1
1
C
Cá
ác phương ph
c phương phá
áp tinh
p tinh
s
sạ
ạch protein
ch protein -
-enzym
enzym
Trong d
Trong dị
ịch chi
ch chiế
ết thô thu đư
t thô thu đượ
ợc ngo
c ngoà
ài protein
i protein
enzyme còn c
enzyme còn có
óc
cá
ác protein t
c protein tạ
ạp, c
p, cá
ác ch
c chấ
ất cao
t cao
phân t
phân tử
ửkh
khá
ác như polysaccharid
c như polysaccharid, acid nucleic
, acid nucleic
v
và
àc
cá
ác ch
c chấ
ất phân t
t phân tử
ửnh
nhỏ
ỏ như đư
như đườ
ờng monose,
ng monose,
c
cá
ác ch
c chấ
ất lipid, mu
t lipid, muố
ối kho
i khoá
áng v.v
ng v.v...
...
Đ
Để
ểlo
loạ
ại b
i bỏ
ỏch
chú
úng ph
ng phả
ải s
i sử
ửd
dụ
ụng ph
ng phố
ối h
i hợ
ợp nhi
p nhiề
ều
u
bi
biệ
ện ph
n phá
áp kh
p khá
ác nhau.
c nhau.
Lo
Lo
ạ
ạ
i c
i cá
ác t
c t
ạ
ạ
p ch
p ch
ấ
ấ
t
t
2
2
Đ
Để
ểlo
loạ
ại b
i bỏ
ỏmu
muố
ối kho
i khoá
áng v
ng và
àc
cá
ác lo
c loạ
ại
i
đư
đườ
ờng... l
ng... là
àc
cá
ác t
c t ạ
ạp ch
p chấ
ất c
t có
óphân t
phân t ử
ử lư
lượ
ợng
ng
th
thấ
ấp ngư
p ngườ
ời ta thư
i ta thườ
ờng d
ng dù
ùng phương ph
ng phương phá
áp
p
th
thẩ
ẩm t
m tí
ích (d
ch (dialysis)
ialysis) đ
đố
ối nư
i nướ
ớc hay đ
c hay đố
ối
i
c
cá
ác dung d
c dung dị
ịch đ
ch đệ
ệm loãng ho
m loãng hoặ
ặc b
c bằ
ằng
ng
c
cá
ách l
ch lọ
ọc qua gel sephadex.
c qua gel sephadex.
Lo
Lo
ạ
ạ
i c
i cá
ác t
c t
ạ
ạ
p ch
p ch
ấ
ấ
t
t
3
3
Đ
Để
ểlo
loạ
ại b
i bỏ
ỏc
cá
ác protein t
c protein tạ
ạp v
p và
àc
cá
ác t
c tạ
ạp ch
p chấ
ất c
t có
ó
phân t
phân tử
ử lư
lượ
ợng cao kh
ng cao khá
ác,
c, ngư
ngườ
ời ta hay d
i ta hay dù
ùng k
ng kế
ết
t
h
hợ
ợp nhi
p nhiề
ều bi
u biệ
ện ph
n phá
áp kh
p khá
ác nhau:
c nhau: phương ph
phương phá
áp
p
bi
biế
ến t
n tí
ính ch
nh chọ
ọn l
n lọ
ọc nh
c nhờ
ờt
tá
ác d
c dụ
ụng c
ng củ
ủa nhi
a nhiệ
ệt đ
t độ
ộ
ho
hoặ
ặc pH c
c pH củ
ủa môi trư
a môi trườ
ờng, p
ng, phương ph
hương phá
áp k
p kế
ết t
t t ủ
ủa
a
phân đo
phân đoạ
ạn b
n bằ
ằng mu
ng muố
ối trung t
i trung tí
ính ho
nh hoặ
ặc c
c cá
ác dung
c dung
môi h
môi hữ
ữu cơ
u cơ, c
, cá
ác phương ph
c phương phá
áp s
p sắ
ắc ký trao đ
c ký trao đổ
ổi
i
ion,
ion, đi
điệ
ện di,
n di, phương ph
phương phá
áp l
p lọ
ọc gel.
c gel.
