BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ TP. HCM
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
KHẢO SÁT MỘT SỐ YẾU TỐ
ẢNH HƯỞNG ĐẾN HOẠT TÍNH CELLULASE CỦA CÁC
CHỦNG VI KHUẨN PHÂN LẬP TỪ NƯỚC THẢI
NHÀ MÁY GIẤY
Ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Giảng viên hướng dẫn : CN. Nguyễn Hoàng Mỹ
Sinh viên thực hiện : Bùi Thị Trang
MSSV: 107111189 : Lớp: 07DSH4
TP. Hồ Chí Minh, 2011
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
i
SVTH: BÙI THỊ TRANG
MỤC LỤC
Nội dung Trang
Mục lục ............................................................................................................................ i
Danh mục các chữ viết tắt ............................................................................................. .iii
Danh mục các bảng ......................................................................................................... iv
Danh mục hình ảnh .......................................................................................................... v
LỜI MỞ ĐẦU ................................................................................................................ vi
Chƣơng 1. TỔNG QUAN .............................................................................................. 3
1.1 Tổng quan về công nghiệp sản xuất giấy ........................................................... 3
1.1.1 Giới thiệu ..................................................................................................... 3
1.1.2 Công nghệ sản xuất bột giấy ........................................................................ 4
1.1.3 Công nghệ sản xuất giấy .............................................................................. 6
1.2 Tổng quan về nước thải nhà máy giấy ............................................................... 7
1.2.1 Giới thiệu về nước thải nhà máy giấy .......................................................... 7
1.2.2 Thành phần tính chất ................................................................................... 7
1.2.3 Ảnh hưởng của nước thải nhà máy giấy .................................................... 10
1.2.4 Phương pháp xử lý nước thải ........................................................................ 11
1.3 Tổng quan về cellulose ..................................................................................... 13
1.3.1 Thành phần cấu tạo .................................................................................... 13
1.3.2 Tính chất .................................................................................................... 15
1.3.3 Enzyme cellulase ....................................................................................... 16
1.3.4 Cơ chế phân hủy ........................................................................................ 18
1.4 Tổng quan về vi sinh vật phân hủy cellulose ................................................... 21
1.4.1 Giới thiệu chung ........................................................................................ 21
1.4.2 Vi khuẩn ..................................................................................................... 22
1.4.3 Xạ khuẩn ................................................................................................... 22
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
ii
SVTH: BÙI THỊ TRANG
1.4.4 Nấm mốc .................................................................................................... 26
1.5 Ảnh hưởng của điều kiện môi trường đến khả năng sinh tổng hợp enzyme
cellulase của vi khuẩn ................................................................................................ 27
1.6 Các nghiên cứu liên quan ở Việt Nam và trên thế giới .................................... 31
1.6.1 Trên thế giới ............................................................................................... 31
1.6.2 Ở Việt Nam ................................................................................................ 31
Chƣơng 2. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP ........................................................... 34
2.1 Thời gian và địa điểm ........................................................................................... 34
2.2 Vật liệu ................................................................................................................ 34
2.2.1 Đối tượng ....................................................................................................... 34
2.2.2 Cơ chất ........................................................................................................... 34
2.3 Thiết bị và hóa chất .......................................................................................... 34
2.3.1 Thiết bị ....................................................................................................... 34
2.3.2 Hóa chất ..................................................................................................... 35
2.4 Các phương pháp nghiên cứu ........................................................................... 35
2.4.1 Phương pháp tuyển chọn chủng vi sinh vật ............................................... 35
2.4.2 Phương pháp xác định hoạt tính enzyme carboxymethyl cellulase
(CMCase) ................................................................................................................ 38
2.4.1 Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp enzyme
cellulase của các chủng vi khuẩn ............................................................................ 42
Chƣơng 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .................................................................. 44
3.1 Kết quả tuyển chọn chủng vi khuẩn ................................................................. 44
3.1.1 Kết quả tuyển chọn trên môi trường A ...................................................... 44
3.1.2 Kết quả xác định hình thái ......................................................................... 44
3.2 Kết quả khảo sát theo thời gian ........................................................................ 47
3.2.1 Kết quả hoạt tính cellulase ......................................................................... 47
3.2.2 Kết quả xác định mật độ tế bào ................................................................. 51
3.3 Khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase theo pH ......................................... 53
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
iii
SVTH: BÙI THỊ TRANG
3.4 Khả năng sinh tổng hợp enzyme cellulase theo nồng độ CMC ....................... 56
3.4.1 Xác định hoạt tính theo nồng độ CMC ...................................................... 56
3.4.2 Xác định đường kính vòng phân giải theo nồng độ CMC ......................... 59
ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP
iv
SVTH: BÙI THỊ TRANG
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
BOD : Biochemical oxygen Demand
COD : Chemical Oxygen Demand
CMCase : Carboxymethyl cellulase
CMC : Carboxymethyl cellulose
CBH hay C1 : Cellobiohydrolase hay Exoglucanase
DNS : Acid 2-hydroxy-3,5-dinitrobenzoic
Dal : Dalton
ĐC : Đối chứng
EG hay Cx : Endoglucanase
IU : International Unit, đơn vị quốc tế.
OD : Optical Density
TN : Thí nghiệm
UV : Ultraviolet