ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
VŨ THỊ HƢƠNG QUỲNH
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG ANTHOCYANIN TRONG MỘT SỐ LOẠI
RAU BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÍ
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Hà Nội - 2015
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
---------------------
VŨ THỊ HƢƠNG QUỲNH
XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG ANTHOCYANIN TRONG MỘT SỐ LOẠI RAU
BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÍ
Chuyên ngành: Hóa phân tích
Mã số: 60440118
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:
PGS.TS. NGUYỄN XUÂN TRUNG
Hà Nội – 2015
LỜI CẢM ƠN
Lời đầu tiên cho phép tôi được bày tỏ lòng biết ơn chân thành nhất đến
PGS.TS. Nguyễn Xuân Trung, NCS Vũ Thị Trang đã giao đề tài, chỉ dẫn tận tình và
tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt quá trình làm luận văn.
Tôi in được g i lời cảm ơn chân thành tới ban lãnh đạo Viện ki m nghiệm
An toàn vệ sinh th c ph m Quốc gia, các anh chị trong Khoa chất lượng ph gia và
chất h trợ chế biến th c ph m - Viện Ki m nghiệm an toàn vệ sinh th c ph m
Quốc gia đã quan tâm, giúp đỡ, tạo điều kiện cho tôi được học tập và nghiên c u
trong môi trường hiện đại.
Tôi in bày tỏ lòng biết ơn tới các thầy cô giảng dạy tại khoa Hoá, đặc biệt là
các thầy cô trong bộ môn Hoá Phân tích đã cho tôi những kiến th c quý giá trong
quá trình học tập và th c hiện đề tài này.
Cuối c ng, tôi in g i lời biết ơn sâu s c tới gia đình, bạn b đã luôn bên
cạnh chia s kh khăn, động viên và giúp đỡ tôi trong học tập cũng như trong cuộc
sống.
Do thời gian th c hiện đề tài c hạn nên không tránh những thiếu s t, rất
mong nhận được ý kiến đ ng g p c a thầy cô và các bạn đ luận văn này được hoàn
thiện hơn.
Hà Nội, ngày 30 tháng 11 năm 2015
Học viên
Vũ Thị Hƣơng Quỳnh
MỤC LỤC
MỞ ĐẦU .................................................................................................................... 1
CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN ..................................................................................... 3
1.1. Giới thiệu chung về anthocyanin ................................................................................ 3
1.1.1. Cấu trúc h a học c a anthocyanin ................................................................ 3
1.1.2. Tính chất c a anthocyanin ............................................................................ 5
1.1.3. Tác d ng c a anthocyanin ............................................................................ 6
1.1.4. S phân bố c a anthocyanin ......................................................................... 7
1.2. Một số phƣơng pháp xác định anthocyanin ............................................................. 8
1.2.1. Phương pháp pH vi sai .................................................................................. 8
1.2.2. Phương pháp s c ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) ......................................... 9
CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM ............................................................................. 13
2.1. Mục tiêu ........................................................................................................................ 13
2.2. Nội dung nghiên cứu ................................................................................................... 13
2.3. Đối tƣợng nghiên cứu ................................................................................................. 13
2.4. Chất chuẩn, hoá chất, thiết bị ................................................................................... 13
2.4.1. Chất chu n .................................................................................................. 13
2.4.2. Hoá chất ...................................................................................................... 13
2.4.3. Thiết bị ........................................................................................................ 14
2.5. Phƣơng pháp nghiên cứu .......................................................................................... 15
2.6. Thẩm định phƣơng pháp .......................................................................................... 16
CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ......................................................... 17
3.1. Tối ƣu các điều kiện xác định anthocyanin trên hệ thống HPLC ..................... 17
3.1.1. Chọn detector .............................................................................................. 17
3.1.2. Chọn bước s ng phát hiện .......................................................................... 18
3.1.3. Chọn cột tách .............................................................................................. 19
3.1.4. Chọn th tích bơm mẫu ............................................................................... 20
3.1.5. Khảo sát thành phần pha động ................................................................... 21
3.1.6. Khảo sát nồng độ a it trong pha động ........................................................ 22
3.1.7. Khảo sát chương trình r a giải ................................................................... 23
3.1.8. Khảo sát tốc độ pha động ............................................................................ 27
3.2. Xây dựng quy trình xử lý mẫu ................................................................................. 28
3.2.1. Khảo sát ảnh hưởng c a thời gian đến quá trình th y phân ....................... 30
3.2.2. Khảo sát ảnh hưởng c a nhiệt độ đến quá trình th y phân ......................... 31
3.2.3. Khảo sát tỷ lệ dung môi chiết mẫu ............................................................. 33
3.3. Thẩm định phƣơng pháp phân tích ........................................................................ 34
3.3.1. Tính đặc hiệu/chọn lọc ................................................................................ 34
3.3.2. Khoảng tuyến tính ....................................................................................... 36
3.3.3. Độ lặp lại ..................................................................................................... 38
3.3.4. Độ thu hồi ................................................................................................... 40
3.4. Ứng dụng phƣơng pháp xác định anthocyanin trong một số rau củ ............... 43
TÀI LIỆU THAM KHẢO ...................................................................................... 46
PHỤ LỤC
