ĐỊNH LƢỢNG IgE ĐẶC HIỆU
Dermatophagoides pteronyssinus máu
I. NGUYÊN LÝ
IgE là một globulin miễn dịch có vai trò quan trọng trong miễn dịch với ký sinh
trùng như giun sán… Ngoài ra nó còn có vai trò trong các quá trình dị ứng của cơ thể
như phản vệ và một số bệnh dị ứng như hen, viêm mũi dị ứng…
IgE đặc hiệu Dermatophagoides pteronyssinus được định lượng bằng phương
pháp miễn dịch hóa phát quang. Quy trình xét nghiệm IgE đặc hiệu
Dermatophagoides pteronyssinus chia thành 2 chu kỳ:
- Chu kỳ đầu: nghiệm phẩm và dị nguyên đặc hiệu Dermatophagoides pteronyssinus
đã đánh dấu ligand được ủ với hạt gắn với anti-ligand trong 30 phút. IgE đặc hiệu
trong nghiệm phẩm gắn với các dị nguyên, sau đó phức hợp này liên kết với anti-
ligand trên hạt. Các thành phần không gắn kết được loại bỏ bằng cách rửa ly tâm;
- Chu kỳ thứ hai: kháng thể đơn dòng kháng IgE từ chuột gắn với enzyme xúc tác
được ủ với phức hợp trên trong 30 phút. Kháng thể này sẽ kết hợp với IgE đã cố định
trên hạt, các thành phần không liên kết được loại bỏ bằng cách rửa ly tâm. Khi gặp
enzyme, cơ chất hoá phát quang sẽ phát quang, cường độ phát quang tỉ lệ thuận với
nồng độ IgE.
II. CHUẨN BỊ
1. Ngƣời thực hiện: người thực hiện kỹ thuật có trình độ phù hợp
2. Phƣơng tiện, hóa chất
2.1. Phương tiện
- Máy xét nghiệm: IMMULITE 2000, Beckman Access, Cobas e411,
- Máy ly tâm có tốc độ vòng quay 3000-5000 vòng/phút
- Tủ lạnh
- Dụng cụ lấy máu: Bông cồn, bơm tiêm, ống đựng máu, găng tay…
2.2. Hóa chất
+ Gói hạt có gắn anti-ligand;
+ Hộp thuốc thử IgE đặc hiệu;
+ Chất chuẩn: kháng thể IgE có nguồn gốc từ người, 2 mức nồng độ (thấp và cao);
+ Mẫu nội kiểm: kháng thể IgE có nguồn gốc từ người, 2 mức nồng độ;
+ Hộp dị nguyên đặc hiệu Dermatophagoides pteronyssinus có mã vạch;
+ Cơ chất hóa phát quang.
- Chú ý: sử dụng nước cất hoặc nuớc khử ion khi phân tích nghiệm phẩm; bảo
quản hóa chất ở 2-8oC, nơi khô thoáng, tránh ánh sáng mặt trời.
3. Ngƣời bệnh: người bệnh và người nhà người bệnh cần được giải thích về mục
đích của việc lấy máu để làm xét nghiệm.
