TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM
KHOA CHĂN NUÔI THÚ Y
BỘ MÔN : VSV – GP - BL
ThS. Nguyễn Mạnh Cường
BÀI THỰC HÀNH VI SINH VẬT HỌC THÚ Y
Số tín chỉ: 02
Mã số học phần: VMO221
Thái Nguyên, 3/2016
Kiến thức bắt buộc của vi sinh vật đại cương
1. CHUẨN BỊ PHA CHÊ
MÔT SÔ
THUÔ
C NHUÔM VA
CA
C PHƯƠNG
PHA
P NHUÔM VI KHUÂ
N
MUC TIÊU HOC TÂP
1. Chuân bi
đu cac phương tiê
n câ n thiêt đê pha chê va nhuôm vi khuân.
2. Thưc hiê
n pha chê va nhâ
n đi
nh kêt qua 3 loa
i thuô c nhuôm vi khuân.
3. Tiên hanh nhuôm va nhâ
n đi
nh kêt qua 2 phương phap nhuôm đơn va
nhuôm kep.
NÔI DUNG
1. Pha chê thuô c nhuôm
1.1 Pha chê thuô c nhuôm Gram : Qua trinh pha chê va đanh gia ky thuâ
t thao tac
đươc thưc hiê
n theo quy trinh sau:
STT
NÔI DUNG THƯC HIÊN
Co
Không
Điêm
chuân
Điêm
đa
t
1
2
3
Chuân bi
dung cu:
- lo sa
ch loa
i 200ml, co nut kin.
- pipet
- Ô
ng đong
- Giâ y loc
- Cối sư
- Cân
Chuân bi
hoa châ t va cach pha
- Thuô c nhuôm tim gentian
+ tim gentian, dung di
ch bao hoa cô n
9510ml
+ Axit phenic
1ml
+ Nươc câ t
100ml
Lă c đêu, loc qua giâ y loc
- Dung di
ch lugol
+ Iod
1g
+ Kali lodua
2g
+ Nươc câ t
5ml
Nghiên tan trong cô sư
rô i rô i cho thêm nươc
câ t cho đu 200ml.
- Thuô c nhuôm Fucsin kiêm.
+ Fucsin kiêm, dung di
ch bao hoa trong cô n
95o 10ml
+ Axit phenic 5ml
+ Nươc câ t 100ml
Lă c đêu, loc qua giâ y loc.
Nhân đi
nh kêt qua đạt được
- Thuô c nhuôm phai tan đêu
- Thuô c nhuôm khô ng qua đă
c hoă
c qua loang
- Thuô c nhuôm phai không co vang hoă
c co
cặn
2,0
2,5
2,0
2,5
1,0
Pha chê thuôc nhuôm Ziehl neelsen.
STT
NÔI DUNG THƯC HIÊN
Co
Không
Điêm
chuân
Điêm
đa
t
1
2
3
Chuân bi
dung cu: - Lo sa
ch co nut
- Ô
ng đong
- Pipet
- Cân
Chuân bi
hoa châ t va cách pha:
Fuscin cua Ziehl:
- Dung di
ch A: Fuscin kiêm 0,3g
Cô n etylic 10ml
- Dung di
ch B : Axit phenic 0,5g
Nươc câ t 95ml
Trôn dung di
ch A vơi dung di
ch B
- Hô n hơp cô n axit ( cô n etylic 95o + HCL 3%,
môi thư
môt nư
a)
- Xanh methylen kiêm:
Dung di
ch A: Xanh methylen 0,3g
Cô n etylic 30ml
Dung di
ch B: Dung di
ch KOH 0,01% 100ml
Trôn dung di
ch A vơi dung di
ch B.
Nhân xet kêt qua
- Thuô c nhuôm phai tan đêu
- không co vang că
n
- không qua đă
c hoă
c qua loang.
1,0
2,5
2,5
2,5
2,5
1,5
2. Nhuô
m vi khuân
2.1. Nhuôm Gram
STT
NÔI DUNG THƯC HIÊN
co
không
Điêm
chuân
Điêm
đa
t
1
2
3
Chuân bi
phương tiê
nL:
- Dung cu
: + Lam kinh sa
ch
+ Que câ y, đen cô n
+ Ô
ng hut pipet
+ Gia nhuôm, gia că m, bô can
+ Đô ng hô phut
- Hoa châ t: + thuô c nhuôm tim gentian
+Dung di
ch lugol
+ cô n 90o
+ Dung di
ch fucsin kiêm
+ Nươc muôi sinh ly
- vi khuân: Vi khuân tư
môi trương nuôi câ y
hoă
c tư
bê
nh phâm
Tiên hanh nhuôm :
- Đanh dâ u lam kinh
_ Dan bê
nh phâm hoă
c vi khuân trên lam kinh,
đê khô tiêu ban
- Cô đi
nh tiêu ban bă ng cach hơ qua trên ngo
n
lư
a đen cô n 3-4 lâ n
- Phu tim gentian 45 giây , rư
a nươc
- Nho dung di
ch lugol lâ n 1,30 giây , hâ t đi
- Nho dung di
ch lugol lâ n 2,30 giây , hâ t đi
- Tây mâ u băng cô n 90o đên khi ba
c mâ u , rô i
rư
a
- Phu thuô c nhuôm fucsin kiêm 30 giây, rư
a
nươc, đê khô
- soi dươii kinh hiên vi
Nhâ
n xet kêt qua
- Vi khuân Gram dương: bă t mâ u tim đen
- Vi khuân Gram âm: bă t mâ u hô ng đo
1,5
0,5
1,0
0,5
1,0
0,5
0,5
0,5
1,0
2,5
![Bài tập Đa dạng thế giới sống [kèm đáp án/ hướng dẫn giải]](https://cdn.tailieu.vn/images/document/thumbnail/2025/20251123/thaohoang9203@gmail.com/135x160/5861763951302.jpg)
![Câu hỏi trắc nghiệm Tế bào nhân sơ [mới nhất]](https://cdn.tailieu.vn/images/document/thumbnail/2025/20251104/xuangiao2601/135x160/40491762309854.jpg)
