Luận văn Thạc sĩ Sinh học: Thu nhận và thử nghiệm hoạt tính thủy phân sulfated polysaccharide từ hải sâm của một số fucoidanase tái tổ hợp

Luận văn này nghiên cứu về việc thu nhận và thử nghiệm hoạt tính thủy phân sulfated polysaccharide (PS) từ hải sâm bằng các fucoidanase tái tổ hợp. Mục tiêu là tìm kiếm các công cụ sinh học có khả năng thủy phân PS thành các oligosaccharide có hoạt tính sinh học, ứng dụng trong lĩnh vực y dược. Đề tài tập trung vào nghiên cứu biểu hiện, thu nhận, tinh sạch fucoidanase tái tổ hợp và xác định đặc tính xúc tác thủy phân PS từ hải sâm của các enzyme thu được.

Luận văn này tập trung vào việc nghiên cứu và khai thác tiềm năng của các enzyme fucoidanase tái tổ hợp trong việc thủy phân sulfated polysaccharide (PS) từ hải sâm. Mục tiêu chính là tạo ra các oligosaccharide có hoạt tính sinh học, ứng dụng trong lĩnh vực y dược.

Luận văn đã đạt được các kết quả chính sau:

1. **Biểu hiện, thu nhận và tinh sạch fucoidanase tái tổ hợp:** Nghiên cứu đã biểu hiện, thu nhận và tinh sạch thành công 5 loại fucoidanase tái tổ hợp (F1, F2, F3, F4, F5) với độ tinh sạch cao, đảm bảo hoạt tính thủy phân trên các cơ chất đặc hiệu.

2. **Khả năng thủy phân PS từ hải sâm:** Ba fucoidanase (F3, F4 và F5) đã được xác định có khả năng thủy phân PS từ loài hải sâm Holothuria spinifera, tạo ra các oligosaccharide có trọng lượng phân tử thấp. Điều này mở ra tiềm năng ứng dụng trong việc sản xuất các hợp chất có hoạt tính sinh học từ nguồn tài nguyên biển.

3. **Tối ưu hóa điều kiện phản ứng:** Nghiên cứu đã xác định được các điều kiện phản ứng tối ưu cho hoạt động xúc tác của fucoidanase F3 khi thủy phân PS từ H. spinifera, bao gồm thời gian phản ứng (15 phút), nhiệt độ phản ứng (35°C) và pH (6).

4. **Ảnh hưởng của ion canxi (Ca2+):** Kết quả cho thấy hoạt tính của fucoidanase F3 không phụ thuộc vào sự có mặt của ion canxi (Ca2+) trong phản ứng, giúp đơn giản hóa quy trình và giảm chi phí sản xuất.

5. ** Phân tích cây phát sinh loài ** Cây phát sinh loài được thực hiện từ kết quả phân của vùng D1 giữa PF1 và 13 fucoidanase khác bằng Phần mềm CLC Genomics workbench program 8.0 và cho kết quả PF1 thuộc cùng Nhánh A cùng với các fucoidanase xúc tác đặc hiệu với liên kết đường α(1→3)