BỘ GIÁO DỤC
VÀ ĐÀO TẠO
VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC
VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM
HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
Nguyễn Thu Trang
NGHIÊN CỨU TẠO DÒNG TẾ BÀO DR CALUX HƯỚNG TỚI ỨNG
DỤNG SÀNG LỌC DIOXIN HOẶC CÁC CHẤT DẪN XUẤT DIOXIN
LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM
Hà Nội - 2023
iii
MỤC LỤC
LỜI CAM ĐOAN ............................................................................................. i
LỜI CẢM ƠN .................................................................................................. ii
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ......................................... v
DANH MỤC CÁC BẢNG ............................................................................. vi
DANH MỤC CÁC HÌNH ............................................................................. vii
MỞ ĐẦU .......................................................................................................... 1
CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN ........................................................................... 3
1.1. Dioxin và độc tính của dioxin .............................................................. 3
1.1.1. Dioxin và các chất dẫn xuất ............................................................. 3
1.1.2. Ảnh hưởng của dioxin và các chất dẫn xuất đến sức khỏe và môi
trường ......................................................................................................... 5
1.1.3. Các hợp chất của dioxin trong chuỗi thực phẩm ............................. 8
1.1.4. Tình hình ô nhiễm và phơi nhiễm dioxin ở Việt Nam .................. 10
1.2. Các phương pháp phân tích và phát hiện dioxin và các chất dẫn xuất
………………………………………………………………………13
1.2.1. Phương pháp sắc ký khối phổ ........................................................ 13
1.2.2. Phương pháp miễn dịch ELISA ..................................................... 14
1.2.3. Phương pháp khối phổ sử dụng lazer ............................................ 14
1.2.4. Phương pháp sử dụng tế bào sinh học ........................................... 15
1.3. Thụ thể AhR ....................................................................................... 17
1.4. Tình hình nghiên cứu ứng dụng CALUX trong phân tích dioxin và
các chất dẫn xuất trên thế giới ..................................................................... 19
1.5. Tình hình nghiên cứu dioxin và CALUX ở Việt Nam ....................... 20
CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ......... 22
2.1. Đối tượng nghiên cứu ......................................................................... 22
2.1.1. Nguyên vật liệu: ............................................................................. 22
2.1.2. Thiết bị ........................................................................................... 22
2.2. Phương pháp nghiên cứu .................................................................... 23
2.2.1. Thiết kế tạo vector biểu hiện tạm thời mang cấu trúc DRE và gen
phát quang GFP ....................................................................................... 23
2.2.2. Biến nạp vector tái tổ hợp pDRE-cDNA3.1(+) eGFP vào tế bào
khả biến E. coli DH5α bằng phương pháp sốc nhiệt ............................... 24
2.2.3. Tách plasmid lượng lớn ................................................................. 24