Bài giảng Phân tích định tính và định lượng nucleic acid - ThS. Nguyễn Thị Mỹ Nương

Tài liệu này giới thiệu tổng quan về các phương pháp phân tích định tính và định lượng nucleic acid, bao gồm các kỹ thuật điện di và đo quang phổ.

Sinh viên, nhà nghiên cứu và các chuyên gia trong lĩnh vực sinh học phân tử, hóa sinh, di truyền học và công nghệ sinh học.

Tài liệu này trình bày chi tiết các phương pháp phân tích định tính và định lượng nucleic acid, là nền tảng trong nghiên cứu sinh học phân tử. Phần đầu tiên tập trung vào kỹ thuật điện di, giải thích mục tiêu định tính (xác định sự hiện diện, cấu hình, kích thước) và định lượng (hàm lượng tương đối) của nucleic acid. Các loại điện di được giới thiệu bao gồm điện di gel agarose để tách DNA/RNA theo kích thước, điện di gel polyacrylamide (PAGE) với độ phân giải cao hơn, điện di trường xung (PFGE) cho các phân tử DNA lớn, và điện di mao quản (CE) với ưu điểm về độ nhạy và khả năng tự động hóa. Tài liệu cũng đề cập đến các phương pháp phát hiện như nhuộm ethidium bromide, Coomassie blue và bạc. Mặc dù trọng tâm là nucleic acid, các nguyên lý điện di protein như SDS-PAGE và điện di 2 chiều (2D PAGE) cũng được giới thiệu để minh họa các ứng dụng rộng rãi của kỹ thuật này trong phân tách sinh học. Phần tiếp theo mô tả kỹ thuật đo quang phổ, bao gồm đo độ hấp thu UV ở 260 nm để định lượng nồng độ nucleic acid và đo huỳnh quang (sử dụng Qubit) để tăng độ chính xác và độ nhạy. Ngoài ra, tài liệu còn giới thiệu các ứng dụng chuyên sâu của điện di trong phân tích di truyền như kỹ thuật RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) và VNTR (Variable Number of Tandem Repeats) để nghiên cứu đa hình di truyền và ứng dụng trong nghiên cứu phả hệ. Cuối cùng, kỹ thuật EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay) được trình bày như một công cụ để phát hiện tương tác giữa protein và nucleic acid. Tổng thể, tài liệu cung cấp một cái nhìn toàn diện về các công cụ thiết yếu để phân tích đặc tính của nucleic acid trong phòng thí nghiệm.