m phun kho¶ng 2 lÇn) ®Ó duy tr× ®ưîc nhÊt. dinh dưìng. • Cµnh gi©m cã th©n l¸ xanh tèt, kh¶ n¨ng bËt léc sím, khi • Sau ®ã cã thÓ gi¶m ®é Èm gi¸ thÓ xuèng tõ 80 - 90 % . trång håi c©y nhanh, c©y sinh trưëng khoÎ. • Cã thÓ tíi Èm theo phư¬ng ph¸p thñ c«ng b»ng b×nh. • C¸c lo¹i chÕ phÈm thưêng sö dông cho c©y hång gi©m lµ Atonik 1,8% DD (10ml/b×nh 8 lÝt), ph©n bãn l¸ thiªn n«ng. • Phun nhÑ lªn bÒ mÆt luèng gi©m trong thêi gian 30 gi©y vµ • cø 30-40 phót phun1 lÇn ë ®iÒu kiÖn mïa kh« vµ 50- 60 phót Trong thêi gian gi©m cµnh ph¶i theo dâi s©u bÖnh trªn cµnh phun 1 lÇn ë ®iÒu kiÖn mïa Èm . gi©m, cã thÓ lµ tµn dư s©u bÖnh tõ c©y mÑ hoÆc cã thÓ lµ s©u bÖnh h¹i míi xuÊt hiÖn.

