Kĩ Thuật Biến Đổi Gen Trên Tế Bào
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
GV: Đào Thị Thanh Thủy Email: dttthuy@hcmus.edu.vn
NỘI DUNG
Thành tựu
Nguyên tắc
Phương pháp
Đánh giá
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Thành tựu của kĩ thuật biến đổi gen trên tế bào
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Sản xuất protein tái tổ hợp
Kháng thể
Hormone
Yếu tố tăng trưởng
cytokine
vaccine
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Mô hình động vật bệnh lí
NOD-SCID Mouse
Humanized mouse
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn NUDE Mouse
http://functionalmedsystem.com/en/nobel-prizes-functional-medicine/
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Đứa trẻ có 3 bố mẹ
Nature, Zhang et al, 2016
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Liệu pháp gen trong điều trị bệnh
http://www.moderncancerhospital.com/cancer-treatments/targeted-gene-therapy/ Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17
NGUYÊN TẮC
2
3
1
4
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Tạo vector chuyển gen
Gen chuyển
Ø Tổng hợp nhân tạo
Ø Ngân hàng gen
Ø Thu nhận từ tế bào
Vector
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
PHƯƠNG PHÁP CHUYỂN GEN TRÊN TẾ BÀO
Vật lí
Virus
Hóa học
- Điện biến
- Canxi
nạp
- Súng bắn
gen - Vi tiêm
phosphate - Liposome - Lipoplex - ….
-Vectơ retrovirus -Vectơ adenovirus -Vectơ adeno-associated virus -Vectơ herpes simplex virus -Vectơ baculovirus
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Vật lí
Điện biến nạp
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Vật lí
Súng bắn gen
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Vật lí
Vi tiêm
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Three-parent baby
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
John Gurdon, Nobel Prize 2012.
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Hóa học
Mechanism of chemical method mediated DNA delivery in animal cells
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Lyposome
Hóa học
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Retrovirus
Virus
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Lentivirus
Virus
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
iPSCs – Yamanaka et al (2006)
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Tái thiết lập chương trình trực tiếp
Breakthrough in research on pluripotent stem cells and their application in medicine, NCBI, Valdimarsdóttir G, Richter A (2015)
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
CRISPR/Cas9 gene editing
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
CRISPR/Cas9 gene editing
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Ứng dụng CRISPR/Cas9
Ứng dụng y sinh
Chỉnh sửa gen
Điều trị ung thư
Y học tái tạo
- Loại bỏ - Chèn - Sửa đổi
nucleotide
- Knock down
gen
- Hoạt hóa gen Im lặng gen -
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
Chuyển gen thông qua tinh trùng
Marialuisa Lavitrano, Sperm-mediated gene transfer, Reproduction, Fertility and Development 18(2) 19-23 https://doi.org/10.1071/RD05124
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ SỰ CHUYỂN GEN THÀNH CÔNG
Định tính
Đặc điểm hình thái
PCR/RT-PCR
Định lượng
Flow cytometry
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
11/8/17 Đào Thị Thanh Thuỷ - dttthuy@hcmus.edu.vn
