Caùc Phöông phaùp ñieän di vaø chuyeån
leân maøng lai trong phaân tích
Electrophoresis and Blotting
methods in Analysis of Biomolecules
Ñaïi hoïc Noâng Laâm TP Hoà Chí Minh
Thaùng 10/2007
CBGD: Traàn Nhaät Phöông
Caùc Phöông phaùp ñieän di vaø chuyeån
leân maøng lai Trong Phaân tích
Khaùi nieäm cô baûn
Ñieän di treân Gel
Gel Electrophoresis
-Taùch caùc phaân töû sinh hoïc (DNA, RNA, Protein) baèng
caùch cho ñi qua chaát neàn laø Gel trong moät ñieän tröôøng.
Ngöôøi ta thöôøng söû duïng caùc loaïi gel agarose hay
polyacrylamide.
-DNA hay RNA thöôøng tích ñieän aâm. Trong ñieän di treân
gel, maãu ñöôïc cho vaøo nhöõng gieáng naèm gaàn dieän cöïc aâm
vaø DNA hay RNA seõ di chuyeån veà phía cöïc döông. Söï di
chuyeån tæ leä nghòch vôùi kích thöôùc phaân töû, phaân töû caøng
nhoû caøng di chuyeån nhanh.
-Protein coù khaù nhieàu ñieän tích treân beà maët, cho neân
chuùng thöôøng ñöôïc xöû lyù vôùi SDS ñeå chuyeån sang daïng tích
ñieän aâm.
Ñieän di treân Gel
Gel Electrophoresis
Söï di chuyeån cuûa caùc phaàn töû mang ñieän trong
ñieän tröôøng ñöôïc goïi laø Ñieän di (Electrophoresis)
Moät phaân töû coù ñieän tích qtrong moät ñieän tröôøng
E taïo ra moät löïc
F =q.E
Ñieän di treân gel ñaõ laø phöông phaùp phaân tích höõu
duïng trong caùc pheùp phaân tích sinh-hoaù hoïc.
Ñieän di treân Gel
Gel Electrophoresis
Toác ñoä di chuyeån cuûa protein trong ñieän tröôøng:
V = Ez/f
V: toác ñoä di chuyeån
E: Löïc ñieän tröôøng
z: Ñieän tích cuûa protein
f: Heä soá ma saùt, tuøy thuoäc vaøo khoái löôïng vaø hình
daïng protein vaø ñoä nhôùt cuûa moâi tröôøng.