Lo
Lo
ạ
ạ
i c
i cá
ác t
c t
ạ
ạ
p ch
p ch
ấ
ấ
t
t
4
4
M
Mộ
ột trong nh
t trong nhữ
ững k
ng kỹ
ỹthu
thuậ
ật không th
t không thể
ểthi
thiế
ếu đư
u đượ
ợc trong vi
c trong việ
ệc
c
t
tá
ách chi
ch chiế
ết v
t và
àtinh ch
tinh chế
ếprotein l
protein là
àly tâm.
ly tâm.
M
Má
áy ly tâm đư
y ly tâm đượ
ợc s
c sử
ửd
dụ
ụng đ
ng để
ểt
tá
ách c
ch cá
ác ph
c phầ
ần kh
n khá
ác nhau kh
c nhau khỏ
ỏi
i
dung d
dung dị
ịch. N
ch. Ngư
gườ
ời ta g
i ta gọ
ọi pha l
i pha lỏ
ỏng l
ng là
àch
chấ
ất l
t lỏ
ỏng bên trên k
ng bên trên kế
ết
t
t
tủ
ủa, pha r
a, pha rắ
ắn m
n mà
à thư
thườ
ờng l
ng lắ
ắng k
ng kế
ết xu
t xuố
ống đ
ng đá
áy
y ố
ống ly tâm
ng ly tâm
đư
đượ
ợc g
c gọ
ọi l
i là
àk
kế
ết t
t tủ
ủa. Th
a. Thự
ực ch
c chấ
ất, s
t, sự
ự ly tâm tăng t
ly tâm tăng tố
ốc đ
c độ
ộk
kế
ết
t
t
tủ
ủa c
a củ
ủa nh
a nhữ
ững ti
ng tiể
ểu ph
u phầ
ần r
n rắ
ắn nh
n nhờ
ờl
lự
ực ly tâm. S
c ly tâm. Sự
ựsai kh
sai khá
ác v
c về
ề
t
tỷ
ỷtr
trọ
ọng c
ng củ
ủa nguyên li
a nguyên liệ
ệu lơ l
u lơ lữ
ững so v
ng so vớ
ới ch
i chấ
ất l
t lỏ
ỏng c
ng cà
àng l
ng lớ
ớn
n
th
thì
ìt
tố
ốc đ
c độ
ộk
kế
ết t
t t ủ
ủa s
a sẽ
ẽc
cà
àng cao. M
ng cao. Mặ
ặc d
c dầ
ầu ngư
u ngườ
ời ta coi s
i ta coi số
ố
vòng quay trong m
vòng quay trong mộ
ột ph
t phú
út l
t là
à đơn v
đơn vị
ị thông thư
thông thườ
ờng c
ng củ
ủa l
a lự
ực ly
c ly
tâm, n
tâm, nhưng quy ư
hưng quy ướ
ớc
c ấ
ấy không th
y không thỏ
ỏa mãn.
a mãn.
C
Cá
ác k
c k
ỹ
ỹ
thu
thu
ậ
ật thông thư
t thông thườ
ờ
ng
ng
trong tinh s
trong tinh s
ạ
ạ
ch protein
ch protein
Ly tâm
Ly tâm
5
5
C
Có
ónh
nh
ữ
ữ
ng nguyên t
ng nguyên t
ắ
ắc đ
c để
ể
l
là
àm vi
m vi
ệ
ệ
c an
c an
to
toà
à
n hơn v
n hơn vớ
ớ
i m
i má
á
y ly tâm đ
y ly tâm đố
ố
i v
i v
ớ
ớ
i
i
ngư
ngườ
ờ
i thao t
i thao t á
ác c
c c
ũ
ũng như đ
ng như đố
ố
i v
i v
ớ
ớ
i
i
nguyên li
nguyên li
ệ
ệu đư
u đượ
ợ
c x
c x
ử
ử
lý m
lý mà
àl
lú
úc th
c thí
í
nghi
nghi
ệ
ệ
m c
m c
ầ
ầ
n ch
n chú
úý tuân th
ý tuân th
ủ
ủ
.
.
Đ
Đ
ó
ól
là
à
nguyên t
nguyên t
ắ
ắ
c cân b
c cân b
ằ
ằng đ
ng đố
ố
i x
i x
ứ
ứ
ng khi ly
ng khi ly
tâm v
tâm và
à
thăng b
thăng bằ
ằ
ng m
ng má
áy ly tâm
y ly tâm khi
khi
đ
đặ
ặ
t m
t má
áy l
y là
àm vi
m vi
ệ
ệ
c.
c.
Ly tâm
Ly tâm