0
Trường đại học nông lâm tp.HCM
Bộ môn CNSH
Tiểu luận:
SV: Vũ Thị Nguyệt
MSSV: 06126097
Lớp: DH06SH
1
MỤC LỤC
I. Đặt vấn đề
II. Tổng quan tài liệu
1. Định nghĩa bệnh PMWS
2. Tác nhân gây bệnh
3. Nguyên nhân lây nhiễm
4. Phương pháp PCR
a. Định nghĩa
b. Thiết kế primer cho phản ứng PCR
c. Thành phần phản ứng
d. Quy trình
e. Đọc kết quả
III. Vật liệu và phương pháp
IV. Kết luận
V. Tài liệu tham khảo
2
NỘI DUNG
I. Đặt vấn đề
Hội chứng còi cọc trên heo cai sữa được phát hiện năm 1991 ở Cananda,
trên đàn heo này một số heo cai sữa có biểu hiện còi cọc và hiệu quả điều trị kém.
Bệnh gây thiệt hại nhiều cho ngành chăn nuôi bắc Mỹ, nhiều nước ở châu Âu và
một số nước ở châu Á. Tại Việt Nam, nghiên cứu của Lâm Thị Thu Hương và
công tác viên (2004), thực hiện tại các trang trại chăn nuôi heo ở Thành phố HCM
và các tỉnh phụ cận cho thấy: khảo sát 25 mẫu hạch của những heo còi cọc sau cai
sữa để xét nghiệm, tỷ lệ dương tính với virus này chiếm 36% (9 mẫu). Điều này
làm chúng ta cần phải quan tâm đặc biệt đến căn bệnh.
Mặc dù căn bệnh diễn biến chậm nhưng tăng dần lên với mức độ nguy hại
cao. Sau khi đàn heo nhiễm bệnh thì tỷ lệ chết có khi lên đến 90 %.
Đây là một bệnh truyền nhiễm do virus gây ra. Virus PMWS là một DNA
virus chuỗi đơn, thuộc họ Circoviridae, thường được gọi là là porcine circovirus
(PCV). Khi nghiên cứu về Circovirus, người ta nhận thấy có đến 2 loại PCV:
PCV1 và PCV2. Do PCV1 và PCV2 cùng có thể hiện trên một heo và giữa chúng
có sự tương đồng nhất định về gen nên dịch tễ học phân tử cần phải phân biệt
chúng với nhau để có những đánh giá chính xác về tình hình dịch tễ PMWS.
Trong bài này đề cập đến việc sử dụng kĩ thuật PCR bằng việc sử dụng các
cặp mồi đặc hiệu tương ứng ở các vùng gen bảo tồn của PCV1, PCV2. Kỹ thuật
này cho phép cùng lúc phân biệt được PCV1 và PCV2.
II. Tổng quan tài liệu
1. Định nghĩa bệnh PMWS
Bệnh xảy ra trên heo cai sữa, heo từ 6- 14 tuần tuổi, đôi khi cũng có thể xảy
ra trên heo 3 tuần tuổi. Sau thời gian cai sữa heo bị èo uột, thở khó, tiêu chảy, gầy
còm, nuôi không lớn, da có màu trắng đôi khi vàng nhạt. Tử số trung bình từ 4%
đến 10%, nếu xảy ra ở dạng cấp tính thì số heo chết có thể lên đến 38%. Ở dạng
mãn tính xảy ra ở heo tơ vỗ béo, tử số ít nhưng heo không tăng trọng và chỉ đạt
trọng lượng khoảng 30 kg, trong khi những heo bình thường có thể đạt 100kg.
Người ta gọi đây là hội chứng còi cọc trên heo sau cai sữa (PMWS).
3
Hình ảnh heo bị mắc hội chứng PMWS
2. Tác nhân gây bệnh
• Circovirus thuộc họ virus có DNA mạch vòng, không có vỏ bao và chứa một
bộ gen vòng đơn.
• Là loại virus nhỏ nhất được biết đến và có khả năng sống sót cao trong môi
trường.
• Gồm có 2 type được tìm thấy ở heo, bao gồm type 1 (PVC1) và type 2
(PVC2).
• Qua nghiên cứu về gen của 2 loại virus này rất khác nhau về mặt di truyền với
bộ nhiễm sắc thể chỉ tương đồng khoảng 68-76%.
• PCV có cấu trúc gen đơn giản,
gồm hai khung chính mở đọc, rep và cap, được nhìn thấy ở hình dưới Gen cap
nằm ở sợi ngược của PCV và mã hóa các protein cấu trúc chính của vi rút
trong khi gen rep chỉ đạo tổng hợp của các protein Rep.
4
a. Circovirus type 1 (PVC-1):
Porcine circovirus loại 1 (PCV1) chứa 2 khung đọc mở mã hóa các
protein trong quá trình phiên mã, Rep và Cap và 1 vị trí cắt tại vị trí như
hình vẽ