LOGO
www.themegallery.com
Southern blot
Sinh học phân tử
Thực hiện:
Đỗ Đức Anh - Ng.Thị Điểm - Ng.Phan Thị Hoàng Kim - Hồng Vĩnh Thành - Mai Hoàng Yến
www.themegall
LOGO
N i dung seminarộ
I
II
3
Giới thiệu về phương pháp Southern Blot
Lai phân tử
III Southern blot
2
1
3
2
1
Khái niệm
Các kiểu lai phân tử
Các yếu tố ảnh hưởng
Nguyên lí và điều kiện
Mẫu dò
Qui trình
Ứng dụng
IV
www.themegall
LOGO
I. Gi i thi u chung v ph ng pháp Southern blot.ớ ệ ề ươ
-Đây là ph ng pháp cho phép xác đ nh đ c s có m t c a ươ ị ượ ự ặ ủ
Đây là ph ng pháp cho phép xác đ nh đ c s có m t c a ươ ị ượ ự ặ ủ
nh ng trình t nucleotide trên m t đo n ADN nào đó, trong ữ ự ộ ạ
nh ng trình t nucleotide trên m t đo n ADN nào đó, trong ữ ự ộ ạ
h n h p các đo n ADN khác nhau ỗ ợ ạ
h n h p các đo n ADN khác nhau ỗ ợ ạ
-Do E.M.Southern đ xu t vào năm 1975, t i đ i h c ề ấ ạ ạ ọ
Edingburd.
-Đ c tri n khai nh 1 s kĩ thu t n n t ng c a công ngh ượ ể ờ ố ậ ề ả ủ ệ
sinh h c phân t nh :ọ ử ư
•Tách chi t gen.ế
•PCR
•Th m tích các phân t acid nucleotide lên màng lai ẩ ử
(blot).
•Lai phân t ( lai v i m u dò đ c hi u)ử ớ ẫ ặ ệ
•…
Southern blot
www.themegall
LOGO
II. Lai phân tử
1. Khái ni mệ
Là hi n t ng 2 m ch DNA sau khi đã tách r i, s ệ ượ ạ ờ ẽ
k t h p l i v i nhau đi u ki n nhi t đ đ c làm ế ợ ạ ớ ở ề ệ ệ ộ ượ
gi m t t , k t h p v i đi u ki n thí nghi m thích ả ừ ừ ế ợ ớ ề ệ ệ
h p.ợ
Đ c đi m:ặ ể
–Đ c hi u tuy t đ i: s b t c p ch x y ra ặ ệ ệ ố ự ắ ặ ỉ ả
gi a 2 trình t hoàn toàn b sung cho nhau.ữ ự ổ
–Các trình t b sung có th là DNA hay RNA ự ổ ể
pt DNA-DNA, RNA-RNA, các phân t lai ử ử
DNA-RNA
www.themegall
LOGO
Các kiểu lai
phân tử
Lai trên
pha rắn
Lai trong
pha lỏng
Lai tại chỗ
Southern blot