BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
Đề tài “CẢI THIỆN ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY SERRATIA
MARCESCENS SH1 VÀ PHƯƠNG PHÁP THU HỒI SẮC
TỐ PRODIGIOSIN TỪ CANH TRƯỜNG”.
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : TS. Nguyễn Hoài Hương
Sinh viên thực hiện : Hồ Thị Bích Phương
MSSV: 1151100246 Lớp: 11DSH04
TP. Hồ Chí Minh, 2015
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi đƣợc thực hiện tại phòng
thí nghiệm khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm – Môi trƣờng, trƣờng đại học Công
nghệ TP.Hồ Chí Minh. Các số liệu và kết quả là trung thực, chƣa ai công bố.
Tôi xin chịu hoàn toàn trách nhiệm về lời cam đoan của mình trƣớc quý thầy cô
và nhà trƣờng.
Tp. Hồ Chí Minh, tháng 8, năm 2015
Sinh viên thực hiện
Hồ Thị Bích Phƣơng
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CẢM ƠN
Tận đáy lòng con xin gửi vạn lời cảm ơn đến cha mẹ, cha mẹ đã gian lao nuôi
dạy con thành ngƣời và là ngƣời thầy đầu đời của con. Cha mẹ luôn là chỗ dựa vững
chắc nhất của con, là ngƣời giúp con đứng vững sau mỗi lần vấp ngã, là nguồn động
viên, động lực để con tiếp tục phấn đấu trong cuộc sống.
Với lòng biết ơn sâu sắc. Em xin chân thành cảm ơn toàn thể quý Thầy Cô Khoa
Công nghệ sinh học – Môi trƣờng – Thực phẩm, cùng toàn thể Thầy Cô Trƣờng Đại
học Công nghệ TP. Hồ Chí Minh đã nhiệt tình giảng dạy và truyền đạt cho em những
kiến thức quý báu về cơ sở ngành cũng nhƣ chuyên ngành từ ngày em bƣớc chân vào
giảng đƣờng đại học.
Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn Hoài Hƣơng ngƣời đã luôn tận
tình chỉ dẫn và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành phần thực nghiệm của
đồ án.
Em xin chân thành cảm ơn thầy Huỳnh Văn Thành và thầy Nguyễn Trung Dũng
đã tạo điều kiện thuận lợi cho em thực hiện đồ án tại phòng thí nghiệm Khoa Công
nghệ sinh học - Môi trƣờng – Thực phẩm, Trƣờng Đại học Công nghệ TP. Hồ Chí
Minh.
Cảm ơn tất cả các bạn lớp 11DSH04 và các bạn làm đồ án tại phòng thí nghiệm
Khoa Công nghệ sinh học - Môi trƣờng – Thực phẩm đã luôn khích lệ, động viên và
giúp đỡ mình trong suốt quá trình học tập tại trƣờng và trong quá trình làm đồ án tốt
nghiệp.
Xin chân thành cảm ơn!
TP. Hồ Chí Minh, tháng 8 năm 2015
SVTH: Hồ Thị Bích Phƣơng
Đồ án tốt nghiệp
i
MỤC LỤC
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .............................................................................. v
DANH MỤC HÌNH ẢNH ...................................................................................... vi
MỤC LỤC BẢNG ................................................................................................ viii
LỜI MỞ ĐẦU .......................................................................................................... 9
CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .............................................................. 12
1.1 Tổng quan hợp chất thứ cấp từ vi sinh vật ........................................................... 12
1.1.1. Hợp chất thứ cấp .......................................................................................... 12
1.1.2. Triển vọng và tiềm năng sản xuất hợp chất thứ cấp từ vi sinh vật .............. 12
1.2 Tổng quan prodigiosin ...................................................................................... 15
1.2.1. Khái niệm về prodigiosin ............................................................................. 15
1.2.2. Cấu trúc và đặc điểm của prodigiosin .......................................................... 16
1.2.3. Hoạt tính sinh học của prodigiosin .............................................................. 18
1.3. Tổng quan về Serratia marcescens .................................................................... 24
1.3.1. Phân loại Serratia marcescens ..................................................................... 24
1.3.2. Đặc điểm của Serratia marcescens ............................................................. 25
1.3.4 Một số hợp chất đƣợc tổng hợp bởi Serratia marcescens ............................ 29
1.3.5 Tổng quan về quorum sensing trong S. marcescens ..................................... 31
1.4. Cơ chế sinh tổng hợp prodigiosin ....................................................................... 32
1.4.1. Cơ chế tổng hợp prodigiosin ........................................................................ 32
1.4.2. Yếu tố ảnh hƣởng đến tổng hợp prodigiosin................................................ 34
Đồ án tốt nghiệp
ii
1.4.3. Điều kiện tổng hợp prodigiosin .................................................................... 38
1.4.4. Thu nhận, tinh sạch và định lƣợng prodigiosin............................................ 39
1.5 Tiềm năng sản xuất prodigiosin của Serratia marcescens ................................... 42
CHƢƠNG 2. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU45
2.1. Thời gian và địa điểm .......................................................................................... 45
2.1.1. Thời gian ...................................................................................................... 45
2.1.2. Địa điểm ....................................................................................................... 45
2.2. Vật liệu ................................................................................................................ 45
2.2.1. Nguồn vi sinh vật ......................................................................................... 45
2.2.2. Môi trƣờng nuôi cấy và hóa chất sử dụng .................................................... 45
2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu ..................................................................................... 46
2.4 Bố trí thí nghiệm .................................................................................................. 47
2.5.1 Khảo sát chủng nuôi cấy ................................................................................... 49
2.5.1 Kiểm tra độ thuần khiết ................................................................................. 49
2.5.2 Kháng sinh đồ ............................................................................................... 49
2.6 Xác định điều kiện lên men .................................................................................. 49
2.7.1 Khảo sát vận tốc lắc trong nuôi cấy .............................................................. 52
2.7.2 Xác định pH tối ƣu cho môi trƣờng lên men ................................................ 53
2.7.3 Khảo sát sự ảnh hƣởng của nồng độ muối NaCl .......................................... 53
2.7.4 Khảo sát sự ảnh hƣởng của phƣơng pháp đồng nuôi cấy ............................ 54
2.7.5 Khảo sát sự ảnh hƣởng của sản phẩm Quorum sensing................................ 55
2.8 Thu hồi sản phẩm thô ........................................................................................... 56