Paragonimus (Sán lá phổi) Ab miễn dịch bán tự động

Chia sẻ: Thẩm Đường | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:3

Thêm vào BST

Báo xấu

2
lượt xem 1
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Tài liệu hướng dẫn quy trình kỹ thuật "Paragonimus (Sán lá phổi) Ab miễn dịch bán tự động" thông tin đến bạn đọc những nội dung về: mục đích và nguyên lý, chuẩn bị phương tiện - hóa chất, phiếu xét nghiệm, các bước tiến hành kỹ thuật, nhận định kết quả, những sai sót và xử trí,... Mời các bạn cùng tham khảo!

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Paragonimus (Sán lá phổi) Ab miễn dịch bán tự động

Paragonimus (Sán lá phổi) Ab miễn dịch bán tự động I. MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ 1. Mục đích Phát hiện kháng thể IgG kháng với Paragonimus có trong mẫu huyết thanh. 2. Nguyên lý Phát hiện kháng thể IgG kháng với Paragonimus có trong mẫu huyết thanh bằng kỹ thuật miễn dịch gắn men (ELISA). II. CHUẨN BỊ 1. Người thực hiện - Người thực hiện: Nhân viên xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ ho c chứng nhận v chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng. - Người nhận định và phê duyệt kết quả: Người thực hiện có trình độ đại học ho c sau đại học v chuyên ngành Vi sinh/Ký sinh trùng. 2. Phương tiện, hóa chất (Ví dụ hoặc tương đương) 2.1. Trang thiết bị - Máy đọc ELISA. - Máy ly tâm - T lạnh 2ºC -8ºC - Micropipette 10 µl, 200 µl, 1000 µl. - Giá đựng ống máu - Ống nghiệm. - Ống đong chia vạch. - Giấy thấm. 2.2. Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm) STT Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao Đơn vị 1 Giấy xét nghiệm Tờ 2 Tube lấy bệnh phẩm Cái 3 Mũ Cái 4 Khẩu trang Cái 5 Găng tay Đôi 6 Găng tay xử lý dụng cụ Đôi 7 Quần áo bảo hộ Bộ 241
8 Bút viết kính Cái 9 Bút bi Cái 10 Sổ lưu kết quả xét nghiệm Quyển 11 Dung dịch rửa tay ml 12 Khăn lau tay Cái 13 Panh Cái 14 Khay đựng bệnh phẩm Cái 15 Hộp vận chuyển bệnh phẩm Cái 16 Đầu côn 10 ml Cái 17 Đầu côn 200 ml Cái 18 Đầu côn 1000 ml Cái 19 Pipet nhựa Cái 20 Sinh phẩm chẩn đoán (QC) Test 21 Sinh phẩm chẩn đoán Test 22 Ngoại kiểm (EQAS) (nếu thực hiện) * * Ghi chú: - Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm). 3.Bệnh phẩm Huyết thanh 4.Phiếu xét nghiệm Đi n đầy đ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu III. Các bước tiến hành 1. Lấy bệnh phẩm Theo đúng quy định c a chuyên ngành Vi sinh (xem Phụ lục). 2. Tiến hành kỹ thuật Bộ sinh phẩm chẩn đoán c a Scimedx (USA) (VD) 2.1. Lấy bộ kít ra khỏi t lạnh, lấy đ số giếng cần làm. 2.2. Nhỏ chứng dương, chứng âm và mẫu huyết thanh đã pha loãng 1/64 vào mỗi giếng. 2.3. nhiệt độ 15°C -25°C trong 10 phút 2.4. Rửa với dung dịch rửa đã pha loãng, lắc sạch nước. 242
2.5. Thêm Conjugate vào mỗi giếng, nhiệt độ phòng trong 5 phút. 2.6. Rửa với dung dịch rửa đã pha loãng, lắc sạch nước. 2.7. Nhỏ TMB vào mỗi giếng nhiệt độ phòng trong 5 phút. 2.8. Nhỏ Stop Solution. IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ 1. Đọc kết quả Cài đ t bước sóng máy đọc là 450nm/650nm-620nm. Đọc kết quả theo hướng dẫn c a bộ kít. 2. Kiểm tra chất lượng - Kiểm tra chất lượng cho phép đánh giá sự ổn định c a bộ kít. Bộ kít không được sử dụng nếu bất kỳ chứng dương ho c chứng âm rơi ra khỏi ngưỡng quy định. V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ 1. Sai sót Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả ho c dương tính giả, thông thường do: - Thực hiện sai các bước trong quy trình hướng dẫn. - Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo b i huyết thanh/ huyết tương có nồng độ kháng thể cao. - Dung dịch cơ chất bị nhiễm b i các tác nhân oxid hoá (thuốc tẩy, ion kim loại v.v…) - Dung dịch dừng phản ứng bị nhiễm bẩn. 2. Xử trí - Tuân th đúng các bước qui trình hướng dẫn c a nhà sản xuất và hướng dẫn v độ ổn định hóa chất xét nghiệm trong bộ sinh phẩm sử dụng. Kiểm tra và vệ sinh máy rửa thường xuyên trước và sau khi làm xét nghiệm. 243