BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP. HỒ CHÍ MINH
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
TỐI ƯU HÓA QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN TRÙN QUẾ
VÀ ỨNG DỤNG VÀO CHẾ PHẨM LÊN MEN
TỪ VI KHUẨN BACILLUS SP. TRONG
THỨC ĂN CHĂN NUÔI THỦY SẢN
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : CN. ĐỖ THỊ TUYẾN
Sinh viên thực hiện : TRẦN THỊ NHỚ
MSSV: 1151110243 Lớp: 11DSH03
TP. Hồ Chí Minh, 2015
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan những nội dung trong bài đồ án là do tôi thực hiện dưới sự
hướng dẫn trực tiếp của cô CN. Đỗ Thị Tuyến. Tôi cam đoan các kết quả nghiên cứu
đưa ra trong luận án này dựa trên các kết quả thu được trong quá trình thực hiện đề
tài, hoàn toàn trung thực không sao chép bất kì kết quả nghiên cứu nào của tác giả
khác. Nội dung trong đồ án có tham khảo và sử dụng một số thông tin, tài liệu từ các
nguồn sách hay công trình nghiên cứu khác đều được đều được trích dẫn rõ ràng và
liệt kê trong danh mục tài liệu tham khảo. Nếu có vi phạm quy chế hay gian trá tôi
xin chịu hoàn toàn trách nhiệm.
Sinh viên thực hiện
Trần Thị Nhớ
Đồ án tốt nghiệp
LỜI CẢM ƠN
Lời đầu tiên tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành và sự tri ân sâu sắc đối với Ban
Giám Hiệu cùng các thầy cô của trường Đại Học Công Nghệ Thành Phố Hồ Chí
Minh, đặc biệt là các thầy cô khoa Công Nghệ Sinh Học – Thực Phẩm – Môi Trường
đã tận tình truyền đạt kiến thức trong những năm tôi học tập tại trường cũng như đã
tạo điều kiện cho tôi thực tập để tích lũy kinh nghiệm cho công việc sau này.
Để hoàn thành tốt khóa luận này tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất đến Cô
CN. Đỗ Thị Tuyến đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ cũng như quan tâm, động viên và
tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thời gian nghiên cứu và hoàn thành
khóa luận tốt nghiệp. Tôi xin chân thành cảm ơn ban lãnh đạo Viện Sinh Học Nhiệt
Đới đã cho phép và tạo điều kiện thuận lợi để tôi thực hiện đề tài.
Bên cạnh sự cố gắng hết mình của bản thân, tôi cũng thầm biết ơn sự ủng hộ,
quan tâm và động viên của gia đình, bạn bè – những người thân yêu luôn là chỗ dựa
vững chắc cho tôi trong suốt thời gian qua.
Cuối cùng tôi xin kính chúc quý Thầy, Cô dồi dào sức khỏe và thành công trong
sự nghiệp cao quý. Đồng kính chúc các Cô, Chú, Anh, Chị trong Viện Sinh Học Nhiệt
Đới luôn dồi dào sức khỏe, đạt được nhiều thành công tốt đẹp trong công việc.
Tôi xin chân thành cảm ơn!
TP. HCM, ngày 15 tháng 08 năm 2015
Sinh viên thực hiện
Trần Thị Nhớ
Đồ án tốt nghiệp
i
MỤC LỤC
Danh mục các chữ viết tắt ............................................................................................ v
Danh mục các hình ...................................................................................................... vi
Danh mục các bảng ....................................................................................................vii
Danh mục các sơ đồ ................................................................................................. viii
Danh mục các đồ thị ................................................................................................. viii
Chương 1 MỞ ĐẦU ................................................................................................... 1
1.1. Đặt vấn đề .............................................................................................................. 1
1.2. Mục đích ................................................................................................................ 2
1.3. Yêu cầu .................................................................................................................. 2
1.4. Phương pháp nghiên cứu ....................................................................................... 2
1.5. Kết cấu của đồ án .................................................................................................. 2
Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU ........................................................................ 3
2.1. Khái quát về vi khuẩn Bacillus sp. ........................................................................ 3
2.1.1. Phân loại ............................................................................................................. 3
2.1.2. Đặc điểm chung của chi Bacillus ....................................................................... 4
2.1.3. Khả năng tạo bào tử ........................................................................................... 4
2.1.4. Ứng dụng của vi khuẩn Bacillus sp. trong nuôi trồng thủy sản ........................ 6
2.1.5. Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chế phẩm từ vi khuẩn Bacillus sp. ............ 7
2.2. Enzyme protease.................................................................................................... 8
2.2.1. Giới thiệu chung về protease.............................................................................. 8
2.2.2. Phân loại protease ............................................................................................. 10
2.2.3. Chức năng sinh học của protease vi sinh vật ................................................... 12
2.2.4. Môi trường và phương pháp nuôi cấy vi sinh vật tổng hợp Protease ............. 13
2.2.5. Các yếu tố môi trường ảnh hưởng đến khả năng sinh enzyme protease ......... 15
2.2.6. Ứng dụng protease vi sinh vật.......................................................................... 16
2.3. Trùn quế ............................................................................................................... 17
2.3.1. Phân loại và đặc điểm của trùn quế ................................................................. 17
2.3.2. Đặc tính sinh học của trùn quế ......................................................................... 18
Đồ án tốt nghiệp
ii
2.3.3. Đặc tính sinh lý của trùn quế ........................................................................... 19
2.3.4. Sự sinh sản và phát triển .................................................................................. 20
2.3.5. Tác dụng của trùn quế ...................................................................................... 20
2.3.6. Bổ sung Trùn quế và BIO – T trong chăn nuôi ............................................... 22
2.4. Chế phẩm probiotics ............................................................................................ 24
2.4.1. Định nghĩa về Probiotics .................................................................................. 24
2.4.2.Vai trò của probiotics trong chăn nuôi thủy sản ............................................... 24
Chương 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP ......................................................... 26
3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu....................................................................... 26
3.2. Vật liệu, hóa chất và dụng cụ nghiên cứu ........................................................... 26
3.2.1. Vật liệu ............................................................................................................. 26
3.2.2. Hóa chất ............................................................................................................ 27
3.2.3. Thiết bị và dụng cụ nghiên cứu ........................................................................ 28
3.3. Môi trường phân lập, định danh và giữ giống .................................................... 28
3.4. Phương pháp nghiên cứu ..................................................................................... 29
3.4.1. Sơ đồ tổng quan thí nghiệm ............................................................................. 29
3.4.2. Phương pháp phân lập Bacillus sp. .................................................................. 30
3.4.2.1. Hoạt hóa giống Bacillus sp. .......................................................................... 30
3.4.2.2. Phân lập các chủng Bacillus sp ..................................................................... 30
3.4.2.3. Cấy giữ gống Bacillus sp.. ............................................................................ 30
3.4.2.4. Tăng sinh chủng Bacillus sp. ........................................................................ 30
3.4.2.5. Xác định mật độ tế bào bằng phương pháp đếm khuẩn lạc ......................... 31
3.4.3. Phương pháp định danh bằng đặc điểm sinh lý, sinh hóa ............................... 31
3.4.3.1. Phương pháp nhuộm Gram ........................................................................... 31
3.4.3.2. Test khả năng di động ................................................................................... 33
3.4.3.3. Test catalase .................................................................................................. 33
3.4.3.4. Thử nghiệm khả năng sinh Indol .................................................................. 34
3.4.3.5. Thử nghiệm Methyl Red (MR) ..................................................................... 35
3.4.3.6. Thử nghiệm khả năng sử dụng đường .......................................................... 36