ĐỊNH LƢỢNG RENIN MÁU BẰNG KỸ THUẬT ELISA
I. NGUYÊN LÝ
Renin được định lượng bằng kỹ thuật ELISA kiểu sandwich .
Kháng thể đơn dòng của chuột đặc hiệu với rennin được phủ trên đĩa 96 giếng.
Các dung dịch chuẩn và mẫu thử được thêm vào các giếng, kháng thể đa dòng của
dê kháng rennin gắn với biotin được thêm vào; tiếp theo là rửa bởi đệm muối
phosphate. Phức hợp avidin-biotin-peroxidase được thêm vào, các thành phần không
gắn bị loại bỏ bằng rửa bởi đệm muối phosphate. Cơ chất TMB được thêm vào,
peroxidase xúc tác chuyển TMB thành sản phẩm màu xanh da trời. Khi cho dung
dịch acid để dừng phản ứng, màu chuyển sang vàng. Đậm độ màu vàng tỷ lệ thuận
với nồng độ rennin trong mẫu thử.
II. CHUẨN BỊ
1. Ngƣời thực hiện:
Người thực hiện kỹ thuật có trình độ phù hợp
2. Phƣơng tiện, hóa chất:
- Hệ thống ELISA (máy ủ, máy rửa và máy đọc).
- Máy ly tâm
- Tủ lạnh
- Dụng cụ lấy máu
- Kit định lượng renin
- Vật liệu kiểm tra chất lượng (QC 1,2)
- Pipet
- Ống nghiệm
- Nước cất
3. Ngƣời bệnh: Người bệnh và gười nhà người bệnh cần được chuẩn bị và giải thích
về mục đích của việc lấy máu để làm xét nghiệm.
4.Phiếu xét nghiệm:
- Phiếu xét nghiệm theo đúng quy định của Bộ Y tế và bệnh viện
- Trên phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin của người bệnh: họ và tên,
tuổi, giới tính, số giường, khoa phòng, chẩn đoán, xét nghiệm cần làm.
- Trên phiếu xét nghiệm cần có: chữ ký và họ tên bác sĩ chỉ định xét nghiệm,
họ tên người lấy mẫu, thời gian chỉ định xét nghiệm và thời gian lấy mẫu
bệnh phẩm.
III.CÁC BƢỚC TIẾN HÀNH
1. Lấy bệnh phẩm:
- Huyết thanh, huyết tương chống đông EDTA hoặc heparin.
- Lấy máu tĩnh mạch và để tạo cục đông trước khi ly tâm lấy huyết thanh.
